Membrana Potencial Dye imagem de Ventromedial Hipotálamo Neurônios de camundongos adultos para estudar Glucose Sensing

O objetivo geral deste procedimento é avaliar a detecção de glicose em neurônios hipotalâmicos mediais ventrais ou VMH de camundongos mais velhos, usando corante sensível ao potencial de membrana como um índice de atividade neuronal. Isso é feito realizando primeiro a perfusão cardíaca para liberar o sangue do cérebro de um camundongo anestesiado antes da remoção do cérebro. O segundo passo é criar fatias de cérebro coronal e dissecar o VMH.

Em seguida, os neurônios VMH são dissociados e cultivados em lamínulas. A etapa final é medir a fluorescência dos neurônios à medida que a glicose diminui na presença de corante potencial de membrana. Em última análise, cada mudança de neurônio na fluorescência é usada para quantificar a resposta desse neurônio inibido pela glicose às mudanças na glicose.