18 de janeiro de 2013
Jogar lutando no rato envolve ataque e defesa da nuca, que se contatado, é suavemente acariciou com o focinho. Porque os movimentos de um animal são contrariadas pelas ações de sua parceira, a luta é um jogo de interação, complexo e dinâmico. Esta complexidade dinâmica levanta problemas metodológicos sobre o que marcar para estudos experimentais. Nós apresentamos um esquema de pontuação que é sensível à natureza correlata das ações realizadas. Duas experiências ilustram a forma como estas medidas podem ser usados para
O objetivo deste procedimento é criar um ambiente controlado que maximize a ocorrência de comportamentos lúdicos e analisar a organização do comportamento lúdico resultante. Isso é feito primeiro criando um cenário natural para brincar de luta. Isso envolve o comportamento sendo conduzido no escuro, além de fornecer uma arena de teste com roupas de cama para fornecer um ambiente confortável.
A segunda etapa consiste em habituar os pares de animais ao aparelho de ensaio durante três dias consecutivos com uma duração de 30 minutos. Em seguida, o animal deve ser isolado por 24 horas antes do teste de luta. A etapa final é testar cada par na arena de jogo por 10 minutos.
Em última análise, o uso dessas etapas simples cria um contexto que facilita o jogo e pode ser usado para revelar diferenças devido a manipulações experimentais. A principal vantagem desta técnica em comparação com algumas outras técnicas, como gravação, comportamento natural em uma ninhada, é que grandes quantidades de dados podem ser coletadas em um curto período de tempo e os parceiros de brincadeira podem ser padronizados. Embora esse método possa fornecer informações sobre interações lúdicas, ele também pode ser aplicado a outros sistemas, como outras espécies ou linhagens modelo.
Os animais utilizados para testes são desmamados entre os dias 21 e 23 do pós-natal e, dependendo da conceção experimental, os animais podem ser alojados juntos após o desmame em grupos de dois a quatro nas combinações de machos e fêmeas exigidas. Os pares que estão alojados juntos também são habituados por três sessões de 30 minutos diretamente antes do início do teste. Para fazer isso, os animais são transportados para a sala de testes escura
.A habituação e o teste de brincadeiras ocorrem durante o ciclo de luz de um animal. Embora o teste ocorra em uma sala escura Enquanto eles estão testando a fase clara ou a fase escura do ciclo diário do rato, há nossa experiência de que os aumentos de jogo foram testados em condições de luz vermelha em comparação com condições de luz branca. Embora aqui optemos por testar na escuridão total, Os animais são colocados na caixa de jogo para habitação.
O aparelho de caixa de jogo é uma caixa de plexiglass transparente medindo 50 centímetros por 50 centímetros por 50 centímetros com um a dois centímetros de cama de espiga de milho padrão. Após a primeira sessão de habituação, os indivíduos são removidos da caixa de brincar e colocados juntos em sua gaiola doméstica. Em seguida, a roupa de cama é descartada e o aparelho de brincar é cuidadosamente limpo com o anti-séptico vercon ou equivalente.
Este é um agente superior para limpar os odores de rato do par anterior, pois não deixa o cheiro forte e persistente de lenços umedecidos ou sprays com álcool. Uma nova roupa de cama é então adicionada e a sessão de habitação para o próximo par começa. Este processo é repetido até que todos os pares tenham sido habituados por três sessões de 30 minutos.
Após a habituação, os pares são isolados individualmente 24 horas antes do teste para maximizar as interações lúdicas. Breves períodos de isolamento social aumentam a motivação para se envolver em brincadeiras sociais, embora não tenham um efeito semelhante em outros comportamentos sociais, como a investigação social. Embora qualquer isolamento tenha esse efeito, o impacto do isolamento no jogo atinge uma assíntota em torno de 24 horas.
No dia do teste, os ratos habituados são transportados para a sala de testes escura. Os pares separados são então reunidos quando colocados na caixa de reprodução, certifique-se de que a câmera de vídeo no tripé esteja corretamente posicionada em um ângulo de 45 graus voltada para baixo em direção ao manual e que todos os quatro cantos da caixa estejam visíveis na tomada para obter uma visão completa do aparelho, comece a filmar no modo de tomada noturna e teste o par por 10 minutos. Embora os testes durem cinco minutos para detectar mudanças de comportamento induzidas pelo isolamento, eles são muito curtos para detectar diferenças sutis devido a um efeito de teto.
Aos 15 minutos, os animais parecem cansados pela brincadeira vigorosa e, consequentemente, os testes com duração de 10 minutos parecem ser um bom compromisso entre a economia do protocolo e também a capacidade de detectar efeitos experimentais. Passados os 10 minutos, remova os animais, limpe as caixas de jogo antes e teste o próximo par. Este vídeo mostra um rato atacado empregando defesa evasiva.
Aqui o defensor pode andar, correr, pular ou se esquivar e, ao fazer isso, não apenas afasta a napa do atacante, mas também acaba de costas para o atacante. À medida que o rato na extrema esquerda se aproxima, a nuca do outro, o destinatário salta para frente e para longe do atacante. Uma ação defensiva em que o rato se vira para enfrentar seu atacante pode ocorrer em dois tipos de EAs de rotação.
No primeiro, ele gira em torno do eixo longo do corpo. Então aqui está o nariz, aqui está o corpo, e ele gira o corpo. Neste plano, na outra forma, o rato vira para o rosto, mas em torno de um eixo vertical estão mantendo o corpo horizontal enquanto ele se vira para o outro animal.
Agora, também nesta rotação do eixo longitudinal, existem duas formas distintas dessa ação específica. A rotação completa em torno do eixo longitudinal envolve o rato girando de uma posição em pé para totalmente supino. À medida que o rato à esquerda ataca a nuca, o receptor afasta o cochilo rolando ao redor do eixo longitudinal de seu corpo e termina em uma posição totalmente supina.
Observe que o rolo para trás é um movimento contínuo com duração de três a quatro quadros. A rotação parcial em torno do eixo longitudinal envolve o rato girando seus quatro quartos, mas deixando uma ou ambas as patas traseiras em contato com o solo. Quando o atacante na frente alcança a nuca, o destinatário rola seus quatro quartos para longe, mas mantém as patas traseiras no chão.
Essa orientação é mantida à medida que o invasor continua a alcançar a nuca. A rotação horizontal em torno do eixo vertical exige que o defensor afaste sua garupa de seu atacante enquanto move sua cabeça em direção a ele. Aqui, quando o atacante na retaguarda alcança a nuca, o destinatário gira em torno de um eixo vertical para ficar de frente para o atacante, mantendo as costas voltadas para o bosque celeste.
Imediatamente após uma defesa de rotação vertical ou uma defesa de rotação longitudinal parcial, o animal defensor pode se levantar em direção ao seu oponente e o animal atacante pode simplesmente se levantar para enfrentá-lo, de modo que acabe convergindo para essa posição vertical, o que nos diz que, independentemente de onde foram os movimentos iniciais que iniciaram a defesa, eles podem convergir para o mesmo resultado. A possível confusão de focar no resultado e não nos movimentos iniciais é ainda mais exagerada, onde comparamos casos de rotação completa com rotação parcial em torno do eixo longitudinal. Neste vídeo, quando o invasor alcança a nuca, o destinatário rola de costas e, assim, protege a napa conforme mostrado acima.
Essa visão dessa manobra enfatiza a ação defensiva fluida e rápida, que dura de dois a três quadros. Uma rotação parcial em torno da longitudinal também pode às vezes levar o animal defensor a acabar deitado de costas, assim como acontece com uma rotação completa. Mas como ele chega lá em comparação com uma rotação completa é muito diferente em uma rotação completa, pois um animal ataca o cochilo ou o outro, este rola suave e continuamente de costas em um, em um caso em que está realizando uma rotação parcial, e assim movendo o cochilo para longe, este animal está atacando o cochilo e não girando mais do que isso.
Mas então o animal atacante pode continuar alcançando, empurrando à medida que avança, levando o que está defendendo a rolar gradualmente cada vez mais e mais até que esteja de costas. Então, neste caso, mesmo que ele caia de costas a partir de uma rotação parcial, é a ação de pressão e o ataque contínuo do animal atacante que o leva a essa posição, não porque o animal realmente opte por rolar de costas. Este vídeo mostra um exemplo do defensor sendo forçado a ficar em decúbito dorsal.
À medida que o invasor alcança a nuca, o destinatário gira. Seus quatro quartos se movendo. Sua nuca longe do atacante.
Em seguida, o atacante continua a avançar alcançando a nuca, e o defensor continua a manter contato com pelo menos um derramamento traseiro no chão por 21 a 22 frames antes de terminar em uma posição totalmente supina. Como a maioria dos estudos está interessada no efeito de manipulações específicas em um sujeito, pontue o comportamento pela tática defensiva tentada pelo sujeito, e não pelo resultado final. Este julgamento pode ser feito examinando os movimentos do defensor nos primeiros dois a três quadros do início de uma ação defensiva.
Ataques lúdicos podem ser medidos quando o focinho de um rato entra em contato ou fica a menos de um a dois centímetros da nuca de seu parceiro. À medida que o rato à direita cheira o outro rato, ele gradualmente move o contato do focinho da garupa em direção aos ombros. Uma vez perto da nuca, o destinatário se vira para o rosto, bloqueando o contato posterior.
Observe que o animal à direita nunca faz um movimento direcionado em direção à napa do outro rato e, portanto, não é considerado um ataque. Como observado acima, a tática defensiva do destinatário pode ser categorizada nos primeiros quadros após um ataque. Este vídeo mostra uma sessão de jogo estendida.
O atacante alcança a nuca. O destinatário rola de costas com o ataque continuando a se mover em direção à nuca. O contato com a nuca é repetidamente interrompido, mas não há interrupção nos movimentos de ataque e defesa levando à recuperação do contato da nuca.
Este vídeo mostra ataques lúdicos separados enquanto o rato à esquerda ataca a nuca, o destinatário rola parcialmente para o lado. O atacante segue a nuca, mas depois se afasta quebrando o contato. Em seguida, ele salta para frente e se vira para enfrentar novamente e lança um novo ataque.
Em todos os casos, uma nova sequência de pontuação começa com um novo ataque. Os ratos podem contra-atacar depois de se defenderem com sucesso, como visto aqui, quando o rato mais próximo da câmera se aproxima do outro. O destinatário se vira e ataca a nuca.
O defensor então bloqueia o ataque, recupera o equilíbrio e marca seu próprio ataque. No entanto, como o CounterTack está altamente correlacionado com a frequência de início de ataques, as fases mais complexas dessas interações não precisam ser pontuadas, a menos que haja uma boa razão para fazê-lo. Ao marcar o jogo, há uma análise sequencial.
Quantos ataques são lançados pelos sujeitos? Quantos ataques são defendidos contra e ao defender? Qual é a probabilidade de usar as diferentes táticas de defesa?
A remoção completa do córtex pode levar a ratos adultos que funcionam de forma relativamente normal em ambientes de laboratório. No entanto, efeitos comportamentais mais sutis podem ser negligenciados. O protocolo descrito neste vídeo foi usado para testar se os jogadores reduziram em ratos sem córtex.
A brincadeira de luta de ratos juvenis e adultos, corticados ao nascimento, foi comparada com controles tratados com simulação. Pode-se observar que o número de pinos, rotações parciais e rotações completas diferiram entre animais intactos e decorticados. Três ratos adultos, dois machos e uma fêmea estéril foram alojados juntos por um período de duas semanas.
Os animais foram então testados em testes prejudicados para determinar qual dos machos em cada tríade era o subordinado. Os subordinados em algumas tríades tiveram seu córtex frontal orbital removido e, em outras tríades, os subordinados foram tratados de forma simulada. Este gráfico mostra a mudança na assimetria demonstrada pelos ratos machos subordinados ao brincar com o macho da colônia dominante em comparação com a fêmea da colônia.
A medida mostra a diferença percentual no uso da rotação completa ao interagir com esses dois tipos de parceiros. Lesões do córtex frontal orbital abolem a capacidade do subordinado de brincar diferencialmente com seus companheiros de gaiola, tratados simuladamente, os machos subordinados continuam a mostrar uma forte assimetria após a cirurgia Uma vez dominado. Essa técnica pode ser concluída em uma a duas horas por sessão de filme.
Se feito corretamente Ao tentar este procedimento, é importante lembrar de ser consistente com sua metodologia de codificação.
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Este estudo investiga o comportamento de brincadeira lúdica em ratos, concentrando-se nas interações entre parceiros durante essa atividade dinâmica. Um esquema de pontuação é introduzido para avaliar a complexidade dessas interações e detectar alterações decorrentes de lesão cerebral.
Este método fornece uma estrutura quantitativa para avaliar comportamentos sociais complexos em modelos de roedores, permitindo a detecção de alterações sutis nos circuitos neurais que podem não afetar os níveis gerais de atividade. Ao medir respostas defensivas contingentes e a seleção de táticas, oferece uma compreensão mecanicista das regiões cerebrais que governam a tomada de decisões sociais. Isso apoia a validação de alvos na descoberta de fármacos neuropsiquiátricos, onde fenótipos comportamentais sutis predizem relevância clínica.
O ensaio integra-se nos fluxos de trabalho iniciais de descoberta, especialmente para a validação de alvos em distúrbios do SNC onde o comportamento social é um desfecho translacional fundamental, conectando a triagem fenotípica à desmistificação mecanicista.