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JoVE Journal Behavior
Use of an Eight-arm Radial Water Maze to Assess Working and Reference Memory Following Neonatal Brain Injury

Uso de um labirinto de água radial de oito braços para avaliar a memória de trabalho e de referência após lesão cerebral neonatal

Full Text
16,691 Views
08:09 min
December 4, 2013

DOI: 10.3791/50940-v

Stephanie C. Penley1, Cynthia M. Gaudet2, Steven W. Threlkeld1

1Department of Psychology,Rhode Island College, 2Department of Biology,Rhode Island College

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Summary

O labirinto de água radial de oito braços foi projetado para avaliar o desempenho da referência e da memória de trabalho simultaneamente, exigindo que os sujeitos usem dicas extra-labirinto para localizar plataformas de fuga e corrige as limitações observadas em projetos de labirintos de braço radial terrestres.

Transcript

O objetivo geral deste procedimento é quantificar simultaneamente a memória de trabalho e de referência sem as limitações típicas dos labirintos terrestres. Para começar, um animal é colocado no braço inicial do labirinto aquático e pode localizar uma plataforma escondida. As entradas em cada braço são registradas, bem como a localização da plataforma usada para fuga.

Em seguida, a plataforma de fuga usada pelo animal é removida e o procedimento é repetido por mais três tentativas. Na etapa final. As entradas são codificadas como memória de trabalho, erros corretos, erros de memória de referência ou erros incorretos de memória de trabalho.

Em última análise, o labirinto de água radial de oito braços pode ser usado para avaliar a memória de trabalho e referência em vários modelos animais. A principal vantagem dessa técnica sobre os métodos existentes, como o labirinto aquático de Morriss, é que ela permite que o experimentador avalie simultaneamente a memória de trabalho e de referência. O labirinto radial consiste em oito braços de aço inoxidável presos a uma base circular.

É colocado em uma banheira cheia de temperatura ambiente. Água. Plataformas ocultas são colocadas um centímetro abaixo da superfície da água. Em quatro dos braços, são necessários dois experimentadores.

Um para registrar os dados e outro para lidar com os assuntos. Durante essa colaboração, a comunicação entre os experimentadores é fundamental. A confirmação dos horários de início, o número das disciplinas e o posicionamento adequado da plataforma antes de cada teste são essenciais.

Um tablet digital é usado para registrar entradas de braço de milho. Abra um programa de gravação de PDF e importe todos os modelos de gravação de dados pré-salvos para assuntos do grupo um. O modelo deve ter uma representação em branco dos locais do labirinto e da plataforma, bem como um local para registrar o número do assunto, o número do teste, a plataforma de fuga do dia de teste usada e a latência do teste.

Para começar, transfira a primeira cobaia para uma gaiola aquecida separada. Em seguida, confirme se as plataformas estão posicionadas corretamente no labirinto de água de oito braços. Depois de verificar o número de identificação do assunto, coloque o assunto no braço inicial voltado para a parede do labirinto e inicie o cronômetro.

É importante permanecer parado durante cada tentativa em uma posição designada para manter a consistência Q durante todo o processo. Testar entradas de registro colocando uma marca no braço correspondente. No modelo de gravação, uma entrada é contada.

Quando os ombros de um sujeito quebrarem o plano de abertura do braço, aguarde no máximo 120 segundos para que o sujeito localize uma das quatro plataformas. Assim que o animal chegar à plataforma, pare o cronômetro para concluir o teste. Registre a latência para chegar à plataforma.

Para cada tentativa de manter a consistência, diz-se que um sujeito atingiu a meta. Quando suas patas dianteiras estão na plataforma. No primeiro dia de teste, permita que o sujeito se sente na plataforma por 10 segundos para todas as quatro tentativas para que o sujeito possa fazer referência às pistas espaciais.

Se o sujeito não conseguir localizar a plataforma em 120 segundos, guie-o cuidadosamente até a plataforma mais próxima e deixe-o permanecer na plataforma por 10 segundos. Após a conclusão do teste, remova o sujeito da plataforma levantando-o suavemente pelo corpo. Inicie o cronômetro para o 92º intervalo entre tentativas.

Para evitar hipotermia, seque o assunto com uma toalha. Coloque o assunto de volta na gaiola individual sobre a almofada de termorregulação. Registre a plataforma específica usada para fuga circulando o local correspondente no modelo de registro de dados.

Durante o intervalo entre as tentativas, remova a plataforma de fuga usada pelo sujeito na tentativa anterior. Abra o modelo para o próximo teste e marque todas as plataformas que foram usadas para fuga pelo sujeito e, portanto, removidas durante os testes anteriores com um x. Em seguida, confirme o posicionamento das plataformas para o próximo teste.

Quando estiver pronto, coloque o assunto no braço inicial voltado para a parede do labirinto e inicie o cronômetro. Repita esse processo para um total de quatro tentativas. Remover a plataforma de fuga alcançada após cada tentativa e marcar o modelo adequadamente durante e após cada tentativa.

Depois de concluído, coloque as plataformas de fuga de volta nos braços apropriados do labirinto e repita o processo de teste para o próximo assunto. Assim que o teste for concluído para o grupo um, exporte as planilhas de registro de dados para uma pasta para esse dia de teste e salve-as para análise futura. Para cada teste, conte o número de entradas de primeira e repetição em qualquer braço que anteriormente tinha uma plataforma.

Estes são os erros corretos da memória de trabalho. Os erros de memória de referência são contados como o número de primeiras entradas em qualquer braço que nunca continha uma plataforma. O número de entradas repetidas em qualquer braço que nunca continha uma plataforma está funcionando Erros incorretos de memória usando o labirinto de água radial de oito braços, foi revelado um aumento significativo no número de erros incorretos em roedores com lesão cerebral isquêmica hipóxica neonatal.

Os erros de memória de referência também aumentaram em animais com lesão cerebral em comparação com animais de controle. Ao tentar este procedimento, é importante observar que animais com manipulações experimentais podem exigir mais tempo para adquirir proficiência na tarefa. Isso é especialmente verdadeiro para erros de correção da memória de trabalho, uma vez que o rato tem uma tendência natural de retornar a um braço de plataforma quando a fuga de água é um motivador.

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Palavras-chave: Labirinto de água radial de oito braços memória de trabalho memória de referência lesão cerebral neonatal hipóxia-isquemia labirinto de braço radial terrestre pistas extra-labirinto plataformas de fuga

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