Name: Abril 2012: Este mês na JOVE (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-04-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 13 s
Description: Descubra técnicas experimentais inovadoras em neurociência e biologia através de vídeos demonstrativos. Este resumo destaca métodos visuais que avançam a pesquisa científica e incentivam a reprodutibilidade.

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<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3646">Sistema de cultura de filme de fibroína de seda para análise in vitro e design de biomateriais</a></h2>
Brian D. Lawrence1, Zhi Pan2, 1, Michael D. Weber1, David L. Kaplan3, Mark I. Rosenblatt1 1Margaret M. Dyson Vision Research Institute, Weill Cornell Medical College, 21Instituto de Pesquisa de Visão Margaret M. Dyson, Faculdade de Medicina Weill Cornell, 3Departamento de Engenharia Biomédica, Universidade Tufts
Os filmes de seda são uma nova classe de biomateriais prontamente personalizáveis para uma variedade de aplicações biomédicas. O sistema de cultura de filme de seda apresentado é altamente adaptável a uma variedade de análises in vitro. Este sistema representa uma plataforma de design de biomateriais que oferece otimização in vitro antes da tradução direta para modelos in vivo.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3666">Indução de Infarto do Miocárdio em Peixe-Zebra Adulto usando Criolesão</a></h2>
Fabian Chablais, Anna Jaźwińska Departamento de Biologia, Unidade de Zoologia, Universidade de Friburgo, Friburgo, Suíça
O peixe-zebra representa um modelo valioso para estudar os mecanismos de regeneração cardíaca em vertebrados. Aqui, apresentamos um protocolo para indução de infarto cardíaco em peixe-zebra adulto usando criolesão. Este método resulta em morte celular maciça dentro de 20% da parede ventricular, semelhante à observada em infartos de mamíferos.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3680">Segmentação e Medição de Volumes de Gordura em Modelos de Obesidade Murina Usando Tomografia Computadorizada de Raios-X</a></h2>
Todd A. Sasser1, Sarah E. Chapman2, Shengting Li1, Caroline Hudson2, Sean P. Orton1, Justin M. Diener3, Seth T. Gammon1, Carlos Correcher4, W. Matthew Leevy2 1Carestream Molecular Imaging , 2Departamento de Química e Bioquímica, Universidade de Notre Dame , 3Freimann Life Science Center, Universidade de Notre Dame , 4Pesquisa e Desenvolvimento, Oncovision, GEM-Imaging S.A.
A análise do teor de gordura é realizada rotineiramente em estudos que utilizam modelos de obesidade murina. Métodos emergentes em imagens e análises de TC de pequenos animais estão fornecendo análises longitudinais de conteúdo de gordura rica em detalhes. Aqui, detalhamos os procedimentos passo a passo para realizar imagens, análises e visualização de tomografia computadorizada de pequenos animais.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3793">Radiocirurgia Estereotáxica para Câncer Ginecológico </a></h2>
Charles Kunos1, James M. Brindle1, Robert Debernardo2 1Departamento de Oncologia de Radiação, Hospitais Universitários Case Medical Center e Case Western Reserve University School of Medicine, 2Departamento de Obstetrícia e Ginecologia, Divisão de Oncologia Ginecológica, Hospitais Universitários Case Medical Center e Faculdade de Medicina da Universidade Case Western Reserve
A radioterapia estereotáxica corporal (SBRT) envolve radiação ablativa guiada por imagem administrada a alvos de câncer refratários à quimioterapia ou ao tratamento com radiação convencional. O sistema Cyberknife SBRT armado com robótica, usando localização sofisticada de alvos, fornece doses de radiação hipofracionadas capazes de esterilizar alvos de câncer. Este artigo considerará novos papéis terapêuticos do SBRT para cânceres ginecológicos.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3992">Estabelecimento de Culturas de Enriquecimento Eucariótico Microbiano de um Lago Antártico Quimicamente Estratificado e Avaliação do Potencial de Fixação de Carbono</a></h2>
Jenna M. Dolhi, Nicholas Ketchum, Rachael M. Morgan-Kiss Departamento de Microbiologia, Universidade de Miami 
Os eucariotos microbianos são uma fonte de carbono derivado fotossinteticamente e as principais espécies predadoras em lagos antárticos permanentemente cobertos de gelo. Este relatório descreve uma abordagem de cultura de enriquecimento para isolar eucariotos microbianos metabolicamente versáteis do lago antártico, Lago Bonney, e avalia o potencial de fixação de carbono inorgânico usando um ensaio de radioisótopo para a atividade da ribulose-1,5-bisfosfato carboxilase oxigenase (RubisCO).
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/4008">Carga retrógrada de nervos, tratos e raízes espinhais com corantes fluorescentes</a></h2>
Dvir Blivis, Michael J. O'Donovan Seção de Neurobiologia do Desenvolvimento, Instituto Nacional de Distúrbios Neurológicos e Derrame, Institutos Nacionais de Saúde
Descrevemos uma técnica simples e de baixo custo para a introdução de alta concentração de corantes fluorescentes e sensíveis ao cálcio em neurônios ou em qualquer trato neuronal usando uma pipeta de sucção de polietileno.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3823">Um sistema de cultura de neurônios primário para o estudo da latência e reativação do vírus Herpes Simplex</a></h2>
Mariko Kobayashi1, Ju-Youn Kim1, Vladimir Camarena2, Pamela C. Roehm3, Moses V. Chao4, 2, 5, 6, 7, Angus C. Wilson1, Ian Mohr1 1Departamento de Microbiologia, Escola de Medicina da Universidade de Nova York, 2Programa de Neurobiologia Molecular, Instituto Skirball de Medicina Biomolecular, Escola de Medicina da Universidade de Nova York, 3Departamento de Otorrinolaringologia, Escola de Medicina da Universidade de Nova York, 4Departamento de Biologia Celular, Escola de Medicina da Universidade de Nova York, 5Departamento de Fisiologia e Neurociência, Escola de Medicina da Universidade de Nova York, 6Departamento de Psiquiatria, Escola de Medicina da Universidade de Nova York, 7Centro de Ciências Neurais, Escola de Medicina da Universidade de Nova York
O protocolo descreve um sistema modelo eficiente e reprodutível para estudar a latência e reativação do vírus herpes simplex tipo 1 (HSV-1). O ensaio emprega culturas homogêneas de neurônios simpáticos e permite a dissecação molecular das interações vírus-neurônio usando uma variedade de ferramentas, incluindo interferência de RNA e expressão de proteínas recombinantes.

Não há conflitos de interesse declarados.

abril 2012: este mês na jove

April 2012: This Month in JoVE

A edição de abril do Journal of Visualized Experiments (JoVE) inclui um artigo que segue um laboratório da Universidade de Miami de Ohio até o Lago Bonney - um lago salino permanentemente coberto de gelo na Antártida. Poucos organismos podem sobreviver às duras condições sob o gelo, onde a luz, o calor e as fontes de carbono são muito escassos. Microrganismos unicelulares chamados protistas são a principal classe de micróbios que vivem sob o Lago Bonney e são capazes de trazer carbono, via fotossíntese, para o círculo da vida.
Depois de determinar o local de amostragem apropriado, nossos autores perfuram e derretem o gelo para que possam coletar amostras de várias profundidades dentro da coluna de água quimicamente estratificada do lago. Uma vez coletadas, as amostras são levadas a um laboratório de campo para filtração e estabilização. Após o processamento, os micróbios presentes na amostra de água são cultivados para experimentação posterior. Por exemplo, nossos autores mostram que suas culturas de enriquecimento retêm atividade fotossintética, e experimentos futuros devem ajudar a entender melhor a fisiologia protista, bem como como esses organismos podem afetar o ciclo geoquímico global.
Na Medicina Clínica e Translacional, o JoVE volta sua atenção para a radioterapia estereotáxica corporal, ou SBRT, para o tratamento de tumores ginecológicos. O SBRT é uma forma minimamente invasiva de tratamento do câncer que depende da radiação, fornecida por um acelerador linear montado em um braço robótico, para inativar biologicamente os tumores.
Nossos autores, do Case Medical Center, explicam como os marcadores fiduciais de tecidos moles dourados são colocados ao redor do alvo do câncer em várias profundidades com base na imagem de tomografia computadorizada. Durante uma sessão de planejamento de tratamento, imagens de TC e PET são tiradas e, em seguida, co-registradas. Guiados por essas imagens, os oncologistas de radiação e ginecológicos designam os volumes de câncer que serão direcionados durante a terapia, bem como contornam as estruturas normais circundantes que devem ser deixadas ilesas. No início do tratamento, um sistema de localização de alvos detecta os marcadores fiduciais por meio de imagens radiográficas de plano cruzado e a localização do marcador é comparada com os dados de imagem obtidos anteriormente.
Durante o tratamento, os diodos emissores de luz rastreiam o movimento do paciente, a fim de correlacionar seu padrão respiratório com a localização dos marcadores fiduciais, para que a radiação possa ser aplicada com precisão. Superando as complicações associadas à imobilização do paciente, nossos autores mostram que seu procedimento de radioterapia corporal estereotáxica pode fornecer radiação com precisão ao volume alvo, limitando a dosagem às estruturas próximas.
Em nossa seção de Bioengenharia, JoVE apresenta um artigo, que envolve a fabricação de substratos biocompatíveis a partir de casulos de bicho-da-seda. Primeiro, os casulos são rastreados quanto à contaminação e processados para que o extrato de seda seja produzido. O extrato é colocado sobre um molde PDMS, que foi projetado para criar um padrão na secagem do filme de seda em sua superfície. Depois de seco, o filme de seda é submetido a um processo conhecido como recozimento com água, que torna o filme transparente e perfeito para microscopia. Após a semeadura celular nos filmes, nossos autores mostram que rastrear a migração celular no substrato de seda micropadronizado é tão fácil quanto em superfícies de cultura de tecidos mais convencionais. A biocompatibilidade dos filmes de seda, bem como seu potencial de serem modificados química e estruturalmente, os tornam materiais candidatos atraentes para aplicações in vivo, como design de dispositivos médicos.
Surpreendentemente, a cultura neuronal primária chega à nossa seção de Imunologia e Infecção, porque em abril deste ano, o JoVE documenta um sistema inovador de cultura de neurônios simpáticos primários usado para estudar a latência e ativação do vírus herpes simplex.
Os neurônios periféricos agem como reservatórios para o vírus do herpes que são a fonte de eventos de reativação. Para estabelecer uma cultura de neurônios periféricos, os gânglios cervicais superiores são isolados de camundongos embrionários e, após a digestão e dissociação, são semeados em placas de 96 poços. Por volta do dia 6 in vitro, os vírus do herpes que codificam uma proteína de fusão viral-GFP são adicionados às células junto com um inibidor da replicação lítica. Após a retirada do inibidor, o vírus latente será reativado e a expressão de GFP será observável por microscopia fluorescente. Ao contar o número de poços que exibem fluorescência GFP, a capacidade de pequenas moléculas ou oligonucleotídeos silenciadores de genes de suprimir ou induzir a reativação viral pode ser testada, tornando este ensaio uma ferramenta potencial para descobrir novas terapias para ajudar a controlar a infecção por HSV-1.
Este breve resumo descreve apenas quatro dos cinquenta artigos que o JoVE lançará em abril. Outros lançamentos notáveis incluem métodos para quantificar a obesidade em ratos usando tomografia computadorizada de raios-x, induzindo infarto do miocárdio no coração do peixe-zebra e rotulagem retrógrada da medula espinhal excisada. Fique ligado.

Abril 2012: Este mês na JOVE

The April issue of the Journal of Visualized Experiments (JoVE) includes an article that follows a lab from the University of Miami of Ohio to Lake Bonney ...

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Descubra técnicas experimentais inovadoras em neurociência e biologia através de vídeos demonstrativos. Este resumo destaca métodos visuais que avançam a pesquisa científica e incentivam a reprodutibilidade.

Abril 2012: Este mês na JOVE (Vídeo) | JoVE Journal

Aaron Kolski-Andreaco

Abril 2012: Este mês na JOVE

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