Name: Modelo do rato de endometriose cirurgicamente induzida pela Auto-transplante de tecido uterino (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-06T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 2 s
Description: Aprenda a induzir endometriose em camundongos por auto-transplante cirúrgico de tecido uterino no mesentério intestinal. Este modelo reproduz lesões semelhantes às humanas para estudos de patofisiologia e terapêuticas.

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Agradecimentos especiais a Chris Bailey Kassotis e Audrey para a revisão crítica do manuscrito e ao Dr. Scott Korte, Beeman Joseph, Curfman Alison, Kimball Paulo, Neibreggue Bridget, Redel Jacob, Schroder Amy, Steinberg Maija e Winkeler Stacey, o auxílio na otimização deste modelo em nosso laboratório. O financiamento foi fornecido pela Clínica Biodetectives Training Grant (NIH T90) (KEP), University of Missouri Life Sciences Research Graduação Programa de Oportunidades, Pesquisa MU Conselho, Research Board MU subvenções e R21HD056441 NIH (SCN).

<ol><li>Simoens, S., Hummelshoj, L., D'Hooghe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometriosis%3A+cost+estimates+and+methodological+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod.+Update%22%5BJournal%5D)">Endometriosis: cost estimates and methodological perspective.</a> Hum. Reprod. Update. 13, 395-404 (2007).</li>
<li>Grummer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+endometriosis+research%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod.+Update%22%5BJournal%5D)">Animal models in endometriosis research.</a> Hum. Reprod. Update. 12, 641-649 (2006).</li>
<li>Vernon, M. W., Wilson, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+the+surgical+induction+of+endometriosis+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Studies on the surgical induction of endometriosis in the rat.</a> Fertil. Steril. 44, 684-694 (1985).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+endometriosis+in+mice%3A+a+new+model+sensitive+to+estrogen%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Induction of endometriosis in mice: a new model sensitive to estrogen.</a> Reprod. Toxicol. 9, 233-238 (1995).</li>
<li>Pelch, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aberrant+gene+expression+profile+in+a+mouse+model+of+endometriosis+mirrors+that+observed+in+women%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Aberrant gene expression profile in a mouse model of endometriosis mirrors that observed in women.</a> Fertil. Steril. 93, 1615-1627 (2010).</li>
<li>Flores, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+profiling+of+experimental+endometriosis+identified+gene+expression+patterns+in+common+with+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Molecular profiling of experimental endometriosis identified gene expression patterns in common with human disease.</a> Fertil. Steril. 87, 1180-1199 (2007).</li>
<li>Giudice, L. C., Kao, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Endometriosis.</a> Lancet. 364, 1789-1799 (2004).</li>
<li>Lin, Y. J., Lai, L. ei, Y, H., Wing, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophils+and+macrophages+promote+angiogenesis+in+the+early+stage+of+endometriosis+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Neutrophils and macrophages promote angiogenesis in the early stage of endometriosis in a mouse model.</a> Endocrinology. 147, 1278-1286 (2006).</li>
<li>Fang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intact+progesterone+receptors+are+essential+to+counteract+the+proliferative+effect+of+estradiol+in+a+genetically+engineered+mouse+model+of+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Intact progesterone receptors are essential to counteract the proliferative effect of estradiol in a genetically engineered mouse model of endometriosis.</a> Fertil. Steril. 82, 673-678 (2004).</li>
<li>Fang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+or+enzymatic+disruption+of+aromatase+inhibits+the+growth+of+ectopic+uterine+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">Genetic or enzymatic disruption of aromatase inhibits the growth of ectopic uterine tissue.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 87, 3460-3466 (2002).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L., Birnbaum, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Promotion+of+endometriosis+by+2%2C3%2C7%2C8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin+in+rats+and+mice%3A+time-dose+dependence+and+species+comparison%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Appl.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Promotion of endometriosis by 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin in rats and mice: time-dose dependence and species comparison.</a> Toxicol. Appl. Pharmacol. 138, 131-139 (1996).</li>
<li>Foster, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphologic+characteristics+of+endometriosis+in+the+mouse+model%3A+application+to+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Can.+J.+Physiol.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Morphologic characteristics of endometriosis in the mouse model: application to toxicology.</a> Can. J. Physiol. Pharmacol. 75, 1188-1196 (1997).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+surgically+induced+endometriosis+on+pregnancy+and+effect+of+pregnancy+and+lactation+on+endometriosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Soc.+Exp.+Biol.+Med%22%5BJournal%5D)">Effect of surgically induced endometriosis on pregnancy and effect of pregnancy and lactation on endometriosis in mice.</a> Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 212, 332-337 (1996).</li>
<li>Lu, Y., Nie, J., Liu, X., Zheng, Y., Guo, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trichostatin+A%2C+a+histone+deacetylase+inhibitor%2C+reduces+lesion+growth+and+hyperalgesia+in+experimentally+induced+endometriosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Trichostatin A, a histone deacetylase inhibitor, reduces lesion growth and hyperalgesia in experimentally induced endometriosis in mice.</a> Hum. Reprod. 25, 1014-1025 (2010).</li>
<li>Whitten, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modification+of+the+oestrous+cycle+of+the+mouse+by+external+stimuli+associated+with+the+male%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Modification of the oestrous cycle of the mouse by external stimuli associated with the male.</a> J. Endocrinol. 13, 399-404 (1956).</li>
<li>Whitten, W. K., Bronson, F. H., Greenstein, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrus-inducing+pheromone+of+male+mice%3A+transport+by+movement+of+air%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Estrus-inducing pheromone of male mice: transport by movement of air.</a> Science. 161, 584-585 (1968).</li>
<li>Goldman, J. M., Murr, A. S., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rodent+estrous+cycle%3A+characterization+of+vaginal+cytology+and+its+utility+in+toxicological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Birth.+Defects.+Res.+B.+Dev.+Reprod.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">The rodent estrous cycle: characterization of vaginal cytology and its utility in toxicological studies.</a> Birth. Defects. Res. B. Dev. Reprod. Toxicol. 80, 84-97 (2007).</li>
<li>Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+of+Rodent+Surgery+for+the+New+Surgeon%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.</a> J. Vis. Exp. (47), e2586-e2586 (2011).</li>
<li>Moen, M. H., Halvorsen, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histologic+confirmation+of+endometriosis+in+different+peritoneal+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Acta.+Obstet.+Gynecol.+Scand%22%5BJournal%5D)">Histologic confirmation of endometriosis in different peritoneal lesions.</a> Acta. Obstet. Gynecol. Scand. 71, 337-342 (1992).</li>
<li>Cummings, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methoxychlor+as+a+model+for+environmental+estrogens%5BTitle%5D)+AND+%22Crit.+Rev.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Methoxychlor as a model for environmental estrogens.</a> Crit. Rev. Toxicol. 27, 367-379 (1997).</li>
<li>Fowler, R. E., Edwards, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+superovulation+and+pregnancy+in+mature+mice+by+gonadotrophins%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Induction of superovulation and pregnancy in mature mice by gonadotrophins.</a> J. Endocrinol. 15, 374-384 (1957).</li>
<li>Wilson, E. D., Zarrow, M. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+superovulation+in+the+immature+mouse+and+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Reprod.+Fertil%22%5BJournal%5D)">Comparison of superovulation in the immature mouse and rat.</a> J. Reprod. Fertil. 3, 148-158 (1962).</li>
<li>Lee, B., Du, H., Taylor, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+murine+endometriosis+induces+DNA+methylation+and+altered+gene+expression+in+eutopic+endometrium%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Experimental murine endometriosis induces DNA methylation and altered gene expression in eutopic endometrium.</a> Biol. Reprod. 80, 79-85 (2009).</li>
<li>Somigliana, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometrial+ability+to+implant+in+ectopic+sites+can+be+prevented+by+interleukin-12+in+a+murine+model+of+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Endometrial ability to implant in ectopic sites can be prevented by interleukin-12 in a murine model of endometriosis.</a> Hum. Reprod. 14, 2944-2950 (1999).</li>
<li>Hirata, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+an+experimental+model+of+endometriosis+using+mice+that+ubiquitously+express+green+fluorescent+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Development of an experimental model of endometriosis using mice that ubiquitously express green fluorescent protein.</a> Hum. Reprod. 20, 2092-2096 (2005).</li>
<li>Story, L., Kennedy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+studies+in+endometriosis%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Ilar.+J%22%5BJournal%5D)">Animal studies in endometriosis: a review.</a> Ilar. J. 45, 132-138 (2004).</li>
<li>Cummings, A. M., Hedge, J. M., Birnbaum, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+prenatal+exposure+to+TCDD+on+the+promotion+of+endometriotic+lesion+growth+by+TCDD+in+adult+female+rats+and+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Effect of prenatal exposure to TCDD on the promotion of endometriotic lesion growth by TCDD in adult female rats and mice.</a> Toxicol. Sci. 52, 45-49 (1999).</li>
<li>Cummings, A. M., Metcalf, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+estrogen%2C+progesterone%2C+and+methoxychlor+on+surgically+induced+endometriosis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Fundam.+Appl.+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Effects of estrogen, progesterone, and methoxychlor on surgically induced endometriosis in rats.</a> Fundam. Appl. Toxicol. 27, 287-290 (1995).</li>
<li>Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometriotic+lesions+synthesize+and+secrete+a+haptoglobin-like+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Endometriotic lesions synthesize and secrete a haptoglobin-like protein.</a> Biol. Reprod. 58, 988-994 (1998).</li>
<li>Yavuz, E., Oktem, M., Esinler, I., Toru, S. A., Zeyneloglu, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genistein+causes+regression+of+endometriotic+implants+in+the+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Genistein causes regression of endometriotic implants in the rat model.</a> Fertil. Steril. 88, 1129-1134 (2007).</li>
<li>Dmitrieva, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocannabinoid+involvement+in+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Endocannabinoid involvement in endometriosis.</a> Pain. 151, 703-710 (2010).</li>
<li>Efstathiou, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsteroidal+antiinflammatory+drugs+differentially+suppress+endometriosis+in+a+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Nonsteroidal antiinflammatory drugs differentially suppress endometriosis in a murine model.</a> Fertil. Steril. 83, 171-181 (2005).</li>
<li>Becker, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endostatin+inhibits+the+growth+of+endometriotic+lesions+but+does+not+affect+fertility%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Endostatin inhibits the growth of endometriotic lesions but does not affect fertility.</a> Fertil. Steril. 84, Suppl 2. 1144-1155 (2005).</li>
<li>Becker, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+synthetic+endostatin+peptides+inhibit+endothelial+migration+in+vitro+and+endometriosis+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Short synthetic endostatin peptides inhibit endothelial migration in vitro and endometriosis in a mouse model.</a> Fertil. Steril. 85, 71-77 (2006).</li>
<li>Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+rats+as+a+research+model+for+the+study+of+endometriosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+N.Y.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Using rats as a research model for the study of endometriosis.</a> Ann. N.Y. Acad. Sci. 955, 318-327 (2002).</li>
<li>Stilley, J. A., Woods-Marshall, R., Sutovsky, M., Sutovsky, P., Sharpe-Timms, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+Fecundity+in+Female+Rats+with+Surgically+Induced+Endometriosis+and+in+Their+Daughters%3A+A+Potential+Role+for+Tissue+Inhibitors+of+Metalloproteinase+1%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Reduced Fecundity in Female Rats with Surgically Induced Endometriosis and in Their Daughters: A Potential Role for Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1.</a> Biol. Reprod. 80, (2009).</li>
</ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

Existem vários parâmetros críticos que devem ser observadas durante a realização da indução cirúrgica de endometriose em camundongos. Primeiro, a endometriose é uma doença estrogênio dependente e, como tal, esta cirurgia deve ser realizada em animais intactos ou, alternativamente, em animais ovariectomizados suplementado com estrógenos 20. Segundo, suturar as biópsias endometriais para a cascata arterial deve ser realizada com extremo cuidado. Nós descobrimos que o uso de apenas dois nós relativamente flexíve...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome do reagente / equipamentos </td><td> Companhia </td><td> Número de catálogo </td></tr><tr><td> Lápis de cera </td><td> Pescador </td><td> NC9954135 </td></tr><tr><td> Lâmina de vidro </td><td> Pescador </td><td> 12-550-433 </td></tr><tr><td> Conta-gotas </td><td> Pescador </td><td> S79383 </td></tr><tr><td> Microscópio de luz padrão para avaliar manchas de citologia vaginal </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Buprenorfina HCL c3 (CARJET) 10X1ml </td><td> Butler Abastecimento da Saúde Animal </td><td> 022891 </td></tr><tr><td> Fosfato estéril salina tamponada (PBS) </td><td> Gibco </td><td> 14040-117 </td></tr><tr><td> 10.000 U / ml de penicilina, estreptomicina 10.000 mg / ml em NaCl 0,85% </td><td> Hyclone </td><td> SV30010 </td></tr><tr><td> Isoflurano </td><td> AbbottSaúde Animal </td><td> 05260-05 </td></tr><tr><td> Isoflurano não-reinalação sistema anestésico </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Recirculação almofada de aquecimento de água quente </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 30 bainha seringa ml </td><td> Pescador </td><td> 14-823-16G </td></tr><tr><td> Pó livre luvas estéreis </td><td> Fisherbrand </td><td> 19020558 </td></tr><tr><td> Pomada oftálmica </td><td> Pharmaceuticals principais </td><td> 10033691 </td></tr><tr><td> Pequenas tesouras elétricas </td><td> Wahl </td><td> 9861-600 </td></tr><tr><td> Matagal clorexidina </td><td> Pescador </td><td> NC9863042 </td></tr><tr><td> Etanol 70% </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Campo estéril Polylined </td><td> Hospital Descartáveis ​​Busse </td><td> 696 </td></tr><tr><td> Tamanho 3 bisturi </td><td> Pescador </td><td> 22-079-657 </td></tr><tr><td> Número de 10 lâminas de bisturi </td><td> Pescador </td><td> 22-079-681 </td></tr><tr><td> Pequenas tesouras cirúrgicas </td><td> Roboz </td><td> RS-5850 </td></tr><tr><td> Pequenas dentadas semi-curvada forceps </td><td> Roboz </td><td> RS-5135 </td></tr><tr><td> 5-0 de sutura de seda preta trançada </td><td> Ethicon </td><td> K870H </td></tr><tr><td> Esterilizado pirex de vidro placas de Petri </td><td> Corning </td><td> 70160-101 </td></tr><tr><td> 2 milímetros biópsia com punch </td><td> Miltex </td><td> 33-31 </td></tr><tr><td> Gaze estéril </td><td> Kendall </td><td> 1806 </td></tr><tr><td> 6-0 preto sutura de monofilamento nylon ethilon </td><td> Ethicon </td><td> 697G </td></tr><tr><td> Drivers de agulha (opcional) </td><td> Precision Instruments mundo </td><td> 500023 </td></tr><tr><td> 5-0 undyed trançado revestido vicryl sutura </td><td> Ethicon </td><td> J490G </td></tr><tr><td> 9 milímetros Autoclip ferida clips </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427631 </td></tr><tr><td> Autoclip aplicador e removedor </td><td> Becton Dickinson </td><td> 427630 </td></tr><tr><td> Agulha 23G </td><td> Becton Dickinson </td><td> 305193 </td></tr><tr><td> Seringa 1cc </td><td> Becton Dickson </td><td> 301025 </td></tr><tr><td> Estande de vidro 5X de aumento (opcional) </td><td> Pescador </td><td> 14-648-23 </td></tr><tr><td> 10% de formalina tamponada </td><td> Pescador </td><td> SF100-4 </td></tr><tr><td> Calibrador </td><td> Roboz </td><td> RS-6466 </td></tr><tr><td> Processamento / incorporação cassetes </td><td> Pescador </td><td> 15-197-700A </td></tr><tr><td> Almofadas de espuma de biópsia </td><td> Pescador </td><td> 22-038-222 </td></tr><tr><td> Kit de isolamento RNAqueous RNA </td><td>Ambion </td><td> AM1912 </td></tr><tr><td> Nitrogênio líquido </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Microcentrífuga tirar tampa do tubo topo plano </td><td> Pescador </td><td> 02-681-240 </td></tr><tr><td> Ketamina (opcional) </td><td> Simga </td><td> K4138 </td></tr><tr><td> Domitor (cloridrato de medetomidina) (opcional) </td><td> Tocris </td><td> 2023 </td></tr><tr><td> Antisedan (atipamezol) (opcional) </td><td> Sigma </td><td> A9611 </td></tr></tbody></table>

modelo do rato de endometriose cirurgicamente induzida pela auto-transplante de tecido uterino

Mouse Model of Surgically-induced Endometriosis by Auto-transplantation of Uterine Tissue

A endometriose é uma doença crônica e dolorosa cuja etiologia permanece desconhecida. Além disso, o tratamento da endometriose pode exigir a remoção laparoscópica de lesões e / ou gestão farmacêutica crônico de dor e os sintomas de infertilidade. O custo associado com endometriose tem sido estimado em 22 bilhões de dólares por ano nos Estados Unidos 1. Para continuar a nossa compreensão dos mecanismos subjacentes a esta doença enigmática, modelos animais têm sido empregados. Primatas espontaneamente desenvolver endometriose e, portanto, modelos de primatas mais semelhantes ao da doença em mulheres. Modelos de roedores, no entanto, são mais rentáveis ​​e prontamente disponíveis 2. O modelo que descrevemos aqui envolve uma transferência autólogo de tecido uterino ao mesentério intestinal (Figura 1) e foi desenvolvido pela primeira vez no rato 3 e mais tarde transferido para o mouse 4. O objetivo do modelo de roedor autólogo de endometriose cirurgicamente induzida é imitarda doença em mulheres. Nós e os outros já haviam demonstrado que o padrão de expressão alterada do gene observada em lesões de endometriose de camundongos ou ratos espelhos que a observada em mulheres com a doença 5,6. Uma vantagem de realizar a cirurgia em ratos é que a abundância de linhagens de camundongos transgênicos disponíveis podem ajudar os pesquisadores a determinar o papel de componentes específicos importantes no estabelecimento e crescimento da endometriose. Um modelo alternativo no qual excisadas humana fragmentos do endométrio são introduzidos no peritônio de ratos imunocomprometidos também é amplamente utilizada, mas é limitado pela falta de um sistema imunológico normal que é pensado para ser importante na endometriose 2,7. Importante, o modelo do rato da endometriose induzida cirurgicamente é um modelo versátil, que tem sido usado para estudar como o sistema imunológico 8, 9,10 hormônios e fatores ambientais afetam 11,12 endometriose, bem como os efeitos da endometriose sobre fertility 13 e 14 a dor.

Uma descrição da indução cirúrgica de endometriose em camundongos e ratos por auto-transplante de tecido do útero para a cascata arterial do mesentério intestinal.

Modelo do rato de endometriose cirurgicamente induzida pela Auto-transplante de tecido uterino

A endometriose é uma doença crônica e dolorosa cuja etiologia permanece desconhecida. Além disso, o tratamento da endometriose pode exigir a remoção laparoscópica de ...

O objetivo geral deste procedimento é induzir cirurgicamente endometriose em camundongos por meio da transferência autóloga de tecido uterino para a cascata arterial do mesentério intestinal. Isso é realizado primeiramente ligando, removendo e expondo o endométrio do útero. O segundo passo do procedimento consiste em criar três implantes endometrioides a partir do endométrio exposto, utilizando uma furadeira de biópsia de dois milímetros.O terceiro passo do procedimento é suturar os três implantes endometrióides às artérias na cascata arterial do mesentério intestinal. O passo final do procedimento é fechar a parede abdominal e a pele e permitir que o animal recupere as lesões endometrióides. Os espécimes ressecados de camundongos assemelham-se aos de mulheres com endometriose, conforme determinado pela análise histológica e pelos padrões de expressão gênica e proteica.De modo geral, indivíduos novos neste método enfrentarão dificuldades por três razões principais. Primeiro, os tecidos de camundongo são muito pequenos. Segundo, o mesentério intestinal é facilmente danificado, e terceiro, pontos cirúrgicos colocados com muita firmeza resultarão em necrose intestinal.Inicie reunindo todo o equipamento cirúrgico necessário para uma cirurgia asséptica bem-sucedida, incluindo soluções para analgesia e anestesia. Após anestesiar o animal com isoflurano inalado, confirme a anestesia completa pela ausência de resposta a um estímulo de pinçamento no dedo do pé; para prevenir ressecamento durante a cirurgia, aplique pomada oftálmica nos olhos e, em seguida, rape a área cirúrgica usando tesouras pequenas. Desinfete o local cirúrgico com três passagens alternadas de solução de clorexidina e etanol a 70%, e depois cubra o animal com um campo estéril.Realize uma pequena incisão mediana utilizando tesoura pequena ou lâmina de bisturi, terminando de 0,5 a 1,0 centímetro cranialmente à abertura vaginal. Disseque cuidadosamente a parede corporal da parede abdominal para facilitar o fechamento do local cirúrgico. Após a dissecação romba, faça uma pequena incisão mediana na parede abdominal.Em seguida, usando pin&ccedil;as pequenas, localize suavemente o corno uterino esquerdo. O &uacute;tero est&aacute; dorsal ao intestino, que &eacute; o que normalmente &eacute; vis&iacute;vel ao entrar pela primeira vez no local da incis&atilde;o; levante levemente o corno uterino e deslize uma pin&ccedil;a aberta sob ele para servir como um afastador. Tamb&eacute;m &eacute; &uacute;til observar, neste momento, a apar&ecirc;ncia dos ov&aacute;rios e do &uacute;tero.Para auxiliar na determinação do ciclo estral. Deslize duas peças de seis a oito centímetros de fio de seda preto trançado 5-0 sob o corneto uterino esticado. Ligue com firmeza o corneto na junção utero-tubária.Apenas acomode até o tubo uterino e na junção uterocervical. Usando um nó quadrado em cada localização, deixe as pontas da sutura sem cortar. Remova o segmento do cornete uterino entre as duas ligaduras e coloque o tecido em uma placa de Petri de vidro contendo aproximadamente 100 microlitros de PBS com penicilina e estreptomicina.Corte as extremidades do fio de seda por último. Se o fio se soltar ou houver sangramento, localize o coto e dê outro nó ou não use tesoura pequena. Remova a gordura do corno uterino.Abra o corneto uterino inserindo uma lâmina de uma pequena tesoura no lúmen. Deslize suavemente a tesoura ao longo do corneto uterino enquanto segura o corneto com pinça. Na placa de Petri de vidro, use um punch de biópsia de dois milímetros para recortar três implantes de tamanho igual, tomando cuidado para que não sequem.Coloque uma gaze estéril imediatamente acima do local da incisão e umedeça-a completamente com PBS estéril contendo penicilina e estreptomicina. É importante manter a hidratação durante todas as etapas seguintes com pinça pequena e lisa. Localize suavemente o ceco e mova-se em direção oral ao longo do intestino delgado.Puxe uma pequena seção de quatro a cinco centímetros do intestino e organize-a como um leque sobre a gaze previamente umedecida, de modo que a cascata arterial do mesentério intestinal fique claramente visível. Certifique-se de manter o intestino úmido em todos os momentos com solução salina estéril. Coloque um implante sobre uma agulha e, em seguida, use sutura preta autógena n° 6 para fixar suavemente o implante a uma artéria localizada aproximadamente a 0,5 centímetros do intestino.Use apenas um. Arremesse a pinça e não aperte o sutura muito forte. Fazer isso pode resultar em perda do fluxo sanguíneo e subsequente necrose do intestino.Complete dois nós com um laço, arremesse cada um e corte o fio cirúrgico a cerca de dois milímetros do implante, hidrate o intestino. Em seguida, movendo-se em direção rostral. Puxe os próximos três a quatro centímetros do intestino e reposicione suavemente a seção que já contém um implante.Pule uma ou duas artérias a partir do local anterior de implante e sutura o próximo implante; repita o procedimento para o terceiro implante. Por fim, suture a parede abdominal e feche a pele com clipes cirúrgicos. Após o fechamento do local cirúrgico e a administração de analgésicos, coloque o animal com a face ventral voltada para baixo na gaiola, parcialmente sobre uma placa aquecida com água recirculante, até que o animal se recupere.Para recuperar as lesões endometrioides, localize os pontos pretos no mesentério intestinal. Meça o comprimento e a largura de cada lesão endometrioide usando paquímetro. Disseque as lesões endometrioides, tomando cuidado para não perfurá-las.Remova qualquer tecido não endométrioide da lesão. Agite suavemente as três lesões endométricas preenchidas com líquido antes de remover o ponto. Remova cuidadosamente o ponto e fure duas das lesões endométricas.Pese-os novamente antes de prosseguir para o processamento do tecido. Em seguida, resseque e pese o corno uterino remanescente. A análise histológica da endometriose em mulheres e no modelo murino apresentado aqui indica que a lesão endometrioide contém glândulas e estroma endometriais. Lesões endometrióticas em camundongos também contêm macrófagos carregados de hemossiderina, que são uma característica comum da endometriose em mulheres. Lesões endometrioides removidas de camundongos três dias após a indução apresentam-se inflamadas e hemorrágicas, como mostrado à esquerda, após duas a quatro semanas de crescimento.Lesões endometrióticas no modelo murino são císticas, semelhantes a cistos cheios de líquido e rodeadas por aderências peritoneais, em comparação com o peso da lesão na indução. Lesões cheias de líquido foram 306% e 862% maiores, e lesões em forma de lança foram 51% e 172% maiores, respectivamente, um e dois meses após a indução. Lesão endometrioide cheia de líquido e em forma de lança.Os pesos permanecem consistentes um mês após a indução em cinco experimentos diferentes realizados segundo este procedimento. Este modelo pode ser utilizado para responder perguntas sobre a fisiopatologia da endometriose e para explorar terapêuticas inovadoras para o tratamento da dor e da infertilidade associadas a esta doença.

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