Name: Um procedimento para estudar o efeito da restrição alimentar prolongada em heroína Buscando em ratos abstinentes (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-11-11T20:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 35 s
Description: Aprenda a estudar o efeito da restrição alimentar prolongada na busca por heroína em ratos abstinentes. Este método utiliza auto-administração intravenosa e testes de busca para investigar mecanismos de recaída.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Este trabalho foi apoiado pelas Ciências Naturais e Engenharia Conselho Programa Discovery (EUA: 298915), o Fonds de Recherche du Quebec - Santé (CSBN), eo Canadá Research Chairs Programa (EUA).

1. Animais Todos os ratos são tratados de acordo com as diretrizes do Canadian Council on Animal Care e aprovação de todos os procedimentos experimentais foi concedida pelo Comitê da Universidade Concordia Ética em Pesquisa Animal. <ol><li> Obter ratos com 275-300 g (homens) ou 225-250 g (mulheres). Ratos Casa em pares até a cirurgia em gaiolas plásticas padrão contendo cama sabugo de milho e papel picado. </li><li> Manter os ratos em um ciclo claro-escuro invertido (luz desligada às 9:30 AM). </li><li> Certifique-se de comida e água estão disponíveis ad libitum, excepto durante o período de abstinência. Nós usamos uma ração regular (20,9% de proteína, 67,2% de carboidratos e 11,8% de gordura). </li></ol> 2. Cateteres e Conectores <ol><li> Adicione cateteres em grandes quantidades e utilize conforme necessário ao longo de um longo período de tempo após a esterilização em autoclave. </li><li> Corte o tubo de Silastic a 12 centímetros de comprimento. <ol><li> Usar um palito de dentes, para colocar um pequenogota de silicone em torno do cateter, a 3 cm da ponta. </li><li> Deixe secar de silicone para 24 horas e, em seguida, autoclave e armazenar os cateteres. </li></ol></li><li> Dobre o tubo longo da cânula &quot;5-up&quot;, que servirá como um conector, em um ângulo reto com o pedestal de plástico, em seguida, autoclave e armazenar. </li><li> Montar, de forma asséptica, os cateteres no dia da cirurgia, empurrando o lado &quot;longo&quot; do tubo de Silastic sobre o tubo metálico dobrado da cânula &quot;5-up&quot;, cerca de metade do caminho para o suporte de plástico. <ol><li> Ligue o &quot;5-up&quot; de tubo através de tubos Tygon e uma agulha embotada 22 L a uma seringa de 1 ml cheio com uma solução salina estéril. </li><li> Solução salina através do cateter para garantir o fluxo desobstruída. </li></ol></li></ol> 3. Cirurgia Cateterismo intravenosa <ol><li> Permitir que os ratos de uma semana de aclimatação na unidade de cuidados de animais (ACF) antes da cirurgia. Não realizar a cirurgia em ratos com peso corporal menorde 300-325 g (homens) ou 250-275 g (mulheres). </li><li> Antes da cirurgia pesam e anestesiar os ratos com uma mistura de cetamina / xilazina (90/13 mg / kg; ip). <ol><li> Shave, e depois limpar a cabeça ea área no ombro direito (perto de base do pescoço) com álcool e paramentação. </li><li> Injectar penicilina (450.000 Ul / rato, sc) para proteger contra a infecção e 2 ml de solução salina (SC) para a hidratação. Aplique gel lágrima nos olhos do rato para prevenir o ressecamento induzida por anestesia. </li></ol></li><li> Colocar o rato sobre o seu abdómen e fazer uma incisão, utilizando um bisturi, no topo da cabeça, entre os olhos, e caudalmente para as orelhas do rato. </li><li> Colocar o rato na sua parte traseira com os antebraços coladas à superfície. Levantar a pele no local da incisão, apenas rostral da clavícula, com uma pinça e fazer de 1 cm de corte longitudinal com pequenas tesouras. </li><li> Usando duas pinças retas, separe a gordura e outros tecidos até o vei jugular externan é exposta. </li><li> Empurrar as pontas das pinças rectas sob a veia para levantar e separar a veia do tecido circundante. Limpe cuidadosamente a veia de qualquer tecido aderir e, em seguida, inserir uma pinça curva sob a veia para mantê-lo levantado e ligeiramente alongadas. </li><li> Adicione uma pequena, em forma de v, cortado na superfície superior da veia utilizando uma tesoura pequena mola. <ol><li> Segurar o corte aberto usando um vaso dilatador, e avançar o &quot;curto&quot;, 3 centímetros da ponta do cateter dentro da veia para o coração até a gota de silicone está no ponto de incisão. </li><li> Amarrar o cateter na veia com 3 suturas: um caudal tão longe quanto possível, apenas uma rostral à gota de silicone e o terceiro uma tão longe quanto possível rostral. </li><li> Passa salina através do cateter depois de cada sutura para assegurar que permanece livre e que as suturas não são muito apertadas. </li></ol></li><li> Retire a fita em torno dos braços e coloque rato lado ventral para baixo. <ol><li> Insira uma pinça hemostática ttravés do lado caudal da incisão cabeça e empurrar para separar a pele do tecido subjacente para criar uma &quot;bolsa&quot; subcutânea. </li><li> Orientar a pinça hemostática sob a pele para a abertura nos ombros onde o cateter foi inserido. </li><li> Romper o tecido conjuntivo usando a hemostática, e prender firmemente o cateter no ponto mais rostral, abaixo da base da &quot;5--se.&quot; </li></ol></li><li> Retire a &quot;5-up&quot; e passe a ponta mais longa do cateter sob a pele e para fora da incisão localizada na parte superior da cabeça do rato. <ol><li> Use a tesoura para cortar o cateter abaixo de onde a pinça hemostática foi pinçada e recolocar a ponta mais longa da &quot;5-up.&quot; </li><li> Puxar o cateter ao longo do eixo de metal do &quot;5&quot; toda a maneira para o suporte de plástico. Passe salina através de garantir o livre fluxo. </li></ol></li><li> Coloque o rato em suas costas, e suturar a incisão apenas perto da clavícula. A incisão cabeça deve remaem aberto. </li><li> Colocar o rato num aparelho estereotáxico. Puxe a pele longe na incisão no topo da cabeça com grampos de bulldog e limpar e secar a superfície do crânio. </li><li> Use uma broca manual, para perfurar 04:56 buracos no crânio e insira parafusos nos furos para atuar como andaimes para a cabeça-cap. <ol><li> Coloque o conector &quot;5-up&quot; entre os parafusos e guarde o excesso de comprimento do cateter para o &quot;bolso&quot; subcutâneo feito anteriormente usando a pinça hemostática. </li></ol></li><li> Use cimento dental para fixar a &quot;5-up&quot; para o topo do crânio. Remover o rato a partir do aparelho estereotáxico após o cimento está completamente seco. </li><li> Submeter o rato pós-operatório cuidados, que consiste de cetoprofeno (analgésico, 5 mg / kg, sc) e 2 ml de solução salina (sc). Administrar cetoprofeno por mais 2 dias após a cirurgia para ajudar com a gestão da dor. </li><li> Começando após a cirurgia de 48 horas, lave ratos diárias wom uma mistura de heparina e gentamicina em solução salina estéril (7,5 UI + 12 ug; 0,2-0,3 ml) ao longo do período de recuperação de aproximadamente 2 dias e, durante a fase de auto-administração de heroína. </li></ol> 4. Procedimento Behavioral A linha de tempo para o procedimento de comida induzida por restrição de aumento de procura de heroína é apresentado na Figura 1. <ol><li> Câmaras de condicionamento operante. <ol><li> Casa ratos individualmente em câmaras de condicionamento operante fechado em som atenuando compartimentos de madeira, equipados com um ventilador. </li><li> Cada câmara é composta por um piso de aço inoxidável grade de metal, uma frente e de trás da parede de acrílico e duas paredes laterais do painel de metal. Monte duas alavancas retráteis nove centímetros acima do chão da parede lateral direita, e localizar um cue-luz acima de cada alavanca. Respondendo sobre a alavanca (ativo) emparelhado de drogas ativa uma bomba de infusão, respondendo sobre a alavanca (inativo) pareado nondrug não tem consequências programáveis. &lt;/ Li&gt; <li> Localize um módulo de som (2,9 kHz) acima da alavanca ativa, e posicionar uma casa de luz vermelha na parte superior central da parede lateral esquerda. </li><li> Ligar a bomba de drogas para o cateter através de um suporte giratório de líquido e tubagem Tygon protegido com uma mola de metal. Além disso, equipar cada uma das câmaras com um funil de comida e uma garrafa de água que permite o acesso irrestrito a água e comida. </li></ol></li><li> Dia habituação: <ol><li> Após a recuperação da cirurgia, os ratos mover para as câmaras operantes de formação e permitir, por um período de habituação de 24 horas. </li><li> Não conecte os ratos para a mola de metal e não ativar o complexo cue-light/tone. </li><li> Certifique-se de que a alavanca ativa permanece retraída, mas garantir a alavanca inativo é estendido para ajudar com a discriminação entre as duas alavancas durante o treinamento. </li></ol></li><li> A heroína auto-administração: <ol><li> Conecte o conector de 5 até o tubo Tygon e anexar a mola de metal. </li><li> Permitir que os ratos se auto-administer heroína (0,1 mg / kg / infusão) durante 10 dias, durante três sessões de 3 hr, separadas por intervalos de 3 h. </li><li> Comece cada sessão após o início da fase escura (cerca de 9h30 em nosso laboratório) com a extensão das alavancas ativos e inativos, bem como a iluminação da casa de luz e ativação do complexo cue-light/tone para 30 seg. </li><li> Respostas sobre o resultado alavanca ativa na ativação da bomba de drogas (5 seg, 0,13 ml / infusão) e início de um período de tempo limite de 20 segundos durante o qual a casa de luz é desligada eo complexo luz cue / tom acima da alavanca ativa é ativado (FR-1, 20 seg timeout). Durante o período de tempo limite, as respostas alavanca ativos são registrados, mas não reforçados. Respostas alavanca inativos são registrados, mas não têm consequências programáveis. </li><li> Após cada sessão de 3 horas, a alavanca ativa é recolhido enquanto a alavanca inativo permanece estendido até 1 hora antes da primeira sessão do dia seguinte. </li></ol></li><li>Abstinência e da restrição alimentar: <ol><li> Após o treinamento de auto-administração, remover os ratos das câmaras de condicionamento operante e individualmente abrigá-los na ACF, e dar acesso irrestrito a água e comida para um dia de drogas washout. </li><li> Divida os ratos em dois grupos: alimentação restrita (FDR) ou saciada, combinados de acordo com o peso corporal, número de infusões e respostas alavanca ativos através dos últimos 5 dias de treinamento. </li><li> Após o dia de drogas lavagem, remover o alimento que os ratos FDR &#39;, e alimentá-los cerca de 15 g de ração às 1:30 AM. Ajuste a quantidade de comida por 14 dias de abstinência para manter o peso corporal dos ratos FDR &#39;(BW) para cerca de 90% do seu próprio BW linha de base. </li></ol></li><li> Teste procurando por drogas: Na manhã do dia 14 de abstinência, o retorno dos ratos para as câmaras de condicionamento operante e anexá-los à mola de metal. Use uma 1 hora ou 3 horas da sessão durante a qual as respostas alavanca ativos e inativos tem as mesmas conseqüências de ums na formação de auto-administração, excluindo a disponibilidade do fármaco (isto é, sob condições de extinção). </li></ol>

<ol><li>Jaffe, J. H. Drug addiction and drug abuse. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJaffe%2C+JH+%22Goodman+%26+Gilman%27s+the+pharmacological+basis+of+therapeutics%22">Goodman & Gilman's the pharmacological basis of therapeutics</a>. Gilman, A. G., Rall, T. W., Nies, A. S., Taylor, P. , Pergamon Press. New York. 522-573 (1990).</li>
<li>O'Brien, C. P., McLellan, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myths+about+the+treatment+of+addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Myths about the treatment of addiction.</a> Lancet. 347, 237-240 (1996).</li>
<li>Childress, A. R., Ehrman, R., Rohsenow, D. J., Robbins, S. J., O'Brien, C. P. Classically conditioned factors in drug dependence. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChildress%2C+AR+%22Substance+abuse%3A+A+comprehensive+textbook%22">Substance abuse: A comprehensive textbook</a>. Lowinson, J. W., Luiz, P., Millman, R. B., Langard, G. , Williams and Wilkins. Baltimore. 56-69 (1992).</li>
<li>Sinha, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+does+stress+increase+risk+of+drug+abuse+and+relapse%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">How does stress increase risk of drug abuse and relapse?</a> Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).</li>
<li>Cheskin, L. J., Hess, J. M., Henningfield, J., Gorelick, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calorie+restriction+increases+cigarette+use+in+adult+smokers%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Calorie restriction increases cigarette use in adult smokers.</a> Psychopharmacology. 179, 430-436 (2005).</li>
<li>Krahn, D., Kurth, C., Demitrack, M., Drewnowski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+of+dieting+severity+and+bulimic+behaviors+to+alcohol+and+other+drug+use+in+young+women%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Subst.+Abuse%22%5BJournal%5D)">The relationship of dieting severity and bulimic behaviors to alcohol and other drug use in young women.</a> J. Subst. Abuse. 4, 341-353 (1992).</li>
<li>de Wit, H., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reinstatement+of+cocaine-reinforced+responding+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Reinstatement of cocaine-reinforced responding in the rat.</a> Psychopharmacology. 75, 134-143 (1981).</li>
<li>Shaham, Y., Shalev, U., Lu, L., De Wit, H., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+reinstatement+model+of+drug+relapse%3A+history%2C+methodology+and+major+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings.</a> Psychopharmacology. 168, 3-20 (2003).</li>
<li>Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+and+relapse+to+drug+seeking+in+rats%3A+studies+on+the+generality+of+the+effect%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect.</a> Psychopharmacology. 150, 337-346 (2000).</li>
<li>Tobin, S., Newman, A. H., Quinn, T., Shalev, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+for+dopamine+D1-like+receptors+in+acute+food+deprivation-induced+reinstatement+of+heroin+seeking+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Neuropsychopharmacol%22%5BJournal%5D)">A role for dopamine D1-like receptors in acute food deprivation-induced reinstatement of heroin seeking in rats.</a> Int. J. Neuropsychopharmacol. 12, 217-226 (2009).</li>
<li>Katz, J. L., Higgins, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+validity+of+the+reinstatement+model+of+craving+and+relapse+to+drug+use%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">The validity of the reinstatement model of craving and relapse to drug use.</a> Psychopharmacology. 168, 21-30 (2003).</li>
<li>Epstein, D. H., Preston, K. L., Stewart, J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+a+model+of+drug+relapse%3A+an+assessment+of+the+validity+of+the+reinstatement+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Toward a model of drug relapse: an assessment of the validity of the reinstatement procedure.</a> Psychopharmacology. 189, 1-16 (2006).</li>
<li>Zacny, J. P., de Wit, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+a+restricted+feeding+regimen+on+cigarette+smoking+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Addict.+Behav%22%5BJournal%5D)">The effects of a restricted feeding regimen on cigarette smoking in humans.</a> Addict. Behav. 17, 149-157 (1992).</li>
<li>Fuchs, R. A., Lasseter, H. C., Ramirez, D. R., Xie, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relapse+to+drug+seeking+following+prolonged+abstinence%3A+the+role+of+environmental+stimuli.+Drug+Discov.+Today+Dis%5BTitle%5D)+AND+%22Models%22%5BJournal%5D)">Relapse to drug seeking following prolonged abstinence: the role of environmental stimuli. Drug Discov. Today Dis.</a> Models. 5, 251-258 (2008).</li>
<li>D'Cunha, T. M., Sedki, F., Macri, J., Casola, C., Shalev, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+chronic+food+restriction+on+cue-induced+heroin+seeking+in+abstinent+male+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">The effects of chronic food restriction on cue-induced heroin seeking in abstinent male rats.</a> Psychopharmacology. 225, 241-250 (2013).</li>
<li>Caprioli, D., Celentano, M., Dubla, A., Lucantonio, F., Nencini, P., Badiani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ambience+and+drug+choice%3A+cocaine-+and+heroin-taking+as+a+function+of+environmental+context+in+humans+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Ambience and drug choice: cocaine- and heroin-taking as a function of environmental context in humans and rats.</a> Biol. Psychiatry. 65, 893-899 (2009).</li>
</ol>

Aprovação para todos os procedimentos experimentais foi concedida pelo Comitê da Universidade Concordia Ética em Pesquisa Animal, de acordo com as diretrizes do Canadian Council on Animal Care. Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes. FS e TD igualmente contribuído para o desenvolvimento do processo de aqui e para a redação do manuscrito apresentado.

O procedimento aqui descrito tem forte validade de face, porque 1) que permite a ingestão de drogas voluntária e controle sobre a administração da droga, 2) ele usa uma via de administração que é comum em viciados em humanos, 3) reflete (períodos) prolongados de exposição à droga e abstinência, e 4) que evita a formação de extinção antes do teste de procura de droga que é parte integrante do processo de reintegração, mas é raramente observada em viciados em humanos 14. Além disso, os modelos de procedimento a...

Uma das principais dificuldades no tratamento da dependência de drogas é a alta taxa de recidiva, mesmo após longos períodos de abstinência 1,2. Estudos em humanos viciados identificaram uma contribuição crítica dos desafios ambientais, como a exposição a estímulos discretos associada à droga ou ambientes 3 ​​e eventos estressantes da vida 4, para a recaída. Um desafio ambiental comum, que foi encontrado para ter um efeito sobre o consumo de drogas e desejo é restrição alimentar crônica. Por exemplo, foi relatado que a restrição calórica crônica está associada ao aumento do cigarro fumar 5. &#160; Além disso, a gravidade da dieta (restrição calórica) é positivamente correlacionada com um aumento da prevalência do uso de drogas em mulheres jovens 6. No entanto, os mecanismos cerebrais subjacentes não são totalmente compreendidos. Devido a considerações práticas e éticas relacionadas à pesquisa humana, os modelos animais hav sido desenvolvido para identificar os mecanismos neuronais relevantes. Nós já usou o procedimento 7,8 reintegração de demonstrar retomada da droga extinta buscando em ratos expostos a aguda (24-48 horas) privação de alimentos 9,10. No entanto, uma parte integrante do processo de reintegração é um período de extinção que não é uma característica comum de tratamentos de dependência de drogas 11 (mas veja 12 Epstein et al., Para uma discussão abrangente sobre a validade do processo de reintegração). Além disso, no caso particular de manipulações dietéticas em seres humanos, apenas restrição alimentar crônica, mas privação de alimento não aguda, foi mostrado para aumentar a eficácia 5,13 de tirar drogas. Conseqüentemente, sugerimos um &quot;procedimento de abstinência&quot; 14, que permite o estudo dos efeitos da restrição alimentar crônica em busca de drogas. Usando este procedimento que recentemente demonstraram um aumento robusto de heroin buscando em ratos abstinentes após a exposição a 14 dias de restrição alimentar leve 15.

<table><tbody><tr><td>Nome</td><td>Número de</td><td>catálogo</td><td></td>da empresa</tr><tr><td>Cetamina (Vetalar, 100 mg/ml)</td><td>Bioniche Saúde Animal</td><td>Obtido através do distribuidor</td><td></td>local</tr><tr><td>Xilazina (Rompun, 100 mg/ml)</td><td>Bayer</td><td>Obtido através do distribuidor</td><td></td>local</tr><tr><td>Heroína HCl</td><td>Instituto Nacional de Abuso de Drogas, Research Triangle Park, NC, EUA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Injeção de Anafen 1 mg/ ml Vial/20 ml</td><td>CDMV, Canadá</td><td>12868</td><td></td></tr> Nome <tr><td>do equipamento</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>Número</td><td></td>de catálogo <td>da empresa</td></tr><tr><td>Tubulação de Silastic (ID 0.02, OD 0.037)</td><td>Fisher Scientific</td><td>1118915A</td><td></td></tr> Tubulação <tr><td>GE</td> SE-1134 Tygon de silício marinho <td>GE</td><td>SE-1134</td><td></td></tr><tr><td>(ID 0.02, OD 0.060)</td><td>VWR</td><td>63018-044</td><td></td></tr><tr><td>Cânulas (22 G, 5 folhas)</td><td>Plásticos One</td><td>C313G-5up</td><td></td></tr><tr><td>Giros líquidos, plástico, 22 G</td><td>Lomir Biomedical, Inc.</td>Bomba de infusão de velocidade fixa <td>RSP1</td><td></td></tr><tr><td>(3,3 rpm)</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>A73-01-3.3</td><td></td></tr><tr><td>Gaiola de teste de rato</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H10-11R-TC</td><td></td></tr><tr><td>Piso de grade de roubo de aço inoxidável</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H10-11R-TC-SF</td><td></td></tr><tr><td>Casa light-rat</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H11-01R</td><td></td></tr><tr><td>Rato único de alto brilho</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H11-03R</td><td></td></tr><tr><td>Módulo de tom 2.9 kHz</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H12-02R-2.9</td><td></td></tr><tr><td>Alavanca retrátil - rato</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H23-17RA</td><td></td></tr><tr><td>Braço de equilíbrio</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H29-01</td><td></td></tr><tr><td>Caixas de atenuação de som</td><td>Concordia University</td><td>Home made</td><td></td></tr><tr><td>Controlador de sistema 2</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>SYS CTRL 2</td><td></td></tr><tr><td>Base de alimentação do sistema</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H01-01</td><td></td></tr><tr><td>Habitest Universal Linc</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H02-08</td><td></td></tr><tr><td>Placa de conexão ambiental e Cabo Linc</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>H03-04</td><td></td></tr><tr><td>Notação de estado gráfico 3</td><td>Coulbourn Instruments</td><td>GS3</td><td></td></tr></tbody></table>

um procedimento para estudar o efeito da restrição alimentar prolongada em heroína buscando em ratos abstinentes

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

Em humanos viciados em drogas, a exposição a estímulos ou ambientes que foram previamente associados com o consumo de drogas associada à droga pode desencadear uma recaída durante a abstinência. Além disso, vários desafios ambientais pode exacerbar este efeito, bem como aumentar a ingestão do medicamento em curso. O procedimento que descrevemos aqui destaca o impacto de um desafio comum ambiental, restrição alimentar, na ânsia de drogas que se expressa como um aumento da procura de droga em ratos abstinentes. Os ratos são implantados com cateteres intravenosos iv crônicas e treinados para pressionar uma alavanca para iv heroína ao longo de um período de 10-12 dias. Após a fase de auto-administração de heroína os ratos são retirados das câmaras de condicionamento operante e alojados nas instalações de cuidados com os animais por um período de pelo menos 14 dias. Enquanto um grupo é mantido sob acesso irrestrito a alimentos (grupo saciado), um segundo grupo (grupo FDR) é exposto a um mild regime de restrição alimentar que resulta em seus pesos corporais mantida a 90% do seu peso corporal não restrita. No dia 14 de restrição alimentar os ratos são transferidos de volta para o ambiente de formação de drogas, e um teste de procura de droga é executado em condições de extinção (ou seja. Prensas de alavanca não resultam na entrega de heroína). O procedimento aqui apresentado resulta em um aumento muito forte de busca de heroína no dia do teste nos ratos alimentos restrito. Além disso, em comparação com os agudos manipulações de privação alimentar que usamos antes, o procedimento atual é um modelo mais clinicamente relevante para o impacto da restrição calórica em busca de drogas. Além disso, pode ser mais estreita para a condição humana como os ratos não são obrigados a passar por uma fase de formação de extinção antes do teste de procura de droga, que é um componente integrante do processo de restabelecimento popular.

O peso corporal ao longo do tempo: Os resultados típicos demonstram que o peso corporal permanecer estável ao longo de heroína treinamento de auto-administração. Durante a abstinência, ratos com acesso irrestrito à comida para aumentar seu peso corporal, enquanto que aqueles que são alimento restrito diminuir seu peso corporal para cerca de 90% do seu próprio peso corporal original ou 75-80% do peso corporal dos ratos saciados (Figura 2) . Infusões respostas alavan...

Um procedimento que permite uma demonstração de aumento robusto de droga que procura, em ratos com restrição de alimentos é descrito. Após o treinamento de auto-administração de heroína, os ratos passam por um período de abstinência, em um ambiente livre de drogas, durante a qual eles são levemente restrição alimentar. Procura de droga é então testada no ambiente associadas à droga.

Um procedimento para estudar o efeito da restrição alimentar prolongada em heroína Buscando em ratos abstinentes

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

O objetivo geral deste procedimento é estudar os efeitos de manipulações ambientais, como a restrição crônica de alimento, sobre a recaída na busca de heroína em ratos de laboratório sob condições de abstinência. Isso é alcançado primeiramente pela inserção cirúrgica de um cateter intravenoso na veia jugular do rato, permitindo a automedicação com heroína após um período de recuperação. Os ratos são treinados para automedicar-se com heroína em câmaras de condicionamento operante durante um período de 10 dias.O próximo passo do procedimento é a fase de abstinência, na qual os ratos são transportados para o biotério e submetidos a um período de acesso restrito ou irrestrito à comida. Por fim, os ratos são devolvidos às câmaras de condicionamento operante para realizarem um teste de busca por heroína, no qual respostas na alavanca associada à heroína acionam uma luz e um tom como estímulo, na ausência de administração de heroína. Em última análise, ratos com restrição crônica de alimento e histórico de automedicação de heroína exibirão um aumento acentuado na procura por heroína sob condições de abstinência, resultante da reexposição ao ambiente de consumo da droga e aos estímulos ass

a-procedure-to-study-effect-prolonged-food-restriction-on-heroin

Research

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

Modelos animais de recaída, conhecido como procedimentos de reintegração, têm sido amplamente utilizados para estudar o papel do estresse na recaída à busca de drogas. Aqui, nós relatamos em um método para induzir a reintegração de cocaína que procuram em ratos de laboratório através de uma exposição aguda ao leve, footshock intermitente elétrica.

Um Procedimento para o Estudo do Reintegração Footshock Induzida de cocaína Buscando em ratos de laboratório

Responder por sinais de alimentos ou drogas emparelhados aumenta ao longo de um período de abstinência e esta pode estar relacionada com uma susceptibilidade aumentada a comportamentos recaída. Aqui detalhamos um procedimento para avaliar este "incubação de desejo" em ratos que têm auto-administrado de sacarose.

Um método geral para a avaliação de Incubação de Craving Sacarose em Ratos

Fonte: Rich, M. T., et al. Usando optogenética para reverter a neuroplasticidade e inibir a busca de cocaína em ratos. J. Vis. Exp. (2021)Este vídeo demonstra o uso da optogenética para induzir depressão de longo prazo (LTD) nas sinapses do núcleo geniculado medial para a amígdala lateral (MGN-LA), enfraquecendo o comportamento de busca de narcóticos induzido por sugestão em um modelo de rato. O rato, implantado cirurgicamente com fibras ópticas e transduzido viralmente para expressar canais...

Indução optogenética de depressão de longo prazo para suprimir o comportamento de busca de narcóticos em ratos

O presente estudo avalia um novo procedimento para avaliar os efeitos de reforço de soluções palatáveis ​​em ratos de laboratório: a auto-administração intra-oral. Para este fim, respondendo operante (isto é, a pressão da alavanca) para infusões intra-orais de soluções doces em diferentes concentrações foi medido em rácios contínuos e progressivos esquemas de reforço.

Um novo procedimento para avaliar as propriedades de reforço de Tastants em laboratório ratos: Intraoral auto-administração operante

Este protocolo descreve um método novo e eficiente para iniciar rapidamente operante de responder por etanol em ratos, que, contrariamente aos métodos convencionais, não necessitam de privação de água ou sacarina / sacarose desvanecimento para iniciar a responder.

Um método para avaliar as propriedades de reforço de etanol em ratos sem água Privação, Sacarina desvanecimento ou treinamento de Acesso Ampliado

Reatividade de sinalização é conceituada como sensibilidade para pistas ligadas com experiências de drogas que contribuem a ânsia e recaída em humanos abstinentes. Reatividade de sinalização é modelada em ratos por medição orientação atenção para pistas de drogas associadas que resulta em comportamento de abordagem repetido em um teste de reactividade deixa seguir auto-administração e forçado a abstinência.

Um protocolo para medição de reatividade de Cue em um modelo do rato do transtorno de uso de cocaína

Aqui, um protocolo de preferência (CPP) do lugar de morfina condicionado é descrito para medir a incubação do desejo em ratos.

Um protocolo de preferência condicionada lugar para medir a incubação do desejo em ratos

Este modelo de conflito é usado para medir a deficiência de controle inibitório após exposição à drogas que viciam, ou outros fatores que podem influenciar o controle inibitório. Um estímulo sexual e um obstáculo aversive são apresentados simultaneamente, assim, ratos machos têm de conquistar o obstáculo para aproximar a recompensa sexual.

Um modelo de conflito de comportamento de busca de recompensa em ratos machos

Um procedimento que demonstra uma robusta recaída induzida por privação alimentar aguda à heroína em busca de abstinência após a abstinência imposta pela punição é descrita. Um modelo de abstinência imposta pela punição foi implementado com sucesso usando o cronograma de busca e ação para a autoadministração da heroína. Os testes de busca de heroína são realizados após 24 horas de estresse de privação alimentar.

Um procedimento para estudar a recaída induzida pelo estresse da busca de heroína após a abstinência imposta pela punição

Um procedimento para o estudo da capacidade de um álcool associado contexto ambiental para desencadear a renovação do comportamento de procura de álcool em ratos, está descrito.

Um procedimento para Observar Renovação induzida por Contexto de pavloviano condicionado Comportamento Álcool-seeking em Ratos

Aprenda a estudar o efeito da restrição alimentar prolongada na busca por heroína em ratos abstinentes. Este método utiliza auto-administração intravenosa e testes de busca para investigar mecanismos de recaída.

Um procedimento para estudar o efeito da restrição alimentar prolongada em heroína Buscando em ratos abstinentes

Explorar mais vídeos