Name: Um método não invasivo para Em situ Determinação do sucesso de acasalamento em fêmeas lagostas americanas ( Homarus americanus) (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-02-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 18 s
Description: Aprenda um método não invasivo para determinar o sucesso de acasalamento em fêmeas de lagosta americana (Homarus americanus). Esta técnica auxilia pesquisadores a avaliar a saúde reprodutiva e sustentabilidade das populações marinhas.

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Os autores gostariam de agradecer a todos os pescadores de lagosta comerciais da Nova Inglaterra, cujos barcos foram autorizados a amostra a partir de - a sua cooperação é muito apreciada. Além disso, agradecemos a Little Bay Lobster Company (Newington, NH) e de Champlin frutos do mar (Point Judith, RI), que permitiu a realização de amostragem em suas instalações. Os seguintes estudantes UNH prestou assistência valiosa ao longo deste estudo: Haley Branco, Françoise Morrison, Sarah Havener, Audra Chaput, e maio Grose. Este projecto foi apoiado por subsídios da NH SeaGrant a WHW (projeto # R/CFR-11) e um Programa Bolsa UNH Marine para JSG.

Parte A: Técnica Campo Amostragem 1. Feminino Medidas <ol><li> Para cada lagosta fêmea, medir o comprimento da carapaça (CL) e a largura do segundo segmento abdominal com uma aproximação de 1,0 milímetros usando um par de pinças. NOTA: O segundo segmento abdominal é medida porque a largura do abdômen (onde as fêmeas carregam seus ovos) é um indicador da maturidade sexual. Além disso, pode ser vantajoso para determinar a fase muda depois para combinar estes dados com a fase reprodutiva (ver passo 1.2). </li><li> Clipe uma pequena porção distal de um dos pleópodos abdominais (um protocolo metodológico padrão em lagostas) e armazenar o pleópodo na água do mar limpa para posterior visualização com um microscópio de dissecação 9. NOTA: Esta etapa também pode revelar a presença de glândulas de cimento nos pleópodos, que são uma indicação de que as mulheres estão se preparando para expulsar seus ovos 10. </li></ol> 2. Agulha Insertion <ol><li> Insira a agulha da seringa (18 G, ver Tabela 1) ~ 1 cm no receptáculo seminal, em ângulo em direção à cauda em ~ 45 ° (Figura 1). NOTA: Em lagostas com bujões de esperma intactas, a agulha pode encontrar alguma resistência durante a inserção, como é empurrado através do tampão de esperma antes de alcançar a maior concentração de esperma no fundo do receptáculo seminal (Figura 1). NOTA: A presença do plugue, em si, é um indicador confiável que as lagostas acasalaram. Em alguns animais pode haver pouca resistência, possivelmente porque não spermatophore está presente, o spermatophore é pequeno, ele não tenha endurecido num tampão, no entanto, ou pode já ter sido utilizado para fertilizar uma ou mais garras de ovos. </li></ol><img alt="Figura 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50498/50498fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50498/50498fig1.jpg" width = &quot;600px&quot; /&gt; Figura 1. Inserção da agulha e visão de lagosta receptáculo seminal. Inserção da agulha de ponta romba no receptáculo seminal da lagosta para extrair uma amostra de esperma. O ângulo e profundidade da agulha são ambos críticos para a obtenção de amostras consistentes. Direita: Vista de um receptáculo seminal que foi dissecado e dividida verticalmente. A ficha de esperma ocupa a porção de topo ou exterior do recipiente, enquanto os espermatozóides são localizados na parte inferior (ponto mais fundo) do receptáculo. É importante notar que a amostragem abaixo desta profundidade pode perfurar o recipiente e resultar em uma amostra contaminada com sangue. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50498/50498fig1highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver a imagem ampliada</a> . 3. Penetrando o esperma plug <ol><li> Após a inserção inicial, steepen o ângulo da agulha, a quase vertical (perpendicular ao eixo do corpo), e muito lentamente começa a trabalharpara baixo, para dentro do receptáculo. </li><li> Manter a agulha inclinada a um ângulo de modo que a ponta está apontado ligeiramente para a cauda. Neste caso, a ponta da agulha está a comprimir a parte superior do obturador, até que, eventualmente, penetra na matriz. </li><li> Continue a empurrar lentamente a agulha para baixo até sentir resistência, mais uma vez - este é o fundo do recipiente e onde a amostra é colhida. </li></ol> 4. Remoção de esperma <ol><li> Retirar uma amostra (muitas vezes o material tampão sólido, esperma líquido e outro fluido) a partir do fundo do recipiente, e depositar a amostra para um tubo de plástico de 2,0 ml marcado. </li><li> Lave o recipiente com ~ 0,1-0,5 ml de água do mar fria. </li><li> Retire cerca de 0,3 ml de líquido e coloque no mesmo tubo. </li><li> Amostras de esperma loja no gelo até que possam ser examinadas em laboratório. Parte B: exame de amostras de esperma no laboratório NOTA: As amostras retiradas dos receptáculos seminais do indivíduo l<html> obsters deve ser examinado para determinar se as células do esperma estavam presentes ou ausentes. </li><li> Remover ~ 50 mL de fluido de cada tubo de plástico, coloque em uma lâmina de vidro com uma lamela e vista no 100X com um microscópio composto. </li><li> Pontuação amostras como: esperma escassos, numerosos, ou ausente (este estudo não quantificar o número de esperma reais, figura 2). </li></ol><img alt="Figura 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50498/50498fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50498/50498fig2.jpg" width="600px" /> Figura 2. Imagens de amostra de esperma Lobster. Imagens de amostras de lagosta esperma retiradas de receptáculo seminal da fêmea, como visto com um microscópio composto em 40X de ampliação. Imagem à esquerda mostra uma amostra que continha numerosos espermatozóides, enquanto o outro (direita) ilustra uma amostra escassa (barra de escala = 10 mm).&quot;Target =&quot;. Jpg _blank &quot;&gt; Clique aqui para ver imagem ampliada.

<ol><li>FAO and Agriculture Organization of the United Nations). Fisheries and Aquaculture Department. , Available from: 
 
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</ol>

Os autores declaram não haver conflitos de interesse.

Este vídeo e papel esboço e demonstrar um método para determinar se as lagostas fêmeas acasalaram com sucesso. Esta abordagem é simples o suficiente para que ele possa ser utilizado para a amostragem em larga escala de lagostas no mar por uma variedade de utilizadores. O método baseia-se na detecção da presença de um spermatophore no receptáculo seminal que é transmitido a partir do sexo masculino para lagostas fêmea durante o acasalamento. Estes spermatophores parcialmente endurecer e formar um tampão de esperma logo d...

<html> Lagosta americana (Homarus americanus) é uma das pescas mais produtivas do Atlântico Norte (~ 56 mil toneladas em 2011, avaliado em mais de $ 390000000) 1. No entanto, há uma falta geral de compreensão sobre a dinâmica reprodutiva da espécie em populações selvagens. Gerando estimativas mais precisas de produção reprodutiva, incluindo o número e tamanho de indivíduos participando ativamente na reprodução, pode melhorar o processo de avaliação de estoque. Por exemplo, as mulheres que são impedidos de alcançar seu pleno potencial reprodutivo, devido à limitação do esperma foram identificados como uma preocupação para vários crustáceos marinhos explorados comercialmente incluindo: lagostas, caranguejos azuis 2 3, rei caranguejos 4, caranguejos de pedra 5 e caranguejos da neve 6. O objetivo geral é determinar se a limitação de esperma pode ser um fator em certas regiões da pesca da lagosta americana. nt &quot;&gt; Os primeiros sinais de um potencial problema de limitação de esperma em lagostas foram observadas durante a realização de um estudo de marcação relacionado com lagostas fêmeas ovígeras (com visivelmente intactos, ovos recentemente extrudados). recapturar relatos de pescadores indicaram que aproximadamente 15% desses animais caiu suas desovas após apenas 1-2 meses. A hipótese de trabalho foi que algumas lagostas estavam carregando os ovos que não foram fertilizados e, como resultado, &#39;caiu&#39; 7. Dados preliminares de um estudo posterior confirmou o fato de que as lagostas vontade expulsar os ovos, mesmo que eles não tenham acasalado com sucesso e esses ovos não fertilizados só são realizadas para ~ 1 mês 8. Portanto, dada a observação de mulheres que levam os ovos não fertilizados em populações naturais, buscou-se determinar até que ponto a limitação de espermatozóides pode estar contribuindo para um nível submáximo de reprodução por lagostas sexualmente maduros. Para atingir este objetivo, a técnica foi desenvolvida para detectar a spermatophore depositado pelos machos durante o acasalamento. Este artigo e vídeo descrever um método não invasivo, simples desenvolvido para determinar o sucesso de acasalamento de lagostas do sexo feminino. A técnica pode ser utilizada de forma rápida e confiável no mar, ou a bordo de investigação ou de embarcações de pesca comercial. Os pormenores deste método de amostragem, bem como alguns resultados representativos são apresentado para ilustrar a aplicação da técnica.

<table><tbody><tr><td>Pinças</td><td>Mitutoyo Digimatic</td><td>500-196-20</td><td>http://www.globalindustrial.com</td></tr><tr><td>Seringa Luer-Lok de 3 ml Seringa</td><td>Beckton-Dickinson</td><td>309585</td><td>www.bd.com</td></tr><tr><td>Monoject cubo de alumínio agulhas rombas, 18 G x 1</td><td>Webster Veterinary</td><td>8881202348</td><td>www.mywebstervet.com</td></tr><tr><td>2.0 ml Tubos de armazenamento de plástico</td><td>Eppendorf</td><td>wu-06333-72</td><td>http://www.coleparmer.com</td></tr><tr><td>Refrigerador de isopor com gelo</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Microscópio óptico composto</td><td>Olympus</td><td>BH System</td><td>http://www.olympusamerica.com</td></tr><tr><td>Laterais de vidro com lamínula</td><td></td><td></td><td>75 mm x 25 mm, ~1 mm de espessura</td></tr><tr><td>Pipetador com pontas</td><td></td><td></td><td></td> descartáveis</tr></tbody></table>

um método não invasivo para<em&gt; em situ</em&gt; determinação do sucesso de acasalamento em fêmeas lagostas americanas (<em&gt; homarus americanus</em&gt;)

A Noninvasive Method For In situ Determination of Mating Success in Female American Lobsters (Homarus americanus)

Apesar de ser uma das mais produtivas da pesca no Noroeste do Atlântico, muito permanece desconhecido sobre a dinâmica reprodutiva naturais de lagostas americanas. Trabalhos recentes em populações de crustáceos exploradas (caranguejos e lagostas) sugere que há circunstâncias em que fêmeas maduras não são capazes de alcançar o seu pleno potencial reprodutivo, devido à limitação do esperma. Para examinar esta possibilidade em diferentes regiões da pesca de lagosta americano, um método confiável e não invasivo foi desenvolvido para provar um grande número de lagostas fêmeas no mar. Este método envolve a inserção de uma agulha de ponta romba no receptáculo seminal da fêmea para determinar a presença ou ausência de um tampão de espermatozóides e para retirar uma amostra que pode ser examinada para a presença de esperma. Uma série de estudos de controle foram realizados no cais e no laboratório para testar a confiabilidade desta técnica. Estes esforços de amostragem envolveu 294 lagostas fêmeas para confirmar que a presença oplugue esperma fa era um indicador confiável de esperma dentro do recipiente e assim, o acasalamento. Este documento detalha a metodologia e os resultados obtidos a partir de um subconjunto da totalidade da amostra fêmeas. Dos 230 lagostas fêmeas amostradas de Banco de George e Cape Ann, MA (intervalo size = 71-145 mm de comprimento da carapaça), 90,3% foram positivas para o esperma. Explicações potenciais para a ausência de espermatozóides em algumas fêmeas incluem: imaturidade (falta de maturidade fisiológica), avaria da tomada de esperma depois de ser utilizado para fertilizar uma ninhada de ovos, e falta de atividade de acasalamento. As pesquisas indicam que esta técnica para analisar o sucesso de acasalamento de lagostas do sexo feminino é um proxy confiável que pode ser usado no campo para documentar atividade reprodutiva em populações naturais.

<html> Os dados aqui apresentados foram para um subconjunto de lagostas fêmeas que se originou a partir de ambos nearshore e offshore. O grupo nearshore consistiu de 44 lagostas que foram capturados nas águas costeiras perto de Cape Ann, Massachusetts e transportados em caixas térmicas para o laboratório para exame. Um total de 186 lagostas no mar foram capturados em Banco de George e amostrado a uma instalação de detenção comercial em New Hampshire. As amostras de esperma foram obtidos a par...

Mudanças induzidas pela pesca para a pesca de crustáceos explorados, tais como a pesca de lagosta americano, poderia influenciar a sua dinâmica reprodutiva, levando a uma redução no sucesso de acasalamento. O objetivo deste estudo foi desenvolver um método não invasivo para determinar o sucesso de acasalamento de lagostas fêmeas que podem ser fisiologicamente ou funcionalmente maduro.

Um método não invasivo para<em&gt; Em situ</em&gt; Determinação do sucesso de acasalamento em fêmeas lagostas americanas (<em&gt; Homarus americanus</em&gt;)

Despite being one of the most productive fisheries in the Northwest Atlantic, much remains unknown about the natural reproductive dynamics of American ...

A lagosta-americana é uma espécie icônica em toda a sua distribuição geográfica, do Canadá Atlântico ao Novo Mundo. Constitui o alvo de uma das maiores pescarias de espécie única no leste dos Estados Unidos em diversas regiões. O sucesso contínuo dessa pescaria é atribuído a uma variedade de medidas de gestão, incluindo controles biológicos destinados à conservação do estoque reprodutivo.Essas regulamentações incluem limites mínimos e máximos de tamanho para a proteção de fêmeas portadoras de ovos e a proibição da captura de fêmeas com corte em "V", consideradas reprodutoras comprovadas. O futuro da pesca de lagosta depende em parte de um suprimento saudável de novos recrutas, os quais dependem do sucesso do sistema reprodutivo da lagosta. No entanto, a natureza intensamente explorada dessa pesca, semelhante a outras pescarias de crustáceos em todo o mundo, pode influenciar a dinâmica reprodutiva dessa espécie.Portanto, o objetivo deste trabalho foi desenvolver um método simples e não invasivo para determinar o sucesso reprodutivo de lagostas fêmeas sexualmente maduras. O sexo de uma lagosta é melhor distinguido pela observação de sua superfície ventral, mostrada à esquerda como uma fêmea, caracterizada principalmente pelo primeiro par de apêndices PLE, que são planos e plumosos. As fêmeas também possuem um receptáculo seminal com formato oval no qual armazenam o esperma transferido pelo macho.O macho é mostrado à direita, identificável pelo primeiro par de pleópodos que são algo cônicos e endurecidos. Esses gonópodos auxiliam na transferência do espermatóforo para o receptáculo seminial da fêmea.Também são mostrados os poros gonádicos do macho, pelos quais esse epítopo SPO é extrudido. Durante o processo de cortejo, lagostas machos e fêmeas exibem comportamentos complexos, incluindo comunicação mediada quimicamente e compartilhamento de tocas. O comportamento de compartilhamento de toca ocorre tanto antes quanto após a muda da fêmea e pode ser interpretado como guarda de macho; a cópula ocorre tipicamente dentro de uma hora após a muda da fêmea e dura apenas um período muito curto.O macho vira a fêmea recém-mudada de posição, colocando-a de costas, para transferir o SPM em forma de S para seu receptáculo seminal. Uma lagosta fêmea é capaz de armazenar espermatozoides de um acasalamento por dois anos ou mais, após o que ela extrai sua postura de ovos. Os ovos são fixados aos pleópodos da fêmea, na parte inferior de seu abdômen.O desenvolvimento dos ovos geralmente leva de nove a onze meses e é altamente dependente da temperatura da água do mar. Os ovos eclodem como larvas planctônicas na primavera e no verão e passam por vários estágios larvais antes de se fixarem no fundo como juvenis. O método que descrevemos aqui fornece uma técnica para obter amostras de esperma de um grande número de lagostas fêmeas a bordo de embarcações comerciais de pesca de lagosta ou outras plataformas de monitoramento no mar.Uma agulha de ponta romba é inserida no receptáculo seminal feminino e uma porção do espermatóforo com os espermatozoides associados é removida. A amostra de espermatozoides pode então ser armazenada e examinada posteriormente no laboratório. Devido à estrutura do receptáculo seminal, não observamos mortalidade associada a esta técnica.Os materiais necessários para a coleta de campo incluem uma caixa térmica com gelo para manter as amostras frias, frascos de amostragem de 2 mL. Utilizamos tubos plásticos einor, uma agulha romba de 18 gauge fixada a uma seringa de 3 cm³ e água do mar limpa e fria.O estéril é ideal, mas não é necessário. Além disso, você precisará de paquímetros para registrar as características morfométricas da lagosta, como o comprimento do carpo, largura abdominal e dimensões da garra, se desejado. Fichas de dados pré-impressas são usadas para registrar essas métricas juntamente com o número de identificação dos tubos de amostra.O coletor também deve registrar detalhes como data, local da amostragem e método de captura, por armadilha comercial. Por exemplo, meça cada lagosta em milímetros mais próximo utilizando paquímetro; o comprimento do carpo deve ser tomado dorsalmente, desde a parte posterior da órbita ocular até a extremidade do carpo. Às vezes, medidas adicionais, como largura abdominal, podem ser úteis para estimar um índice de maturidade.Posteriormente, utilizando um par de paquímetros, meça o comprimento padrão do carpo. Em seguida, vire o animal com o lado ventral voltado para cima para medir a largura abdominal. Para coletar a amostra de esperma do receptáculo seminal, segure a lagosta fêmea com o lado ventral voltado para cima e o abdômen voltado para você.Insira a agulha da seringa no receptáculo seminal. Se um espermatóforo estiver presente, haverá uma rolha de esperma muito firme. Você precisará penetrar cuidadosamente e esvaziar a seringa em um tubo previamente rotulado, preencher a seringa com uma pequena quantidade de água do mar limpa e injetar no receptáculo seminal.Isso ajudará a dissociar os espermatozoides do coágulo endurecido. Em seguida, levante novamente o êmbolo e deposite esta amostra adicional no mesmo tubo de amostra. O ângulo e a profundidade da agulha são fundamentais para obter amostras consistentes.Nesta imagem, o receptáculo seminal foi dissecado e dividido verticalmente. O tampão espermático ocupa a porção superior do receptáculo, enquanto espermatozoides estão localizados na parte inferior, o ponto mais profundo do receptáculo. O receptáculo tem aproximadamente um centímetro de profundidade, dependendo do tamanho da fêmea, e a agulha precisará penetrar o tampão endurecido para coletar a amostra de esperma.Tenha cuidado para não perfurar a substância semelhante a uma casca na base do receptáculo. Agora mostraremos o processo de coleta mais lentamente. Em um ambiente de laboratório.Recomendamos que qualquer pessoa que deseje utilizar esta técnica pratique primeiro no laboratório antes de tentar coletar amostras no campo. Novamente, segure a lagosta com o lado ventral voltado para cima e o abdômen voltado para você. Use uma agulha de ponta romba, iniciando em um ângulo de 45 graus com a ponta voltada para o abdômen, para penetrar o receptáculo seminal e verificar a presença de um tampão de esperma.Se houver um tampão, é aí que se sentirá resistência ao aplicar pressão constante. Gire ligeiramente a agulha para auxiliar nesta penetração. Atravesse o tampão espermático, inserindo a agulha aproximadamente um centímetro, conforme indicado pela marca de referência preta na agulha mostrada.Esvazie a seringa em um tubo de amostra. Em seguida, encha a seringa com uma quantidade muito pequena de água do mar fria e fresca para lavar o receptáculo seminal e, novamente, esvazie o conteúdo no tubo de amostra entre os lagostins. Certifique-se de lavar completamente a seringa para evitar contaminação.Limpe a agulha, depois encha e esvazie a seringa várias vezes para garantir que todo o material da amostra tenha sido removido. Antes de coletar outra lagosta, recomendamos substituir a seringa e a agulha após vários usos para o processamento e identificação do esperma. Serão necessárias uma pipeta de 200 microlitros, ponteiras descartáveis para pipeta, lâminas e lamínulas para microscopia.Retire um tubo de amostra de sêmen e remova aproximadamente 200 microlitros de material líquido. Pipete este volume para uma lâmina de microscópio devidamente identificada, com lamínula, utilizando um microscópio composto padrão com aumento de 100 x, e determine a quantidade de espermatozoides presente. Os espermatozoides na lâmina de microscópio podem estar orientados em diversas posições, incluindo vistas verticais e laterais.Como visto nestas imagens de exemplo, recomendamos o uso de descrições qualitativas, como muitos, poucos ou nenhum, para descrever a quantidade de espermatozoides presentes. Empregamos com sucesso esta técnica em diversas localidades no mar e por meio da coleta de lagostas em portos. Os resultados apresentados aqui são de lagostas capturadas em águas profundas no banco de George, que pudemos coletar em uma instalação comercial de retenção.No total de 84% dessas fêmeas tinham espermatozoides em seus receptáculos seminais. Surpreendentemente, aquelas que não tinham estavam no meio da faixa de tamanho, e não nos tamanhos menores, potencialmente imaturos. Esta técnica não tem a finalidade de quantificar as quantidades reais de espermatozoides no metáfora espermática.Em vez disso, fornece um método não invasivo que pode ser utilizado no mar para determinar se uma lagosta fêmea teve sucesso reprodutivo. Quanto mais soubermos sobre o sucesso reprodutivo em lagostas, melhor poderemos compreender os impactos da exploração dessa espécie e, consequentemente, gerenciar adequadamente esse valioso recurso marinho.

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Research

JoVE Journal

Environment

Ambiente

Este protocolo de vídeo demonstra um método para estudar os efeitos do fluido seminal em gastrópodes, usando o caracol hermafrodita de água doce Lymnaea stagnalis.

Efeito do Masculino Acessório Gland produtos em postura de ovos em gastrópode

O objetivo deste protocolo é fornecer aos usuários um conjunto de métodos para a descapsulação de alto rendimento de embriões e larvas de Lymnaea stagnalis em preparação para hibridização in situ de montagem inteira e para tratamentos subsequentes de pré e pós-hibridização.

A Monte Whole<em&gt; In Situ</em&gt; Método de hibridação para o molusco gastrópode<em&gt; stagnalis Lymnaea</em

Aqui, apresentamos um protocolo para isolar e caracterizar a estrutura, potência olfativa e resposta comportamental de compostos putativos feromônio de lampreias do mar.

A identificação das feromonas de lampreia do mar usando guiada por bioensaio fracionamento

Aqui nós apresentamos um protocolo para controlar individualmente os animais durante um longo período de tempo. Ele usa a visão computacional, métodos para identificar um conjunto de marcas construídos manualmente usando um grupo de lagostas como estudo de caso, simultaneamente, fornecendo informações sobre como a casa, manipulam e marcam as lagostas.

Acompanhamento a longo prazo de vídeo de animais aquáticos, Cohoused: um estudo de caso da atividade locomotora diária do lagostim (Nephrops norvegicus)

Neste protocolo, métodos para a realização de cruzamentos de consanguinidade e para avaliar o sucesso dessas cruzes, são descritos para a formiga Vollenhovia emeryi. Estes protocolos são importantes para as experiências que visa compreender a base genética dos sistemas de determinação do sexo em Hymenoptera.

Indução e avaliação de cruzes de endogamia utilizando o Ant, Vollenhovia Emeryi

Este artigo ilustra o procedimento para implantar uma marca acústica micro no juvenil Pacífico lampreia e enguia americana. Nossa aplicação é baseada em ensaios de laboratório, que indicam que etiquetas acústicas podem ser implantadas com êxito com nenhum efeito aparente na natação habilidade ou sobrevivência e perda mínima de marca.

Implantação de uma nova marca acústica Micro no juvenil Pacífico lampreia e enguia americana

O objetivo deste protocolo é genótipo o vectensis do nematostella do Anemone de mar durante o gastrulação sem sacrificar o embrião.

Genotyping de Anemone de mar durante o desenvolvimento adiantado

O esperma deve navegar com sucesso através do oviduto para fertilizar um oócito. Aqui, nós descrevemos um ensaio para medir a migração do esperma dentro do útero hermafrodita de C. elegans . Este ensaio pode fornecer dados quantitativos sobre a distribuição de espermatozóides dentro do útero após o acasalamento, bem como na velocidade, rotação direcional e frequência de reversão.

Medindo a orientação e a motilidade do esperma dentro do intervalo reprodutivo hermafrodita dos elegans de Caenorhabditis

A conservação do mexilhão de água doce depende do monitoramento de padrões reprodutivos e processos de espécies. Este estudo padroniza um protocolo não letal para amostragem de conteúdo de brânquias, caracterizando o desenvolvimento larval e fornecendo um repositório digital para os dados coletados. Este pacote de protocolo-banco de dados será uma ferramenta importante para pesquisadores de mexilhão na recuperação de espécies imperadas.

Padronizar um método não letal para caracterizar o estado reprodutivo e o desenvolvimento larval de mexilhões de água doce (Bivalvia: Unionida)

Medir a freqüência cardíaca durante um desafio térmico fornece uma visão das respostas fisiológicas dos organismos como conseqüência de mudanças ambientais agudas. Usando a lagosta americana (Homarus americanus) como um organismo modelo, este protocolo descreve o uso da pneumografia de impedância como uma abordagem relativamente não invasiva e não letal para medir a freqüência cardíaca em invertebrados em estágio tardio.

Pneumografia de impedância para medição minimamente invasiva da freqüência cardíaca em invertebrados em estágio tardio

Aqui, apresentamos um método geral para determinar a viabilidade embrionária e o número total de embriões produzidos (ninhada) usando o organismo modelo C. elegans.

Mensuração da Viabilidade Embrionária e do Tamanho da Ninhada em Caenorhabditis elegans

Aprenda um método não invasivo para determinar o sucesso de acasalamento em fêmeas de lagosta americana (Homarus americanus). Esta técnica auxilia pesquisadores a avaliar a saúde reprodutiva e sustentabilidade das populações marinhas.

Um método não invasivo para

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