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A Plataforma de Produção de Proteína Complexo MultiBac no EMBL
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JoVE Journal Biology
The MultiBac Protein Complex Production Platform at the EMBL

A Plataforma de Produção de Proteína Complexo MultiBac no EMBL

Full Text
16,686 Views
13:51 min
July 11, 2013

DOI: 10.3791/50159-v

Imre Berger1, Frederic Garzoni1, Maxime Chaillet1, Matthias Haffke1, Kapil Gupta1, Alice Aubert1

1EMBL Grenoble Outstation and Unit of Virus Host Cell Interactions (UVHCI) UMR5322

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Complexos proteína de catalisar as funções celulares importantes. Caracterização estrutural e funcional detalhada de muitos complexos essenciais exige a produção recombinante. MultiBac é um sistema de células de baculovirus / insecto particularmente adaptado para a expressão de proteínas eucarióticas e seus complexos. MultiBac foi implementado como uma plataforma de acesso aberto, e procedimentos operacionais padrão desenvolvidos para maximizar a sua utilidade.

O objetivo geral deste procedimento é produzir complexos de proteínas usando o sistema de células de insetos do vírus multi back baula. Isso é feito gerando primeiro a construção multigênica, codificando o complexo proteico de escolha. O segundo passo é fazer um vírus baula composto que contenha a construção multigênica, transformando células bacterianas e rastreando os médios traseiros corretos.

Em seguida, isole o genoma viral do baula e use-o para infectar células de insetos em pequena escala em uma placa de seis poços após o teste de produção de proteínas. O complexo proteico de escolha é expresso em maior escala e purificado. Em última análise, o complexo de proteínas purificadas é usado para descobrir sua estrutura e função e, potencialmente, para a descoberta de medicamentos.

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