Name: Radioterapia em uma combinação ortotópico modelo de tumor de cérebro de camundongos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-03-06T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 2 s
Description: Aprenda a implantar células de glioblastoma em cérebro de camundongo para estudos de quimiorradioterapia. Este modelo ortotópico permite avaliar novas terapias e analisar curvas de sobrevivência em pesquisa oncológica.

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Esta pesquisa é apoiada pelo financiamento do programa intramuros do NIH.

I. preparação de células <ol><li> As células são crescidas até à confluência em DMEM com FBS 10% sobre um 80% 225 centímetros confluente 3 balão para cada 5 ratinhos a ser implantadas. </li><li> Aspirar meios fora das células; lava-se com 10 ml de PBS sem cálcio ou magnésio. Aspirado PBS células fora. </li><li> Trypsinize células com 3 ml de tripsina, esperar 10-15 min, e neutralizar a tripsina com 15 ml de meio. </li><li> Pipetar todas as células e meios de comunicação em um cónico de 50 ml. Dois frascos grandes caber em um cónico de 50 ml. </li><li> Girar as células a 1600 rpm durante 7 minutos a 4 ° C. Aspirar completamente o sobrenadante. Ressuspender as células em 10 ml de PBS frio, e enxaguar células por suavemente pipetando para cima e para baixo. Assegure-se o pellet celular é misturada uniformemente com o PBS. A suspensão deve ser nublado. </li><li> Neste momento uma contagem de células é feita usando um contador Coulter. As células são novamente centrifugado a 1600 rpm durante 7 minutos a 4 ° C. </li><li> Após a centrifugação nd 2 das células, comopirata todos PBS e ressuspender em 1 ml de PBS. </li><li> As células são centrifugadas a em 1 ml de PBS a 3000 rpm durante 10 min a 4 ° C. O PBS é aspirado, e PBS é adicionado para ajustar a concentração final de 1x10 6 por 5 uL para U87 células, outras linhas celulares podem exigir um número diferente e concentração de células para o crescimento do tumor óptima. </li><li> Após o volume final e concentração obtém-se as células são mantidas em gelo em um tubo de Eppendorf. </li></ol> II. Xenoenxerto <ol class="ualpha"><li> Preparando o mouse <ol><li> Os ratos são anestesiados com uma mistura de injecção de Cetamina / Xilazina / solução salina. A mistura é de 120 mg / kg de cetamina, 16 mg / kg de Rompun e solução salina. Os ratinhos são pesados ​​individualmente e deu 0,1 ml por 10 g com base no seu peso. O anestésico é dado com agulha 26G ligado a uma seringa IP ml. Levará cerca de 15 min para os ratos para chegar a uma fase de sono sem resposta à dor. Você pode verificar a resposta à dor dacamundongos por beliscar a sua pata. </li><li> Após o mouse está totalmente anestesiado, pomada é administrado aos seus olhos, para evitar que sequem. </li><li> O rato é colocado sobre o leito do estereotáxico com os dentes da frente superiores no entalhe na barra de boca. O leito é então colocado no estereotáxica. </li><li> A guarda nariz é colocada sobre o nariz do rato para impedir o movimento da cabeça, e as barras de orelha são suavemente colocar nos canais de orelha dos ratinhos. Tenha cuidado para não fazer qualquer colocação de barra de nariz ou barras de ouvido muito apertados, como o crânio podem fraturar e / ou impedir o mouse de respirar. </li><li> Certifique-se que a cabeça do rato é o nível usando as marcas de escala na estereotáxica é útil durante este processo. </li><li> Para preparar o álcool de iodo rato, e providine é aplicada liberalmente sobre a cabeça do rato alternada para um total de 3 aplicação de álcool e 3 aplicações de iodo. Uma aplicação final de uma almofada de álcool com 70% é aplicado paraa cabeça. </li></ol></li><li> Procedimento cirúrgico <ol><li> Todos os instrumentos o procedimento deve ser esterilizado quer por autoclavagem ou embebendo instrumentos em etanol a 70% antes de iniciar o procedimento. </li><li> É feita uma incisão no topo do crânio por trás do olho direito diagonalmente de volta para o posterior esquerda do crânio. A incisão deve ser de cerca de 10 mm a 15 mm de comprimento. </li><li> Usando um Q-Tip, separar lentamente a incisão para expor o crânio e enxugar a membrana que está entre o crânio ea pele. Use um Q-ponta para apagar qualquer vestígio de sangue e assistir a sangramento excessivo. </li><li> Expor o topo do crânio para visualizar a bregma. Utilizando o ponto de seringa Hamilton, posicionar sobre o bregma. A posição correcta do orifício a ser perfurado no crânio é de 2 mm direita e 1 mm anterior da bregma (figura 2). Um marcador cirurgião ponta de feltro, que é comprado estéril, é utilizado para marcar a posição do orifício a ser perfurado. Por favor, note que o buraco está localizado próximo à umalinha de sutura terior. </li><li> Em seguida, faça um pequeno furo no crânio, na posição marcada com a ponta de uma agulha 22G em um vaso de pino ou alimentado através de uma agulha de 18G. </li><li> Carregar o 10 uL de vidro Hamilton seringa com 5 ul de células. A seringa de Hamilton é 10 ul com um contundente 30G para 33G agulha fixa ligada a ela. Certifique-se de misturar as células antes de carregá-las, seja por pipetagem-los ou usando uma seringa de 1 ml com agulha de 25G conectado. Depois de a seringa Hamilton é carregado, colocá-lo de volta no braço para alinhá-lo com o furo no crânio. </li><li> Abaixar a fim bunt da agulha para a superfície do crânio, uma vez que a agulha esteja nivelada com o crânio; baixar a agulha até que seja a uma profundidade de 3 mm abaixo da superfície do crânio. </li><li> Depois de a agulha é reduzida, deve permanecer ali durante 2 minutos para evitar qualquer traumatismo grave da agulha que afecta o cérebro. Implantação das células é a uma taxa de 1 uL por minuto para um total de 6-8 minutos, ter o cuidado de qualquer backflow. Após a última das células terem sido implantadas, deixar a agulha no lugar por mais 2 minutos, para permitir todas as células para resolver dentro </li><li> Retire a agulha do cérebro, e limpe o buraco com um Q-tip. Continuar a limpar a agulha e seringa com 50% acetona, EtOH a 100%, e de PBS, 3x em cada solução e, nessa ordem. </li><li> A pele sobre o crânio está pronto para ser suturado neste ponto. Usando 5-0 PBS fechar a incisão com cerca de 3 pontos. </li><li> Permitir o mouse para acordar em uma almofada de calor, e reaplicar pomada, se necessário. O rato pode ser devolvido à gaiola após mostra movimento na sua própria (isto é, Levantando a cabeça ou movendo os ombros). </li></ol></li></ol> III. O tratamento do implante IC por radiação e de drogas <ol class="ualpha"><li> O tratamento de radiação <ol><li> Dependendo da linha de células, o tratamento dos ratos pode ter lugar de 5 a 7 dias após o implante. Nosso departamento utiliza uma unidade de radioterapia para tratamento de ortovoltagem radiaçãomento. </li><li> Imagiologia, tais como BLI (Imaging bioluminescência), MRI ou CT pode ser usado para visualizar o tumor antes da randomização (figura 3A). </li><li> Os ratos são anestesiados com o cocktail de Cetamina / Xilazina / solução salina como antes, e pomada oftálmica é aplicado aos seus olhos. </li><li> Os ratinhos são posicionados em um jig radiação feitos que está configurado como uma roda de pizza, em que as cabeças dos ratinhos apontar em direcção ao centro. Os corpos dos ratos são protegidos da radiação com chumbo. </li><li> O tratamento medicamentoso pode ser dado antes ou radiação através de rotas de entrega diferentes, SQ ou seja, IP e IV. </li></ol></li></ol> IV. Resultados O rato deve acordar o procedimento dentro de 45-60 minutos após a injeção de anestesia. Se o mouse tem dificuldade de acordar após o procedimento e tempo ultrapassou 1 ½ horas após o procedimento, o mouse pode não recuperar e eutanásia pode ser uma alternativa eficaz. Se there é sangramento excessivo ou o crânio rachado torna-se a qualquer momento durante o procedimento de eutanásia é aconselhada. Se tudo correr bem e, dependendo da linha celular, um tumor deve começar a formar dentro de 2-4 semanas após o procedimento tem lugar. Ao usar modelos xenograft intracranianos, a eficácia terapêutica é geralmente medido como a sobrevivência pós-implantação-5. No entanto, como este é um modelo IC sinais e sintomas ocorrerá antes da morte. Alguns dos sinais físicos do mouse podem apresentar são uma postura arqueada, a perda de peso e inatividade. Alguns dos sinais neurológicos podem ser convulsões, incline a cabeça e perda de equilíbrio. A Figura 3B mostra uma mancha de HE um tumor em mortalidade. Um diagrama de Kaplan-Meier é usado para avaliar os dados (Figura 4). O número de dias de sobrevivência de 50% são calculados e comparados com o controle. Se o grupo de combinação viveram mais do que a adição da radiação indivíduo e os braços de drogas a combinação é foi bem sucedida. <img alt='"Figura' src="/files/ftp_upload/3397/3397fig1.jpg"> Figura 1. O equipamento Stoelting estereotáxica. <img alt="A Figura 2" src="/files/ftp_upload/3397/3397fig2.jpg"> Figura 2. Um diagrama da localização do furo de perfurador no crânio do rato. <img alt="A Figura 3A" src="/files/ftp_upload/3397/3397fig3A.jpg"> Figura 3A. BLI imagem após a implantação do GBM. <img alt="A Figura 3B" src="/files/ftp_upload/3397/3397fig3B.jpg"> Figura 3B. H e E do tumor GBM a mortalidade. <img alt="A Figura 4" src="/files/ftp_upload/3397/3397fig4.jpg"> Figura 4. Resultados de U87 implantes IC injetados com inibidor de PARP 7 pós-cirurgia dias.

<ol><li>Bleau, A. M., Holland, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trapping+the+mouse+genome+to+hunt+human+alternations%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Nat.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Trapping the mouse genome to hunt human alternations.</a> Proc. Nat. Acad. Sci. U.S.A. 104, 7737-7738 (2007).</li>
<li>McGrady, B. J., McCormick, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+of+intracranial+invasion%3A+morphological+observations+on+central+nervous+system+invasion+by+melanoma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Exp.+Metastasis%22%5BJournal%5D)">A murine model of intracranial invasion: morphological observations on central nervous system invasion by melanoma cells.</a> Clin. Exp. Metastasis. 10, 387-393 (1992).</li>
<li>Fei, X., Zhang, Q., Dong, J., Diao, y, Wang, Z., Li, R., Wu, Z., Wang, A., Lan, Q., Zhang, S., Huang, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+clinically+relevant+orthotopic+xenograft+mouse+model+of+metastatic+lung+cancer+and+glioblastoma+through+surgical+tumor+tissues+injection+with+trocar%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+%26+Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Development of clinically relevant orthotopic xenograft mouse model of metastatic lung cancer and glioblastoma through surgical tumor tissues injection with trocar.</a> Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. 29, 84-84 (2010).</li>
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<li>Candolfi, M., Curtin, J. F., Nichols, W. S., Muhammad, A. K. M. . G., King, G., Pluhar, G. D., McNiel, G. E., Ohlfest, E. A., Freese, J. R., Moore, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracranial+glioblastoma+models+in+preclinical+neuro-oncology%3A+neuropathlogical+characterization+and+tumor+progression%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurooncol%22%5BJournal%5D)">Intracranial glioblastoma models in preclinical neuro-oncology: neuropathlogical characterization and tumor progression.</a> J. Neurooncol. 85, 133-148 (2007).</li>
<li>Kaye, A., Morstyn, G., Gardner, I., Pyke, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+xenograft+glioma+model+in+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Development of a xenograft glioma model in mouse brain.</a> Cancer Research. 46, 1367-1373 (1986).</li>
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<li>Learn, C., Grossi, P., Schmittling, R., Xie, W., Mitchell, D., Karikari, I., Wei, Z., Dressman, H., Sampson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+Analysis+of+Intracranial+Tumors+in+a+Murine+Model+of+Glioma+Demonstrate+a+Shift+in+Gene+Expression+in+Response+to+Host+Immunity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neuroimmunol%22%5BJournal%5D)">Genetic Analysis of Intracranial Tumors in a Murine Model of Glioma Demonstrate a Shift in Gene Expression in Response to Host Immunity.</a> J. Neuroimmunol. 182, 63-72 (2007).</li>
<li>Martens, T., Laabs, Y., Günther, H., Kemming, D., Zhu, Z., Witte, L., Hagel, C., Westphal, M., Lamszus, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+Glioblastoma+Growth+in+a+Highly+Invasive+Nude+Mouse+Model+Can+Be+Achieved+by+Targeting+Epidermal+Growth+Factor+Receptor+but+not+Vascular+Endothelial+Growth+Factor+Receptor-2%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Inhibition of Glioblastoma Growth in a Highly Invasive Nude Mouse Model Can Be Achieved by Targeting Epidermal Growth Factor Receptor but not Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2.</a> Clin. Cancer Res. 14, 5447-5458 (2008).</li>
<li>Purow, B., Schiff, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+genetics+of+glioblastoma%3A+are+we+reaching+critical+mass%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Advances in the genetics of glioblastoma: are we reaching critical mass.</a> Nat. Rev. Neurol. 5, 419-426 (2009).</li>
</ol>

Não temos nada a divulgar.

Gliomas malignos, como o glioblastoma multiforme, representam os mais comuns tumores cerebrais primários e têm um prognóstico sombrio 4. Sobrevida de pacientes afetados por GBM permaneceu praticamente inalterada durante a última década (isto é, 9-12 meses após o diagnóstico), apesar dos avanços em cirurgia, radioterapia e quimioterapia 5. As características de um modelo adequado para o estudo do tratamento glioma deve incluir uma localização do tumor reprodutível e crescimento das células como um t...

<table border="1"><tbody><tr><td> Laboratório Padrão Estereotáxica Instrutment </td><td> Stoelting Mouse e adaptador rato </td></tr><tr><td> Betadine </td><td> 100% de EtOH </td></tr><tr><td> 70% de EtOH </td><td> Acetona 50% </td></tr><tr><td> 6 &quot;Q-tips </td><td> Compressas com álcool </td></tr><tr><td> Hamilton seringa 80008 </td><td> Ethicon 5-0 PD </td></tr><tr><td> 1701 SN 31-33G / 1 &quot;/ PT3 agulha </td><td> Seringas de 1 ml </td></tr><tr><td> Agulhas 25G </td><td> Almofada de aquecimento </td></tr><tr><td> Pomada Lágrimas Artificial </td><td> Muito bom marcador permanente ponta </td></tr></tbody></table>

radioterapia em uma combinação ortotópico modelo de tumor de cérebro de camundongos

Combination Radiotherapy in an Orthotopic Mouse Brain Tumor Model

O glioblastoma multiforme (GBM) são os mais comuns e agressivos adultos tumores cerebrais primários 1. Em anos recentes, tem havido um progresso substancial na compreensão dos mecanismos de invasão do tumor, e inoculação intracerebral directa de tumor proporciona a oportunidade de se observar o processo invasivo em um ambiente apropriado fisiologicamente 2. No que diz respeito tumores cerebrais humanos estão em causa, os modelos ortotópicos actualmente disponíveis são estabelecidas, quer por injecção estereotáxica de suspensões de células ou implantação de um pedaço sólido de tumor através de um procedimento complicado craniotomia 3. Na nossa técnica que colher células de cultura de tecidos para criar uma suspensão de células usadas para implante directamente para o cérebro. A duração da cirurgia é aproximadamente 30 minutos, e como o rato precisa de ser constante num plano cirúrgico, um anestésico injectável é usado. O rato é colocado em um jig estereotáxico feita por Stoetling (figura 1). À réer a área cirúrgica é limpo e preparado, é feita uma incisão; eo bregma está localizado para determinar a localização do craniotomia. A localização do craniotomia é de 2 mm para a direita e 1 mm rostral à bregma. A profundidade é de 3 mm da superfície do crânio, e as células são injectadas a uma taxa de 2 ul a cada 2 minutos. A pele é suturada com 5-0 PDS, e do rato é permitido para acordar em uma almofada de aquecimento. De nossa experiência, dependendo da linha celular, o tratamento pode ter lugar a partir de 7-10 dias após a cirurgia. A entrega da droga depende da composição de droga. Para o tratamento de radiação os ratos são anestesiados e colocados em um feito gabarito. Chumbo cobre o corpo do rato e expõe apenas o cérebro do rato. O estudo de tumorigénese ea avaliação de novas terapias para GBM requerem precisos e reprodutíveis cerebrais modelos animais de tumores. Assim, utilizar este modelo ortotópico cérebro para estudar a interacção do microambiente do cérebro e do tumor, para testar a effectiveness de diferentes agentes terapêuticos, com e sem radiação.

O objetivo deste artigo é descrever o uso de um modelo de glioblastoma ortotópico para estudos quimioradioterapia. Este artigo irá passar por transformação celular, implantação, e radioterapia do mouse através de um modelo intracraniana.

Radioterapia em uma combinação ortotópico modelo de tumor de cérebro de camundongos

O glioblastoma multiforme (GBM) é o tumor cerebral primário adulto mais comum e agressivo1. Nos últimos anos, houve um progresso substancial no...

O objetivo geral deste procedimento é descrever, demonstrar e tratar células de glioblastoma implantadas no cérebro de um camundongo. Isso é realizado primeiramente preparando as células e, em seguida, implantando-as no cérebro de um camundongo. Após o procedimento cirúrgico, um tumor se desenvolve no cérebro, podendo ser submetido a experimentações com diversos tratamentos.No final das contas, uma curva de sobrevida pode mostrar se o tratamento foi ou não eficaz. As implicações dessa técnica estendem-se à terapia do glioblastoma, pois pode ser uma forma mais eficaz de testar novos tratamentos, como medicamentos e radiação, em comparação com o cultivo tecidual. Comece cultivando as células de interesse, como as células U 87, até atingirem 80% de confluência. Em DMEM com 10% de FBS, um frasco de 225 centímetros cúbicos fornecerá células suficientes para implantar cinco camundongos; aspire o meio das células e lave brevemente as células com 10 mililitros de PBS sem cálcio ou magnésio, agitando manualmente.Após aspirar a solução de lavagem, incubar as células com tripsina por 10 a 15 minutos e, em seguida, neutralizar a tripsina com 15 mililitros de meio. Agora, transferir todas as células e o meio para um tubo cônico de 50 mililitros. Duas placas de cultivo cabem em um único tubo.Centrifugue as células a 1600 RPM durante sete minutos e remova completamente o sobrenadante por aspiração. Ressuspenda o pellet em 10 mililitros de PBS frio e lave as células pipetando suavemente para cima e para baixo na solução até obter uma suspensão turva e uniforme. Após medir a concentração celular utilizando um contador de culturas, repita a lavagem com PBS para um crescimento tumoral ideal.Ajuste a concentração final das células U 87 para 200.000 células por microlitro. Outras linhagens celulares podem exigir uma concentração diferente para crescimento tumoral ideal. Com as células preparadas para injeção, mantenha-as no gelo e prossiga com o preparo do animal.Comece a preparar os camundongos administrando anestésico aos camundongos hospedeiros. Após cerca de 15 minutos, verifique se os camundongos são insensíveis à dor com um aperto leve no dedo do pé. Uma vez anestesiados, aplique uma pomada nos olhos para evitar que sequem.Em seguida, posicione o camundongo sobre a plataforma do estereotáxico. Encaixe os dentes na ranhura da barra bucal. Em seguida, posicione a plataforma dentro do quadro.Agora, para imobilizar a cabeça, coloque uma proteção nasal no camundongo e, em seguida, insira suavemente as barras auriculares nos canais auditivos. Não aperte excessivamente nenhuma dessas barras, pois o crânio pode fraturar ou o camundongo pode sofrer asfixia. Neste momento, verifique se a cabeça está nivelada.A preparação final consiste em passar alternadamente álcool e iodo na região da cabeça três vezes cada e finalizar com uma quarta aplicação de álcool. Inicie a cirurgia de implante com uma incisão começando atrás do olho direito e seguindo diagonalmente até a região posterior esquerda do crânio. A incisão deve ter entre 10 e 15 milímetros de comprimento.Use um aplicador de algodão para separar lentamente a incisão, expondo o crânio, remova a membrana que está entre o crânio e a pele e absorva qualquer sangue ou sangramento excessivo. Agora, visualize o bgma e posicione uma seringa de vidro Hamilton de 10 microlitros sobre ele usando uma caneta de ponta de feltro. Faça uma marca dois milímetros à direita e um milímetro anterior ao bgma, próxima à linha da sutura anterior.Agora remova a seringa e faça um pequeno orifício no crânio na posição marcada. A broca tem o tamanho de uma agulha de calibre 22. Deixe a broca realizar a perfuração no crânio.Nenhuma pressão adicional é necessária. Usando uma seringa com agulha de 30 a 33 gauge, carregue a seringa com cinco microlitros de células bem misturadas e, em seguida, reconecte-a ao suporte. Alinhe a agulha com o orifício no crânio e abaixe-a até a superfície do crânio a partir da superfície do crânio.Abixe a agulha três milímetros e espere dois minutos. Esta pausa reduz a chance de trauma. Pressione lentamente o êmbolo para implantar as células a uma taxa de cerca de um microlitro por minuto.Evite cuidadosamente qualquer refluxo após a implantação da última célula. Mantenha a agulha no lugar por mais dois minutos para permitir que todas as células se acomodem. Após esse período, retire suavemente a agulha do cérebro e limpe cuidadosamente o orifício com um aplicador de algodão.Agora, utilizando fio de sutura de PBS cinco-zero, feche a incisão com cerca de três pontos. Coloque o camundongo sobre uma placa aquecida e, se necessário, reaplique pomada oftálmica.Uma vez que o camundongo levante a cabeça ou mova os ombros, devolva-o à sua gaiola de origem. A partir do momento da injeção de anestesia, este procedimento leva entre 30 e 60 minutos. Se o camundongo não se mexer após 90 minutos, ele pode não se recuperar e a eutanásia pode ser uma alternativa adequada.Além disso, se houver sangramento excessivo ou se o crânio se rachar em qualquer momento durante o procedimento, recomenda-se a eutanásia. Dependendo da linhagem celular, o tratamento com radiação nos camundongos pode ser realizado entre cinco e sete dias após o implante. Por exemplo, uma unidade de radioterapia de tensão ortovolt pode ser usada para o tratamento com radiação.Utilize técnicas de imagem, como B-L-I-M-R-I ou TC, para visualizar o tumor antes de randomizar os camundongos em grupos experimentais. Após o implante celular, os tumores geralmente se formam em duas a quatro semanas, dependendo da linhagem celular. Após a morte, a coloração foi realizada nos tecidos cerebrais para examinar o tumor.Uma avaliação importante da eficácia do tratamento é a construção de uma curva de sobrevida de Kaplan-Meier. Esta compara a sobrevida média após a injeção de animais que receberam tratamento com medicamento, tratamento com radiação ou uma terapia combinada. Após esse desenvolvimento, essa técnica abriu caminho para pesquisas na área de oncologia, permitindo explorar terapias para tumores cerebrais em camundongos.

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Pacientes com tumor cerebral rotineiramente submetidos à radioterapia cranial, e ao mesmo tempo benéfico, este tratamento muitas vezes resulta em disfunção cognitiva debilitante. Este grave problema por resolver tem no momento, nenhum recurso clínico, e tem impulsionado os nossos esforços para desenvolver terapias com células-tronco com base para a recuperação de induzida por radiação decrementa cognitiva.

Transplante de Células-tronco Estratégias para a Restauração da disfunção cognitiva causada pela radioterapia craniana

Nós descrevemos um método integrado para a implantação, precisa estereotáxica de células de glioblastoma multiforme humano no cérebro de camundongos nude e série...

Implantação estereotáxica intracraniana e<em&gt; Em vivo</em&gt; Imaging Bioluminescent de xenoenxertos de tumores em um Sistema Modelo de Rato Glioblastoma Multiforme

O vídeo demonstra a técnica de inoculação ortotópica do câncer de mama em um modelo de camundongo. Esta técnica produz uma alta taxa de tumorigênese com menos variabilidade no tamanho e forma do tumor em comparação com a injeção subcutânea ou não cirúrgica.

Injeção ortotópica: implante de células cancerígenas específicas do tecido em um camundongo adulto

Este vídeo demonstra a implantação de células tumorais no cérebro de camundongos realizando injeção intracraniana.

Modelo ortotópico intracraniano: um procedimento para implantar células cancerígenas no cérebro de camundongos

No passado, pequena animal irradiação geralmente foi realizada sem a capacidade de direcionar um volume de tumor bem delineados. O objetivo era imitar o tratamento do glioblastoma humano em ratos. Utilizando uma plataforma de irradiação de animais pequenos, realizamos guiada por MRI irradiação conformal 3D com secundário-volume baseados em PET impulsionando em um ajuste pré-clínicos.

PET e MRI guiada irradiação de um modelo do rato de Glioblastoma usando um Microdifusora

Aqui, apresentamos um protocolo para a preparação e a administração estereotáxica de linfócitos humanos alogênico em camundongos imunodeficientes carregando humana ortotópico de tumores primários. Este estudo fornece um prova de conceito para a viabilidade e a eficácia antitumoral de imunoterapias celulares intrabrain-entregue.

Estereotáxica transferência adotiva de citotóxicas células imunes em modelos murino de humanos ortotópico Glioblastoma Multiforme Xenografts

Pesquisa sobre estratégias de tratamento para os teratomas de células-tronco derivadas de pluripotentes é importante para a tradução clínica de terapia de células-tronco. Aqui, descrevemos um protocolo para, em primeiro lugar, gerar células-tronco derivadas os teratomas em camundongos e, depois, para seletivamente alvo e tratar estes tumores in vivo usando uma difusora de pequenos animais.

Tratamento orientado e seletivo de Teratomas células-tronco derivadas de pluripotentes usando radiação de feixe externo em um modelo animal de pequeno

A modelagem da metástase cerebral intracraniana é complicada pela incapacidade de monitorar o tamanho do tumor e a resposta ao tratamento com métodos precisos e oportunos. A metodologia apresentada casais injeção de tumor intracraniano com análise de ressonância magnética, que, quando combinada, cultiva injeções precisas e consistentes, monitoramento animal aprimorado e medições precisas de volume de tumor.

Modelando metástases cerebrais através de injeção intracraniana e ressonância magnética

Aqui apresentamos um protocolo para realizar radioterapia baseada em tomografias pré-pêtrons em um modelo de glioblastoma de ratos usando algoritmos desenvolvidos internamente para otimizar a precisão e eficiência.

Positron Emission Tomography-based Dose Radiation Therapy em um modelo de rato glioblastoma usando a plataforma de pesquisa de radiação animal de pequeno porte

Aqui, descrevemos um modelo ortotópico pré-clínico em camundongos para GBM, estabelecido por injeção intracraniana de células derivadas de tumores modelo de camundongos geneticamente modificados. Este modelo exibe as características da doença do GBM humano. Para estudos translacionais, o tumor cerebral de camundongo é rastreado por ressonância magnética in vivo e histopatologia.

Modelos Ortotópicos Translacionais de Glioblastoma Multiforme

O desenvolvimento de modelos ortotópicos de tumores cerebrais pediátricos requer precisão meticulosa, usando um dispositivo estereotáxico para implantar células cancerígenas com precisão. A metodologia apresentada aqui descreve as etapas envolvidas na preparação de células tumorais cerebrais, na realização de injeções intracranianas e na implementação de um sistema de monitoramento pós-operatório para avaliar o enxerto de tumor cerebral.

Estabelecimento de modelos ortotópicos de xenoenxerto derivados de pacientes para tumores cerebrais usando um dispositivo estereotáxico

Aprenda a implantar células de glioblastoma em cérebro de camundongo para estudos de quimiorradioterapia. Este modelo ortotópico permite avaliar novas terapias e analisar curvas de sobrevivência em pesquisa oncológica.

Radioterapia em uma combinação ortotópico modelo de tumor de cérebro de camundongos

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