Name: Transplante hepático ortotópico experimental em ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-07-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 25 s
Description: Aprenda o transplante hepático ortotópico em ratos, uma técnica microcirúrgica revisada que enfatiza precisão e velocidade na fase de implante. Este método detalha dissecação vascular, anastomose e preservação do enxerto para pesquisa em biologia de transplantes.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

CT foi apoiada pela National Science Foundation suíço (SCORE concessão 3232230-126233). O estudo foi financiado pela Fundação Artères, a Astellas Foundation Europe e da Fundação Boninchi.

1. Operação doador <ol><li> Anestesiar ratos machos, pesando 200 ± 20 gramas, com isoflurano em cone máscara (3% para a indução, 2% durante a operação, um fluxo de ar l / min, FiO2 70%). </li><li> Realize uma laparotomia mediana e grande transversal e cauterização dos vasos epigástricos em ambos os lados. </li><li> Cortar o ligamento falciforme, e separar a veia esquerdo do diafragma a partir da veia cava suprehepatic. Finalmente, dividir a veia do diafragma entre duas ligaduras de seda 7-0. </li><li> Corte o triangular esquerdo e os ligamentos gastro-hepáticas. </li><li> Divida o ligamento hepato-esofágico e artéria entre 7-0 ligaduras (coagulação é uma alternativa válida). </li><li> Isolar o infrahepatic veia cava para baixo para a veia renal esquerda. Separa-se a veia renal direita a partir dos tecidos circundantes e dividi-lo entre um 10-0 e uma ligadura 7-0, nas suas extremidades proximal e distai, respectivamente. </li><li> Divida a veia supra-renal direita entre 7-0 ligatures e livre o fígado de seus ligamentos posteriores cortando sob leve tração. </li><li> Isolar a veia gastroesplênico e dividi-lo entre um 10-0 e uma ligadura 7-0, nas suas extremidades proximal e distai, respectivamente. </li><li> Divida a artéria hepática própria entre 7-0 laços. </li><li> Isolar a veia duodeno pâncreas e dividiu-a entre um 10-0 e uma ligadura 7-0, em sua extremidade proximal e distal, respectivamente. </li><li> Insira um 22G, 3,5 mm de stent no ducto biliar comum através da prática de uma pequena incisão de 1 cm de distância a partir do hilo hepático. Fixe o stent em posição com uma ligadura 7-0. </li><li> Injectar 10 UI de heparina, diluiu-se em 1 ml de solução salina normal, através da veia dorsal do pénis. </li><li> Canular a porta cava (tanto quanto possível a partir do hilo) com uma agulha de 21G e suavemente lavar o fígado com 20 ml de lactato de Ringer frio (ou outras soluções de conservação). Ao mesmo tempo, cortar a veia cava inferior das veias renais para permitir uma adequada outflow. Perfusão de fígado frio deve durar entre um e dois minutos. </li><li> Corte a porta abaixo da veia cava duodeno pâncreas. </li><li> Corte o duto biliar comum distal à ligadura ao redor do stent. </li><li> Complete a incisão da veia cava infrahepatic. </li><li> Cortar o supra-hepática da veia cava desnatado para o diafragma e remover o fígado. </li><li> Coloque o fígado em uma bacia cheia de ringer lactato fria e colocar a bacia em uma almofada de gelo. </li></ol> 2. Preparação do Enxerto <ol><li> Insira o porta veia em seu punho, então everter o navio ao redor da borda para expor a íntima. Fixe o segmento evertido no punho com uma ligadura de 7-0. </li><li> Repita a mesma operação no infrahepatic veia cava. </li><li> Posicionar uma braçadeira de micro-(4-6 mm de comprimento) na parte proximal do infrahepatic veia cava. Esta operação evita a perda de sangue após a reperfusão do portal. </li><li> Derrubar o fígado e inserir duas prolene 8-0 suturasnas bordas opostas laterais da supra-hepática da veia cava, de fora para dentro. </li><li> Guarde o enxerto (imersos em solução de ringer lactato) na geladeira a 0-4 ° C. </li></ol> 3. Operação destinatário <ol><li> Anestesiar ratos machos, pesando 200 ± 20 gramas, com isoflurano em cone máscara (3% para a indução, 2% durante a operação, um fluxo de ar l / min, FiO2 70%) e manter em uma almofada de aquecimento. De nota, pesos receptores e os doadores devem ser combinados (± 40 gramas). </li><li> Injectar 10 ml de soro fisiológico por via subcutânea e 0,03 g de piperacilina / tazobactam intramuscular antes da laparotomia. </li><li> Realize uma laparotomia xipho-púbica na linha média. </li><li> Inverter o processo xifóide com uma pinça de auto-estáticas, a fim de melhor expor o fígado. </li><li> Corte os ligamentos anterior e dividir a veia diafragmática esquerda entre dois laços 7-0. </li><li> Divida o ligamento hepato-esofágico e artéria entre 7-0 ligaduras (coagulation é uma alternativa válida). Não é mostrado no vídeo (idêntica à operação de dador). </li><li> Isolar o infrahepatic veia cava até a veia renal direita. </li><li> Dividir a veia supra-renal direita entre 7-0 ligaduras e fígado o livre a partir dos seus ligamentos posteriores cortando sob uma ligeira tracção (não mostrado no vídeo (idêntica à operação de dador)). </li><li> Coloque uma ligadura 7-0 ao redor do ducto biliar comum, logo abaixo de sua divisão. Dito de outra ligadura um milímetro abaixo e cortar no meio. </li><li> Isolar a artéria hepática no hilo e dividi-lo entre 7-0 ligaduras. </li><li> Gentilmente separar ramos portais direito e esquerdo. Preste atenção para não danificar a artéria hepática comum ou a veia gastro-esplênica. </li><li> Posicione o anel ao redor da cava da veia cava, cranialmente até a veia renal direita. Em seguida, fixar a parede do vaso para o anel através da colocação de quatro cardinais 9-0 suturas. </li><li> Repita a mesma operação com o anel de portal na porta cava. </li&gt; <li> Injectar 10 UI de heparina, diluiu-se em 1 ml de solução salina normal, através da veia dorsal do pénis. </li><li> Definir a anestesia em 0,25% ea FiO2 em 100%. </li><li> Prenda o infrahepatic veia cava logo acima da veia renal direita, em seguida, apertar a veia porta logo acima da veia gastro-esplênica. Finalmente prender o supra-hepática da veia cava não se esquecendo de incluir pelo menos 2 mm do diafragma. </li><li> Corte o supra-hepática da veia cava próxima ao parênquima. </li><li> Corte a esquerda e os ramos direito do portal e dividir o septo entre os dois. </li><li> Corte o infrahepatic veia cava próximo ao parênquima, prestando atenção para não incisar qualquer dos pontos previamente posicionados. Remover o fígado e colocar o enxerto para dentro da cavidade abdominal. </li><li> Realizar uma anastomose ponta a ponta entre a cava supra-hepática veia do enxerto e do receptor. Comece com a sutura da parede posterior da esquerda para a direita, em seguida, proceder na parede anterior da direita para a leManter o pé de sutura anterior solto até ao fim, a fim de permitir que um rubor generosa do lúmen interior antes de apertar as extremidades. </li><li> Insira o ramo caudal da aproximador no punho anel portal, em seguida, insira o porta cava do enxerto na fenda do ramo cranial da aproximador, com a braçadeira portal encontrar sua posição no slot. </li><li> Feche o aproximador durante a lavagem do destinatário veia porta com solução salina normal e permitir que a braçadeira para inserir dentro do vaso. Fixe o destinatário da veia porta em torno de seu punho com um empate 7-0 circunferencial. </li><li> Remover o aproximador. Abra o grampo na veia cava supra-hepática ea veia porta em ordem: fluxo portal está restabelecida. </li><li> Retire o anel portal cortando as ligaduras 9-0 com extra-finas tesoura. </li><li> Inserir o ramo caudal do aproximador no punho anel cava; então inserir o infrahepatic veia cava do enxerto na fenda do crânio<html> ramo da aproximador, com a braçadeira cava encontrar sua posição no slot. </li><li> Feche o aproximador durante a lavagem do destinatário infrahepatic veia cava com solução salina normal e permitir que a braçadeira para inserir dentro do vaso. Fixe o destinatário da veia cava em torno de seu punho com um empate 7-0 circunferencial. </li><li> Remover o aproximador. Abra as microclamps no infrahepatic veia cava do enxerto e do receptor em ordem: fluxo venoso está agora restabelecida. </li><li> Realizar uma incisão parcial do ducto do destinatário biliar comum, aplique uma leve tração para a cabeça, e insira o lado livre do stent previamente inserido no ducto biliar do enxerto. Fixe o stent com um empate 7-0 circunferencial. </li><li> Feche o animal por camadas com 5-0. Permitir que a água livre e comida de despertar. </li><li> Administrar analgesia eficaz de acordo com protocolos institucionais locais. Uma duração mínima de 24 h é recomendada. </li></ol>&gt; _content &quot;Digno de nota: fim-de-final da anastomose da artéria hepática pode ser realizada, quando exigido pelo projeto experimental (a artéria não é necessário para a sobrevivência a longo prazo após o transplante de fígado de rato). 4. Os resultados representativos A técnica descrita pode ser dominado com sucesso pela nossa equipe após cerca de 10 cirurgias de treinamento. Ele permitiu que 100% sobrevivência a longo prazo (&gt; 21 dias) em 36 consecutivo Lewis-a-Lewis e Agouti-a-Lewis Trevas transplantes, após o período de formação de curta duração (um número de receptores de enxertos singênicos fígado foram mantidos vivos por mais de 12 meses agora). Pós-transplante singénicos dia 1 testes de função hepática mostrou aspartato transaminase mediana (AST): 84 U / l (51,7-92,7) alanina transaminase e mediana (ALT): 172,5 U / l (127,5-240,2). A fase anepática média (de veia porta de fixação de enxerto re-perfusão) foi de 14 ± 2 min, com o maior passo de ser o supra-hepática da veia cava anastomose (executando suture) tempo de 9 ± 2 min. O sistema quick-linker permitiu o posicionamento de 1,55 mm de calibre algemas em veia porta e 2,40 mm de calibre punhos na veia cava (destinatários pesando 200 ± 20 g). Em contraste, quando tentámos transplante utilizando a técnica de Kamada, eles não podia exceder 1,40 milímetros e 2,16 milímetros, respectivamente (ratos correspondentes para a estirpe e peso). Como mostrado na Figura 7, rápido-linker anéis são concebidos para manter os vasos receptoras sobre óptima alongamento, permitindo paquímetro mínimo e desperdício de comprimento, o que resulta em mais perto-a-fisiológicas resultados hemodinâmicos. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig1.jpg" alt="A Figura 1" /> Figura 1. Medidas anéis. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig2.jpg" alt="A Figura 2" /> Figura 2. Medidas Microclamps. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig3.jpg" alt="A Figura 3" /> Figura 3. Quick-linker kit. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig4.jpg" alt="A Figura 4" /> Figura 4. Quick-linker armado. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig5.jpg" alt="A Figura 5" /> Figura 5. Quick-linker fechado. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig6.jpg" alt="A Figura 6" /> Figura 6. Braçadeira SHVC. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig7.jpg" alt="A Figura 7" /> Figura 7. Clássico contra quick-linker assistidas manguito anastomose-hemodinâmica. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig8.jpg" alt="A Figura 8" /> Figura 8. Doadores e preparação destinatário pele e incisão.

<ol><li>Starzl, T. E., Marchioro, T. L., Porter, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+and+clinical+observation+after+homotransplantation+of+the+whole+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Revue+internationale+d%27hepatologie%22%5BJournal%5D)">Experimental and clinical observation after homotransplantation of the whole liver.</a> Revue internationale d'hepatologie. 15, 1447(1965).</li>
<li>Starzl, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Evolution of liver transplantation.</a> Hepatology. 2, 614S-636S (1982).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47(1979).</li>
<li>Kashfi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+various+techniques+of+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+proceedings%22%5BJournal%5D)">A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation proceedings. 37, 185-188 (2005).</li>
<li>Hori, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+and+innovative+techniques+for+liver+transplantation+in+rats%3A+A+surgical+guide%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%3A+WJG%22%5BJournal%5D)">Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide.</a> World Journal of Gastroenterology: WJG. 16, 3120(2010).</li>
<li>Oldani, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+technique+for+rat+liver+transplantation+using+Quick+Linker+system%3A+a+preliminary+result%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result.</a> Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).</li>
<li>Nosaka, T., Bowers, J. L., Cay, O., Clouse, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biliary+complications+after+orthotopic+liver+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Surg.+Today%22%5BJournal%5D)">Biliary complications after orthotopic liver transplantation in rats.</a> Surg. Today. 29, 963-965 (1999).</li>
<li>Li, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+incidence+of+biliary+complications+in+rat+liver+transplantation%3A+can+we+avoid+it%5BTitle%5D)+AND+%22World+J.+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">High incidence of biliary complications in rat liver transplantation: can we avoid it.</a> World J. Gastroenterol. 17, 3140-3144 (2011).</li>
<li>Peng, Y., Gong, J. P., Yan, L. N., Li, S. B., Li, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+two-cuff+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatobiliary+Pancreat.+Dis.+Int%22%5BJournal%5D)">Improved two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.</a> Hepatobiliary Pancreat. Dis. Int. 3, 33-37 (2004).</li>
<li>Urata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+survival+in+rat+liver+transplantation+with+extended+cold+preservation%3A+role+of+portal+vein+clamping+time%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Decreased survival in rat liver transplantation with extended cold preservation: role of portal vein clamping time.</a> Hepatology. 28, 366-373 (1998).</li>
</ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

O presente modelo de transplante de fígado de rato pode ser facilmente estabelecida. Em nossa experiência, alguns pontos-chave ajudar a minimizar o risco de morte (≤ 20%). Mortes precoces, que ocorrem dentro das primeiras três horas de reperfusão, são mais frequentemente devido a um enfarte do intestino, como consequência de um portal longo de aperto. Portanto, é recomendável para manter a fase anepática dentro do limite ideal de 15 minutos (20 minutos ainda aceitável). Central embolia aérea também pode ser uma causa de morte súbita e é obrigatório para descarregar todas as veias antes da anastomose. Óbitos ocorridos entre o dia pós-operatório um e três são muitas vezes devido à insuficiência hepática ou trombose da veia cava. Deve-se, portanto, evitar qualquer enxerto agressivo de lavagem antes do explante no doador (que lavar com 20 ml durante aproximadamente 60 segundos) e garantir uma adequada preservação frio (imersão total em 0-4 ° C solução ringer lactato). O risco de trombosepode ser diminuída através da minimização da manipulação da íntima e preservar a sua integridade. Nós não recomendamos o uso de anticoagulação após a cirurgia. As mortes entre o dia pós-operatório de quatro e nove estão muitas vezes relacionados com colangite bacteriana 7. Com base na nossa experiência, uma dose única de piperacilline / tazobactam (0,03 g) administrado antes da laparotomia é suficiente para minimizar o risco de infecção biliar comum. A morte é um evento raro após o dia 10. No entanto, devido à ausência de fluxo arterial, alguns problemas de condutas biliares pode ser observado com cholastasis 8. Dependendo das necessidades do investigador uma arterialização pode ser considerado 9. Digno de nota, um tempo de isquemia fria até 24 horas pode ser considerado como 10 aceitável. O sistema quick-linker foi originalmente concebido para realizar transplantes de fígado com três anastomoses manguito (fase anepática muito curto). No entanto, o te três bainha-condutahaver descrição prévia requer o uso de pinças muito pequenas para a cava supra-hepática veia braçadeira (SHVC) e não tem sido largamente aceite, devido ao risco de problemas de fígado de saída 11-14. Nós, portanto, a favor de uma rápida linker técnica de três manguito assistida somente quando os tempos de isquemia quente com menos de dez minutos são necessários. Na maioria dos estudos no entanto, as fases de implantação até 15-18 minutos são aceitáveis, permitindo a utilização da técnica de dois bainha-conduta, e uma drenagem mais fisiológico SHVC. Como mostrado neste papel de vídeo, que rotineiramente usar o sistema rápido-ligante na segunda parte da implantação só. Embora algum tempo extra cirúrgico é necessário para posicionar as alças rápido-ligante, esta parte do processo está associado com riscos mínimos e permite a um encurtamento das graças anepática fase crítica para inserções mais fáceis golas. Outras vantagens do sistema rápido-ligante são um melhor alinhamento vaso enxerto-receptor e da utilização de punhos mais largos, com melhores resultados hemodinâmicos em comparação com otécnicas anteriormente descritas (incluindo a descrita por Kamada et ai.) 6 (Fig. 7).

<table border="1"><tbody><tr><td> Ferramenta / Reagente </td><td> Companhia </td><td> Catálogo n. </td><td> Comentar </td></tr><tr><td> Manguito Portal </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> ou <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">ferreiros-medical.com</a> </td><td> Bobina 01-96-1729 800/100/420 </td><td> Calibre: 1,55 milímetros Parede: 0,30 milímetros Comprimento: 3,5 mm </td></tr><tr><td> Infrahepatic v manguito cava </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> ou <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">ferreiros-medical.com</a> </td><td> Bobina 01-96-1733 800/100/540 </td><td> Calibre: 2,40 milímetros Parede: 0,30 milímetros <br/&gt; Comprimento: 3,5 mm </td></tr><tr><td> Stent biliar comum </td><td> comum 22G venflon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 7-0 laços de seda </td><td> <a href="http://georgetiemann.com" target="_blank">georgetiemann.com</a> </td><td> 160-1226-7 / 0 </td><td></td></tr><tr><td> 10-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 9-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 8-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Retas fórceps micro </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">-s e-t</a>. Net </td><td> FRC-15RM-8 </td><td></td></tr><tr><td> Curvas fórceps micro </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">-s e-t.net</a> </td><td> FRS-15 RM-8 </td><td></td></tr><tr><td> Dissecção porta-agulhas </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">-s e-t.net</a> </td><td> B-15-8,2 </td><td></td></tr><tr><td> Anastomose porta-agulhas </td><td> <a href="http://rumex.net" target="_blank">rumex.net</a> </td><td> 8-021T </td><td></td></tr><tr><td> Grampos Micro </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18055-03 </td><td> 6 x 1 milímetro </td></tr><tr><td> Aplicador de grampos Micro </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18057-14 </td><td></td></tr&gt; <tr><td> Supra-hepática v. cava grampo </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> 13.349.14 </td><td></td></tr><tr><td> Quick-Linker anéis </td><td> <a href="http://dltchiropody.co.uk" target="_blank">dltchiropody.co.uk</a> </td><td> PAR 10 </td><td> modificados lâminas de bisturi </td></tr><tr><td> Quick-Linker aproximador </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> UD-04-275 </td><td> fórceps modificado Kocher </td></tr></tbody></table>

transplante hepático ortotópico experimental em ratos

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Progresso clínico no campo de transplante de fígado tem sido largamente suportado por 1,2 modelos animais. Desde a publicação do transplante hepático primeiro rato em 1979 por Kamada et al. 3, este modelo permanece o padrão ouro apesar de várias propostas de técnicas alternativas 4. No entanto, sua maior utilização é limitada pela sua curva de aprendizagem 5. Neste trabalho de vídeo, vamos mostrar uma revisão simples e fácil de estabelecer de técnica Kamada de dois manguito. A veia cava supra-hepática anastomose é realizada manualmente com uma sutura contínua, ea porta cava e anastomoses infrahepatic veia cava são realizados utilizando um sistema de manguito rápida linker 6. Fabricar o kit rápido-ligante é mostrado em um papel de vídeo separada.

Nós apresentamos uma revisão fácil de estabelecer a técnica de dois manguito clássica para transplante hepático em ratos.

Transplante hepático ortotópico experimental em ratos

O progresso clínico no campo do transplante de fígado tem sido amplamente sustentado por modelos animais1,2. Desde a publicação do primeiro transplante ortotópico de rato...

O transplante hepático ortotópico na raiva é um procedimento exigente e requer treinamento microcirúrgico pulmonar para ser adequadamente dominado. Precisão e velocidade, especialmente durante a fase de implante, são as chaves para o sucesso. Nos próximos vídeos, revelaremos cada etapa fundamental para um transplante bem-sucedido e explicaremos como um dispositivo clínico rápido pode facilitar a fase de implante.Aproveite os vídeos. O doador é aberto por meio de incisão transversa. O ligamento falciforme é seccionado e a veia cava inferior é exposta.A veia diafragmática esquerda é destacada da veia cava e, em seguida, seccionada entre dois laços de seda número sete. O ligamento gastroesplênico é seccionado e, depois, o ligamento esofágico é dividido entre os laços. A veia cava inferior é exposta puxando suavemente o intestino delgado e o intestino grosso.No lado esquerdo, o peritônio é aberto e a veia cava é cuidadosamente liberada dos tecidos circundantes. A veia adrenal direita é isolada e, em seguida, seccionada entre sete laços. O fígado é puxado para o lado esquerdo e mantido suavemente sob tração.Os ligamentos retro-hepáticos e triangulares direitos são seccionados. A veia renal direita é ligada em sua extremidade proximal utilizando uma ligadura de náilon 10-0. A veia renal direita e a artéria renal são ligadas juntas em sua extremidade distal, e em seguida a veia renal direita é dividida.É mostrada uma visão geral da veia cava inferior completamente isolada. Visão geral da anatomia regional do hilo hepático e da veia porta, artéria hepática própria, ducto biliar comum e veia gastroesplênica. O pâncreas glu.A veia gastroesplênica é isolada e dividida entre uma ligadura 10 oh e uma ligadura 7 oh. A artéria hepática superior é seccionada entre ligaduras 7 oh. Finalmente, a veia pancreático-duodenal é dividida.É apresentada uma visão geral da veia porta isolada. O ducto biliar comum é parcialmente aberto em sua junção com o tecido pancreático. Uma prótese de 3,5 milímetros 22 G é inserida e firmemente fixada.São injetadas 10 unidades de heparina. O fígado é então lavado através da veia porta com 20 mililitros de solução de Ringer lactato gelada, enquanto a veia cava distal é incisada para permitir um fluxo de saída adequado; a veia porta é cortada em sua extremidade distal e a seção distal do ducto biliar comum é seccionada. A veia cava hepática é então cortada em sua extremidade distal, enquanto a veia cava supra-hepática é seccionada, destacada até o diafragma, que é removido e imerso em uma solução de Ringer lactato a quatro graus Celsius.Uma veia porta é inserida na sua panturrilha, depois desviada para expor a íntima e, finalmente, fixada na panturrilha com um nó sete oh. O mesmo é feito na veia panturrilha de repat. Uma pinça micro é posicionada na parte mais cranial da veia cava de repat.O fígado é virado e dois pontos de prolene ATO são passados nas bordas laterais opostas da veia cava sativa, de fora para dentro. O receptor é mantido sob anestesia com fluoreto de isoflurano em um suporte aquecido, 10 mililitros. Linhagem celular normal é injetada subcutaneamente antes da laparotomia; é realizada uma incisão mediana na região púbica e a bexiga é retrovertida para melhor expor o fígado.O ducto biliar comum é fixado com uma sutura em forma de oito e seccionado logo antes de sua bifurcação esquerda e direita. Os ramos portais são separados com precisão. O anel cava é posicionado ao redor da veia cava cranialmente à veia renal esquerda.Um primeiro ponto nove zero é passado através da parede do vaso em sua borda direita e, em seguida, fixado ao anel cava na posição previamente estabelecida. Um segundo ponto é passado pela borda oposta e fixado. O terceiro é fixado na posição ventral.Por fim, o quarto ponto é fixado em posição dorsal. Após virar o anel para o lado esquerdo, o primeiro ponto é passado pela parede posterior levantando o vaso. O anel portal é então posicionado e o laço é fixado em seu ramo posterior.Um segundo ponto é passado pela borda do ramo portal esquerdo e fixado; um terceiro ponto é feito na borda do portal direito. Em seguida, é fixado. O último ponto perfura a parede anterior do órgão e é fixado em posição antes da aplicação do clamp.Uma última limpeza da veia cava é realizada no trajeto da veia cava e da veia porta, que são clampadas transversalmente em ordem. A veia cava inferior é então clampada transversalmente e incisada até o parênquima. Os ramos portais direito e esquerdo são cortados e o septo entre eles é dividido. A veia cava é cortada até o parênquima. Em seguida, o fígado é removido.As veias cava e porta são mantidas abertas com segurança pelos dois anéis. O enxerto é posicionado na cavidade abdominal e a sutura NATO é fixada na borda esquerda da veia cava espática. Uma segunda sutura é fixada na borda direita.A sutura iraniana da parede posterior é realizada da esquerda para a direita, de modo a não incluir o parênquima hepático na sutura. A sutura da parede anterior é mantida frouxa para permitir uma lavagem generosa antes do fechamento completo. Esta manobra evita embolia aérea.O ramo coddle do aproximador é inserido na alça do anel portal e o bezerro portal é inserido através da fenda de seu ramo cranial. O portador Vina do receptor é irrigado com solução salina normal enquanto o aproximador é fechado. Para auxiliar a inserção do bezerro no receptor, o Porter é fixado ao bezerro por meio de um nó sete oh.O Aproximador é removido e o fluxo portal é restabelecido removendo-se, na ordem, o grampo Atic VNA CVA e o grampo portal; o anel portal é removido mediante corte. As nano ligaduras, no entanto, são restabelecidas com a mesma técnica utilizada nos receptores. O ducto biliar comum é mantido sob tração e o stent é inserido por meio de uma pequena incisão.Uma ligadura circular fixa sua posição. Uma visão geral do enxerto fundido é mostrada em a.

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

O transplante hepático em ratos é um modelo indispensável experimental para a pesquisa biomédica. Aqui apresentamos nossos procedimentos cirúrgicos para transplante ortotópico do fígado do rato com a reconstrução da artéria hepática utilizando um enxerto parcial de 50%.

Procedimentos cirúrgicos para um modelo de rato de Transplante de Fígado parcial ortotópico com reconstrução arterial hepática

Nós descrevemos o design do dispositivo "quick-linker" para o transplante de fígado de rato ortotópico mais fácil.

Dispositivos de fabricação e instrumentos para facilitar a Rat Liver Transplantation

O transplante de fígado auxiliar proporciona um suporte temporário em insuficiência hepática aguda, até que a regeneração do fígado, não. O transplante heterotópico auxiliar fígado (HALT) com Arterialização veia porta (PVA) torna a função hepática está suficientemente bem. Desenvolvemos uma técnica análoga, no rato, para examinar a influência da arterialização veia portal na morfologia e função do enxerto.

Heterotópico Rat auxiliar Liver Transplantation com fluxo regulado Portal Vein Arterialização na Insuficiência Hepática Aguda

Descrevemos uma nova técnica para transplante coração-pulmão abdominal heterotópico (HAHLT) em ratos. A configuração do transplante resulta em uma circulação do enxerto parcialmente carregada, permitindo avaliação funcional direta. Esse modelo pode ser empregado para estudos agudos ou crônicos de função e estado imunológico do enxerto transplantado.

Rat heterotópico abdominal coração / pulmão Transplante Single-carregado em uma configuração-Volume

Aqui, apresenta-se um protocolo envolvendo transplante hepático parcial de re-arterialized de rato. Especificamente, 70% fígado foi ressecado na vivo usando uma técnica atualizada de hepatectomy orientada a embarcação. A artéria hepática foi reconstruída em uma forma de ponta-a-lado. A técnica de punho foi modificada para encurtar o tempo de anastomose da veia cava infrahepatic.

Re-Arterialized transplante de fígado parcial de rato com na vivo orientado a embarcação 70% Hepatectomy

A reconstrução da veia cava suprahepatic (SHVC) continua a ser uma etapa difícil em transplante ortotópico de fígado de rato. Neste artigo, vamos mostrar um protocolo passo a passo para a reconstrução de SHVC em ratos utilizando uma técnica de anastomose magnético romance.

Um modelo do rato de ortotópico transplante hepático, usando uma técnica de anastomose magnético romance para reconstrução de veia Cava Suprahepatic

O objetivo deste estudo é modificar o modelo de transplante de fígado ortotópico de ratos para representar melhor o transplante de fígado humano e melhorar a sobrevivência do receptor. O método apresentado restabelece o fluxo arterial hepático conectando a artéria hepática comum do fígado doador à artéria hepática adequada do fígado receptor.

Complicações reduzidas após reconexão arterial em um modelo de rato de transplante de fígado ortotópico

Este artigo fornece uma descrição detalhada de como construir um modelo animal da fase anháptica (isquemia hepática) em ratos para facilitar a pesquisa básica sobre a lesão isquemia-reperfusão após o transplante hepático.

Lesão por Isquemia-Reperfusão de Órgãos simulando alterações hemodinâmicas no modelo de transplante de fígado de rato

O protocolo auxiliar de transplante hepático heterotópico de rato descrito aqui oferece uma ferramenta prática de investigação para explorar os mecanismos de rejeição do aloenxerto hepático. Este modelo ajuda a aliviar os obstáculos cirúrgicos e o estresse animal do transplante hepático ortotópico em ratos.

Modelo de transplante de fígado total auxiliar heterotópico de rato utilizando uma hepaticouretorostomia para estudos de rejeição de aloenxerto

Este protocolo descreve uma técnica aprimorada para transplante ortotópico de pulmão esquerdo em ratos, com foco na redução da dificuldade operacional e na melhoria das taxas de sobrevida.

Transplante ortotópico de pulmão esquerdo em ratos

Aprenda o transplante hepático ortotópico em ratos, uma técnica microcirúrgica revisada que enfatiza precisão e velocidade na fase de implante. Este método detalha dissecação vascular, anastomose e preservação do enxerto para pesquisa em biologia de transplantes.

Transplante hepático ortotópico experimental em ratos

Explorar mais vídeos