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Injeção estereotáxica de um vetor viral para manipulação genética condicional no Cabo de Rato Spinal
Injeção estereotáxica de um vetor viral para manipulação genética condicional no Cabo de Rato Spinal
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JoVE Journal Neuroscience
Stereotaxic Injection of a Viral Vector for Conditional Gene Manipulation in the Mouse Spinal Cord

Injeção estereotáxica de um vetor viral para manipulação genética condicional no Cabo de Rato Spinal

Full Text
32,153 Views
08:39 min
March 18, 2013

DOI: 10.3791/50313-v

Perrine Inquimbert1, Martin Moll2, Tatsuro Kohno3, Joachim Scholz2

1Département Nociception et Douleur, Institut des Neurosciences Cellulaires et Intégratives,Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), 2Departments of Anesthesiology and Pharmacology,Columbia University , 3Department of Anesthesiology,Niigata University Graduate School of Medical and Dental Sciences

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study demonstrates a method for achieving spatially restricted gene expression in the mouse spinal cord through stereotaxic injection of a viral vector into the lumbar dorsal horn. This technique allows for targeted gene manipulation, particularly in areas of synaptic contact between primary somatosensory afferents and central nervous system neurons.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Gene Therapy
  • Spinal Cord Research

Background

  • Viral vectors are used for gene manipulation.
  • The lumbar dorsal horn is a significant site for synaptic interactions.
  • Conditional gene expression can aid in understanding neural mechanisms.
  • Stereotaxic injection is a precise method for targeting specific brain regions.

Purpose of Study

  • To achieve targeted gene expression in the spinal cord.
  • To explore the effects of gene manipulation on spinal cord function.
  • To provide a methodological framework for future research.

Methods Used

  • Locating and exposing the lumbar vertebra.
  • Performing laminectomy to access the spinal cord.
  • Using a glass pipette connected to a micro syringe pump.
  • Injecting the viral vector suspension into the dorsal horn.

Main Results

  • Successful injection of the viral vector into the lumbar dorsal horn.
  • Conditional gene expression observed in targeted neurons.
  • Method demonstrated effectiveness for spatially restricted manipulation.
  • Potential applications in studying spinal cord-related disorders.

Conclusions

  • The method allows for precise gene manipulation in the spinal cord.
  • It can be used to investigate the role of specific genes in neural function.
  • This approach may enhance our understanding of spinal cord physiology.

Frequently Asked Questions

What is the significance of using viral vectors?
Viral vectors enable targeted gene manipulation, allowing researchers to study specific genes' roles in neural function.
How does stereotaxic injection work?
Stereotaxic injection involves using a precise apparatus to deliver substances directly into specific brain regions.
What is laminectomy?
Laminectomy is a surgical procedure that removes part of the vertebra to access the spinal cord.
What are the potential applications of this method?
This method can be used to study spinal cord disorders and the effects of gene manipulation on neural function.
Can this technique be applied to other areas of the nervous system?
Yes, similar techniques can be adapted for other regions of the nervous system to study various functions.
What are the challenges associated with this method?
Challenges include ensuring accurate targeting and minimizing potential damage to surrounding tissues.

Vetores virais permitem a manipulação de genes alvo. Nós demonstramos um método para a expressão de genes condicionais ou ablação da medula espinhal de rato, utilizando a injecção estereotáxica de um vector viral no corno dorsal, um local proeminente de contacto sináptico entre os aferentes primários e os neurónios de somatossensorial no sistema nervoso central.

O objetivo geral deste procedimento é alcançar a expressão gênica espacialmente restrita na medula espinhal de camundongos, injetando estereotaticamente um vetor viral no corno dorsal lombar. O primeiro passo do procedimento é localizar e expor a vértebra lombar. O segundo passo é remover a porção dorsal da vértebra para revelar a medula espinhal.

Um procedimento denominado laminectomia. Em seguida, uma pipeta de vidro conectada a uma bomba de microseringa é posicionada sobre o corno dorsal e abaixada na medula espinhal. A etapa final é injetar lentamente a suspensão vetorial.

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