Super-Resolution Imaging da Divisão de Máquinas bacteriana

O objetivo geral do experimento a seguir é obter informações estruturais quantitativas sobre as proteínas de divisão celular de e coli em seu ambiente nativo. Isso é conseguido expressando uma proteína de fusão fluorescente fotoativa em células vivas e imobilizando essas células em uma almofada de acro gel. As células são então fotografadas via streaming de vídeo.

Enquanto os lasers de excitação e ativação são aplicados para visualizar locais de moléculas únicas, os filmes resultantes são analisados computacionalmente para extrair as posições das moléculas com precisão nanométrica e sobrepô-las para gerar uma imagem de super-resolução. Esta imagem pode então ser analisada por uma variedade de medições quantitativas que descrevem a estrutura de interesse, incluindo suas dimensões e densidade de moléculas. A localização fotoativada, microscopia ou palma da mão é uma técnica de microscopia de fluorescência de super resolução facilmente implementada.