21 de dezembro de 2012
Perda da integridade peritoneal oferece um novo paradigma para entender e tratar a dor pélvica crônica em mulheres com formas leves de endometriose e pode ser facilmente detectada usando intra instilação de corante no momento da laparoscopia.
O objetivo geral do experimento a seguir é fornecer aos profissionais que tratam mulheres com dor pélvica um método simples para destacar a presença e a extensão da endometriose sutil. Isso é alcançado primeiramente realizando um levantamento da endometriose visível para identificar a doença evidente. Como segundo passo, aplica-se o corante azul de metileno, que revela áreas de endometriose sutil que poderiam ser ignoradas pela laparoscopia convencional.
Em seguida, todas as áreas coradas em azul são ressecadas para eliminar completamente a doença no paciente. Os resultados obtidos por microscopia eletrônica de varredura mostram que essa abordagem remove endometriose invisível que afeta as células peritoneais subjacentes, o que por sua vez permite que o sangue menstrual ou ovulatório entre em contato com os nervos sensoriais que inervam a pelve, causando dor. As implicações dessa técnica estendem-se tanto para o diagnóstico quanto para o tratamento da endometriose, pois permitem identificar alterações sutis e até mesmo endometriose invisível que possam comprometer a superfície peritoneal e permitir que o sangue entre em contato com os nervos subjacentes aos tecidos, explicando a dor que essas pacientes estão experimentando.
Normalmente na ovulação ou menstruação, um pouco de sangue entra na cavidade pélvica. O revestimento da pelve e do abdome contém uma camada intacta de mesotélio que impede que esse sangue ou os fatores presentes no sangue que causam dor entrem em contato com as fibras nervosas sensoriais. Em mulheres com endometriose, as células endometrioides inflamatórias podem fazer com que as células peritoneais percam seus contatos célula a célula, permitindo que o sangue alcance os tecidos subjacentes e as fibras nervosas.
Essas lacunas nas células mesoteliais podem ser observadas por microscopia eletrônica de varredura, mas também são a razão pela qual o corante azul pode corar os tecidos subjacentes onde atua. Mulheres que apresentam dor pélvica crônica são inicialmente entrevistadas para determinar seu histórico médico e detalhes relacionados à localização da dor e ao seu momento no ciclo menstrual; sintomas associados, incluindo queixas de intestino irritável ou queixas vesicais, são anotados e registrados. Além disso, um exame físico é realizado na paciente após a seleção da paciente.
Certifique-se de solicitar às mulheres submetidas à laparoscopia o consentimento para possível ressecção de endometriose e uso de seus tecidos para pesquisa. Realize a laparoscopia utilizando técnicas padrão por meio de um acesso umbilical de cinco milímetros e acessos adicionais de cinco milímetros no baixo-ventre. Inspecione cuidadosamente a pelve para correlacionar quaisquer achados de endometriose com a localização pré-operatória da dor indicada pela paciente.
Em seguida, misture o corante azul de metileno na proporção de um para 200 com soro fisiológico estéril e use uma agulha de aspiração para injetar a solução nas superfícies pélvicas. Depois, realize irrigação com sucção para remover o corante em excesso e lavar as superfícies peritoneais. Novamente, inspecione cuidadosamente a pelve e registre quaisquer áreas com captação do corante azul.
Quando possível, realize uma ressecção das áreas afetadas do peritônio. Após a conclusão da ressecção, inspecione a pelve para confirmar a ausência de sangramento. Em seguida, libere o gás CO2, remova os instrumentos e feche as incisões com um adesivo tecidual.
Após repousar por uma hora na sala de recuperação, o paciente pode ir para casa. Para documentar a endometriose invisível por microscopia eletrônica de varredura, primeiro suturar as seções peritoneais em uma gaze estéril para aplainar o espécime e manter a orientação com o lado intraperitoneal voltado para cima. Em seguida, colocar as seções no fixador de glutaraldeído para MEV. Uma vez adequadamente fixadas, as amostras podem ser processadas para microscopia eletrônica de varredura em um paciente diferente, com ressecção prévia de endometriose da bexiga, que não apresenta mais dor nessa região.
O corante não corou as superfícies peritoneais, o que reforça a associação entre a coloração com corante azul e a presença de dor pélvica. Esta imagem da superfície peritoneal foi obtida de uma mulher com dor pélvica crônica e queixas urinárias que pioravam no período menstrual. A imagem laparoscópica foi capturada antes da aplicação do corante azul e, apenas o reflexo da luz laparoscópica revelou áreas suspeitas de lesões claras de endometriose, conforme indicado pelas setas nesta imagem. Na mesma região, pode-se observar que o corante azul aplicado na bexiga corou porções distintas do peritônio.
Esta imagem mostra uma ressecção do peritônio sobrejacente à bexiga, e esta imagem mostra as células dessa área conforme visto por microscopia eletrônica de varredura. A amostra foi preparada de acordo com procedimentos padrão e revestida por pulverização com liga de ouro e platina com espessura de 20 nanômetros. Pode-se observar que o peritônio está recoberto por células consideradas endometriose, e as células mesoteliais do peritônio apresentam lacunas em seus contatos célula-célula, expondo a matriz extracelular subjacente.
Enquanto esta imagem de microscopia eletrônica de varredura de uma amostra normal de peritônio preparada da mesma maneira mostra que as células epiteliais do peritônio normal estão firmemente conectadas. Como você pode ver, esta é uma técnica bastante simples que pode ser utilizada em seus procedimentos laparoscópicos para ajudar a identificar endometriose sutil e invisível que está causando permeabilidade nas superfícies peritoneais. Ao ressecar toda a lesão juntamente com todas as células endometrioides, você oferece ao seu paciente a melhor chance de alívio da dor.
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Este estudo apresenta um método para detectar endometriose sutil em mulheres com dor pélvica crônica. Ao utilizar corante azul de metileno durante a laparoscopia, os profissionais podem identificar e ressecar áreas de endometriose que podem não ser visíveis por meio de técnicas convencionais.
Este estudo apresenta uma técnica baseada no corante azul de metileno para detectar endometriose sutil durante a laparoscopia, abordando uma lacuna diagnóstica importante em mulheres com dor pélvica crônica. Ao permitir a visualização e ressecção da perda da integridade peritoneal, o método apoia a redução de riscos mecanicistas na pesquisa da endometriose e pode melhorar a validação de alvos em estudos de vias da dor. A abordagem oferece uma ferramenta reprodutível e de baixa complexidade para modelos pré-clínicos que investigam interações entre o peritônio e os nervos na dor pélvica.
O método se insere no espectro contínuo da pesquisa sobre endometriose, desde a descoberta inicial (teste de hipóteses por captação de corante) até a validação pré-clínica (confirmação ultraestrutural) e intervenção terapêutica (ressecção), apoiando a desmistificação iterativa de alvos.