Name: Um método geral para a avaliação de Incubação de Craving Sacarose em Ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-11-04T12:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 44 s
Description: Aprenda a avaliar o craving por sacarose em ratos após períodos de abstinência forçada. Este método de autorregulação investiga como estímulos ambientais desencadeiam recaídas em modelos de vício.

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Produção deste manuscrito e vídeo foi apoiado pelo National Institute on Drug Abuse / National Institutes of Health conceder DA016285 R15-02, da Western Washington University Atividades de Pesquisa Biomédica em Neuroscience Initiative, e Washington Western University.

1. Temas de animais <ol><li> Masculino Long-Evans ratos são 3 meses de idade no início de um estudo. Os ratos são Simonsen derivados (Gilroy, Califórnia, EUA) criados no biotério Washington Western University e são alojados individualmente em um h-12 inverter ciclo de dia / noite (luzes apagadas em 0700) com Purina Mills Inc. Pellets Rodent Mazuri (Gray Summit , MO, EUA) e água ad libitum disponíveis. </li><li> Todo o treinamento e teste ocorre entre 0900-1300 com coortes de ratos sempre treinados e testados ao mesmo tempo diariamente. </li><li> Ratos são pesados ​​cada segunda, quarta e sexta-feira para a duração do estudo. </li><li> Imediatamente anterior à fase de treinamento, os ratos são privados de água para cerca de 20 h para encorajar a auto-administração de sacarose no primeiro dia de treinamento. </li></ol> 2. Procedimentos comportamentais Todos os procedimentos operantes comportamentais uso padrão câmaras de condicionamento operante (Med Associates Inc., St. Albans, VT, EUA) com uma bomba de infusão (Razel Scientific Instruments, St. Albans, VT, EUA), localizado no topo de cada câmara de condicionamento operante. Câmaras de condicionamento operante são fechados em som atenuando armários com ventiladores (Western Washington University, EUA). Todas as condições experimentais e coleta de dados são controlados por software Med PC IV (Med Associates Inc., St. Albans, VT, EUA). Câmaras de condicionamento operante (30 x 20 x 24 cm) contêm duas alavancas (uma fixa e uma retrátil), um gerador de tom, uma luz branca acima de estímulo a alavanca retrátil e uma luz casa vermelha na parede oposta. A bomba de infusão proporciona sacarose em um receptáculo de recompensa para a direita da alavanca ativa. Alavancas são 10 centímetros do chão grid. Quatro photobeams infravermelho cruzam cada câmara. As vigas da frente são cada 10,5 centímetros das paredes laterais e no lado vigas cada seis centímetros das paredes laterais. Cada feixe é de 4,5 cm acima do piso em aço inoxidável bar. Os feixes de umre set para contar o número de quebras completa. O número total de quebras de feixe são registrados durante os testes de formação e desejo. Com exceção da restrição de água antes da primeira sessão de treinamento, os ratos são fornecidos alimentos e água ad libitum tanto em gaiolas em casa e nas câmaras de condicionamento operante. Chambers está em um quarto de teste dedicado que, como o viveiro, está em um ciclo de luz reversa. Ratos são transportados em gaiolas em casa entre as salas em um carrinho que é coberto com tecido bloqueando a luz. No final de cada sessão, os ratos são retornados para gaiolas de casa. Há três fases para a experiência típica: Treinamento, A abstinência forçada, e teste. O teste é o desejo em que sessão é avaliada. Avaliamos craving em dois procedimentos de teste geral, dependendo do estudo. Estes dois procedimentos são descritos nas seções 2.3.1 e 2.3.2. <ol><li> Treinamento <ol><li> No experimento, ratos gastar 2 h / dia para10 dias consecutivos em câmaras de condicionamento operante, onde eles estão autorizados a pressionar a alavanca (ativo) retrátil para uma entrega 0,2 ml da solução de sacarose 10% no receptáculo à direita da alavanca. </li><li> Essa resposta também ativa um estímulo composto consistindo de um tom (2 kHz, 15 dB acima do ruído ambiente) e da luz branca. O estímulo composto tem a duração de 5 s, e é seguido por um tempo de 40 s para fora, durante o qual pressiona a alavanca de ativos são registrados, mas não têm conseqüência programada. </li><li> Uma resposta sobre a alavanca (estacionário) inativos não tem qualquer consequência programado, mas prensas são gravadas. Os números de quebras de feixe são registrados durante treinamento e teste. Todas as medidas de resposta e locomotor são registradas como cursos tempo (2 caixas minuto), mas geralmente são relatados como totais por sessão. </li></ol></li><li> A abstinência forçada. Ratos permanecem em gaiolas em casa durante o período de abstinência forçada. O típico períodos de abstinência forçada que usamos são de ter ratos testados ªe dia imediatamente seguinte ao último dia de treinamento (1 º Dia de abstinência forçada) ou 30 dias após o último dia de treinamento (Dia 30 de abstinência forçada). </li><li> Ensaio <ol><li> Extinção sem pistas. Neste procedimento de teste, os ratos são os primeiros autorizados a pressionar a alavanca ativa em condições idênticas à Formação, com a ressalva de que a resposta não tem consequências e duração da sessão é de 1 h. Ratos experiência de pelo menos seis dessas sessões de extinção no dia de teste. Cada sessão de extinção é separado por um período de cinco minutos, onde a alavanca ativa é retraída ea luz da casa é desligada. "Extinção" é indicada se a alavanca ativa responder foi reduzido para menos de 20 prensas / h. Alguns ratos exigem uma sétima sessão. A próxima sessão (após o outro demora 5 minutos) é a sessão de testes onde os ratos pode pressionar o tom + cue luz que inicialmente foi emparelhado com cada entrega de sacarose durante o treinamento. </li><li> Extinção com sugestões. Neste abreviarTeste d procedimento, os ratos estão autorizados a pressionar a alavanca ativa em condições idênticas à Formação, exceto que a sacarose não é entregue. </li></ol></li><li> Alavanca inativos premente é usado como uma medida de discriminação alavanca. É também, juntamente com quebras photobeam, usado como uma medida de não-específicos de ativação do motor. Alterações motoras motivacional versus complicar a interpretação do comportamento desejo. A alavanca de responder e inativos dados quebrar photobeam são úteis no esclarecimento contribuições do motor versus motivação para o desejo, assim como os grupos de comparação em estudos farmacológicos onde os ratos responder a uma taxa elevada de sacarose ou outro alimento são desafiados com um composto de craving potenciais que afetam (por exemplo, 7 , 8). </li></ol> 3. Manipulações representante para Affect Craving Sacarose após períodos variáveis ​​de abstinência forçada O método geral descrito aqui fornece uma maneira de sondar a determinação comportamental e neurobiológicants de desejo após períodos variáveis ​​de abstinência forçada. Aqui descritos são métodos relacionados a resultados representativos previsto na seção 4. <ol><li> Saciedade. Alguns ratos receberam garrafas de sacarose 10% em suas gaiolas de casa para o 17 h imediatamente antes do teste 8. Ratos neste estudo foram testados usando a Extinção sem procedimento pistas. </li><li> Enriquecimento ambiental. Durante o período de abstinência forçada, alguns ratos permaneceu em habitação individual (controles), enquanto outros foram transferidos para um grande ("width x 20", 36 de profundidade x 40 altura "; Produtos de Qualidade Cage, Portland, OR, EUA), gaiola com três coortes (Enriched). Os animais Enriquecido tinha vários brinquedos em seu ambiente, incluindo tubos de PVC e também receberam novos brinquedos cada M, W, F 10. Rats neste estudo foram testados usando a Extinção sem procedimento pistas. </li><li> Desafio farmacológico. No dia de teste, os ratos foram pré-tratados com uma dose do antagonista D1 de dopamina SCH 23390. Ratos neste estudo were testados usando a extinção com o procedimento pistas. </li></ol> 4. Resultados representativos: <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/3335/3335fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1 Representante de Treinamento e dados de teste para um experimento de incubação da ânsia de sacarose. Pontos dados indicam médias ± SEMs. Tamanho do grupo para a Figura 1A é de 77 ratos e tamanhos para Figura 1b grupo variou de 11-12 por grupo. * Diferença significativa do grupo Dia 1, p &lt;0,05. Esta figura é adaptada a partir de dados em 8 com a permissão da Springer. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/3335/3335fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2 Efeito da saciedade sacarose na ânsia de sacarose após 1 ou 30 dias de abstinência forçada. Tamanhos dos grupos são 8-9 por grupo. * Diferença significativa do grupo Dia 1, † diferença significativa do grupo controle, p &lt;0,05. Esta figura é adaptadade 9 com a permissão da Elsevier. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/3335/3335fig3.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 3"> Figura 3 Um mês de enriquecimento ambiental reduzido desejo de sacarose. Tamanho dos grupos estão a 8 ratos. * Diferença significativa a partir do dia 1, † diferença significativa do grupo controle, p &lt;0,05. Esta figura é adaptada a partir de 10 com a permissão da Wolters Kluwer Saúde. <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/3335/3335fig4.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 4"> Figura 4 sistêmica SCH 23390 craving sacarose diminuiu de forma mais eficaz após um dia de abstinência forçada. Tamanhos dos grupos são 8-12 por grupo. * Diferença significativa do grupo Dia 1, † diferença significativa entre 0 grupo de dose, p &lt;0,05. Este valor é adaptado de 8, com a permissão da Springer. <ol><li> A Figura 1 mostra dados representativos de treinamento e teste para os ratos de sacarose auto-administração (FiguraTOP 1) e depois responder em extinção com a sugestão de sacarose emparelhado disponível (Figura 1 abaixo). Como mostrado, os ratos respondem seletivamente a alavanca ativa durante o treinamento e durante o teste. Curiosamente, respondendo inativos e atividade locomotora mostrar alguns de incubação, embora o efeito é mais robusto na alavanca ativa responder. </li><li> A Figura 2 mostra o efeito de saciedade com sacarose na ânsia de sacarose após 1 ou 30 dias de abstinência forçada. Saciedade reduzida Extinção sem pistas responder após uma período de abstinência forçada, mas respondendo apenas reduzida para a pista sozinha sacarose em ratos que tiveram apenas um dia de abstinência forçada. </li><li> Conforme mostrado na Figura 3, o enriquecimento ambiental reduzido Extinção incubadas sem sugestão de responder e responder para a sugestão de sacarose sem aditivos comportamentos aos níveis observados depois de apenas um dia de abstinência forçada. </li><li> A Figura 4 mostra um efeito de abstinência dependente do SCH 23390 em Extinção com dicas responder. SCH 23390 foi mais efcaz para reduzir o desejo de sacarose após 1, vs 30, dias de abstinência forçada. </li></ol>

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<li>Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+a+model+of+drug+relapse%3A+an+assessment+of+the+validity+of+the+reinstatement+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure.</a> Psychopharmacology (Berl). 189, 1-16 (2006).</li>
<li>Kupferschmidt, D. A., Brown, Z. J., Erb, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Procedure+for+Studying+the+Footshock-Induced+Reinstatement+of+Cocaine+Seeking+in+Laboratory+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats.</a> J. Vis. Exp. (47), (2011).</li>
</ol>

Todos os procedimentos seguiram as diretrizes descritas no &quot;Principles of Laboratory Animal Care&quot; (NIH publicação não. 86-23) e foram aprovados pela Universidade de Washington ocidental Animal Care Institucional e Comitê Use.

Os procedimentos que descrevemos aqui pode ser identificada como procedimentos de reintegração, embora isso seja tecnicamente imprecisas como alavanca de pressão para a pista não se extingue antes da sessão de testes desejo. Em um procedimento típico de reintegração, respondendo com recompensa emparelhado-pistas é extinto e depois &quot;reintegrado&quot; com a administração de uma apresentação não contingente da recompensa (priming induzida reintegração) ou um estressor, como footshock (induzida pelo estresse reintegraç...

<table border="1"><tbody><tr><td> Item </td><td> Companhia </td><td> Número de catálogo </td></tr><tr><td> Gaiola de enriquecimento </td><td> Empresa de Cage de qualidade </td><td> FH-36 ½ T-N </td></tr><tr><td> Câmara operante </td><td> Med Associates </td><td> MED-008-CT-B3 </td></tr><tr><td> SCH 23390 </td><td> Sigma </td><td> D054 </td></tr></tbody></table>

um método geral para a avaliação de incubação de craving sacarose em ratos

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

Para alguém em um alimento restrito craving alimento da dieta, em resposta ao alimento pareado sugestões podem servir como um ponto de transição fundamental de comportamento entre abstinência e recaída ao alimento tomar uma. Craving alimento conceituada desta forma é semelhante a ânsia da droga, em resposta a drogas pareado pistas. A rica literatura tem sido desenvolvido em torno de entendimento dos determinantes comportamentais e neurobiológicos da ânsia da droga, nós e outros têm se concentrado recentemente em traduzir as técnicas de investigação vício básicas para melhor compreender o vício-como comportamentos relacionados à alimentação 2-4. Como é feito em estudos anteriores do desejo de drogas, examinamos o comportamento ânsia de sacarose, utilizando um modelo do rato de recaída. Neste modelo, os ratos auto-administrar qualquer droga ou comida em sessões durante vários dias. Em uma sessão, alavanca responder oferece a recompensa junto com um tom + estímulo luminoso. Comportamento desejo é, então, definida operacionalmente como responder em umsessão subseqüente, onde a recompensa não está disponível. Ratos irá responder de forma confiável para o tom + estímulo luminoso, provavelmente devido à sua aquisição condicionada propriedades reforçadoras 5. Esse comportamento é por vezes referido como busca de sacarose ou reatividade cue. Na presente discussão, vamos usar a &quot;ânsia de sacarose&quot; prazo para subsumir essas duas construções. Na última década, temos nos concentrado em como o período de tempo seguinte recompensa auto-administração craving recompensa influências. Curiosamente, os ratos de responder por aumentar o sinal de recompensa-emparelhado ao longo de várias semanas de um período de abstinência forçada. Este &quot;incubação do desejo&quot; é observado em ratos que têm auto-administrado ou alimentos ou drogas de abuso 4,6. Este aumento tempo-dependente na ânsia nós identificamos no modelo animal pode ter relevância grande potencial para drogas e os comportamentos humanos vício em comida. Aqui apresentamos um protocolo para avaliar incubação de sucrosi o desejo em ratos. Variantes do procedimento será indicado que o desejo é avaliado como de responder por um taco de sacarose emparelhado discreto após a extinção da alavanca pressionando dentro da sacarose auto-administração de contexto (Extinção sem pistas) ou como responder por sacarose emparelhado-pistas em um contexto geral de extinção (Extinção com dicas).

Responder por sinais de alimentos ou drogas emparelhados aumenta ao longo de um período de abstinência e esta pode estar relacionada com uma susceptibilidade aumentada a comportamentos recaída. Aqui detalhamos um procedimento para avaliar este &quot;incubação de desejo&quot; em ratos que têm auto-administrado de sacarose.

Um método geral para a avaliação de Incubação de Craving Sacarose em Ratos

Para alguém em uma dieta de restrição alimentar, o desejo por alimentos em resposta a pistas associadas a alimentos pode servir como um ponto de transição comportamental fundamental entre a abstinência e ...

O objetivo geral deste experimento é avaliar o desejo por sacarose em ratos após um período curto ou prolongado de abstinência forçada da automedicação de sacarose. Isso é realizado primeiramente permitindo que os ratos se automediquem com sacarose em 10 sessões diárias de automedicação. Em seguida, os ratos são submetidos a um período de abstinência forçada da automedicação de sacarose, mantendo-os simplesmente em suas gaiolas de origem por um ou 30 dias.O passo final do procedimento é retornar os ratos ao ambiente de autoministração e permitir que respondam a estímulos previamente associados explicitamente à sacarose e à autoministração, mas não à própria sacarose. Em última análise, os resultados demonstram como a intensidade da resposta aos estímulos pareados com sacarose varia de acordo com a duração da abstinência forçada. Conforme relatamos anteriormente, o desejo por sacarose aumenta ou incuba ao longo de um mês de abstinência forçada da sacarose.Experimentos de automedicação podem ser realizados usando este procedimento para investigar os substratos comportamentais e neurobiológicos da incubação do desejo. A principal vantagem desta técnica em relação aos métodos existentes é que a duração do período após a última sessão de automedicação pode variar. Este método pode ajudar a responder perguntas fundamentais na área da pesquisa sobre dependência, em particular, como a duração de um período de abstinência forçada afeta o desejo.As implicações do uso desta técnica estendem-se à terapia para comportamentos de recaída. Em particular, como a grande maioria dos indivíduos apresenta recaída após um longo período de abstinência. Embora este método possa fornecer informações sobre o desejo por açúcar.Também pode ser aplicado a outras recompensas, como drogas de abuso. Este estudo utiliza ratos machos da linhagem Long Evans com três meses de idade no início do estudo. Os ratos são mantidos individualmente em ciclo claro-escuro invertido de 12 horas, com ração em pellets e água disponíveis ad libitum antes do início do procedimento, pesando-se todos os animais experimentais e controles posteriormente.Os animais devem ser pesados toda segunda-feira, quarta-feira e sexta-feira durante todo o período do estudo. Por fim, inicie a privação de água aproximadamente 20 horas antes de começar o estudo sobre o desejo por sacarose. Isso incentivará a automedicação com sacarose no primeiro dia de treinamento.Todo o treinamento e teste ocorre entre as 0900 e 1300 horas, e os grupos são sempre treinados e testados no mesmo horário diariamente na sala de testes. As câmaras de condicionamento operante são acomodadas em gabinetes atenuadores de som com ventiladores de ventilação. As câmaras utilizadas neste estudo têm dimensões de 30 por 20 por 24 centímetros e contêm duas alavancas, uma alavanca fixa e uma alavanca retrátil.As duas alavancas estão posicionadas a 10 centímetros do piso da grade. Além disso, as câmaras contêm um gerador de tom, uma luz estímulo branca acima da alavanca retrátil e uma luz ambiente vermelha na parede oposta. Para avaliar a atividade locomotora, as câmaras são equipadas com feixes de luz infravermelha; nesses compartimentos, os feixes frontais estão a 10,5 centímetros das paredes laterais e os feixes laterais estão a seis centímetros de cada parede lateral.Cada feixe está a 4,5 centímetros acima do piso de barras de aço inoxidável. Adicione solução fresca de sacarose a 10% à bomba de infusão localizada na parte superior de cada câmara. Configure o software associado para ativar a bomba e liberar 0,2 mililitros da solução de sacarose a 10% no recipiente à direita da alavanca.Além disso, utilizando o programa de software associado, a câmara é configurada de modo que pressionar a alavanca retrátil ou ativa também ative um estímulo composto constituído por um tom e uma luz branca. O estímulo composto deve durar cinco segundos e ser seguido por um período de tempo limite de 42 segundos, durante o qual pressões na alavanca ativa serão registradas, mas não terão consequência programada. A alavanca fixa ou inativa é programada para não ter consequência quando pressionada, mas para apenas registrar o número de pressões.Essencialmente, o software deve registrar todos os acionamentos de ambas as alavancas e o número de interrupções do feixe de infravermelho ocorridas durante cada sessão de treinamento. No primeiro dia de treinamento, coloque a rata na câmara de condicionamento operante por um total de duas horas. Durante esse período, a rata pode se movimentar livremente e pode acionar a alavanca retrátil para receber uma solução de sacarose a 10% ou pode acionar a alavanca estacionária inativa.Todas as medidas de resposta e locomotoras são registradas como séries temporais em intervalos de dois minutos, mas geralmente são relatadas como totais por sessão. Após decorridas duas horas, retire o rato e devolva-o à gaiola de origem. Certifique-se de que a câmara de condicionamento operante seja limpa completamente para remover quaisquer resíduos ou pistas olfativas orais que possam interferir nas sessões subsequentes de treinamento.Durante o período de abstinência forçada, os ratos permanecem na gaiola de origem com ração peletizada e água disponíveis ad libitum. O período de abstinência forçada pode variar conforme o tempo necessário. Um intervalo típico para estudos de incubação de desejo é de um a 30 dias.Além disso, outros parâmetros a serem testados, como sacarose, saciedade ou o efeito do enriquecimento ambiental, podem ser administrados sob condições controladas. Durante este período, dois paradigmas de teste são apresentados aqui. O primeiro deles ilustra a extinção sem estímulos condicionados.Primeiro, prepare a câmara de condicionamento operante para replicar as condições de treinamento, com exceção de que o tom e a luz branca não são ativados em resposta à depressão da alavanca ativa. Programe a câmara para realizar seis sessões de extinção de uma hora, cada uma separada por um período de cinco minutos, no qual a luz ambiente é desligada e a alavanca ativa é recolhida, executando-se sem interrupções. Em seguida, após o período de abstinência forçada ser concluído, coloque a rata na câmara de condicionamento operante e permita que o animal responda na alavanca ativa durante seis sessões de extinção de uma hora.A extinção comportamental é indicada se a resposta na alavanca ativa tiver sido reduzida a menos de 20 pressões por hora na sexta sessão de extinção. Se a extinção ainda não tiver ocorrido, permita que a rata realize uma sétima sessão de extinção. A próxima sessão, após um novo atraso de cinco minutos, é a sessão de teste de uma hora, na qual as ratas podem pressionar para obter o sinal sonoro combinado à luz que inicialmente foi pareado com cada entrega de sacarose durante o treinamento. Para o segundo procedimento de teste, extinção com sinais, a câmara de condicionamento operante é configurada para replicar as condições de treinamento.Com a exceção de que a solução de sacarose não é administrada após a pressão na alavanca ativa, o rato a ser testado é colocado na câmara de condicionamento operante durante um período de duas horas. A pressão na alavanca inativa em conjunto com os dados de interrupção do feixe também pode ser utilizada como medida de ativação motora não específica. Uma vez que alterações motoras versus motivacionais podem potencialmente complicar a interpretação do comportamento de reatividade à Q.Esta figura ilustra dados típicos obtidos de um grupo de 77 ratos normais treinados para autoadministrar sacarose. De acordo com o paradigma de treinamento descrito neste protocolo, pode-se observar que os ratos respondem seletivamente na alavanca ativa durante o treinamento. Aqui, são apresentados os dados obtidos de uma sessão de teste.Observa-se que os ratos respondem à extinção com a extinção da fila emparelhada disponível com estímulos. Novamente, os ratos respondem seletivamente na alavanca ativa durante o teste, e as respostas na alavanca inativa e a atividade locomotora mostram alguma incubação, embora o efeito seja mais acentuado nas respostas na alavanca ativa aqui; os tamanhos dos grupos variaram de 11 a 12 por grupo, e uma diferença significativa foi observada entre os grupos do dia um e do dia 30, com um valor de P inferior a 0,05. Esta figura mostra o efeito da saciedade de sacarose na reatividade ao Q de sacarose após um ou 30 dias de abstinência forçada; alguns ratos receberam garrafas com sacarose a 10% em suas gaiolas domésticas durante as 17 horas imediatamente anteriores ao teste, utilizando a extinção sem estímulos.No procedimento, a saciedade reduziu a extinção sem respostas a estímulos após qualquer período de abstinência forçada, mas somente reduziu as respostas à sacarose Q isoladamente em ratos que tiveram apenas um dia de abstinência forçada; os tamanhos dos grupos variaram de oito a nove por grupo. O asterisco indica uma diferença significativa em relação ao grupo do dia um, e o símbolo de cruz indica uma diferença significativa em relação ao grupo controle, onde P é menor que 0,05. Esses resultados ilustram que um mês de enriquecimento ambiental reduziu a reatividade à sacarose Q em ratos.Durante o período de abstinência forçada, os ratos controle permaneceram em alojamento individual, enquanto o grupo enriquecido foi transferido para gaiolas grandes com diversos brinquedos em seu ambiente, incluindo tubos de PVC. Esses ratos também receberam brinquedos novos toda segunda-feira, quarta-feira e sexta-feira. Os ratos deste estudo foram testados utilizando o procedimento de extinção sem Q'S.O enriquecimento ambiental reduziu a extinção incubada sem respostas à Q e respostas pela sacarose Q isoladamente a níveis observados após apenas um dia de abstinência forçada; cada grupo consistiu de oito ratos. O asterisco indica diferença significativa em relação ao grupo do dia um, e o símbolo de cruz indica diferença significativa em relação ao grupo controle, onde P é menor que 0,05. Aqui, os ratos foram pré-tratados com uma dose do antagonista da dopamina D1 SCH23390 no dia do teste e testados utilizando o procedimento de extinção com QS.Pode-se observar que a administração sistêmica de CH₂3390 reduz mais efetivamente a busca por sacarose após um dia de abstinência forçada; cada grupo consistiu de oito a doze ratos por grupo. O asterisco indica uma diferença significativa em relação ao grupo do primeiro dia. O símbolo de cruz indica diferença significativa em relação ao grupo controle, onde P é menor que 0,05.Ao realizar este procedimento, é importante lembrar-se de equilibrar os grupos atribuídos às condições de abstinência forçada com base em seus comportamentos de treinamento. Após este procedimento, outros métodos, como a automedicação de drogas, podem ser realizados para responder a questões adicionais, como a generalidade do efeito de incubação do desejo após seu desenvolvimento. Esta técnica forneceu aos pesquisadores da área de dependência um meio de explorar os substratos neurais das alterações dependentes da abstinência no desejo em ratos.Após assistir a este vídeo, você deverá ter uma boa compreensão de como conduzir um estudo que meça a abstinência dependente de sacarose, o desejo por sacarose em ratos, avaliando a resposta dos ratos por uma Q previamente associada à autoadministração de sacarose.

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