Treinar um técnica microcirúrgica sofisticado: Interposição de enxerto de veia jugular externa na artéria carótida comum em ratos

A hiperplasia neointimal é uma das principais causas de estenose em veias arterialized utilizadas na cirurgia de revascularização miocárdica arterial, bem como em cirurgias de revascularização arterial periférica e em enxertos de fístula arteriovenosa. A interposição na artéria carótida comum tem sido realizada em diversos projetos de pesquisa para estudar a etiologia da hiperplasia neointimal e as opções terapêuticas atualmente disponíveis para combatê-la. No entanto, as técnicas microcirúrgicas convencionais que utilizam modelos de pequenos animais são complicadas, frustrantes e exigem o sacrifício excessivo de animais experimentais para simplificar todo o procedimento.

Este vídeo ilustra um protocolo operacional detalhado, que ajudará o cirurgião iniciante a aprender a técnica de corte e o enxerto venoso. Interposição na artéria carótida comum: 21 ratas fêmeas Sprague-Dawley provenientes de um criador comercial foram divididas em três grupos iguais, que foram operados e sacrificados no dia 21, 42 e 84, respectivamente. A anestesia geral dos animais foi induzida utilizando uma caixa de plexiglass conectada a um aparelho de anestesia ajustado a uma taxa de fluxo de oxigênio de um litro por minuto e um vaporizador de isoflurano com 5% de gás anestésico.

Nesta figura, você observa os cientistas antes da secção do músculo esternocleidomastoideo direito. Aqui é mostrada a veia jugular externa. Aqui você observa os cientistas após a secção do músculo esternocleidomastoideo direito, onde são reveladas a artéria carótida comum direita e o nervo vago direito.

Durante a operação seguinte, as anastomoses são realizadas utilizando a técnica de luva. As luvas são confeccionadas artesanalmente a partir de um tubo plástico cortado em um comprimento de três milímetros. Essas luvas consistem em um corpo cilíndrico, incluindo o volume completo do tubo plástico, e uma alça constituída por metade do volume da luva.

O corpo da cânula e o cabo da cânula têm o mesmo comprimento. A cânula é posicionada sobre a artéria carótida comum. O vaso e o cabo da cânula podem ser fixados com segurança juntos usando um grampo tipo mini bulldog.

Posteriormente, o vaso é desviado e puxado para fora do corpo da manga. Em seguida, é fixado com uma ligadura de seda. Dessa forma, a luz do copo é revestida com endotélio.

O enxerto venoso pode ser deslizado sobre os dois cotos das artérias carótidas comuns e fixado com a ligadura de seda. Para prevenir a formação de trombo, especialmente na anastomose distal, é essencial prender a ligadura do enxerto venoso bem próxima à margem do manguito, de modo a evitar que o sangue entre em contato com a ligadura que mantém a artéria posicionada. Uma incisão cervical mediana de 2,5 centímetros de comprimento é feita diretamente acima do esterno, lateral ao músculo esternocleidomastoideo. Pode-se observar a veia jugular externa ampla, que é completamente separada dos tecidos circundantes.

Aqui você pode observar a veia jugular externa totalmente mobilizada, na qual os tributários venosos foram ligados com sete pontos de seda 0. O músculo esternocleidomastoideo é preparado aqui após a secção do músculo esternocleidomastoideo. Agora você pode ver a artéria carótida comum direita.

A artéria carótida comum é cuidadosamente preparada, certificando-se de não comprimir a artéria nem o nervo vago, e agora você pode ver a artéria carótida comum em todo o seu comprimento. Em seguida, ela é ligada duas vezes na porção média com suturas de seda 7-0. Posteriormente, a artéria carótida comum é seccionada exatamente entre as duas ligaduras.

Uma cânula de náilon composta por um corpo e uma alça é então deslizada sobre a extremidade distal da artéria comum de queratina, de modo que a alça da cânula fique posicionada atrás do vaso. Em seguida, a extremidade com cânula da artéria comum de queratina distal é presa com um grampo tipo mini bulldog diretamente sobre a alça da cânula. Isso garante estabilidade.

Posteriormente, a artéria é cortada diretamente atrás da ligadura, de modo que o coto arterial resultante tenha o mesmo comprimento do corpo da braçadeira. A luz arterial é lavada com solução salina heparinizada. Em seguida, o laço de ligadura é reservado.

Imediatamente após, o coto arterial é puxado para cima e deslizado como uma manga sobre o corpo do manguito. Posteriormente, o laço de ligadura é firmemente puxado e amarrado para impedir que a artéria saia de sua manga. Utilizamos um truque em que tanto a parede arterial quanto o fio são pinçados simultaneamente com um par de pinças, e a pinça esquerda faz o nó.

Em seguida, o mesmo procedimento é repetido para o coto arterial proximal, deslizando a luva sobre a extremidade proximal da artéria comum ceratinada. Prendendo, cortando a artéria, lavando, colocando o laço de ligadura sobre o coto arterial, deslizando o coto arterial sobre a luva e, finalmente, amarrando o laço de ligadura. Um segmento de um centímetro de comprimento da veia jugular externa presa é excisado. As duas artérias com luvas estão muito distantes uma da outra para que a interposição venosa aproxime a distância correta para o procedimento.

Uma sutura Vicryl 3-0 é enlaçada ao redor de cada grampeador miniatura tipo bulldog, e ambas as suturas são cruzadas. Em seguida, as suturas são puxadas em direções opostas, permitindo assim o posicionamento adequado dos tocos arteriais em forma de taça. Lavagem com solução salina heparinizada.

Uma vez que a sutura é enlaçada ao redor da artéria distal de queratina, uma das extremidades do segmento venoso revertido e lavado é deslizada sobre a artéria distal de queratina com luva. Em seguida, a sutura é amarrada na posição correta. É importante garantir que a ligadura inclua toda a circunferência do enxerto venoso.

Agora, o segmento venoso é novamente lavado com solução salina heparinizada, e a outra extremidade do segmento venoso é deslizada sobre o coto arterial proximal da carótida. Posteriormente, a ligadura é finalizada. Aqui você pode observar o enxerto venoso em interposição completamente implantado.

Posteriormente, os dois grampos tipo miniatura para bulldog são removidos. Primeiro, o distal e depois o proximal. Finalmente, o enxerto venoso de interposição arterial está no lugar.

Pode-se observar pulsação na artéria carótida comum e no enxerto venoso. Após a remoção dos grampos para o fechamento da ferida, aplica-se uma sutura contínua subcutânea com fio Vicryl 4-0, sendo utilizado fio Vicryl 3-0 para a sutura contínua cutânea. Os animais recuperaram-se sobre uma camada plana de papel sob uma lâmpada de aquecimento por infravermelho.

Os animais foram injetados pós-operatoriamente com norfina salina numa concentração de 0,03 a 0,05 miligramas por quilograma de peso corporal por via subcutânea a cada oito a 12 horas durante dois dias, e 100% dos animais sobreviveram no momento da eutanásia. Além disso, a taxa de perviedade do enxerto foi de 60% para os primeiros 10 animais operados e de 82% para os 11 animais restantes. O fluxo sanguíneo no momento da eutanásia foi de oito mais ou menos três mililitros por minuto.

Ao utilizar a técnica de anastomose com luva, vasos com diferentes diâmetros luminais podem ser anastomosados. É importante ligar toda a circunferência dos vasos com luva e TED para evitar sangramento após a reperfusão. Para prevenir a formação de trombos, especialmente na anastomose distal, é essencial apertar o nó do enxerto venoso bem próximo à borda da luva, de modo a evitar que o sangue entre em contato com o nó que mantém a artéria posicionada.

Este modelo é muito adequado para simular a hemodinâmica de alta velocidade sanguínea e baixa tensão de cisalhamento e para estudar os mecanismos que afetam o desenvolvimento da hiperplasia neointimal. Diferentemente do procedimento que utiliza a veia cava como enxerto, este autoenxerto utilizando a veia jugular externa reduz pela metade o número necessário de animais experimentais. Em última análise, a interposição de um enxerto de veia jugular externa na artéria carótida comum é uma técnica de microcirurgia sofisticada.

Este vídeo ajuda o cirurgião Sonata a dominar isso no menor tempo possível, com menor desperdício de animais experimentais. Este modelo é um excelente recurso para cirurgiões iniciantes praticarem a técnica de anel, atualmente utilizada no transplante de órgãos sólidos em animais pequenos.