Anticorpo de coloração em C. Elegans Usando o "Freeze-Cracking"

O objetivo geral deste procedimento é realizar a coloração de anticorpos na elegância C. Para fazer isso, os nematóides são enxaguados, espalhados em lâminas e cuidadosamente comprimidos entre duas lâminas adesivas, que são então congeladas em gelo seco. Em seguida, as lâminas são separadas para abrir os nematóides e imediatamente colocadas no fixador.

Os nematóides são então corados usando anticorpos padrão A análise das técnicas de coloração por microscopia fluorescente revela uma coloração bem-sucedida de anticorpos de nematóides semi-intactos. A principal vantagem dessa técnica sobre os métodos existentes, como a fixação de nematóides intactos, é que ela minimiza o tratamento químico da amostra. Geralmente, os indivíduos novos neste método terão dificuldades porque preparar as lâminas e os nematóides é um pouco complicado de demonstrar.