Name: Um novo procedimento para avaliar as propriedades de reforço de Tastants em laboratório ratos: Intraoral auto-administração operante (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-02-06T13:15:00.000+00:00
Duration: 11 min 16 s
Description: Aprenda a técnica de auto-administração intraoral operante em ratos de laboratório para avaliar os efeitos de reforço de soluções doces. Este método permite estudar mecanismos de recompensa e comportamentos relacionados à adição alimentar.

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Estes estudos foram apoiados por bolsas do Conselho de Pesquisa em Ciências Naturais e Engenharia do Canadá (NSERC) a FL e uma bolsa de estudos de Pós-Graduação canadense (CGSD) de NSERC para AM.L.

1. Animal Care e Habitação Todos os experimentos foram aprovados pelo Comitê Animal Care, da Universidade de Guelph, e são realizadas de acordo com as recomendações do Conselho Canadense de Cuidados Animal. O estudo inclui 22 adultos machos Sprague-Dawley (Charles River, QC) pesando 200-225 g no início da experiência. <ol><li> Ratos única casa e mantê-los em um ciclo claro / escuro reversa (07:00 OFF - 07:00 ON) com acesso ad libitum à comida e água, exceto quando indicado o contrário, ou durante o teste comportamental que ocorre durante o ciclo ativo. </li><li> Habituar ratos para a sala da colónia e manuseamento humano pesando diariamente durante uma semana antes da cirurgia. </li></ol> 2. Cirurgia Canulação Intraoral: Materiais e Processos O intra-oral (IO) a cirurgia e materiais estão descritos em 14 Limebeer et al. <ol><li> Para construçãot a cânula IO, cortar um pedaço de tubo de plástico de polietileno de cerca de 130 mm de comprimento (diâmetro interno de 0,86 mm e diâmetro exterior de 1,27 milímetros). </li><li> O tubo a ser fixado na cavidade oral requer uma extremidade com flange (~ 5 mm de diâmetro). Criar esta extremidade flangeada aquecendo a extremidade do tubo, com um ferro de soldar de 2-5 segundos e depois achatar prontamente a borda aquecida do tubo contra uma superfície plana. Cortar um disco de malha cirúrgica (cerca de 6-7 mm de diâmetro para se encaixar à volta do diâmetro da extremidade com flange da cânula) e passe-a para o comprimento do tubo até que o disco assenta contra a parte de trás da extremidade com flange da cânula IO. </li><li> Para cada cânula IO, cortar um disco adicional cirúrgico malha (8 mm de diâmetro) e os três quadrados de uma banda elástica (de 6 mm x 6 mm; ver Figura 1). </li><li> Esterilizar a cânula IO, discos de malha cirúrgica, e os quadrados elásticas numa solução anti-bacteriana por um período mínimo de 24 horas antes da cirurgia. </li><li> Antes da cirurgia, umautoclave todos os instrumentos cirúrgicos e desinfetar o campo cirúrgico. Entre as cirurgias, use um esterilizador pérola de vidro para esterilizar ferramentas e usar uma touca, luvas de borracha nitrílica, e máscaras cirúrgicas para manter as condições assépticas. </li></ol> Analgesia e anestesia <ol start="6"><li> Cerca de 30 minutos antes da cirurgia administrar uma via subcutânea (SC), a injecção do antibiótico Depocillin (0,33 mg / kg) e o analgésico meloxicam (5 mg / kg SC). </li><li> Induzir anestesia geral com isoflurano (4% de indução e manutenção 3%). </li><li> Uma vez que os ratos são responsivos ao dedo de aperto, e antes de proceder a quaisquer incisões, usar um cotonete de algodão derrubado para administrar uma anestesia tópica ao longo da face interior esquerda de ratos onde a cânula está a ser implantado, e injectar um anestésico local como a lidocaína HCl o local da incisão para a agulha de biópsia (base do pescoço) e de cabeça (couro cabeludo). </li><li> Aplicar lubrificante pomada para ambos os olhos, antes do início da ondary. </li></ol> Os procedimentos cirúrgicos <ol start="10"><li> Raspar a 10 milímetros x 10 milímetros remendo de cabelo na base do pescoço. Use gazes esterilizadas para cotonete e limpar a área raspada na seguinte ordem: sabonete antibacteriano, isopropílico a 70% de álcool e Betadine. </li><li> Inserir uma agulha G 15, de aço inoxidável, na base do pescoço e movê-lo por via subcutânea em torno da orelha para a face esquerda. Posicionar a ponta da agulha e passa-o através do mordente atrás do primeiro molar dentro da cavidade oral. </li><li> Passar a cânula IO através da ponta da agulha sobressai da cavidade oral e, em seguida, retirar a agulha, deixando apenas a cânula IO. </li><li> Passe um disco de malha cirúrgica seguido por três discos elásticos quadrados sobre a parte exterior da cânula IO e desenhá-los na pele exposta na parte de trás do pescoço para estabilizá-la. </li><li> Lave a cânula IO com um enxaguatório bucal antibacteriano </li><li> Antes do início da cirurgia, modificar um parafuso de nylon(28 mm de comprimento, 4 mm ponto; 8 milímetros cabeça) para remover a cabeça e esculpir um sulco dois milímetros ao longo do comprimento da rosca (ver Figura 2). </li><li> Raspar a 10 mm x 20 mm faixa de cabelo ao longo da linha média da cabeça. Use gazes esterilizadas para cotonete e limpar a área raspada na seguinte ordem: sabonete antibacteriano, isopropílico a 70% de álcool e Betadine. </li><li> Usar um bisturi cirúrgico para fazer uma longa incisão 20 milímetros ao longo da sutura sagital. Use uma broca de mão para fazer 4 furos (2 em cada lado da sutura) e usar uma chave de fenda de mão para fixar quatro parafusos joalheiros ao crânio. </li><li> Coloque o parafuso no centro dos quatro parafusos de joalheiros com a ranhura posicionada para a parte posterior do animal. Montar o parafuso no crânio do rato através da construção de um Headcap com cimento dental (usar cimento dental suficiente para cobrir a superfície dos parafusos joalheiros). Permitir que o cimento dental para secar antes de retirar o animal do campo cirúrgico e terminar a anestesia. </li></ol><pclass = &quot;jove_content&quot;&gt; monitoramento e cuidados pós-operatórios <ol start="19"><li> Individualmente os ratos da casa em gaiolas com cama imediatamente após a cirurgia e acompanhar de perto, durante 24 horas. </li><li> Administrar uma segunda injeção do analgésico Meloxicam 24 horas pós-cirurgia e lavar a cânula IO com um enxaguatório bucal antibacteriano uma vez / dia durante três dias. </li></ol> Dar ratazanas de 3-5 dias para recuperar de uma cirurgia, antes do início da experiência. 3. Procedimentos de auto-administração de IO Aparelho Para auto-administração, Plexiglas câmaras de condicionamento operante são usados, e cada câmara é colocada em uma caixa de madeira compensada atenuantes de som maior. Cada câmara de condicionamento operante tem uma luz casa (28 V) e duas alavancas retráteis (ativos e inativos) localizados em lados opostos da câmara, 8 cm acima do chão. A alavanca ativa é conectado a uma bomba de infusão saídas posicionadaside a câmara de isolamento de som e luz branca (28 W) está localizado a 3 cm acima para servir como uma luz de estímulo emparelhado com a entrega de infusões IO. A alavanca inativo serve para controlar a linha de base, o comportamento operante não reforçado, pressionando a alavanca não tem qualquer consequência, mas todas as prensas são gravadas. Comida <ol><li> Fornecer os ratos com uma dieta padrão (3,1 kcal / g) em sua gaiola. </li><li> Diluir xarope de milho rico em frutose (55% fórmula) para três diferentes concentrações (8% = 0,026 kcal/80 infusão mL; 25% = 0,08 kcal/80 infusão mL; 50% = 0,17 kcal/80 infusão mL), utilizando água de osmose reversa. Estas concentrações são selecionados porque cada um produz uma viscosidade que é apropriado para entregar rápidas infusões (2,5 seg) IO, dado o aparato experimental (ou seja, o diâmetro de seringas e tubos). </li></ol> Privação de alimento A fim de facilitar a obtenção deIO auto-administração, mas promover o crescimento normal, os ratos se sucederem períodos de privação de alimento e ad libitum acesso à ração padrão. <ol start="3"><li> Pesar os ratos diariamente às 7:00 e remover ração da calha de alimentação da gaiola. </li><li> No dia seguinte, pesar ratos às 12:00 horas (aproximadamente 18 horas depois) e começar IO auto-administração por 01:00. </li><li> Retornar ratos para suas gaiolas às 4:00 pm e fornecer acesso ad libitum à comida durante 3 horas consecutivas. Em seguida, registre o peso dos ratos e a quantidade total de ração consumida durante as três horas. Retomar a privação de alimentos, como descrito. </li></ol> Geral IO procedimento de auto-administração Operante de responder por infusões de IO de HFCS é avaliada em PR e horários contínuos de reforço. Os ratos são testados em IO de auto-administração até que a ingestão é estável, tal como definido por: 1) uma diferença significativa na resposta entre activo e inactiva alavancas para pelo menos 2 sessões consecutivas e 2) variação inferior a 20% no número de infusões auferidos por sessão por 2 sessões consecutivas. Cada sessão começa 6 horas para o ciclo escuro e dura 3 horas. A fase de aquisição 10 é constituída de IO sessões de auto-administração consecutivos sobre um esquema contínuo de reforço, e os ratos recebem uma única PR de teste de 24 horas antes do início de aquisição (teste PR I) e 24 horas após a última sessão de aquisição (Teste PR II). Para os testes de RP, o ponto de interrupção (PA) é definida como a última infusão recebida antes da cessação da resposta na alavanca activa durante pelo menos 1 h 18. <ol start="6"><li> Ratos contrap na base de pesos tomados durante três dias antes do inicio da experiência e atribuir os ratos para auto-administrar uma de três concentrações de HFCS: 8%, 25%, ou 50%. </li><li> Pesar ratos às 12:00 e transferi-los da sala de colônia para a sala de ensaios em suas gaiolas. Para remover alimentos ou bedding, que podem acumular-se dentro da cânula de IO, a bomba de ar através da cânula, utilizando uma seringa de 12 ml com uma agulha fixa 16 L, com 50 mm de tubo de polietileno (diâmetro interno de 1,14 mm e diâmetro exterior de 1,57 mm) ligados à extremidade. </li><li> Na câmara operante, ligar a cânula de IO a tubagem Tygon (diâmetro interno de 0,02 mm e diâmetro exterior de 1,53 mm) através de um veio construído de uma agulha de 20 G modificada (remover o cubo de plástico e ponta chanfrada). Posicionar a parte inferior do tubo (isto é, mais próximo do animal) dentro do bosque do parafuso. A maior parte do tubo está ligada a um suporte giratório, e protegido por uma mola. Ligue a base da mola do segmento de parafuso montado na cabeça do rato. </li><li> Dê ratos cinco minutos para se acostumar com a câmara operante e, em seguida, iniciar a sessão de auto-administração IO. A sessão de auto-administração IO começa com a ativação da casa de luz, a entrada das duas alavancas retráteis, e iluminação doestímulo luminoso acima da alavanca ativa por 30 segundos. </li><li> Para PR Teste I, utilizar o horário PR descrita por Richardson e Roberts18 (relação resposta escalada = (5-E (número de injeção x 0,2)) - 5). </li><li> Para as sessões de aquisição de 1-10, use uma programação contínua de reforço em que cada imprensa na alavanca de resultados ativos na entrega de uma infusão de 80 mL da solução de teste de mais de 2,5 seg. </li><li> Para dar tempo suficiente para a ingestão, impõem um período de tempo limite de 27,5 segundos, durante o qual a alavanca ativa está retraída ea luz estímulo é ativado (ou seja, os ratos podem obter uma infusão IO a cada 30 seg). Não imponha um limite para o número de infusões obtidas dentro de cada sessão de auto-administração IO. </li><li> Se o rato não dar uma resposta sobre a alavanca ativa por 20 minutos consecutivos, o primeiro-rato (abrir a câmara operante e facilitar o rato pressionando uma vez a alavanca ativa). Prime os animais a cada 20 minutos até 5x/session dutocar os três primeiros dias de só de aquisição. </li><li> Administrar o segundo teste de RP usando os parâmetros descritos no passo 3.10. </li><li> Seguindo sessões de auto-administração de IO, remover os ratos das câmaras operantes, lave a cânula IO com 2,0 ml de água usando os mesmos materiais descritos em 3.7, e retornar os ratos às suas gaiolas casa na sala da colónia. </li><li> Após três horas de acesso ad libitum à ração, os ratos de peso at 7:00, retire o alimento da manjedoura, e retomar a privação de alimento. </li></ol> Dados auto-administração são analisados ​​usando de dois fatores repetidas medidas análises de variância (ANOVA). Comparações múltiplas utilizando o método Student-Newman-Keuls (α = 0,05) foram utilizados para explorar quaisquer interacções significativos ou efeitos principais.

<ol><li>Avena, N. M., Bocarsly, M. E., Hoebel, B. G., Gold, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overlaps+in+the+nosology+of+substance+abuse+and+overeating%3A+the+translational+implications+of+%26%2334%3Bfood+addiction%26%2334%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Drug+Abuse+Rev%22%5BJournal%5D)">Overlaps in the nosology of substance abuse and overeating: the translational implications of &#34;food addiction&#34.</a> Curr. Drug Abuse Rev. 4 (3), 133-139 (2011).</li>
<li>Ifland, J. R., Preuss, H. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+food+addiction%3A+a+classic+substance+use+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Med.+Hyp%22%5BJournal%5D)">Refined food addiction: a classic substance use disorder.</a> Med. Hyp. 72, 518-526 (2009).</li>
<li>Volkow, N., Wise, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+can+drug+addiction+help+us+understand+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">How can drug addiction help us understand obesity.</a> Nat. Neurosci. 8 (5), 555-560 (2005).</li>
<li>Gearhardt, A. N., Davis, C., Kuschner, R., Brownell, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+addiction+potential+of+hyperpalatable+foods%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Drug+Abuse+Rev%22%5BJournal%5D)">The addiction potential of hyperpalatable foods.</a> Curr. Drug Abuse Rev. 4 (3), 140-145 (2011).</li>
<li>Gearhardt, A. N., Yokum, S., Orr, P. T., Stice, E., Corbin, W. R., Brownell, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+correlates+of+food+addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Gen.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Neural correlates of food addiction.</a> Arch. Gen. Psychiatry. 68 (8), 808-816 (2011).</li>
<li>Volkow, N. D., Wang, G., Fowler, J. S., Telang, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overlapping+neuronal+circuits+in+addiction+and+obesity%3A+evidence+of+systems+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Philos.+Trans.+Royal+Soc%22%5BJournal%5D)">Overlapping neuronal circuits in addiction and obesity: evidence of systems pathology.</a> Philos. Trans. Royal Soc. 363, 3191-3200 (2008).</li>
<li>Alsiö, J., Olszewski, P. K., Levine, A. S., Schiöth, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Feed-forward+mechanisms%3A+addiction-like+behavioral+and+molecular+adaptations+in+overeating%5BTitle%5D)+AND+%22Front.+Neuroendocrinol%22%5BJournal%5D)">Feed-forward mechanisms: addiction-like behavioral and molecular adaptations in overeating.</a> Front. Neuroendocrinol. 33 (2), 127-139 (2012).</li>
<li>Johnson, P. M., Kenny, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopamine+D2+receptors+in+addiction-like+reward+dysfunction+and+compulsive+eating+in+obese+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Dopamine D2 receptors in addiction-like reward dysfunction and compulsive eating in obese rats.</a> Nat. Neurosci. 13 (5), 635-644 (2010).</li>
<li>Bray, G. A., Nielsen, S. J., Popkin, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Consumption+of+high-fructose+corn+syrup+in+beverages+may+play+a+role+in+the+epidemic+of+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Clin.+Nutr%22%5BJournal%5D)">Consumption of high-fructose corn syrup in beverages may play a role in the epidemic of obesity.</a> Am. J. Clin. Nutr. 79 (4), (2004).</li>
<li>Forshee, R. A., Storey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+examination+of+the+evidence+relating+high+fructose+corn+syrup+and+weight+gain%5BTitle%5D)+AND+%22Crit.+Rev.+Food+Sci.+Nutr%22%5BJournal%5D)">A critical examination of the evidence relating high fructose corn syrup and weight gain.</a> Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 47 (6), 561-582 (2007).</li>
<li>Moeller, S. M., Fryhofer, S. A., Osbahr, A. J., Robinowitz, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+high+fructose+corn+syrup%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Nutr%22%5BJournal%5D)">The effects of high fructose corn syrup.</a> J. Am. Coll. Nutr. 28 (6), 619-626 (2009).</li>
<li>White, J. S., Foreyt, J. P., Melanson, K. J., Angelopoulos, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+fructose+corn+syrup%3A+Controversies+and+common+sense%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Lifestyle+Med%22%5BJournal%5D)">High fructose corn syrup: Controversies and common sense.</a> Am. J. Lifestyle Med. 4 (6), 515-520 (2010).</li>
<li>Grill, H. J., Norgren, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+taste+reactivity+test.+I.+Mimetic+responses+to+gustatory+stimuli+in+neurologically+normal+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The taste reactivity test. I. Mimetic responses to gustatory stimuli in neurologically normal rats.</a> Brain Res. 143 (2), 263-279 (1978).</li>
<li>Limebeer, C. L., Vemuri, V. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inverse+agonism+of+cannabinoid+CB1+receptors+potentiates+LiCl-induced+nausea+in+the+conditioned+gaping+model+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Br.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Inverse agonism of cannabinoid CB1 receptors potentiates LiCl-induced nausea in the conditioned gaping model in rats.</a> Br. J. Pharmacol. 161 (2), 336-349 (2010).</li>
<li>DeBold, R. C., Miller, N. E., Jensen, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+strength+of+drive+determined+by+a+new+technique+for+appetitive+classical+conditioning+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Physiol.Psychol%22%5BJournal%5D)">Effect of strength of drive determined by a new technique for appetitive classical conditioning of rats.</a> J. Comp. Physiol.Psychol. 59 (1), 102-108 (1965).</li>
<li>Panksepp, J., Trowill, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraoral+self+injection%3A+I.+Effects+of+delay+of+reinforcement+on+resistance+to+extinction+and+implications+for+self-stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Psychonomic+Sci%22%5BJournal%5D)">Intraoral self injection: I. Effects of delay of reinforcement on resistance to extinction and implications for self-stimulation.</a> Psychonomic Sci. 9 (7), 405-406 (1967).</li>
<li>Panksepp, J., Trowill, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraoral+self+injection%3A+II.+The+simulation+of+self-stimulation+phenomena+with+a+conventional+reward%5BTitle%5D)+AND+%22Psychonomic+Sci%22%5BJournal%5D)">Intraoral self injection: II. The simulation of self-stimulation phenomena with a conventional reward.</a> Psychonomic Sci. 9 (7), 407-408 (1967).</li>
<li>Richardson, N. R., Roberts, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+ratio+schedules+in+drug+self-administration+studies+in+rats%3A+a+method+to+evaluate+reinforcing+efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Progressive ratio schedules in drug self-administration studies in rats: a method to evaluate reinforcing efficacy.</a> J. Neurosci. Methods. 66, 1-11 (1996).</li>
<li>Berridge, K. C., Robinson, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parsing+reward%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Parsing reward.</a> Trends Neurosci. 26 (11), 507-501 (2003).</li>
<li>Sclafani, A., Ackroff, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reinforcement+value+of+sucrose+measured+by+progressive+ratio+operant+licking+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Reinforcement value of sucrose measured by progressive ratio operant licking in the rat.</a> Physiol. Behav. 79, 663-670 (2003).</li>
<li>Houpt, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gastrointestinal+factors+in+hunger+and+satiety%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Gastrointestinal factors in hunger and satiety.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 6 (2), 145-164 (1982).</li>
<li>Mazur, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+rate+of+reinforcement+and+rate+of+change+on+choice+behaviour+in+transition%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Psychol%22%5BJournal%5D)">Effects of rate of reinforcement and rate of change on choice behaviour in transition.</a> J. Exp. Psychol. 50 (2), 111-128 (1997).</li>
<li>Samaha, A. N., Robinson, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+does+the+rapid+delivery+of+drugs+to+the+brain+promote+addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Pharmacol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Why does the rapid delivery of drugs to the brain promote addiction.</a> Trends Pharmacol. Sci. 26 (2), 82-87 (2005).</li>
<li>Berridge, K. C., Kringelbach, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affective+neuroscience+of+pleasure%3A+reward+in+humans+and+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Affective neuroscience of pleasure: reward in humans and animals.</a> Psychopharmacology. 199 (3), 457-480 (2008).</li>
<li>Kelley, A. E., Berridge, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neuroscience+of+natural+rewards%3A+relevance+to+addictive+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The neuroscience of natural rewards: relevance to addictive drugs.</a> J. Neurosci. 22 (9), 3306-3311 (2002).</li>
<li>Shaham, Y., Shalev, U., Lu, L., De Wit, H., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+reinstatement+model+of+drug+relapse%3A+history%2C+methodology+and+major+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">The reinstatement model of drug relapse: history, methodology and major findings.</a> Psychopharmacology. 168 (1-2), 3-20 (2003).</li>
<li>de Wit, H., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+reinstatement+of+heroin-reinforced+responding+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Drug reinstatement of heroin-reinforced responding in the rat.</a> Psychopharmacology. 79 (1), 29-31 (1983).</li>
<li>Schmidt, H. D., Anderson, S. M., Famous, K. R., Kumaresan, V., Pierce, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomy+and+pharmacology+of+cocaine+priming-induced+reinstatement+of+drug+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Anatomy and pharmacology of cocaine priming-induced reinstatement of drug seeking.</a> Eur. J. Pharmacol. 526 (1-3), 65-76 (2005).</li>
<li>Dunnigan, M. G., Ford, J. S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+insulin+response+to+intravenous+fructose+in+relation+to+blood+glucose+levels%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">The insulin response to intravenous fructose in relation to blood glucose levels.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 40 (4), 629-635 (1975).</li>
<li>Crapo, P. A., Kolterman, O. G., Olefsky, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+oral+fructose+in+normal%2C+diabetic%2C+and+impaired+glucose+tolerance+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Care%22%5BJournal%5D)">Effects of oral fructose in normal, diabetic, and impaired glucose tolerance subjects.</a> Diabetes Care. 3 (5), 575-582 (1980).</li>
<li>Lê, K. A., Tappy, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+effects+of+fructose%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Clin.+Nutr.+Metab.+Care%22%5BJournal%5D)">Metabolic effects of fructose.</a> Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab. Care. 9 (4), 469-475 (2006).</li>
<li>Scheggi, M. E., Secci, G., Marchese, M. G., De Montis, C., Gambarana, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+palatability+on+motivation+to+operate+for+caloric+and+non-caloric+food+in+non+food-deprived+and+food-deprived+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Influence of palatability on motivation to operate for caloric and non-caloric food in non food-deprived and food-deprived rats.</a> Neuroscience. 236, (2013).</li>
<li>Sclafani, A., Lucas, F., Ackroff, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+taste+and+palatability+in+carbohydrate-induced+overeating+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">The importance of taste and palatability in carbohydrate-induced overeating in rats.</a> Am. J. Physiol. 270 (6), 1197-1202 (1996).</li>
<li>Roberts, D. C. S., Loh, E. A., Vickers, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-administration+of+cocaine+on+a+progressive+ratio+schedule+in+rats%3A+dose-response+relationship+and+effect+of+haloperidol+pretreatment%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Self-administration of cocaine on a progressive ratio schedule in rats: dose-response relationship and effect of haloperidol pretreatment.</a> Psychopharmacology. 97 (4), 535-538 (1989).</li>
<li>Reilly, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reinforcement+value+of+gustatory+stimuli+determined+by+progressive+ratio+Performance%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Biochem.+Behav%22%5BJournal%5D)">Reinforcement value of gustatory stimuli determined by progressive ratio Performance.</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 63 (2), 301-311 (1999).</li>
<li>Zittel-Lazarini, A., Cador, M., Ahmed, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+transition+in+cocaine+self-administration%3A+Behavioral+and+neurobiological+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">A critical transition in cocaine self-administration: Behavioral and neurobiological implications.</a> Psychopharmacology. 192 (3), 337-146 (2007).</li>
<li>Stanhope, K. L., Havel, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocrine+and+metabolic+effects+of+consuming+beverages+sweetened+with+fructose%2C+glucose%2C+sucrose%2C+or+high+fructose+corn+syrup+Am%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Nutr%22%5BJournal%5D)">Endocrine and metabolic effects of consuming beverages sweetened with fructose, glucose, sucrose, or high fructose corn syrup Am.</a> J. Clin. Nutr. 88 (6), 17335-17375 (2008).</li>
<li>Deroche-Gamonet, V., Belin, B., Piazza, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+addiction-like+behaviour+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Evidence for addiction-like behaviour in the rat.</a> Science. 305, 1014-1017 (2004).</li>
</ol>

Os autores que não têm nada a revelar.

O estudo atual mostra uma nova abordagem para a avaliação das propriedades de reforço de soluções doces combinando métodos tradicionalmente empregados para estudar o comportamento motivado por drogas de abuso (auto-administração operante intravenosa) e avaliar a palatabilidade de tastants (sabor reatividade através de infusões intra-orais). Para este fim, sob muito breve anestesia induzida por isoflurano, os ratos são implantados cânula IO que permite a entrega de soluções teste directamente para a boca. Após a recupera...

O estudo da base neurobiológica e comportamental de dependência de alimentos baseia-se nas observações de que, à semelhança de drogas de abuso, o consumo excessivo de alimentos palatáveis ​​promove dependência comportamental 1-4 e induz alterações em circuitos de recompensa do cérebro em humanos 5-6 e laboratório animais 7-8. Mas, enquanto existem vários protocolos e procedimentos para estudar as propriedades de dependência de drogas de abuso em ratos de laboratório, adaptando os métodos para avaliar comportamentos &quot;viciantes&quot; induzidas por alimentos apresenta desafios únicos. O objetivo do presente estudo foi o de aplicar princípios de administração intravenosa (IV) de drogas auto-administração operante para a investigação de auto-administração operante de soluções doces entregues por infusão intra-oral (IO). O doce utilizado foi o xarope de milho rico em frutose (HFCS), porque, apesar de controversa, há evidências de que a HFCS pode ser ligada à epidemia moderna de obesidade 9-12. Tradicionalmente, as infusões de IO são entregues para estudar a palatabilidade de saborizantes em experiências reactividade gustativas 13. Resumidamente, uma cânula de IO é implantado cirurgicamente no mordente de ratos e infusões IO de várias soluções são passivamente entregues 14. O objetivo é estudar as reações orofaciais dos animais aos tastants. No entanto, cânulas IO também foram implantados cronicamente no palato de ratos para determinar se eles iriam aprender a pressionar uma alavanca para soluções de auto-infundir diretamente em sua cavidade oral, daí o termo IO auto-injeção 15-17. No presente estudo, descrevemos um procedimento que utiliza uma pequena cirurgia e que permite o teste de auto-administração operante longo prazo. Este procedimento tem várias vantagens significativas sobre os processos tradicionais que envolvem a beber uma solução a partir de um bico (a), ou responder operante para peletes sólidos (b), ou responder operante de gotas de fluido entregues num receptáculo(C). Em comparação com a (a), IO auto-administração envolve uma resposta operante (isto é, pressionando uma alavanca) e, por conseguinte, é possível modificar a programação regulando a relação entre resposta e requisitos de entrega de infusões IO. Por exemplo, através do emprego de uma razão progressiva (PR) cronograma, segundo o qual as respostas necessárias para infusões sucessivas aumentam exponencialmente dentro de uma sessão de 18, é possível avaliar o quanto um animal &quot;quer&quot; a próxima infusão 19. Este importante aspecto de &quot;buscar&quot; o comportamento não pode ser avaliado quando os animais beber uma solução de uma bica, a menos que um aparelho especial que controla a oferta de líquidos e monitora as respostas é empregado 20. Além disso, IO auto-administração proporciona um meio de comparar os comportamentos motivados por diferentes estímulos de reforço. Ou seja, é possível comparar responder operante mantidas por doces e outros reforços, tais como drogas de abuso emos chamados &quot;estudos de substituição.&quot; Em comparação com (b), IO auto-administração permite o teste de qualquer concentração e qualquer quantidade de qualquer aditivo alimentar solúvel em água. Isso é fundamental para estudar o comportamento motivado por doces como HFCS, porque, com o melhor de nosso conhecimento, não há pastilhas disponíveis comercialmente sólidos de frutose, frutose ou combinações de glicose, em diferentes proporções, que seria adequado para câmaras operantes. Além disso, a importância de controlar e manipular índices de concentração / volume é obrigatório em experimentos onde o consumo pode ser modulada tanto pelo valor calórico de uma solução (que leva à saciedade específicas de nutrientes) e pela quantidade de solução que podem ser consumidos dentro de um determinado período de tempo (isto é, plenitude) 21. IO auto-administração também reduz o atraso entre a resposta operante e a entrega do reforço primário, um factor que desempenha um papel importante na aquisição e manutençãotenção do comportamento operante 16,22-23. Finalmente, em comparação com (c), IO auto-administração permite a entrega de infusões passivos IO de quantidades controladas de solução de teste, e isso faz com que seja possível medir as respostas orofaciais de &quot;gosto&quot; (reação hedônica objetivo como protuberâncias da língua 24 -25) e se estas respostas mudar durante IO auto-administração. Além disso, a capacidade de administrar infusões passivos IO tem aplicações importantes para o estudo da recaída de procura de alimentos. Ou seja, em estudos de IV droga auto-administração, após períodos de extinção, primos de drogas (ou seja, a administração de uma pequena dose da droga 26) podem &quot;restaurar&quot; responder 27-28. Portanto, a capacidade de entregar infusões IO sem qualquer ação por parte do animal pode ser usado para estudar &quot;cru&quot; preparado reintegração, assim como o potencial de reintegração cruzamento entre alimentos edrogas de abuso. IO auto-administração de soluções doces também é preferível para IV e auto-administração intra-gástrica. De facto, apesar de infusões IV de frutose em seres humanos e em animais de laboratório produz efeitos fisiológicos similares aos observados após ingestão oral, 29-31, este é um modelo pobre de como doces são normalmente consumido (isto é, por via oral). Além disso, os sinais gustativos produzidos por mastigação conferem informação importante sobre o paladar dos alimentos, e quando esta fase do processo de digestão é omitido, o desenvolvimento de comportamentos adaptativos, tais como excesso de comida é reduzida 32-33.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Reagents</td></tr><tr><td>Meloxicam</td><td>Boehringer Ingelheim Canada Ltd.</td><td></td><td>Da farmácia da Faculdade de Veterinária</td></tr><tr><td>de Ontário Procaína Penicilina G</td><td>Caneta Aquosa, Wyeth Saúde Animal</td><td></td><td>Da farmácia da Faculdade de Veterinária de Ontário</td></tr><tr><td>Lidocaína HCl 2%</td><td></td><td></td><td>Da farmácia da Faculdade de Veterinária de Ontário</td></tr><tr><td>Marcaína 0,5 %</td><td></td><td></td><td>Da farmácia da Faculdade de Veterinária de Ontário</td></tr><tr><td>Pomada</td><td></td><td></td> <td>lubrificante para os olhosO produto pode ser comprado em qualquer farmácia</td></tr><tr><td>2% Lidocaína Viscosa Oral (Anestésico Tópico)</td><td>Pharmascience Inc.</td><td>CDMV # 14705</td><td>Frasco de 100 ml</td></tr><tr><td>Isoflurano USP</td><td>Pharmaceutical Partners of Canada</td><td>CDMV # 108737</td><td>Frasco de 250 ml</td></tr><tr><td>Bacti-Stat</td><td>Merck Sante Animale</td><td>CDMV # 6449</td><td>Frasco de 3.785 L</td></tr><tr><td>Álcool isopropílico (70%)</td><td>Perdu Pharma</td><td>Fisher # MPX18404</td><td>frasco de 4 L</td></tr><tr><td>Betadine 10%</td><td>McKesson Canada</td><td>CDMV # 104826</td><td>frasco</td></tr> <tr><td>de 500 mlSuper Germiphene</td><td>Ceva Animal Health</td><td>CDMV # 103629 garrafa de</td><td>454 ml</td></tr><tr><td>Chlorhexidene (Novadent)</td><td>Zoetis</td><td>CDMV # 8908</td><td>garrafa de 236 ml</td></tr><tr><td>Xarope de Milho com Alta Frutose</td><td>Natures Flavours</td><td>HFCS-55</td><td>garrafa</td></tr><tr> de 1 galão<td colspan="4">Materials</td></tr><tr><td>PE90 tubulação</td><td>Becton Dickinson and Company</td><td>VWR # CA-63019-080A</td><td>100 pés/bobina</td></tr><tr><td>Tubulação PE160</td><td>Becton Dickinson and Company</td><td>VWR # CA-63018-747</td><td>100 pés/bobina</td></tr><tr><td>Malha de Polipropileno</td><td>Small Parts Inc.</td><td>CMP-0297-D</td><td></td></tr><tr><td>Ferro</td><td></td><td></td> de solda <td>O produto pode ser comprado em qualquer loja de ferragens</td></tr><tr><td>#64 Bandas elásticas</td><td>Grampos Material de escritório</td><td>Item # 13556</td><td>O produto pode ser comprado em qualquer loja de material de escritório</td></tr><tr><td>15 G Agulhas de parede fina de 3,5 pol</td>. <td>VWR # CABD1108</td><td>12 agulhas/pacote</td>Barbeador elétrico (lâmina de 1/2 pol) O produto pode ser comprado em qualquer animal de estimação <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> loja de suprimentos</td></tr><tr><td>Agulhas de Precisão Deslizante 20 G agulhas (1&frac12; in)</td><td>Becton Dickinson and Company</td><td>Fisher # 14-826D</td><td></td></tr><tr><td>Precision Glide Needles 16 G agulhas (1&frac12; in)</td><td>Becton Dickinson and Company</td><td>Fisher # 14-826-5D</td><td></td></tr><tr><td>Câmaras de condicionamento operantes</td><td>Med Associates Inc.</td><td>ENV-008-CTC</td><td></td></tr><tr><td>Câmara de atenuação de som</td><td>Med Associates Inc.</td><td>ENV-018M</td><td></td></tr><tr><td>MED PC IV software</td><td>Med Associates Inc.</td><td>SOF-735</td><td></td></tr><tr><td>Bombas de seringa</td><td>Razel Scientific Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Conjunto giratório de plástico descartável</td><td>Med Associates Inc.</td><td>Tubulação PHM-115I</td><td></td></tr><tr><td>Tygone Microbore</td><td>Saint Gobain Performance Plastics</td><td>Fisher # 1417015B</td><td>500 pés/bobina</td></tr></tbody></table>

um novo procedimento para avaliar as propriedades de reforço de tastants em laboratório ratos: intraoral auto-administração operante

A Novel Procedure for Evaluating the Reinforcing Properties of Tastants in Laboratory Rats: Operant Intraoral Self-administration

Este artigo descreve um novo método para estudar a base de bio-comportamental da dependência de alimentos. Este método combina a componente cirúrgica de sabor reactividade com os aspectos do comportamento de auto-administração de drogas operante. Sob anestesia geral breve, os ratos são implantados com uma cânula intra-oral (IO), que permite a administração de soluções de teste directamente na cavidade oral. Os animais são então testados em câmaras de auto-administração operante através do qual eles podem pressionar uma alavanca para receber infusões de IO de soluções de teste. IO auto-administração tem várias vantagens sobre os procedimentos experimentais que envolvem a beber uma solução a partir de um bico ou responder operante para pastilhas ou soluções entregues num recipiente sólido. Aqui, mostramos que a IO auto-administração pode ser utilizada para estudar a auto-administração de xarope de milho rico em frutose (HFCS). Os ratos foram testados para a auto-administração em uma (PR) esquema de razão progressiva, que avalia a quantidade máxima de opcomportamento rante que será emitido para diferentes concentrações de HFCS (isto é, 8%, 25% e 50%). Após este teste, os ratos auto-administrados estas concentrações em uma programação contínua de reforço (ou seja, uma infusão para cada imprensa alavanca) por 10 dias consecutivos (1 sessão / dia, cada um com duração de 3 horas), e em seguida, eles foram novamente testados no cronograma PR . No esquema de reforço contínuo, os ratos levou menos infusões de concentrações mais elevadas, embora a concentração mais baixa de HFCS (8%) mantida a auto-administração de mais variável. Além disso, os testes de RP revelaram que 8% tinha um valor de reforço inferior a 25% e 50%. Estes resultados indicam que a IO auto-administração pode ser empregada para o estudo de aquisição e de manutenção da resposta de soluções doces. A sensibilidade de resposta operante a diferenças na concentração e esquema de reforço torna IO auto-administração de um processo ideal para investigar a neurobiologia da ingestão voluntária of doces.

Aquisição de IO auto-administração A Figura 3 representa responder operante nas alavancas ativos e inativos durante a auto-administração de 8%, 25%, ou 50% HFCS por 10 sessões consecutivas. Os ratos adquirem IO auto-administração de HFCS dentro das primeiras três sessões e manter a alavanca activa estável responder (como descrito acima) para o restante da aquisição. As diferenças dependentes da concentração em resposta alavanca activos também são evidentes: em comparaç...

O presente estudo avalia um novo procedimento para avaliar os efeitos de reforço de soluções palatáveis ​​em ratos de laboratório: a auto-administração intra-oral. Para este fim, respondendo operante (isto é, a pressão da alavanca) para infusões intra-orais de soluções doces em diferentes concentrações foi medido em rácios contínuos e progressivos esquemas de reforço.

Um novo procedimento para avaliar as propriedades de reforço de Tastants em laboratório ratos: Intraoral auto-administração operante

This paper describes a novel method for studying the bio-behavioral basis of addiction to food. This method combines the surgical component of taste ...

O objetivo geral deste procedimento é aplicar os princípios do condicionamento operante de automedicação intravenosa ao estudo da automedicação operante de soluções doces administradas por infusão intraoral. Isso é realizado primeiramente implantando cirurgicamente ratos com uma cânula IO e um capacete craniano. O segundo passo do procedimento consiste em selecionar o açúcar de interesse e preparar as concentrações apropriadas da solução para automedicação em câmaras operantes.O terceiro passo do procedimento consiste em colocar os ratos nas câmaras operantes, conectar seus cânulas IO à tubulação apropriada e permitir que os animais autoadministrem infusões IO da solução utilizando diferentes concentrações e diferentes esquemas de reforço. O passo final do procedimento é remover os ratos das câmaras operantes e lavar seus cânulas com água, em preparação para a próxima sessão de autoadministração. Em última análise, podem ser obtidos resultados que demonstram que os ratos adquirem e mantêm a autoadministração de soluções doces, e que seu comportamento é sensível a alterações na concentração da solução e no esquema de reforço empregado por meio da autoadministração IO.A principal vantagem desta técnica em relação a métodos existentes, como beber uma solução de um bico ou responder livremente por pellets sólidos, é que este dispositivo metálico permite testar qualquer concentração e qualquer volume de aditivos alimentares solúveis em água. Mais importante ainda, podemos administrar infusões intervaladas passivas, em quantidades controladas das soluções, sem que seja necessária qualquer ação por parte do animal. Isso torna possível medir respostas artificiais de apreciação utilizando testes de atividade.Quaisquer estudos sobre recaída mais infusões intervaladas podem ser utilizados para investigar o ressurgimento induzido por condicionamento, bem como possíveis ressurgimentos cruzados entre soluções Swiss e drogas de abuso. Este método pode ajudar a responder perguntas fundamentais nas áreas de dependência alimentar e obesidade, como a identificação dos substratos neurais responsáveis pela aquisição, manutenção e recaída no comportamento compulsivo de busca por substâncias doces, além de identificar os fatores envolvidos na obesidade induzida por dieta. Também será possível estudar os fatores genéticos e epigenéticos envolvidos no desenvolvimento da busca compulsiva por alimentos.Todos os experimentos são aprovados pelo Comitê de Cuidados com Animais da Universidade de Guelph e são realizados de acordo com as recomendações do Conselho Canadense de Cuidados com Animais. Para construir a cânula IO, corte um pedaço de tubo plástico de polietileno, com aproximadamente 130 milímetros de comprimento, para criar uma extremidade achatada em forma de flange F, que será fixada na cavidade oral. Utilize uma ponteira de solda para aquecer a extremidade do tubo por dois a cinco segundos e, em seguida, achate imediatamente a borda aquecida do tubo contra uma superfície plana.Corte um disco de malha cirúrgica com aproximadamente seis a sete milímetros de diâmetro e enfie-o no tubo até que encoste na extremidade traseira da cânula com flange F. Para cada cânula IO, corte um disco adicional de malha cirúrgica com aproximadamente oito milímetros de diâmetro e três quadrados de seis por seis milímetros de uma faixa elástica pelo menos 24 horas antes da cirurgia. Esterilize a cânula IO, os discos de malha cirúrgica e os quadrados elásticos em uma solução antibacteriana aproximadamente 30 minutos antes da cirurgia.Administre uma injeção subcutânea do antibiótico dein e do analgésico meloxicam. Após utilizar isof fluorine para induzir anestesia geral de acordo com o protocolo descrito no texto e verificar a sedação com um aperto no dedo do pé, use um cotonete para aplicar um anestésico tópico ao longo da bochecha interna esquerda, onde será implantada a cânula. Em seguida, injete um anestésico local, como lidocaína HCL, no local da incisão para a agulha de biópsia e no capacete craniano.Aplicar pomada lubrificante para os olhos em ambos os olhos. Em seguida, fazer a depilação de uma área de 10 por 10 milímetros na base do pescoço. Usar gaze estéril para limpar e higienizar a região com sabão antibacteriano, seguido de álcool a 70%.E, finalmente, Betadine. Em seguida, insira uma agulha de aço inoxidável de 15 gauge na base do pescoço e mova-a subcutaneamente em direção à orelha até a bochecha esquerda. Posicione a ponta da agulha e passe-a através da bochecha, atrás do primeiro molar, no interior da cavidade oral.Passe a cânula IO através da ponta da agulha saliente e, em seguida, remova a agulha, deixando apenas a cânula. Enfie um disco cirúrgico de malha seguido por três discos elásticos quadrados na porção externa da cânula e deslize-os até a pele exposta na parte de trás do pescoço para estabilizá-la. Em seguida, use enxaguante bucal antibacteriano para lavar a cânula IO antes da cirurgia na parte superior da cabeça. Modifique um parafuso de náilon removendo sua cabeça e, então, esculpa um sulco de dois milímetros ao longo do comprimento da rosca.Após raspar uma faixa de 10 por 20 milímetros de pelos ao longo da linha média da cabeça, use gaze estéril para limpar e higienizar a área raspada, conforme mostrado anteriormente para a bochecha, com um bisturi cirúrgico, faça uma incisão de 20 milímetros de comprimento ao longo da sutura sagital. Em seguida, use uma broca manual para fazer quatro furos, dois em cada lado da sutura. Por fim, use parafusos de ourives e cimento dental para fixar o pino ao crânio após a cirurgia.Mantenha a rata em uma gaiola individual e monitore por 24 horas. Consulte o protocolo descrito no texto para os cuidados e limpeza adicionais da cânula IO para experimentos realizados na câmara operante. Descrito no protocolo descrito no texto.Usando água de osmose reversa, prepare diluições de 8% e 50% de xarope de milho com alto teor de frutose a 55% ou HFCS após pesar a rata e transferi-la para a sala de testes em sua gaiola de origem. Remova a comida ou a cama que possa se acumular na cânula IO utilizando uma seringa de 12 mililitros equipada com uma agulha de 16 calibres e 50 milímetros de tubo de polietileno para bombear ar através da cânula na câmara operante. Use uma agulha de 20 calibres como haste para conectar a cânula IO ao tubo de tigon.Fixe a porção inferior do tubo dentro do sulco da correia e conecte a porção superior a um conector giratório protegido por um braço oscilante. Em seguida, conecte a base da mola ao filete do parafuso montado na cabeça da rata. Permita que a rata se acostume à câmara por cinco minutos e, então, inicie a sessão de automadministração ativando a luz ambiente.Introduza as duas alavancas retráteis e ilumine o estímulo luminoso acima da alavanca ativa durante 30 segundos. Para o teste de razão progressiva, ou RP, e todos os testes RP subsequentes, utilize o esquema RP descrito por Richardson e Roberts, no qual a escalada da razão de resposta é igual a cinco vezes E elevado ao número da injeção multiplicado por 0,2, menos cinco. Para as sessões de aquisição de um a dez, utilize um esquema contínuo de reforço, em que cada pressão na alavanca ativa resulta na administração de uma infusão de 80 microlitros da solução-teste ao longo de 2,5 segundos, permitindo tempo suficiente para a ingestão, impondo um período de tempo limite de 27,5 segundos, durante o qual a alavanca ativa é retratada e a luz do estímulo é ativada.Não estabeleça um limite para o número de infusões disponíveis em cada sessão de autoministração intravenosa. Se a rata não responder à alavanca ativa por 20 minutos consecutivos, prepare a rata facilitando uma pressão única na alavanca ativa. Após as sessões de autoministração, remova a rata da câmara de condicionamento operante.Use dois mililitros de água para lavar a cânula IO e devolva a rata à sua gaiola no ambiente de criação. Siga a programação de alimentação descrita no protocolo textual. Esta figura mostra a resposta operante nas alavancas ativa e inativa durante a autoadministração de 8, 25 ou 50% de HFCS por 10 sessões consecutivas.As ratas adquirem a autoadministração intravenosa de HFCS dentro das três primeiras sessões e mantêm respostas estáveis na alavanca ativa pelo restante da fase de aquisição. Diferenças dependentes da concentração nas respostas da alavanca ativa também são evidentes. Por exemplo, em comparação com 25% de HFCS, as respostas são significativamente menores nas ratas que autoadministram 50% de HFCS.Os ratos mantêm um nível intermediário de resposta operante quando recebem HFCS a 8% e demonstram maior variabilidade individual na ingestão, nas respostas à alavanca ativa e no ponto de interrupção, definido como a última infusão recebida devido à ausência de respostas na alavanca ativa por pelo menos uma hora, conforme apresentado nestes gráficos, respectivamente. No teste PR um, observa-se uma frequência modesta de respostas para todas as concentrações de HFCS. No entanto, diferenças entre os grupos surgem no teste dois, em que concentrações mais altas provocam mais respostas e pontos de interrupção mais elevados.Ao realizar este procedimento, é importante verificar frequentemente seus animais quanto ao acúmulo de fluido na cápsula craniana e vazamentos durante a sessão de autoadministração. Além disso, a perda de animais nestes experimentos deve ser mínima, pois a cirurgia de cânulação IO pode ser realizada uma segunda vez caso os animais retirem ou roíam a cânula entre as sessões de autoadministração. Após assistir a este vídeo, você deverá ter uma boa compreensão de como modificar procedimentos cirúrgicos e câmaras abertas para realizar experimentos de autoadministração intraoral em ratos de laboratório.

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Research

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

Operante de drogas auto-administração e preferência local condicionado (CPP) procedimentos são utilizados em pesquisas expansiva para modelo de vários componentes de reforço de drogas, consumo e dependência em humanos. Neste relatório, nós combinamos os métodos tradicionais de CPP e auto-administração como uma nova abordagem para estudar o reforço de drogas e vício em ratos.

Aparelho novo e Método para Reforço de Drogas

Neste protocolo, descrevemos um método de aprendizagem operante utilizando estímulos sensoriais como reforço no mouse. Não requer treinamento prévio ou restrição alimentar, e permite o estudo do comportamento motivado, sem o uso de um reforçador farmacológicos ou naturais, tais como alimentos.

Sensation operante que procura no mouse

Responder por sinais de alimentos ou drogas emparelhados aumenta ao longo de um período de abstinência e esta pode estar relacionada com uma susceptibilidade aumentada a comportamentos recaída. Aqui detalhamos um procedimento para avaliar este "incubação de desejo" em ratos que têm auto-administrado de sacarose.

Um método geral para a avaliação de Incubação de Craving Sacarose em Ratos

Flutuações rápidas na dopamina extracelular (DA) medeiam tanto o processamento de recompensas quanto o comportamento motivado em mamíferos. Este manuscrito descreve o uso combinado de voltametria cíclica de varredura rápida (FSCV) e administração intraoral de saborizantes para determinar como os saborizantes alteram a liberação rápida de dopamina em ratos acordados e em movimento livre.

Exame de Rapid dopamina Dynamics com Fast digitalização Voltametria Cíclica Durante Intra-oral Administração saborizante em ratos acordados

Este protocolo descreve um método novo e eficiente para iniciar rapidamente operante de responder por etanol em ratos, que, contrariamente aos métodos convencionais, não necessitam de privação de água ou sacarina / sacarose desvanecimento para iniciar a responder.

Um método para avaliar as propriedades de reforço de etanol em ratos sem água Privação, Sacarina desvanecimento ou treinamento de Acesso Ampliado

O objetivo deste estudo é identificar redes cerebrais distribuídos relacionadas com a recompensa por delinear uma técnica de imuno confiável usando a ativação de c-fos celular para medir as mudanças simultâneas nos caminhos da dopamina e locais de terminal após a novela ingestão de gordura e açúcar em ratos.

Detecção simultânea de c-Fos Ativação de mesolímbico e mesocortical dopamina Sites Recompensa Após Naive açúcar e gordura ingestão em ratos

Este protocolo descreve um método para investigar a possibilidade de metamemory, ou consciência de memória, em roedores. O paradigma de atraso-correspondência-para-amostra baseada no odor é um novo, ecologicamente relevantes comportamental teste útil para determinar a extensão a que roedores adaptativamente podem responder com base na monitorização cognitivamente a força de seus Estados de memória.

Testes para responder metacognitiva usando um Odor baseado adiada partida-para-amostra teste em ratos

Apresentamos três protocolos que avaliam diferentes formas de impulsividade em ratos e outros pequenos mamíferos. Procedimentos de escolha intertemporais avaliam a tendência de desconto o valor dos resultados atrasados. Reforço diferencial de taxas baixas e discriminação negativa característica avaliar a capacidade de inibição de resposta com e sem punição para respostas inapropriadas, respectivamente.

Três procedimentos de laboratório para avaliar diferentes manifestações de impulsividade em ratos

Apresentado aqui é um protocolo para estudar o comportamento anedônico e depressão em ratos. Combina dois métodos comportamentais bem estabelecidos, a preferência por sacarose e testes de hipofagia induzidos por novidades, com um sistema automatizado de monitoramento de consumo alimentar e líquido, para investigar indiretamente o comportamento dos roedores usando parâmetros substitutos.

Preferência por sacarose e testes de hipofagia induzidos por novidades em ratos usando um sistema automatizado de monitoramento da ingestão de alimentos

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Avaliação da hipersensibilidade mecânica induzida por lesão nervosa em ratos usando um ensaio de dor operante orofacial

Aprenda a técnica de auto-administração intraoral operante em ratos de laboratório para avaliar os efeitos de reforço de soluções doces. Este método permite estudar mecanismos de recompensa e comportamentos relacionados à adição alimentar.

Um novo procedimento para avaliar as propriedades de reforço de Tastants em laboratório ratos: Intraoral auto-administração operante (Vídeo) | JoVE Journal

Um novo procedimento para avaliar as propriedades de reforço de Tastants em laboratório ratos: Intraoral auto-administração operante

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