Name: Fevereiro de 2012: Este mês, em JoVE (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-02-01T09:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 53 s
Description: Explore os destaques da edição de fevereiro de 2012 do JoVE em neurociência e biologia. Descubra protocolos experimentais visualizados que aprimoram a comunicação científica e facilitam a reprodutibilidade.

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<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3445">MALDI Espectrometria de Massa de Imagem de Neuropeptídeos na Doença de Parkinson</a></h2>
Jörg Hanrieder1, 2, Anna Ljungdahl1, Malin Andersson1 1Departamento de Biociências Farmacêuticas, Universidade de Uppsala, 2Departamento de Engenharia Química e Biológica, Universidade de Tecnologia Chalmers
A farmacoterapia de reposição de dopamina usando L-DOPA é o tratamento sintomático mais comumente usado da doença de Parkinson, mas é acompanhada por efeitos colaterais, incluindo movimentos anormais involuntários, denominados discinesia 1. Aqui, é apresentado um protocolo para espectrometria de massa de imagem MALDI que detecta alterações nos níveis de neuropeptídeos cerebrais de ratos relacionados à discinesia.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3466">Detecção de hipóxia microrregional no córtex cerebral de camundongos por imagem de dois fótons de fluorescência endógena de NADH</a></h2>
Oksana Polesskaya1, Anita Sun2, Gheorghe Salahura2, Jharon N. Silva1, Stephen Dewhurst1, Karl Kasischke3 1Departamento de Microbiologia e Imunologia, Universidade de Centro Médico de Rochester, 2Centro de Desenvolvimento Neural e Doenças, Centro Médico da Universidade de Rochester, 3Departamento de Neurologia, Centro de Desenvolvimento Neural e Doenças, Centro Médico da Universidade de Rochester 
Aqui descrevemos um método para visualizar diretamente a hipóxia tecidual microrregional no córtex de camundongos in vivo. Baseia-se em imagens simultâneas de dois fótons do dinucleotídeo nicotinamida adenina (NADH) e da microcirculação cortical. Este método é útil para análise de alta resolução do suprimento de oxigênio tecidual.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3661">MAME Modelos para imagens 4D de células vivas de tumor: interações de microambiente que afetam a progressão maligna</a></h2>
Mansoureh Sameni1, Arulselvi Anbalagan1, Mary B. Olive1, Kamiar Moin1, 2, Raymond R. Mattingly1, 2, Bonnie F. Sloane1, 2 1Departamento de Farmacologia, Wayne State Universidade, 2Instituto do Câncer Barbara Ann Karmanos, Universidade Estadual de Wayne 
Desenvolvemos modelos de cocultura 3D para imagens de células vivas em tempo real de interações entre células tumorais de mama e outras células em seu microambiente que afetam a progressão para um fenótipo invasivo. Esses modelos podem servir como telas pré-clínicas para medicamentos direcionados às vias proteolíticas, quimiocinas/citocinas e quinase induzidas por parácrinos implicadas na invasividade.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3671">O dispositivo de fechamento do apêndice atrial esquerdo WATCHMAN para fibrilação atrial</a></h2>
Sven Möbius-Winkler, Marcus Sandri, Norman Mangner, Phillip Lurz, Ingo Dähnert, Gerhard Schuler Centro do Coração da Universidade de Leipzig
O vídeo que acompanha descreve um procedimento para a colocação percutânea do dispositivo de apêndice atrial esquerdo (AAE) WATCHMAN. O WATCHMAN é um dispositivo de nitinol projetado para ser implantado permanentemente ou ligeiramente distal à abertura do apêndice atrial esquerdo (AAE) para reter coágulos sanguíneos antes que eles saiam do AAE, evitando AVC tromboembólico.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3756">Medindo a pressão ventricular esquerda em camundongos embrionários e neonatais tardios</a></h2>
Victoria P. Le1, Attila Kovacs2, Jessica E. Wagenseil1 1Departamento de Engenharia Biomédica, Universidade de Saint Louis, 2Departamento de Medicina Interna, Escola de Medicina da Universidade de Washington
A medição da pressão ventricular esquerda (VE) em camundongos embrionários e neonatais é descrita. A pressão é medida inserindo uma agulha conectada a um transdutor cheio de fluido no VE sob orientação de ultrassom. Deve-se tomar cuidado para manter a função cardíaca normal durante o protocolo experimental.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3888">Ensaio de depuração mesotelial in vitro que modela os primeiros passos da metástase do câncer de ovário</a></h2>
Rachel A. Davidowitz, Marcin P. Iwanicki, Joan S. Brugge Departamento de Biologia Celular, Harvard Medical School
O ensaio de depuração mesotelial descrito aqui aproveita as células marcadas com fluorescência e a microscopia de vídeo com lapso de tempo para visualizar e medir quantitativamente as interações de esferoides multicelulares de câncer de ovário e monocamadas de células mesoteliais. Este ensaio modela os primeiros passos da metástase do câncer de ovário.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3894">Coleta de saliva, glândula salivar e hemolinfa de carrapatos Ixodes Scapularis</a></h2>
Toni G. Patton1, Gabrielle Dietrich2, Kevin Brandt1, Marc C. Dolan2, Joseph Piesman2, Robert D. Gilmore Jr. 11Atividade de Microbiologia e Patogênese, Ramo de Doenças Bacterianas, Divisão de Doenças Transmitidas por Vetores, Centro Nacional de Doenças Infecciosas Emergentes e Zoonóticas, Centros de Controle e Prevenção de Doenças, 2Atividade de Doenças Transmitidas por Carrapatos, Ramo de Doenças Bacterianas, Divisão de Doenças Transmitidas por Vetores, Centro Nacional de Doenças Infecciosas Emergentes e Zoonóticas, Centros de Controle e Prevenção de Doenças
A coleta de hemolinfa, glândulas salivares e saliva de carrapatos infectados é importante para estudar como os patógenos transmitidos por carrapatos causam doenças. Neste protocolo demonstramos como coletar hemolinfa e glândulas salivares da alimentação de ninfas de Ixodes scapularis. Também demonstramos a coleta de saliva de fêmeas de I. scapularis adultas.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3750">Um novo desfibrilador implantável de câmara única com detecção atrial: uma demonstração prática de detecção e facilidade de implantação</a></h2>
Dietmar Bänsch, Ralph Schneider, Ibrahim Akin, Cristoph A. Nienaber Heart Center Rostock, Hospital Universitário de Rostock, Alemanha
Os cardioversores-desfibriladores implantáveis (CDIs) de câmara dupla podem melhorar a detecção de fibrilação atrial, bem como a diferenciação de taquicardias. No entanto, essa vantagem é prejudicada por complicações associadas ao segundo eletrodo, que é necessário em dispositivos convencionais de câmara dupla. Portanto, a BIOTRONIK desenvolveu um novo eletrodo chamado LinoxSMART S DX que, quando usado em conjunto com o CDI Lumax DX, oferece detecção de câmara dupla sem os riscos associados ao segundo eletrodo.

Não há conflitos de interesse declarados.

fevereiro de 2012: este mês, em jove

February 2012: This Month in JoVE

A edição de fevereiro do Journal of Visualized Experiments (JoVE) aborda um tema clínico com o lançamento de dois artigos, que demonstram implantes de dispositivos médicos usados no tratamento de arritmia cardíaca. Mais especificamente, ambos os artigos se concentram no tratamento da fibrilação atrial - uma condição devastadora que pode levar ao derrame.
O primeiro procedimento, liderado pelo professor Dietmar Baensch, do Hospital Universitário de Rostock, envolve a implantação cirúrgica de um cardioversor-desfibrilador implantável, ou CDI. Os CDIs são dispositivos amplamente utilizados para a terminação de arritmias ventriculares. No entanto, se o local da marca-passo anormal for de origem supraventricular, como no átrio esquerdo, esses dispositivos podem aplicar choques inapropriados e dolorosos. Para superar esse problema com possíveis diagnósticos incorretos, bem como taxas de complicações mais altas observadas com elecectrodos de câmara dupla, a Biotronik desenvolveu um único eletrodo do CDI, capaz de detectar atriais e ventriculares. Guiados por fluoroscopia de raios-X e eletrofisiologia, o Dr. Baensch e sua equipe demonstram o procedimento cirúrgico para inserir, testar e ancorar o eletrodo de câmara única. Após o posicionamento do eletrodo, o desfibrilador Lumax é unido ao eletrodo e inserido no paciente. Para avaliar a função do dispositivo, a fibrilação ventricular é induzida por meio de um choque de onda T, e a capacidade do desfibrilador de detectar arritmia e administrar um choque corretivo é avaliada.
Enquanto o sistema Lumax CDI pode atenuar a arritmia cardíaca corrigindo o marcapasso cardíaco, o dispositivo de oclusão do apêndice atrial esquerdo (LAA) WATCHMAN da Boston Scientific foi projetado para tratar uma complicação grave com fibrilação atrial - acidente vascular cerebral tromboembólico. Em pacientes com fibrilação atrial, o apêndice atrial esquerdo, uma bolsa muscular no átrio esquerdo, pode atuar como um reservatório para a coagulação do sangue, que, se desalojado, pode formar êmbolos que podem causar acidente vascular cerebral. Quando implantado, o dispositivo WATCHMAN pode prender coágulos dentro do AAE antes que eles saiam. Após a avaliação da morfologia do AAE, nossos autores, liderados pelo Dr. Sven Möbius-Winkler, da Universidade de Leipzig, demonstram métodos para inserir um fio-guia através da artéria femoral no coração, avançar o dispositivo para o átrio esquerdo e implantar o dispositivo no apêndice atrial esquerdo. Estudos demonstraram que os pacientes que recebem intervenção WATCHMAN têm uma probabilidade reduzida de eventos cardíacos adversos quando comparados aos pacientes que recebem o medicamento anticoagulante varfarina.
Embora o sistema Lumax CDI e o dispositivo de oclusão WATCHMAN sejam promissores para o tratamento de arritmia cardíaca e suas complicações, nenhum dos dispositivos é aprovado para uso nos EUA. Por meio da publicação em vídeo no JoVE, nossos autores forneceram um recurso para os médicos dos EUA visualizarem esses procedimentos de implantação de dispositivos sensíveis antes que eles se tornem disponíveis do outro lado do Atlântico.
Uma consequência do tromboembolismo é a hipóxia, e JoVE viaja para a Universidade de Rochester para documentar um método para imagens de 2 fótons de hipóxia microrregional no córtex cerebral. Nossos autores ilustram uma preparação detalhada da janela craniana aberta seguida de imagens de 2 fótons da fluorescência endógena do dinucleotídeo nicotinamida adenina, ou NADH. O NADH é bem conhecido por sua capacidade de transportar elétrons durante a respiração celular, e acontece que a fluorescência do NADH exibe uma relação não linear com a pressão parcial de oxigênio nos tecidos. No córtex, a fluorescência do NADH aumenta à medida que a hipóxia é induzida, permitindo que esses investigadores determinem quais áreas corticais são mais vulneráveis à hipóxia, bem como o padrão geométrico de difusão de oxigênio dos vasos.
Para Bioengenharia, JoVE segue para a Wayne State University para capturar um procedimento para visualizar o microambiente do tumor de câncer de mama, in vitro. Nossos autores demonstram um procedimento para a montagem de um sistema de co-cultura de câncer de mama, ao qual se referem como Mammary Architecture e Microenvironment Engineering, ou MAME. Resumidamente, esses modelos de cultura consistem em uma camada de fibroblastos de mama humana na matriz de colágeno 1, abaixo de uma camada de matriz de membrana basal reconstituída, sobre a qual células de carcinoma ductal da mama são adicionadas antes que todo o modelo seja submerso em meio. Quando fotografado em 4D, ou em 3 dimensões ao longo do tempo, a proliferação de células de carcinoma pode ser rastreada. Além disso, a degradação da membrana basal também pode ser avaliada, graças à incorporação de um tipo de colágeno que fluoresce quando hidrolisado. Este sistema de cultura inovador pode fornecer informações para pesquisadores de câncer de mama sobre as vias proteolíticas que promovem fenótipos invasivos em células de câncer de mama e pode ser usado para rastrear novos inibidores de pequenas moléculas que podem impedir a proliferação do tumor.
Em Imunologia e Infecção, o JoVE muda seu foco para doenças transmitidas por vetores, onde pesquisadores do Centro de Controle de Doenças em Fort Collins, Colorado, apresentam três procedimentos fundamentalmente importantes para entender como os patógenos infecciosos migram através do carrapato. O primeiro procedimento envolve a remoção de uma das pernas do carrapato, o que permite a coleta de hemolinfa - o fluido transporta oxigênio para os órgãos do carrapato. A bactéria que causa a doença de Lyme, Borrelia burgdorferi, se moverá para a hemolinfa do carrapato assim que uma refeição de sangue for absorvida pelo intestino médio. O segundo protocolo de dissecção ilustra as etapas para acessar a hemocele e remover as glândulas salivares, que é onde Borrrelia reside antes da transmissão para um hospedeiro. O protocolo final inicia-se com a aplicação do agonista muscarínico, pilocarpina, na superfície dorsal de um carrapato ingurgitado, a fim de induzir a salivação. A saliva é coletada de um aparelho bucal conhecido como hipóstomo e são demonstradas técnicas manuais para promover a salivação do carrapato por meio de massagem suave.
De doenças transmitidas por vetores à implantação de dispositivos médicos, fevereiro está repleto de conteúdo enviado por autores dedicados à compreensão e tratamento de doenças humanas. Outros artigos notáveis para o mês de fevereiro incluem métodos para avaliar o potencial metastático do câncer de ovário, análise espacial de neuropeptídeos em um modelo de roedor de Parkinson e medições de pressão ventricular em camundongos neonatais e embrionários. Da bancada à beira do leito, nenhum outro periódico oferece uma janela para a pesquisa biomédica como o JoVE. Fique ligado no conteúdo de fevereiro!

Fevereiro de 2012: Este mês, em JoVE

A edição de fevereiro do Journal of Visualized Experiments (JoVE) adota um tema clínico com a publicação de dois artigos que demonstram a implantação de dispositivos médicos utilizados para tratar a arritmia cardíaca. Mais especificamente, ambos os artigos focam no tratamento da fibrilação atrial — uma condição devastadora que pode, em última análise, levar ao acidente vascular cerebral (AVC). O primeiro procedimento, liderado pelo Professor Dietmar Baensch, do Hospital Universitário de Rostock, envolve a implantação cirúrgica de um cardioversor desfibrilador implantável, ou CDI. Os CDIs são dispositivos amplamente utilizados para a terminação de arritmias ventriculares. No entanto, se o local do marcapasso anormal for de origem supraventricular, como no átrio esquerdo, esses dispositivos podem emitir choques inapropriados e dolorosos. Para superar esse problema de potenciais diagnósticos incorretos, bem como as taxas de complicações mais elevadas observadas com eletrodos de câmara dupla, a Biotronik desenvolveu um eletrodo de CDI único, capaz de realizar a detecção tanto atrial quanto ventricular. Orientados por fluoroscopia de raios X e eletrofisiologia, o Dr. Baensch e sua equipe demonstram o procedimento cirúrgico para a inserção, teste e ancoragem do eletrodo de câmara única. Após o posicionamento do eletrodo, o desfibrilador Lumax é conectado ao eletrodo e inserido no paciente. Para avaliar a função do dispositivo, a fibrilação ventricular é induzida via choque na onda T, e avalia-se a capacidade do desfibrilador de detectar a arritmia e administrar um choque corretivo. Enquanto o sistema CDI Lumax pode atenuar a arritmia cardíaca corrigindo o marcapasso cardíaco, o dispositivo de oclusão da apêndice atrial esquerda (AAE) WATCHMAN, da Boston Scientific, foi projetado para tratar uma complicação grave da fibrilação atrial: o AVC tromboembólico. Em pacientes com fibrilação atrial, a apêndice atrial esquerda, uma bolsa muscular no átrio esquerdo, pode atuar como um reservatório de sangue coagulado que, se deslocado, pode formar êmbolos capazes de causar um AVC. Quando implantado, o dispositivo WATCHMAN pode reter coágulos dentro da AAE antes que eles saiam. Após a avaliação da morfologia da AAE, os autores, liderados pelo Dr. Sven Möbius-Winkler, da Universidade de Leipzig, demonstram métodos para a inserção de um fio-guia através da artéria femoral até o coração, o avanço do dispositivo para o átrio esquerdo e a implantação do dispositivo na apêndice atrial esquerda. Estudos mostraram que pacientes submetidos à intervenção com WATCHMAN apresentam uma probabilidade reduzida de eventos cardíacos adversos quando comparados a pacientes tratados com o medicamento anticoagulante varfarina. Embora tanto o sistema CDI Lumax quanto o dispositivo de oclusão WATCHMAN sejam promissores para o tratamento da arritmia cardíaca e suas complicações, nenhum dos dois dispositivos está aprovado para uso nos EUA. Por meio da publicação em vídeo no JoVE, os autores forneceram um recurso para que médicos dos EUA possam visualizar esses procedimentos sensíveis de implantação de dispositivos antes que estejam disponíveis do outro lado do Atlântico. Uma consequência da tromboembolia é a hipóxia, e o JoVE vai até a Universidade de Rochester para documentar um método de imagem de 2 fótons da hipóxia microrregional no córtex cerebral. Os autores ilustram a preparação detalhada de uma janela craniana aberta, seguida por imagem de 2 fótons da fluorescência endógena de nicotinamida adenina dinucleotídeo, ou NADH. O NADH é bem conhecido por sua capacidade de transportar elétrons durante a respiração celular, e acontece que a fluorescência do NADH apresenta uma relação não linear com a pressão parcial de oxigênio nos tecidos. No córtex, a fluorescência do NADH aumenta à medida que a hipóxia é induzida, permitindo que esses investigadores determinem quais áreas corticais são mais vulneráveis à hipóxia, bem como o padrão geométrico de difusão de oxigênio a partir dos vasos. Para Bioengenharia, o JoVE vai à Wayne State University para registrar um procedimento de visualização do microambiente tumoral do câncer de mama in vitro.

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Explore os destaques da edição de fevereiro de 2012 do JoVE em neurociência e biologia. Descubra protocolos experimentais visualizados que aprimoram a comunicação científica e facilitam a reprodutibilidade.

Fevereiro de 2012: Este mês, em JoVE (Vídeo) | JoVE Journal

Aaron Kolski-Andreaco

Fevereiro de 2012: Este mês, em JoVE

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