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DOI: 10.3791/50758-v
Stacy L. Fairbanks*1, Rebekah Vest*1, Saurabh Verma2, Richard J. Traystman1,3, Paco S. Herson1,3
1Department of Anesthesiology,University of Colorado School of Medicine, 2Oregon National Primate Research Center,Oregon Health & Science University, 3Department of Pharmacology,University of Colorado School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Culturas neuronais embrionárias primárias dissociadas do hipocampo são úteis para investigar os mecanismos de sinalização envolvidos na morte dos neurônios. A sexagem dos embriões antes do isolamento e dissociação do hipocampo permite a preparação de culturas masculinas e femininas separadas, o que permite ao pesquisador identificar e investigar a sinalização celular específica do sexo.
O objetivo geral deste procedimento é preparar culturas de neurônios dissociados primários do hipocampo estratificados por sexo. O primeiro passo do procedimento é sexar e dissecar embriões no dia embrionário 18, para obter culturas neuronais primárias estratificadas por sexo. O próximo passo é preparar neurônios associados a partir do tecido neuronal.
A etapa final é colocar os neurônios na densidade apropriada e cultivá-los para experimentação. Em última análise, esse método em conjunto com outros protocolos pode ser usado para qualquer estudo em que o sexo seja considerado um determinante importante do resultado. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo de pesquisa de gênero, como se roedores machos e fêmeas respondem de maneira diferente à isquemia neuronal Das várias preparações necessárias, havia algumas que valiam a pena revisar, como as placas de cultura de tecidos.
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