November 11th, 2012
Hiperplasia neointimal é a causa principal de estenose nas veias arterializado. Propomos um novo protocolo através do qual a veia jugular externa direita é enxertado por meio da técnica do manguito na artéria carótida comum de ratos Sprague Dawley. A taxa de sobrevivência foi de 100% no ponto de momento de sacrifício.
A hiperplasia neointimal é uma das principais causas de estenose em veias arterializadas utilizadas na cirurgia de revascularização do miocárdio, na cirurgia de revascularização do miocárdio periférica, bem como no enxerto de fístulas venosas arteriais. A interposição na artéria carótida comum tem sido realizada em vários projetos de pesquisa para estudar a etiologia da hiperplasia neointimal e as opções terapêuticas para abordá-la atualmente. No entanto, as técnicas microcirúrgicas convencionais usando modelos de pequenos animais são complicadas, frustrantes e exigem sacrifício excessivo de animais experimentais para simplificar todo o procedimento.
Este vídeo ilustra um protocolo de operação detalhado, que ajudará o cirurgião iniciante a aprender a técnica de corte e o enxerto de veia. Interposição na artéria comum transportada 21 ratas fêmeas de um criador comercial foram categorizadas em três grupos iguais que foram operadas e sacrificadas no dia 21, 42 e 84, respectivamente. A anestesia geral dos animais foi induzida utilizando-se uma caixa de plexiglass conectada a uma máquina de anestesia ajustada a uma taxa de fluxo de oxigênio de um litro por minuto e um vaporizador de flúor de cavalete com gás anestésico a 5%.
Nesta figura, você vê os cientistas antes da transação do músculo mastóideo cla esternal direito. A veia jugular externa é mostrada aqui. Aqui você vê os cientistas após a transação do músculo esternocleidomastóideo direito, onde a artéria carótida comum direita e o nervo vago direito são revelados.
Durante a operação seguinte, as anastomoses são realizadas usando a técnica do manguito. Os punhos são feitos à mão a partir de um tubo de plástico cortado em um comprimento de três milímetros. Esses manguitos consistem em um corpo tubular do manguito, incluindo o volume total do tubo de plástico e uma alça do manguito que consiste em metade do volume do manguito.
Tanto o corpo do manguito quanto a alça do manguito são igualmente longos. O manguito é puxado sobre a artéria de queratina comum. O vaso e a alça do manguito podem ser presos com segurança usando um mini grampo de buldogue.
Em seguida, o vaso é desviado e puxado para fora do corpo do manguito. Em seguida, é fixado com uma ligadura de seda. Desta forma, o lúmen do copo é coberto com endotélio.
O enxerto venoso pode ser deslizado sobre ambos os cotos da artéria carótida comum em forma de concha e fixado com a ligadura de seda. Para evitar a formação de trombos, especialmente na anastomose distal, é essencial prender o laço do enxerto venoso muito próximo à margem do manguito para evitar que o sangue entre em contato com o laço que mantém a artéria no lugar, Uma incisão cervical mediana de 2,5 centímetros de comprimento é feita diretamente acima do esterno lateral ao músculo esternal da mastóide CDO. Você pode ver a ampla veia jugular externa, que está completamente separada dos tecidos circundantes.
Aqui você pode ver a veia jugular externa totalmente mobilizada, por meio da qual os tributários venosos foram ligados com sete suturas de seda. O músculo quito mastóideo esternal é preparado aqui após a transação do músculo esternocleidomastóideo. Agora você pode ver a artéria de queratina comum direita.
A artéria de queratina comum é cuidadosamente preparada, certificando-se de não comprimir a artéria ou o nervo vago, E agora você pode ver a artéria de queratina comum em todo o seu comprimento. Em seguida, é ligado duas vezes no meio com sete suturas de seda. Depois disso, a artéria carótida comum é seccionada entre as duas ligaduras.
Um manguito de náilon consistindo de um corpo e uma alça é então deslizado sobre a extremidade distal da artéria queratina comum, onde a alça do manguito fica atrás do vaso. Em seguida, a extremidade do balonete da artéria de queratina comum distal é presa com uma mini braçadeira de buldogue bem na alça do manguito. Isso garante estabilidade.
Posteriormente, a artéria é cortada diretamente atrás da ligadura, sendo que o coto arterial resultante deve ser tão longo quanto o corpo do manguito. O lúmen arterial é enxaguado com solução salina de heparina. Em seguida, o loop de ligação é deixado de lado.
Imediatamente depois, o coto arterial é puxado para cima e deslizado como uma manga sobre o corpo do manguito. Posteriormente, a alça de ligadura é puxada com força e amarrada para evitar que a artéria escorregue para fora de sua manga. Usamos um truque tanto a parede arterial quanto a sutura de pinça simultaneamente com um par de pinças e a pinça esquerda fazem o nó.
Em seguida, o mesmo procedimento é repetido para o coto arterial proximal, deslizando o manguito sobre a extremidade proximal da artéria de queratina comum com balonete, pinçando, cortando a artéria, enxaguando, colocando o laço de ligadura sobre o coto arterial, deslizando o coto arterial sobre o manguito e, finalmente, amarrando o laço de ligadura. Um segmento de um centímetro de comprimento da veia jugular externa pinçada é excisado. As duas artérias com balonete estão muito distantes uma da outra para que a interposição venosa se aproxime da distância correta para o procedimento.
Uma sutura de três oh Vicryl é enrolada em torno de cada mini grampo de buldogue e ambas as suturas são cruzadas. Em seguida, as suturas são puxadas em direções opostas, permitindo o posicionamento adequado dos cotos arteriais em forma de concha. Enxágue com solução salina de heparina.
Uma vez que a sutura é enrolada ao redor da artéria de queratina distal em forma de concha, uma extremidade do segmento da veia invertida e enxaguada é deslizada sobre a artéria de queratina distal com balonete. Em seguida, a sutura é amarrada na posição correta. Por meio disso, é importante garantir que a ligadura incorpore toda a circunferência do enxerto venoso.
Agora, o segmento da veia é novamente enxaguado com solução salina de heparina e a outra extremidade do segmento da veia é deslizada sobre o coto da artéria queratina proximal. Posteriormente, a ligadura é concluída. Aqui você pode ver o enxerto de interposição venosa completo.
Depois disso, os dois mini grampos bulldog são removidos. Primeiro, o distal e depois o proximal. Finalmente, o enxerto de interposição venosa de mentiras arteriais está no lugar.
A pulsação pode ser observada na artéria comum carregada e no enxerto venoso. Depois de remover as pinças para o fechamento da ferida, uma sutura subcutânea contínua é aplicada com quatro oh Vicryl, enquanto uma sutura três oh Vicryl é usada para a sutura cutânea contínua. Os animais se recuperaram em uma cama de papel plana sob uma lâmpada de aquecimento infravermelho.
Os animais foram injetados no pós-operatório com salmoura norfina na concentração de 0,03 a 0,05 miligramas por quilograma de peso corporal SC a cada oito a 12 horas por dois dias, 100% dos animais sobreviveram no momento do sacrifício. Além disso, a taxa de perviedade do enxerto foi de 60% para os primeiros 10 animais operados e de 82% para os 11 animais restantes. O fluxo sanguíneo no momento do sacrifício era de oito mais ou menos três mililitros por minuto.
Utilizando a técnica do manguito, vasos com diferentes diâmetros luminais podem ser anastomoses. É importante ligar toda a circunferência dos vasos balonetes e TED para evitar sangramento após a reperfusão. Para evitar a formação de trombos, especialmente na anastomose distal, é essencial prender o laço do enxerto venoso muito próximo à margem do manguito para evitar que o sangue entre em contato com o laço que mantém a artéria no lugar.
Este modelo é muito adequado para simular hemodinâmica de alta velocidade sanguínea e baixa tensão de cisalhamento e para estudar mecanismos que afetam o desenvolvimento de hiperplasia neointimal. Ao contrário do procedimento que usa a veia cava como enxerto, este autotransplante usando a veia jugular externa como enxerto reduz pela metade o número necessário de animais experimentais. Em última análise, a interposição de um enxerto de veia jugular externa na artéria queratina comum é uma técnica sofisticada de microcirurgia.
Este vídeo ajuda o cirurgião Sonata a dominar isso em tempo mínimo com um menor desperdício de animais experimentais. Este modelo é um excelente meio para cirurgiões novatos praticarem a técnica do manguito que é atualmente usada no transplante de órgãos sólidos em pequenos animais.
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Este estudo apresenta um novo protocolo para enxerto da veia jugular externa direita usando a técnica de cuff na artéria carótida comum de ratos Sprague Dawley. A abordagem visa simplificar o procedimento cirúrgico e melhorar os resultados relacionados à hiperplasia neointimal, uma das principais causas de estenose em veias arterializadas.
This microsurgical protocol addresses a key challenge in vascular research: modeling neointimal hyperplasia in arterialized vein grafts, a primary cause of stenosis in coronary and peripheral bypass surgeries and arteriovenous fistulas. By simplifying external jugular vein interposition in the rat carotid artery using the cuff technique, the method reduces animal use and improves procedural standardization. This supports preclinical target validation and mechanistic de-risking in cardiovascular therapeutic development.
The method fits within the discovery-to-preclinical continuum by providing a disease-relevant system for evaluating mechanisms of neointimal hyperplasia, enabling lead identification through functional validation of vascular grafts, and supporting preclinical model refinement via standardized surgical execution.