Medindo o transporte de catiões de Na, K e H, K-ATPase em Xenopus Oócitos por espectrofotometria de absorção atômica: uma alternativa para Ensaios de Radioisótopos

O procedimento usa citos de sapo como um sistema de expressão in vivo. Para quantificar a atividade de transporte do contra-transporte de potássio P-tipo A, TP, ais ou outros transportadores de membrana de oligoelementos, primeiro expresse a proteína transportadora em zap lavis. Os citos então induzem a captação de cátions incubando as células em solução de fluxo contendo uma certa concentração do cátion transportado por um tempo e temperatura fixos.

Alternativamente, execute o experimento de captação sob controle de potencial de membrana usando a técnica de grampo de tensão de dois eletrodos. Após a lavagem das células homogeneizam, oócitos individuais em um mililitro de água milipore. Em seguida, meça as amostras em um espectrofotômetro de absorção atômica equipado com um forno atomizado de grafite aquecido transversalmente.