Identificação de populações específicas de neurônios sensoriais para estudo de canais iônicos expressos

O objetivo geral deste procedimento é identificar neurônios aferentes por marcação retrógrada de corante e estudar os canais iônicos nesses neurônios usando eletrofisiologia e imunoquímica de patch clamp. Isso é feito injetando primeiro DAI no tecido-alvo para rotular os neurônios aferentes inervantes. O segundo passo é isolar os neurônios aferentes dos gânglios da raiz dorsal.

Em seguida, os neurônios marcados são fixados para registrar os canais iônicos fechados, a etapa final é identificar os canais iônicos expressos nos neurônios marcados usando imunoquímica. Em última análise, usando uma combinação de patch, clamp e imunoquímica, somos capazes de identificar o padrão de expressão, bem como as propriedades funcionais dos canais iônicos em neurônios aferentes. A principal vantagem deste método sobre outros métodos existentes é que é um método não invasivo e o DAI que usamos, o DAI I, é conhecido por sua rápida absorção pelos terminais neuronais.