Name: Avaliação do nervo Excitabilidade em induzida por quimioterapia Neurotoxicidade (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-04-26T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 42 s
Description: Aprenda a avaliar a excitabilidade nervosa para detectar neurotoxicidade induzida por quimioterapia em pacientes oncológicos. Este método permite identificar alterações funcionais precoces nos axônios periféricos.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. Preparação do paciente <ol><li> Os pacientes são encaminhados pelo Departamento de Oncologia Médica para a excitabilidade nervosa base teste antes do início de quimioterapia. </li><li> Aptidão paciente para testes excitabilidade deve ser determinada. Os pacientes devem ser excluídos se eles têm uma história ou evidência de base neurofisiológica de neuropatia periférica, receberam tratamento de quimioterapia ou neurotóxicos existem contra-indicações para o teste de excitabilidade. </li></ol> 2. Axonais Procedimentos excitabilidade <ol><li> Realizar protocolos de excitabilidade sensorial e motora do nervo mediano, usando as semi-automatizados QTracS sistema computadorizado (Instituto de Neurologia, Queen Square, UK), um isolado linear bipolar estimulador de corrente constante (Digitimer, Welwyn Garden City, Reino Unido) e um amplificador ( Sapphire IIA, Medelec, UK). </li><li> Prepare a superfície da pele no punho e antebraço com um gel abrasivo ou almofada para reduzir a peleresistência, seguido pela aplicação de um álcool. </li><li> Preparar o local de gravação para gravações de motores com não-polarizáveis ​​eletrodos colocados sobre o ventre do músculo abdutor do polegar de brevis e um eletrodo de referência 4cm distais para gravar composto de motor potenciais de ação (MCs). </li><li> Preparar o local de gravação para gravações sensoriais - através de eletrodos colocados anel nas articulações proximal e distal para gravação e eletrodos de referência, respectivamente, para captação de potenciais compostos de ação sensoriais (CSAPs). </li><li> Coloque uma placa eletrocirúrgica terra neutro na palma da mão, com gel condutor. </li><li> Ruído elétrico na configuração de gravação deve ser removido, tanto quanto possível, utilizando uma farsa 50/60 Hz Ruído eliminador (Quest Scientific Instruments, North Vancouver, Canadá). </li><li> Estimular o nervo mediano no punho. Local de estimulação deve ser selecionada como o local de menor limiar, usando um eletrodo bipolar reposicionável e, posteriormente, um não-peletrodo olarizable. </li><li> O eléctrodo de ânodo deve ser colocado 10 cm proximal a partir do eléctrodo estimulante sobre o osso. </li><li> Monitorar a temperatura no local da estimulação durante todo o ensaio e assegurar que a temperatura é maior do que 32 ° C. </li></ol> 3. Axonais Protocolos excitabilidade <ol><li> Gravar uma curva de resposta a estímulos por incrementalmente aumentando o estímulo até que a resposta é máxima e não aumentar quando a intensidade de estímulo é ainda maior. </li><li> A amplitude de destino para o acompanhamento limiar é ajustado automaticamente a 30% -40% da amplitude máxima, correspondente à área de inclinação mais acentuada na curva de resposta a estímulos. </li><li> De acordo com a método de Bostock et al., 1998, mudanças no limiar corrente necessária para atingir o alvo de amplitude são rastreadas em linha. </li><li> Grave parâmetros excitabilidade múltiplos, incluindo limiar electrotonus (TE), ciclo de recuperação (RC) eo limiar de corrente (I / V) a relaçãotal como descrito no Kiernan et al., 2000 e et Kiernan ai., 2001. </li><li> Limiar electrotonus é avaliada usando correntes 100ms subliminares de polarização, com polarização conjunto de corrente de ± 40% de limiar de controlo (Fig. 1). A mudança na corrente limiar necessária para manter a amplitude de resposta alvo, tanto após des-e hiper-polarização é gravado. Limiar electrotonus fornece uma avaliação de condutâncias internodais e potenciais de membrana, com respostas na direcção hiperpolarizante no final do pulso de polarização (90-100 ms) fortemente associada com o potencial de membrana. </li><li> O ciclo de recuperação é avaliada utilizando um paradigma de pulso emparelhado (Fig. 2), com um estímulo de condicionamento inicial supramáxima seguida, a intervalos diferentes por um estímulo de teste (a partir de 2,5 ms a 200 ms). Após o estímulo supramáximo, é mais difícil de gerar uma resposta subsequente, denominado «refratariedade ', reflectindo a inactivação de tensão-gated canais de Na +. Após o período refractário, um período de facilitação conhecido como superexcitability ocorre. </li><li> Atual limite-relação é avaliada através de correntes de polarização de 200 ms, que variam em intensidade de 50% para -100% do limiar. </li></ol> 4. Paciente <ol><li> Utilizando estas técnicas, os pacientes são avaliados de forma aguda e longitudinalmente através tratamento de quimioterapia. Para avaliar a neurotoxicidade aguda, a paciente retorna para pós-quimioterapia de avaliação no prazo de 48 horas após receber tratamento. </li><li> Para examinar a neurotoxicidade crónica, as avaliações de tomadas antes da infusão de quimioterapia são comparados longitudinalmente entre os ciclos de tratamento. </li><li> Além de testes de excitabilidade axonal, escalas de classificação convencionais clínicos devem ser usados ​​para avaliar a quimioterapia neurotoxicidade induzida, incluindo o National Cancer Institute - Common Criteria de eventos adversos Neuropatia subescala sensorial, neuropatia Pontuação total e patient-referida avaliação dos resultados. </li></ol> 5. Análise e Interpretação <ol><li> Para identificar a neurotoxicidade aguda, os resultados são comparados de pré-tratamento e pós-quimioterapia. Para avaliar o desenvolvimento de alterações longitudinais em função dos nervos, os resultados são comparados através de tratamento. Parâmetros essenciais para a avaliação incluem refratariedade, superexcitability, a extensão da alteração limiar em electrotonus limiar (hiperpolarizante 90-100 ms), além de parâmetros convencionais, tais como amplitude de pico e de latência. </li><li> Para avaliar a mudança global nos parâmetros de excitabilidade de todo o tratamento, uma pontuação excitabilidade composto é calculado. A mudança de três parâmetros - refratariedade superexcitability, e limiar electrotonus (hiperpolarizante 90-100 ms) - é resumida a partir inicial para tratamentos finais para dar um marcador global de mudança. </li></ol> 6. Os resultados representativos Exemplos de resultados excitabilidade em um tapinhaient tratada com oxaliplatina são fornecidos. Imediatamente a infusão pós-oxaliplatina, alterações agudas na excitabilidade tanto sensorial e motora desenvolvem, sugestiva de o desenvolvimento de um funcional canalopatia + Na 10 -13. No entanto, as alterações significativas nos parâmetros de excitabilidade múltiplas desenvolve progressivamente ao longo do tratamento de oxaliplatina apenas em axónios sensoriais, com axónios do motor não afectados (Fig. 3), reflectindo danos sensorial generalizada axonal e mudança potencial de membrana. Este padrão corresponde à expressão clínica dos sintomas em neurotoxicidade induzida por oxaliplatina crônica. Mudanças na excitabilidade axônios sensitivos precede reduções na amplitude pico avaliada utilizando técnicas convencionais de condução do nervo, e sugerem que as técnicas de excitabilidade axonal pode fornecer uma ferramenta de avaliação sensível para a neurotoxicidade induzida por oxaliplatina cedo. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/3439/3439fig1.jpg" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/3439/3439fig2.jpg" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Figura 2"> Figura 2. Ciclo de recuperação da excitabilidade, demonstrando a sequência característica de alterações na sequência de excitabilidade condução do impulso, com um período de excitabilidade reduzida (refratariedade) até 3 ms após um estímulo supramáximo, seguido por um período de aumento da excitabilidade (superexcitability) atingindo um máximo de 5 -7 ms e, subsequentemente, a excitabilidade reduzida (subexcitability). O protocolo de estímulo emparelhado pulso paradigma é inserido. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/3439/3439fig3.jpg" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Figura 3"> Figora 3. mudanças excitabilidade em axônios sensitivos oxaliplatina pacientes tratados, com valores basais mostradas em gravações negras e pós-tratamento mostrados em branco, após 4-6 meses de tratamento com oxaliplatina. Essas mudanças são pensados ​​para refletir dano axonal generalizado e mudança potencial de membrana. Um retrato da excitabilidade set-up dentro do ambiente oncológico é mostrado à esquerda. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/3439/3439fig3large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver a imagem ampliada</a> .

<ol><li>Hausheer, F. H., Schilsky, R. L., Bain, S., Berghorn, E. J., Lieberman, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis%2C+management%2C+and+evaluation+of+chemotherapy-induced+peripheral+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Semin.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Diagnosis, management, and evaluation of chemotherapy-induced peripheral neuropathy.</a> Semin. Oncol. 33, 15-49 (2008).</li>
<li>Park, S. B., Krishnan, A. V., Lin, C. S., Goldstein, D., Friedlander, M., Kiernan, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+underlying+chemotherapy-induced+neurotoxicity+and+the+potential+for+neuroprotective+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Med.+Chem%22%5BJournal%5D)">Mechanisms underlying chemotherapy-induced neurotoxicity and the potential for neuroprotective strategies.</a> Curr. Med. Chem. 15, 3081-3094 (2008).</li>
<li>Park, S. B., Lin, C. S., Krishnan, A. V., Goldstein, D., Friedlander, M. L., Kiernan, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+Neuropathy+after+Oxaliplatin+Treatment%3A+Challenging+the+Dictum+of+Reversibility%3F%5BTitle%5D)+AND+%22The+Oncologist%22%5BJournal%5D)">Long-term Neuropathy after Oxaliplatin Treatment: Challenging the Dictum of Reversibility?</a> The Oncologist. , Forthcoming (2012).</li>
<li>Postma, T. J., Heimans, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Grading+of+chemotherapy-induced+peripheral+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Grading of chemotherapy-induced peripheral neuropathy.</a> Ann. Oncol. 11, 509-513 (2000).</li>
<li>Cascinu, S., Catalano, V., Cordella, L., Labianca, R., Giordani, P., Baldelli, A. M., Beretta, G. D., Ubiali, E., Catalano, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effect+of+reduced+gluthathione+on+oxaliplatin-based+chemotherapy+in+advanced+colorectal+cancer%3A+a+randomized%2C+double-blind%2C+placebo-controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effect of reduced gluthathione on oxaliplatin-based chemotherapy in advanced colorectal cancer: a randomized, double-blind, placebo-controlled trial.</a> J. Clin. Oncol. 20, 3478-3483 (2002).</li>
<li>Lehky, T. J., Leonard, G. D., Wilson, R. H., Grem, J. L., Floeter, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxaliplatin-induced+neurotoxicity%3A+acute+hyperexcitability+and+chronic+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Oxaliplatin-induced neurotoxicity: acute hyperexcitability and chronic neuropathy.</a> Muscle Nerve. 29, 387-392 (2004).</li>
<li>Bostock, H., Cikurel, K., Burke, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Threshold+tracking+techniques+in+the+study+of+human+peripheral+nerve%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Threshold tracking techniques in the study of human peripheral nerve.</a> Muscle Nerve. 21, 137-158 (1998).</li>
<li>Burke, D., Kiernan, M. C., Bostock, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excitability+of+human+axons%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Excitability of human axons.</a> Clin. Neurophysiol. 112, 1575-1585 (2001).</li>
<li>Krishnan, A. K., Lin, C. S., Park, S. B., Kiernan, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axonal+ion+channels+from+bench+to+bedside%3A+a+translational+neuroscience+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Axonal ion channels from bench to bedside: a translational neuroscience perspective.</a> Prog. Neurobiol. 89, 288-313 (2009).</li>
<li>Park, S. B., Lin, C. S., Krishnan, A. V., Goldstein, D., Friedlander, M., Kiernan, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxaliplatin-induced+neurotoxicity%3A+changes+in+axonal+excitability+precede+development+of+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Oxaliplatin-induced neurotoxicity: changes in axonal excitability precede development of neuropathy.</a> Brain. 132, 2712-2723 (2009).</li>
<li>Park, S. B., Goldstein, D., Lin, C. S., Krishnan, A. V., Friedlander, M. L., Kiernan, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+abnormalities+of+sensory+nerve+function+associated+wtih+oxaliplatin-induced+neurotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Acute abnormalities of sensory nerve function associated wtih oxaliplatin-induced neurotoxicity.</a> J. Clin. Oncol. 27, 1243-1249 (2009).</li>
<li>Krishnan, A. V., Goldstein, D., Friedlander, M., Kiernan, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxaliplatin-induced+neurotoxicity+and+the+development+of+neuropathy%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Oxaliplatin-induced neurotoxicity and the development of neuropathy.</a> Muscle Nerve. 32, 51-60 (2005).</li>
<li>Krishnan, A. V., Goldstein, D., Friedlander, M., Kiernan, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxaliplatin+and+axonal+Na%2B+channel+function+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Oxaliplatin and axonal Na+ channel function in vivo.</a> Clin. Cancer Res. 12, 4481-4484 (2006).</li>
</ol>

Não temos nada a divulgar.

Neuropatia induzida por quimioterapia é um efeito colateral grave do tratamento do cancro, que podem afectar o curso do tratamento e produzir longa duração deficiência paciente. Há uma falta de medidas de avaliação sensível e objetiva para mensurar especificamente a disfunção do nervo em pacientes tratados de quimioterapia. O desenvolvimento clínico de técnicas de excitabilidade axonal forneceu informações úteis e preditivos para a avaliação da quimioterapia neurotoxicidade induzida. Ao fornecer informações sobre a função do canal de íons, potencial de repouso, e função da membrana axonal, estas técnicas permitem insights sobre os processos fisiopatológicos subjacentes disfunção axonal em pacientes com câncer tratados com quimioterapia. Além disso, as técnicas de excitabilidade axonais têm demonstrado ser viável na configuração oncologia clínica, e um único teste pode ser completado em 5-10 minutos. Em pacientes tratados com oxaliplatina, técnicas de excitabilidade axonais fornecerum biomarcador sensível que permite a identificação precoce de pacientes em risco de neurotoxicidade grave. Em comparação com estudos de condução nervosa convencionais que identificam oxaliplatina danos nervosos causados ​​por apenas após a perda axonal já ocorreu, estudos excitabilidade axonal fornecer marcadores preditivos de disfunção do nervo antes da perda axonal. Como tal, os estudos de excitabilidade axonais podem ser utilizados para fornecer a avaliação da função do nervo em ensaios clínicos de potenciais estratégias neuroprotectores, para determinar a eficácia neuroprotectora objectivamente.

<table border="1"><tbody><tr><td> Equipamentos e Materiais </td><td> Companhia </td></tr><tr><td> Programa QTracS </td><td> Digitimer, Instituto de Neurologia, Queen Square, UK </td></tr><tr><td> DS5 isolado linear bipolar estimulador de corrente constante </td><td> Digitimer </td></tr><tr><td> Sapphire Amplificador IIA </td><td> Medelec </td></tr><tr><td> Farsa 50/60 Hz Ruído eliminador </td><td> Busca Scientific Instruments </td></tr><tr><td> Não-polarizáveis ​​eletrodos </td><td> Unomedical </td></tr><tr><td> Electrosurgical neutro placa Terra </td><td> Unomedical </td></tr></tbody></table>

avaliação do nervo excitabilidade em induzida por quimioterapia neurotoxicidade

Nerve Excitability Assessment in Chemotherapy-induced Neurotoxicity

Induzida por quimioterapia neurotoxicidade é uma consequência grave do tratamento do cancro, que ocorre com alguns dos 1,2 quimioterapias mais comumente utilizado. Induzida por quimioterapia neuropatia periférica produz sintomas de dormência e formigamento nos membros e podem evoluir para dificuldades com habilidades motoras finas e pé, levando ao comprometimento funcional. Além de produzir sintomas perturbadores, neuropatia induzida por quimioterapia pode limitar o sucesso do tratamento levando a uma redução da dose ou cessação do tratamento precoce. Os sintomas neuropáticos podem persistir a longo prazo, deixando danos permanentes do nervo em pacientes com um prognóstico outra boa 3. Como a quimioterapia é utilizada mais frequentemente como uma medida preventiva, e aumentar as taxas de sobrevivência, a importância de neurotoxicidade de longa duração e significativa irá aumentar. Não há opções estabelecidas neuroprotetoras ou tratamento ea falta de métodos de avaliação sensíveis. Adequado doavaliação iate de neurotoxicidade será crucial como fator prognóstico e como parâmetros adequados para futuros estudos de neuroproteção. Os métodos atuais para avaliar a gravidade da neuropatia induzida por quimioterapia utiliza escalas de classificação clínico-base que tenha sido demonstrada sensibilidade falta para mudar e inter-observador objetividade 4. Os estudos de condução convencionais nervosas fornecer informações sobre potencial de ação composto amplitude e velocidade de condução, que são relativamente não-medidas específicas e não fornecer a introspecção em função do canal de íon ou potencial de repouso da membrana. Assim, estudos prévios demonstraram que estudos de condução de nervos convencionais não são sensíveis às alterações precoce em quimioterapia neurotoxicidade induzida 4-6. Em comparação, os estudos de excitabilidade nervosas utilizar técnicas de rastreio de limiar que têm sido desenvolvidos para permitir a avaliação de canais iónicos, bombas e permutadores in vivo em grandes mielinizados axónios humanos7-9. Técnicas de excitabilidade nervosas foram estabelecidas como uma ferramenta para examinar o desenvolvimento e severidade da induzida por quimioterapia neurotoxicidade 10-13. Que compreende um certo número de parâmetros de excitabilidade, estudos excitabilidade nervosas pode ser usado para avaliar a neurotoxicidade aguda resultante infusão imediatamente a seguir e para o desenvolvimento de neurotoxicidade, crónica cumulativa. Técnicas de excitabilidade nervosa são viáveis ​​na prática clínica, a cada teste que requer apenas 5 -10 minutos para completar. Equipamento de excitabilidade do nervo é prontamente disponíveis comercialmente, e um sistema portátil, foi concebida de modo a que os pacientes podem ser testados in situ na configuração centro de infusão. Além disso, estas técnicas podem ser adaptados para utilização no quimioterapias múltiplas. Nos pacientes tratados com a oxaliplatina quimioterapia, principalmente utilizado para o cancro colo-rectal, as técnicas de excitabilidade nervosas proporcionar um método para identificar pacientes umat-risco de neurotoxicidade antes do início da neuropatia crónica. Estudos excitabilidade nervosa revelaram o desenvolvimento de uma aguda canalopatia Na + em axónios do motor e sensorial 10-13. É importante ressaltar que pacientes que demonstraram mudanças na excitabilidade no início do tratamento foram, posteriormente, mais propensos a desenvolver moderada a severa neurotoxicidade 11. No entanto, através de tratamento, marcantes mudanças longitudinais foram identificados apenas em axónios sensoriais que eram capazes de prever o resultado clínico neurológico em 80% dos pacientes 10. Estas alterações demonstrou um padrão diferente aos observados agudamente, após infusão de oxaliplatina, e muito provavelmente reflectem o desenvolvimento de dano axonal significativa e de mudança potencial de membrana em nervos sensoriais que se desenvolve longitudinalmente, durante o tratamento de oxaliplatina 10. Alterações significativas desenvolvidas durante o tratamento precoce, antes de qualquer redução de medidas convencionais de função do nervo, sugerindo que a exparâmetros citability pode fornecer um biomarcador sensível.

Este resumo descreve um novo método para avaliar o desenvolvimento de neurotoxicidade em pacientes que receberam tratamento de quimioterapia. Enquanto os métodos de avaliação convencionais são limitados em sua capacidade de detectar precocemente alterações em função dos nervos, as técnicas de excitabilidade nervosa fornecer a identificação precoce de pacientes em risco de neurotoxicidade grave e insights sobre a fisiopatologia.

Avaliação do nervo Excitabilidade em induzida por quimioterapia Neurotoxicidade

A neurotoxicidade induzida por quimioterapia é uma consequência grave do tratamento do câncer, ocorrendo com algumas das quimioterapias mais comumente utilizadas1,2. ...

O objetivo geral do experimento a seguir é identificar anormalidades na função nervosa em pacientes submetidos a tratamento com quimioterapia, utilizando estudos de excitabilidade axonal. Isso é alcançado mediante a estimulação do nervo mediano no punho e o registro dos potenciais de ação sensoriais compostos do segundo dedo ou dos potenciais de ação motores compostos do músculo abdutor do hálux. Em seguida, é produzida uma curva estímulo-resposta para determinar as alterações na corrente limiar necessária para atingir uma amplitude-alvo, que é monitorada em tempo real por meio de técnicas de rastreamento do limiar.Parâmetros múltiplos de excitabilidade nervosa são registrados em resposta a diferentes padrões de estímulo, os quais avaliam marcadores da função dos canais iônicos periféricos e do potencial de membrana, a fim de avaliar a função nervosa. São obtidos resultados que mostram as alterações longitudinais na excitabilidade axonal sensitiva com o tratamento quimioterápico e fornecem um método para detectar essas alterações mais cedo do que as técnicas convencionais. A principal vantagem dessa técnica em relação aos estudos convencionais de condução nervosa é que ela fornece informações sobre a função intrínseca da membrana axonal, incluindo condutâncias constituintes, e não apenas amplitude e velocidade de condução. Demonstrarão esta técnica a Dra. Cindy Lin, professora sênior em neurociências, e a Dra. Susanna Park, pós-doutoranda do meu laboratório, para este estudo.Os pacientes do protocolo geralmente são encaminhados por um oncologista para realização de teste de excitabilidade nervosa basal antes do início da quimioterapia. Todos os procedimentos do estudo devem ser aprovados por um comitê de ética hospitalar ou institucional, que deve triar os pacientes para garantir que não haja histórico ou evidência neurofisiológica basal de neuropatia periférica, que não tenham recebido tratamento prévio com quimioterapia neurotóxica e que não apresentem contraindicações para o teste de excitabilidade. Realize protocolos de excitabilidade sensorial e motora no nervo mediano utilizando o sistema computadorizado semiautomatizado Q track S, um estimulador de corrente constante bipolar linear isolado e um amplificador.Inicie o preparo utilizando um gel abrasivo ou uma gaze para preparar a superfície da pele no punho e antebraço, a fim de reduzir a resistência da pele, e em seguida aplique um cotonete com álcool. Em seguida, prepare o local de registro para gravações motoras posicionando eletrodos não polares no ventre muscular do abdutor do dedo mínimo curto. Posicione também um eletrodo de referência quatro centímetros distal a esse local para registrar os potenciais de ação motores compostos.Agora prepare o local de registro para gravações sensoriais utilizando eletrodos em anel posicionados nas articulações interfalangianas proximal e distal como eletrodos ativo e de referência, respectivamente, para registrar potenciais de ação sensoriais compostos. Posicione também uma placa neutra de terra para eletrocirurgia na palma da mão com gel condutor e fixe os dedos com fita para estabilizá-los. Neste momento, certifique-se de remover o máximo possível de ruído elétrico na configuração de gravação.Utilizando um eliminador de ruído humbug de 50 hertz a 60 hertz, posicione um eletrodo estimulador reposicionável sobre o nervo mediano no punho. Posicione o eletrodo anódico a 10 centímetros proximalmente ao eletrodo estimulador, sobre o osso. Agora, estime o nervo mediano.Utilize o eletrodo bipolar reposicionável para localizar o ponto de menor limiar, que será usado como local de estimulação nas etapas subsequentes deste protocolo. Uma vez localizado o ponto, posicione um eletrodo não polar. Para iniciar o protocolo de excitabilidade, registre uma curva de resposta ao estímulo aumentando progressivamente o estímulo até que a resposta seja máxima e não aumente mais com o incremento da intensidade do estímulo.A amplitude-alvo para o rastreamento do limiar deve ser definida automaticamente em 40% da amplitude máxima, correspondendo à área de inclinação mais acentuada na curva resposta ao estímulo. As alterações na corrente limiar necessárias para atingir a amplitude-alvo devem ser monitoradas em tempo real. Registre múltiplos parâmetros de excitabilidade, incluindo limiar, ciclo de recuperação eletrotônico e relação corrente-limiar. Avalie o eletrotônio limiar utilizando um estímulo sublimiar de 100 milissegundos.Correntes polarizantes Registre a alteração na corrente limiar necessária para manter a amplitude da resposta alvo. Após as polarizações despolarizante e hiperpolarizante, o eletrotono fornece uma avaliação das condutâncias internodais e do potencial de membrana, sendo as respostas na direção hiperpolarizante ao final do pulso polarizante fortemente associadas ao potencial de membrana. Em seguida, avalie o ciclo de recuperação utilizando um paradigma de estímulos em pares, com um estímulo condicionante supramáximo inicial seguido, em diferentes intervalos, por um estímulo de teste variando de 2,5 milissegundos a 200 milissegundos.Após o estímulo supramáximo, é mais difícil gerar uma resposta subsequente, denominada rapidez, refletindo a inativação dos canais de sódio com comporta voltagem-dependente. Em seguida ao período refratário, ocorre um período de facilitação conhecido como superexcitabilidade. Por fim, avalie a relação entre o limiar e a corrente utilizando correntes polarizantes de 200 milissegundos, variando em intensidade de +50% a -100% do limiar.Utilizando essas técnicas, os pacientes podem ser avaliados tanto de forma aguda quanto longitudinalmente ao longo do tratamento quimioterápico para verificar a neurotoxicidade aguda, com retorno dos pacientes para avaliação pós-quimioterapia dentro de 48 horas após o tratamento e comparação com os resultados pré-tratamento. Para examinar a neurotoxicidade crônica, avaliações realizadas antes da infusão quimioterápica podem ser comparadas longitudinalmente ao longo dos ciclos de tratamento. Além dos testes de excitabilidade axonal, escalas clínicas convencionais de graduação devem ser utilizadas para avaliar a neurotoxicidade induzida pela quimioterapia, incluindo os critérios comuns do Instituto Nacional do Câncer para eventos adversos, subescala de neuropatia sensitiva, escore total de neuropatia e avaliação de desfechos relatados pelo paciente.Os parâmetros principais para avaliação incluem a superexcitabilidade, a extensão da alteração do limiar em estímulos limiares, além dos parâmetros convencionais, como amplitude de pico e latência. Para avaliar a alteração global nos parâmetros de excitabilidade ao longo do tratamento, calcule um escore composto de excitabilidade. A alteração desses três parâmetros deve ser somada do tratamento inicial ao final, fornecendo um marcador geral de mudança.Aqui observamos exemplos de alterações na excitabilidade de axônios sensoriais em pacientes tratados com oxaliplatina, sendo os registros basais mostrados em preto e os registros pós-tratamento mostrados em branco após quatro a seis meses de tratamento com oxaliplatina. Acredita-se que essas alterações reflitam danos axonais generalizados e mudanças no potencial de membrana. Uma vez dominada, esta técnica leva menos de 10 minutos se realizada corretamente; após assistir a este vídeo, você deverá ter uma boa compreensão de como realizar técnicas de excitabilidade externa.

nerve-excitability-assessment-in-chemotherapy-induced-neurotoxicity

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

O vídeo demonstra a análise eletrofisiológica de neurônios derivados de células-tronco embrionárias após exposição a neurotoxinas. O tratamento desses neurônios com neurotoxinas botulínicas reduz a frequência de correntes pós-sinápticas excitatórias espontâneas em miniatura, confirmando a inibição da transmissão sináptica.

Uma técnica para avaliar o efeito inibitório da exposição a toxinas em correntes pós-sinápticas excitatórias em miniatura (mEPSCs)

Fonte: Soukupová, M., et al. Microdiálise de aminoácidos excitatórios durante registros de EEG em ratos em movimento livre. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra a avaliação dos níveis de neurotransmissores excitatórios extracelulares em ratos com indução de epilepsia crônica. Após a implantação de uma sonda de microdiálise no cérebro e a confirmação da ausência de convulsões por meio de eletroencefalografia (EEG), o fluido extracelular é coletado para avaliar níveis elevados de...

Avaliação dos níveis de neurotransmissores excitatórios em ratos induzidos por epilepsia crônica

Ensaios aprimorados de neurotoxicidade in vitro ajudariam na identificação de novos compostos neuroprotetores. A utilidade de um analisador celular baseado em impedância em tempo real para determinar a citotoxicidade e citoproteção em linhagens celulares neuronais e delinear o envolvimento das vias do segundo mensageiro, obtendo assim informações sobre o mecanismo de neuroproteção é apresentada.

Analyzer celular baseado em impedância Real-Time como uma ferramenta para delinear vias moleculares envolvidas na neurotoxicidade e neuroproteção em uma linha de células neuronais

Um protocolo personalizado é descrito para diferenciar células ES de camundongos em populações definidas de neurônios altamente puros exibindo sinapses funcionais e comportamento de rede emergente. A análise eletrofisiológica demonstra a perda da transmissão sináptica após a exposição aos sorotipos de neurotoxina botulínica / A- / G e neurotoxina tetânica.

Avaliação Funcional de neurotoxinas Biológica em Culturas em Rede de Células-Tronco derivadas do Sistema Nervoso Central Neurônios

Apresentamos um protocolo para avaliar alterações na função neuromuscular. A estimulação elétrica nervosa percutânea é um método não invasivo que evoca respostas musculares. As propriedades eletrofisiológicas e mecânicas dessas respostas permitem a avaliação da função neuromuscular do cérebro ao músculo (níveis supraespinhal, espinhal e periférico).

Avaliação da função neuromuscular Usando percutânea Estimulação Elétrica Nervosa

Técnicas de excitabilidade axonal fornecem uma poderosa ferramenta para examinar a fisiopatologia e alterações biofísicas que precedem eventos degenerativas irreversíveis. Este manuscrito demonstra a utilização destas técnicas no nervo ulnar de ratos anestesiados.

Na Vivo Medida eletrofisiológica do nervo Ulnar rato com teste de excitabilidade Axonal

APTrack é um plugin de software desenvolvido para a plataforma Open Ephys que permite a visualização de dados em tempo real e o rastreamento do limiar elétrico em malha fechada de potenciais de ação neuronais. Nós usamos isso com sucesso em microneurografia para nociceptores de fibra C humana e nociceptores de fibra C e fibra Aδ de camundongo.

Rastreamento de limiar elétrico de circuito fechado em tempo fechado de código aberto para pesquisa translacional da dor

Neste relatório nós descrevemos um método para esmagamento do nervo ciático do rato. Este método usa prontamente disponíveis pinça hemostática e facilmente reproduzível e produz esmagamento do nervo ciático completa. Além disso, nós descrevemos um método para preparar montagens de músculos inteiros adequados para análise da regeneração do nervo após esmagamento do nervo ciático.

Reprodutível mouse esmagamento do nervo ciático e subsequente avaliação de Regeneração por Análise Whole Mount muscular

Células olfativas ensheathing (OECO) são células da crista neural que permitem o crescimento dos neurônios olfativos primários. Esta propriedade específica pode ser utilizado para transplantação celular. Apresentamos aqui um modelo de transplante celular baseado na utilização de OECs em um modelo de lesão do nervo laríngeo.

Transplante de células olfativas Ensheathing para avaliar a recuperação funcional após a lesão do nervo periférico

Microglia (células imunes do cérebro), são usadas como um biossensor substituto para determinar como as nanopartículas influenciam a neurotoxicidade. Descrevemos uma série de experimentos projetados para testar a resposta microglial a nanopartículas e a exposição de neurônios hipotalâmicos ao sobrenadante da micróglia ativada para determinar a neurotoxicidade.

Microglia como um Biosensor Surrogate determinar nanopartículas neurotoxicidade

Aprenda a avaliar a excitabilidade nervosa para detectar neurotoxicidade induzida por quimioterapia em pacientes oncológicos. Este método permite identificar alterações funcionais precoces nos axônios periféricos.

Avaliação do nervo Excitabilidade em induzida por quimioterapia Neurotoxicidade

Explorar mais vídeos