Name: Transplante de intestino delgado de ratos ortotópico (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-06T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: Aprenda o transplante ortotópico de intestino delgado em ratos para estudar processos imunológicos e inflamatórios. Este método demonstra sobrevivência a longo prazo e função adequada do enxerto.

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1. Operação doador <ol><li> O rato dador devem ser mantidos em jejum durante 24 horas (acesso livre à água / solução de glicose). </li><li> Para induzir a anestesia inalatória de isoflurano, comece com 2% sobre atomizador padrão, e em seguida, reduzir para 1% após a realização de laparotomia. Realize uma pitada de igual para verificar sedação. </li><li> Raspar o abdômen e limpe com preparação da pele 3 vezes (Kodan). Em seguida, executar uma incisão mediana, após a administração subcutânea do analgésico. </li><li> Após o enxerto ser envolta em gaze embebida salina, separam-se as aderências fisiológicas entre o pâncreas e do cólon ascendente cuidadosamente com um Q-tip (sob o microscópio cirúrgico com ampliação 6x). </li><li> Ligadura e dividir os vasos cólica ileocecal e direita e meio usando 7-0 seda. Após o cólon ascendente foi espalhada para fora para o lado direito da veia mesentérica superior (SMV), os vasos de cólica ileocecal, direita e do meio pode ser identificado por ligadura e divisão usando 7-0 laços. </li><li> Retrair o estômago para cima, de modo que a totalidade SMV é endireitada para fora e exposta. Use uma pinça mosquito para a retração. O dispositivo de fixação é realizada em massa plasticina formado em forma, conforme necessário. </li><li> Ligadura e dividir as veias pancreatico-duodenais provenientes do SMV. Todas as pequenas veias pancreatico-duodenais provenientes do SMV deve ser cuidadosamente identificada, ligada com 7-0 seda e dividida antes do tecido pancreático pode ser removido a partir do enxerto. </li><li> Ligadura e dividir o tecido conjuntivo, incluindo todos os perder linfáticos e SMV entre a aorta abdominal. Com o enxerto ainda está do lado direito do abdómen, o tecido conjuntivo frouxo, incluindo todos os vasos linfáticos e SMV entre a aorta abdominal é acessível. Este tecido conjuntivo devem ser ligados utilizando 7-0 seda e dividido para evitar linforréia pós-operatória do enxerto intestinal. </li><li> Ligadura e dividir a artéria renal direita. Depois que o tecido conjuntivo é dividido, a artéria renal direita torna-se accessible e é ligada e dividida usando 7-0 seda. </li><li> Sistemicamente heparinise o rato, utilizando 200 unidades de heparina iv através da veia peniana. </li><li> Ligar as artérias marginais, e dividir o intestino delgado na junção duodeno-jejuno e no íleo terminal. </li><li> A aorta é ligada proximalmente para a origem da SMA. A veia porta é seccionado na confluência com a veia esplênica. Em seguida, o enxerto é colhida com o seu consistindo pedículo vascular da SMA com um segmento da aorta. </li></ol> 2. Procedimento Backtable <ol><li> Perfundir o enxerto com 3 ml de solução da Universidade de Wisconsin (UW), a 4 ° C, através da conduta aórtica e irrigar o lúmen intestinal a partir do final do jejuno, com 30 ml de solução Nebacetin Uro-N, a 4 ° C (a irrigação do lúmen é obrigatório) . </li></ol> Imediatamente após a extracção do enxerto, o conduto aórtico é utilizada para a perfusão, com 3 ml de solução gelada de UW. Para isto, um cateter de 20 G em ivuma seringa de 10 ml. O perfusato deve ser observada a fluir livremente para fora a partir da veia portal dividido. Para a irrigação intestinal com Nebacetin, uma seringa de 50 ml. <ol start="2"><li> Armazene a solução de enxerto de UW, a 4 ° C durante a preparação do receptor. </li></ol> 3. Operação destinatário <ol><li> O rato receptor devem ser mantidos em jejum durante 24 horas (acesso livre à água / solução de glicose). </li><li> Para induzir a anestesia inalatória de isoflurano, comece com 2% sobre atomizador padrão, e em seguida, reduzir para 1% após a realização de laparotomia. Realize uma pitada de igual para verificar sedação. </li><li> Raspar o abdômen e limpe com preparação da pele 3 vezes (Kodan). Em seguida, executar uma incisão mediana, após a administração subcutânea de carprofeno 5 mg / kg sc de analgesia. </li><li> Enrole o intestino destinatário em gaze embebida soro fisiológico e colocá-lo no peito do destinatário. </li><li> Abra o retroperitônio sem rodeios com Q-dicas, e expor a abdominal aorta ea veia cava inferior, logo abaixo dos vasos renais para baixo para o nível dos vasos ilíacos, se necessário também usar microtesoura. Ligar o tribuaries pequenas e lombar da coluna vertebral da aorta e veia cava usando 7-0 seda para evitar a perda de sangue. (Para fazer isso, altere o zoom microscópio cirúrgico até 16x.) </li><li> Atravesse-braçadeira a aorta ea veia cava inferior abaixo dos vasos renais esquerda proximal e acima da bifurcação ilíaca distalmente usando clipes de microvasos. Apenas uma braçadeira é utilizada proximal distal, bem como para fixar ambos os navios simultaneamente. Incisão ambos os navios anteriormente usando um microlanceta e lavar o sangue restante. </li><li> Criar uma anastomose término-lateral entre o segmento da aorta infra-renal da aorta do enxerto e do destinatário, usando uma sutura continua de prolene 10-0 .. Inicialmente, o enxerto é colocado no lado direito do abdómen (a cabeça do rato posicionado a 12 horas) para realizar os pontos da parede de trás da anastomose arterial e atar o fio de sutura inferior estadia. Then, o enxerto é virado para o lado esquerdo do abdómen (a cabeça do rato posicionado a 09:00), para expor e sutura da parede frontal da anastomose. </li><li> Anastomose término-lateral entre a veia porta do doador e do receptor IVC é realizada do mesmo modo, executando usando suturas 10-0 Prolene. Com o rato ainda lateralmente deitadas (cabeça na posição 9 horas), o enxerto é colocado no lado esquerdo do abdómen inferior e um fio de sutura é colocado estadia. A anastomose é iniciado com a parede do fundo do interior do vaso. Após a sutura está ligada estadia inferior, os pontos da parede frontal podem ser executadas a partir do exterior. </li><li> Remover os grampos distais primeiro lugar, seguido pelos grampos superiores. Qualquer sangramento anastomótico é controlada pela pressão direta usando Q-dicas. O enxerto deve ser verificado para igual e reperfusão rápida. </li><li> Ressecar intestino delgado do destinatário inteiro após a ligadura dos vasos mesentéricos. Destinatários enterectomizados subtotal, preservando 2-3 cm de projejuno ximal e 1 cm do íleo terminal. </li><li> Restaurar a continuidade entérico por proximal (jejuno-jejunostomia) e distal (íleo-ileostomia) de ponta a ponta anastomoses intestinais utilizando uma sutura interrompida uma camada com 6-0 Monocryl. Cerca de 16 pontos são necessários para completar as anastomoses. </li><li> Irrigar a cavidade peritoneal com solução salina normal até ficar limpo. Administrar 2 ml de soro fisiológico por via intraperitoneal para a reposição de líquidos. Em seguida, feche o abdômen com uma sutura contínua com Vicryl 3-0 para a camada muscular, mais uma sutura da pele contínua. </li><li> No pós-operatório os ratos devem ser mantidos em jejum (com acesso a água e uma solução de glucose) para um outro 24 hr depois reiniciado em dieta padrão e água ad libitum. Analgesia com carprofeno deve ser administrada durante 3 dias (ver dosagem abaixo). </li></ol>

<ol><li>Abu-Elmagd, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Five+Hundred+Intestinal+and+Multivisceral+Transplantations+at+a+Single+Center%3A+Major+Advances+With+New+Challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Ann.+Surg%22%5BJournal%5D)">Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges.</a> Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).</li>
<li>Berney, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Portal+versus+systemic+drainage+of+small+bowel+allografts%3A+comparative+assessment+of+survival%2C+function%2C+rejection%2C+and+bacterial+translocation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Surg%22%5BJournal%5D)">Portal versus systemic drainage of small bowel allografts: comparative assessment of survival, function, rejection, and bacterial translocation.</a> J. Am. Coll. Surg. 195 (6), 804(2002).</li>
<li>Fishbein, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Engl.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Intestinal transplantation.</a> N. Engl. J. Med. 361 (10), 998(2009).</li>
<li>Hernandez, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+portal+venous+outflow+better+than+systemic+venous+outflow+in+small+bowel+transplantation%3F+Experimental+study+in+syngeneic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pediatr.+Surg%22%5BJournal%5D)">Is portal venous outflow better than systemic venous outflow in small bowel transplantation? Experimental study in syngeneic rats.</a> J. Pediatr. Surg. 40 (2), 336(2005).</li>
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<li>Murase, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Graft-versus-host+disease+after+brown+Norway-to-Lewis+and+Lewis-to-Brown+Norway+rat+intestinal+transplantation+under+FK506%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Graft-versus-host disease after brown Norway-to-Lewis and Lewis-to-Brown Norway rat intestinal transplantation under FK506.</a> Transplantation. 55 (1), 1(1993).</li>
<li>Murase, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunomodulation+of+intestinal+transplant+with+allograft+irradiation+and+simultaneous+donor+bone+marrow+infusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Immunomodulation of intestinal transplant with allograft irradiation and simultaneous donor bone marrow infusion.</a> Transplant Proc. 31 (1-2), 565(1999).</li>
<li>Pech, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perioperative+infliximab+application+ameliorates+acute+rejection+associated+inflammation+after+intestinal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Transplant%22%5BJournal%5D)">Perioperative infliximab application ameliorates acute rejection associated inflammation after intestinal transplantation.</a> Am. J. Transplant. 10 (11), 2431(2010).</li>
<li>Schaefer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resident+macrophages+are+involved+in+intestinal+transplantation-associated+inflammation+and+motoric+dysfunction+of+the+graft+muscularis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Resident macrophages are involved in intestinal transplantation-associated inflammation and motoric dysfunction of the graft muscularis.</a> Am J Transplant. 7 (5), 1062(2007).</li>
<li>Schaefer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+and+impact+of+organ+harvesting+and+ischemia-reperfusion+injury+within+the+graft+muscularis+in+rat+small+bowel+transplantation.+Transplant%5BTitle%5D)+AND+%22Proc%22%5BJournal%5D)">Mechanism and impact of organ harvesting and ischemia-reperfusion injury within the graft muscularis in rat small bowel transplantation. Transplant.</a> Proc. 38 (6), 1821(2006).</li>
<li>Schaefer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+rejection+and+the+muscularis+propria+after+intestinal+transplantation%3A+the+alloresponse%2C+inflammation%2C+and+smooth+muscle+function%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Acute rejection and the muscularis propria after intestinal transplantation: the alloresponse, inflammation, and smooth muscle function.</a> Transplantation. 85 (10), 1465(2008).</li>
<li>Xue, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+experience+of+refined+3-cuff+technique+for+orthotopic+small-bowel+transplantation+in+rat%3A+a+report+of+270+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Surg%22%5BJournal%5D)">Surgical experience of refined 3-cuff technique for orthotopic small-bowel transplantation in rat: a report of 270 cases.</a> Am. J. Surg. 198 (1), 110(2009).</li>
<li>Zhang, X. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+techniques+in+rat+heterotopic+small+bowel+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant.+Proc%22%5BJournal%5D)">Simplified techniques in rat heterotopic small bowel transplantation.</a> Transplant. Proc. 38 (6), 1840(2006).</li>
<li>Zhao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+establishment+of+a+new+en+bloc+combined+liver-small+bowel+transplantation+model+in+rats.+Transplant%5BTitle%5D)+AND+%22Proc%22%5BJournal%5D)">The establishment of a new en bloc combined liver-small bowel transplantation model in rats. Transplant.</a> Proc. 39 (1), 278(2007).</li>
</ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

Embora os modelos de transplante de intestino de ratos têm sido descritos, o mais cedo no 5 1970ies a maioria dos modelos recentemente utilizados envolvem transplante heterotópico intestinal utilizando diferentes técnicas 13. Enquanto os procedimentos heterotópico em geral, têm a vantagem de técnicas de microcirurgia mais fáceis e mais fácil acessibilidade do enxerto para a avaliação, o transplante heterotópico intestinal tem a grande desvantagem de não levar em conta as múltiplas interações do int...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome do reagente </td><td> Companhia </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentários (opcional) </td></tr><tr><td> Universidade de Wisconsin (UW) solução (ViaSpan) </td><td> Bristol-Myers Squibb </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Uro-Nebacetin solução N </td><td> Nycomed </td><td> 6967855 </td><td></td></tr><tr><td> Ampicilina </td><td> Ratiopharm </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Carprofeno (Rimadyl) </td><td> Pfizer </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Prolene sutura 10-0 unresorbable </td><td> Ethicon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Monocryl sutura reabsorvível 6-0 </td><td> Ethicon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Fio de vicryl 3-0 reabsorvível </td><td> Ethicon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Cateter iv G 20 milímetros 1.1x33 </td><td> Braun </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Cateter iv G 22 0.9x25 milímetro </td><td> Braun </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Kodan pele Prep </td><td> Schülke </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Solução de NaCl a 0,9% Infusão </td><td> Braun </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Fórceps curvos pequena </td><td> FineScienceTools </td><td> 11009-13 </td><td></td></tr><tr><td> Fórceps micro curvo </td><td> AESCULAP </td><td> BD 333 </td><td></td></tr><tr><td> Fórceps micro curvo </td><td> AESCULAP </td><td> FD281R </td><td></td></tr><tr><td> Micro pinça reta 1 </td><td> WPI </td><td> 5 </td><td></td></tr><tr><td> Micro pinça reta 2 </td><td> WPI </td><td> 2 </td><td></td></tr><tr><td> Suporte da agulha micro </td><td> WPI </td> &lt;td&gt; 14081 </td><td></td></tr><tr><td> Micro tesoura </td><td> FineScienceTools </td><td> 15006-09 </td><td></td></tr><tr><td> Micro bisturi </td><td> MANI </td><td> Faca oftálmica </td><td></td></tr><tr><td> Grampos Micro </td><td> AESCULAP </td><td> FB329R </td><td></td></tr></tbody></table>

transplante de intestino delgado de ratos ortotópico

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Transplante de intestino delgado, tornou-se uma opção clínico aceite para doentes com síndrome do intestino curto e insuficiência de nutrição parentérica (insuficiência intestinal irreversível). Em centros especializados melhorou operatório e estratégias de gestão levaram a paciente a curto e médio prazo e excelente sobrevida do enxerto, proporcionando alta qualidade de vida 1,3. Ao contrário do transplante mais comum de outros órgãos sólidos (coração, fígado ou seja,) muitos mecanismos subjacentes da função do enxerto e alterações imunológicas induzidas por transplante intestinal não são totalmente conhecidos 6,7. Episódios de rejeição aguda, septicemia e insuficiência crônica do enxerto são os principais obstáculos ainda contribuem para menos favorável resultado a longo prazo e dificultando um emprego mais amplo do procedimento, apesar de um número crescente de pacientes em nutrição parenteral domiciliar que potencialmente podem beneficiar de um transplante de tal. O intestino delgado contémum grande número de leucócitos passageiros comumente referida como parte do intestino associada sistema linfóide (GALT), esta sendo parte da razão para a alta immunogenity do enxerto intestinal. A presença ea proximidade de muitos comensais e patogénicos no intestino explica a gravidade dos episódios de sépsis, uma vez a integridade da mucosa do enxerto for comprometida (por exemplo, rejeição). Para avançar no campo de dados de múltiplos órgãos intestinais e transplante mais gerados a partir de modelos animais confiáveis ​​e viáveis ​​é necessário. O modelo aqui fornecida combina confiabilidade e viabilidade uma vez estabelecido de forma padronizada e pode fornecer informações valiosas nas subjacentes complexos moleculares, os mecanismos celulares e funcionais que são acionados por transplante intestinal. Nós temos utilizado com sucesso e refinado o procedimento descrito ao longo de mais de 5 anos no nosso laboratório 8-11. O formato de vídeo baseado JoVE é especialmente útil para demonstrar o procedimento complexoDure e evitar as armadilhas iniciais para grupos de planejamento para estabelecer um modelo de roedor ortotópico investigando o transplante intestinal.

Evolução pós-operatória normal Os animais transplantados deve se recuperar rapidamente do procedimento sob uma lâmpada de calor por cerca de 1 hora. A hipotermia é uma das principais causas de mortalidade no pós-operatório e devem ser evitados intra e pós-operatório. As perdas de fluido intra-operatória deve ser substituído por injeção subcutânea de 2,5 ml de solução salina normal mais 2,5 ml de glicose 5% a cada 8 horas para a primeira hora 24. Os ratos também devem ter livre acesso à solução ...

Transplante de intestino delgado tornou-se uma opção de tratamento aceitável para os pacientes com falência intestinal irreversível. Nosso modelo experimental de transplante intestinal ortotópico pequena em ratos serve como uma ferramenta confiável para enfrentar imunológico subjacente e os processos inflamatórios que complicam o transplante intestinal.

Transplante de intestino delgado de ratos ortotópico

O transplante de intestino delgado tornou-se uma opção clínica aceitável para pacientes com síndrome do intestino curto e falência da nutrição parenteral...

O objetivo geral deste procedimento é realizar um transplante intestinal ortotópico em rato. Isso é realizado primeiramente obtendo o intestino delgado do animal doador. O segundo passo do procedimento é a chamada preparação em mesa reversa do enxerto intestinal antes do transplante.O terceiro passo do procedimento é o enxerto mediante anastomose arterial e venosa, seguido pela reperfusão do enxerto. O passo final do procedimento é o restabelecimento da continuidade enteral mediante a realização da anastomose intestinal de forma extremidade com extremidade, devido à gastrostomia e ileoileostomia, respectivamente. Em última análise, podem ser obtidos resultados que demonstram sobrevida de longo prazo em animais transplantados iso geneticamente, por meio de excelente função do enxerto e absorção oral suficiente de nutrientes em combinações alergênicas.No entanto, diferentes aspectos da rejeição intestinal aguda e crônica podem ser estudados. Este método pode ajudar a responder perguntas fundamentais na área do transplante intestinal, como os mecanismos de rejeição aguda e crônica que podem levar à falha do enxerto e comprometer o resultado clínico. A demonstração visual deste método é essencial.Os passos cruciais são difíceis de aprender, principalmente devido ao pequeno tamanho dos vasos e à necessidade de empregar uma técnica microcirúrgica rápida e precisa para minimizar o tempo de isquemia quente. Antes da cirurgia no rato doador, mantenha-o em jejum com acesso livre à água e à solução de glicose por 24 horas. Após anestesiar o animal com inalação de isoflurano a 2%, verifique a sedação realizando um teste no dedo do pé.Pince, depile o abdômen e desinfete a pele três vezes com preparação cutânea. Em seguida, realize uma incisão mediana após a administração subcutânea do analgésico usando um bisturi. Execute a incisão mediana sob microscópio cirúrgico.Envolva o intestino delgado em gaze umedecida com soro fisiológico e coloque-o no lado esquerdo do abdômen com um campo estéril e um cotonete. Separe suavemente as aderências fisiológicas entre o pâncreas e o cólon ascendente usando microcirurgia, se necessário, com seda sete zero como oito, e divida os vasos ileocecal e colico médio direito após afastar o cólon ascendente para o lado direito da veia mesentérica superior ou VMS com laços de sete zero como oito, e divida os vasos colico direito e médio usando uma pinça mosquito mantida no lugar com atadura plástica moldada em forma. Retraia o estômago para cima de modo que toda a VMS fique esticada e exposta.A seguir, ligue e seccione as veias pancreáticas duodenais provenientes da VMS. Em seguida, vire o enxerto para o lado direito do abdômen, mantendo o enxerto ainda no lado direito do abdômen, de modo que o tecido conjuntivo solto, incluindo todos os linfáticos entre a VMS e a aorta, fique acessível. Utilize seda 7-0 para ligar o tecido e seccioná-lo, evitando assim a fuga linfática pós-operatória proveniente do enxerto intestinal.Alterar o tecido conjuntivo é dividido, ligar e seccionar a artéria renal direita. Heparinizar sistemicamente a rata utilizando 200 unidades de heparina por via intravenosa através da veia peniana. Ligar as artérias marginais e seccionar o intestino delgado na junção duodenojejunal e no íleo terminal.Realize a ligadura da aorta proximalmente à origem da artéria mesentérica superior e seccione a veia porta na confluência com a veia esplênica. Obtenha o enxerto com seu pedículo vascular, composto pela artéria mesentérica superior com um segmento aórtico. Utilize um cateter intravenoso de 20 calibres acoplado a uma seringa de 10 mililitros por meio do conduto aórtico.Perfusar o enxerto utilizando três mililitros de solução fria de Wisconsin da Universidade ou UW. Em seguida, com uma seringa de 50 mililitros, irrigar o lúmen intestinal a partir da extremidade AL com 30 mililitros de solução fria de cetina e solução durante o preparo do receptor. Armazenar o enxerto em solução UW fria antes da cirurgia na rata receptora.Mantenha-o em jejum com acesso livre à solução de glicose por 24 horas após a anestesia do animal com 2% de isoflurano. Administre carprofeno para analgesia intraoperatória. Depile o abdômen e desinfete a pele três vezes com preparação cutânea.Em seguida, realize uma incisão mediana. Envolva o intestino receptor com gaze embebida em soro fisiológico e coloque-o sobre o tórax do receptor. Utilize compressas estéreis e cotonetes para abrir, de forma romba, o retroperitônio e expor a aorta abdominal e a veia cava inferior logo abaixo dos vasos renais, descendo até o nível dos vasos ilíacos, a fim de evitar perda sanguínea como oito.Os pequenos ramos lombares e espinhais da aorta e da veia cava com vasos microscópicos. Grampos. Clampar a aorta e a VCI abaixo dos vasos renais esquerdos, proximalmente e acima da bifurcação ilíaca. Distalmente, então incisar a parede anterior de ambos os vasos e lavar qualquer sangue remanescente.Transplante para o campo cirúrgico para realizar uma anastomose término-terminal entre o segmento aórtico do enxerto e a aorta infrarrenal do receptor. Utilizando uma sutura contínua de prolina 10-0. Posicione o enxerto no lado direito do abdômen e realize os pontos da parede posterior da anastomose arterial e amarre a sutura de fixação inferior.Em seguida, vire o enxerto para o lado esquerdo do abdômen para expor a parede anterior da anastomose, mantendo o enxerto no lado esquerdo do abdômen. Inicie a anastomose da veia porta colocando um ponto de fixação inferior. Depois, com proleno 10 zero, realize uma anastomose término-terminal entre a veia porta do enxerto e a VCI do receptor.Em seguida, do lado externo, fixe os pontos da parede anterior quando todos os pontos estiverem posicionados. Remova os grampos distais, seguidos pelos grampos superiores. Utilize pressão direta com cotonetes para controlar qualquer sangramento anastomótico.Verifique o enxerto quanto à reperfusão igual e rápida após a ligadura dos vasos mesentéricos, ressecar todo o intestino delgado do receptor, preservando dois a três centímetros de jejuno proximal e um centímetro de íleo distal usando aproximadamente 16 suturas contínuas de Monocryl seis zero. Restaure a continuidade entérica por anastomoses intestinais término-terminais proximal e distal. Irija a cavidade peritoneal com soro fisiológico até ficar limpa.Administre dois mililitros de solução salina normal por via intraperitoneal para reposição hídrica. Em seguida, utilize Vicryl 3-0 para a camada muscular e uma sutura contínua na pele para fechar o abdômen após a cirurgia. Para uma recuperação rápida, coloque a rata sob uma lâmpada de calor.Mantenha o animal em jejum com acesso à água e à solução de glicose e administre injeções subcutâneas de soro fisiológico e glicose a cada oito horas nas primeiras 24 horas do segundo dia; reinicie a oferta de ração e água ad libitum após o procedimento de transplante. A aparência geral, o estado da pelagem e a aparência das mucosas devem ser normais após o primeiro dia pós-operatório. O nível de atividade deve retornar ao estado pré-operatório.No entanto, comportamento apático ou anormal sugere complicações cirúrgicas precoces. Esta figura mostra o peso médio pós-operatório após transplante ortotópico de intestino delgado. Após uma perda inicial de até 20% do peso corporal, os ratos começarão a ganhar peso novamente por volta do sexto ao oitavo dia pós-operatório e normalmente atingirão cerca de 90% de seu peso pré-operatório por volta do 14º dia pós-operatório.Ao realizar este procedimento, é importante focar na perda mínima de sangue e no tempo mínimo de isquemia quente. Tempo para obter sucesso após seu desenvolvimento. Essa técnica abriu caminho para pesquisadores na área de transplante intestinal explorarem a rejeição aguda e crônica em um modelo roedor.

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O rato modelo de transplante de intestino delgado tem sido reconhecida como uma importante ferramenta para estudar mechanismes da rejeição imunológica e tela novas drogas imunossupressoras. No entanto, este modelo é limitado a usar, porque as técnicas envolvidas é um desafio extremamente técnico. Agora vamos introduzir a técnica modificada.

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Este vídeo demonstra o modelo de transplante ortotópico aórtica como um modelo simples para estudar o desenvolvimento de vasculopatia do transplante (TVP) em ratos.

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Aqui nós descrevemos o rato ortotópico membro-hind procedimento de transplante, o que parece ser o padrão...

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O transplante hepático em ratos é um modelo indispensável experimental para a pesquisa biomédica. Aqui apresentamos nossos procedimentos cirúrgicos para transplante ortotópico do fígado do rato com a reconstrução da artéria hepática utilizando um enxerto parcial de 50%.

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O objetivo deste manuscrito e protocolo é explicar e demonstrar detalhadamente o procedimento cirúrgico do transplante renal ortotópico em ratos. Este método é simplificado para alcançar a perfusão correta do rim doador e encurtar o tempo de reperfusão usando a técnica de anastomose do manguito venoso e ureteral.

Transplante de rim de rato ortotópico: uma abordagem cirúrgica nova e simplificada

Descrevemos um modelo de transplante de coração abdominal heterotópico em ratos, implicando modificações nas estratégias atuais, que levam a uma abordagem cirúrgica simplificada. Além disso, descrevemos um novo modelo de rejeição pela injeção in-ear de células musculares cardíacas vitais, permitindo novas análises imunológicas de transplante em ratos.

Um modelo imunológico para transplante heterotópico de células cardíacas e cardíacas em ratos

O modelo de transplante renal ortotópico de rato contribui para investigar o mecanismo de rejeição de aoenxerto renal. O modelo atual aumenta a sobrevivência dos receptores sem interferência com o suprimento de sangue e refluxo venoso da parte inferior do corpo usando uma anastomose de ponta a ponta da implantação renal e um método de "túnel" de ponta a ponta de anastomose ureter-bexiga.

Um modelo de transplante renal ortotópico de rato para rejeição de aoenerxerto renal

Este protocolo descreve uma técnica aprimorada para transplante ortotópico de pulmão esquerdo em ratos, com foco na redução da dificuldade operacional e na melhoria das taxas de sobrevida.

Transplante ortotópico de pulmão esquerdo em ratos

Este protocolo descreve um modelo de transplante intestinal baseado em ratos com ileostomia para avaliação temporal da intervenção medicamentosa na rejeição do enxerto.

Um Modelo de Rejeição de Enxerto de Rato de Transplante Intestinal com Ileostomia Exteriorizada para Avaliação de Prognóstico Longitudinal

Aprenda o transplante ortotópico de intestino delgado em ratos para estudar processos imunológicos e inflamatórios. Este método demonstra sobrevivência a longo prazo e função adequada do enxerto.

Transplante de intestino delgado de ratos ortotópico

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