Name: Secas Coleta de Sangue Mancha de Biomarcadores de saúde para maximizar a participação em Estudos Populacionais (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-01-28T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 20 s
Description: Aprenda a coletar amostras de sangue seco em papel de filtro para análise de biomarcadores de saúde. Este método simples e menos invasivo que a punção venosa facilita estudos populacionais em campo.

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Este trabalho foi apoiado pelo Trabalho, Família e Rede de Saúde (www.WorkFamilyHealthNetwork.org), que é financiado por um acordo de cooperação com os Institutos Nacionais de Saúde e os Centros de Controle e Prevenção de Doenças: Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health e Desenvolvimento Humano (Grant # U01HD051217, U01HD051218, U01HD051256, U01HD051276), do Instituto Nacional do Envelhecimento (Grant # U01AG027669), Secretaria de Ciências Comportamentais e Science Research, National Heart, Lung and Blood Institute (R01HL107240) e Instituto Nacional de Segurança Segurança e Saúde (Grant # U01OH008788, U01HD059773). Bolsas do William T. Grant Foundation, Alfred Sloan Foundation P, ea Administração para Crianças e Famílias têm fornecido financiamento adicional. O conteúdo desta publicação é de responsabilidade exclusiva de seus autores e não representam necessariamente a posição oficial dos institutos e escritórios.

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Orfeu Buxton recebeu uma subvenção iniciado pelo investigador de Sepracor Inc (agora Sunovion; ESRC-0977, ClinicalTrials.gov Identificador NCT00900159); atua como consultor e perito para Dinsmore LLC, no Conselho Consultivo da Matsutani Scientific America, e recebeu consultoria honorários da Universidade Florestal Centro Médico Wake.

Biomarcadores são ferramentas extremamente úteis em várias disciplinas, como medicina, biologia celular, genética, psicologia, sociologia, demografia e epidemiologia social. Dentro de cada disciplina, validade e confiabilidade fase inicial de pesquisa de biomarcadores foi usado para descobrir tanto o risco de doença oculta e fornecer previsão longitudinal dos resultados de saúde. Nestes casos, os biomarcadores que são precisas e durável (isto é, podem sobreviver ao desfasamento entre a recolha da amostra e a execução do ensaio de laboratório para extrair o biomarcador), e versátil (isto é, útil em uma variedade de modelos) são necessários. Enquanto coleção DBS é um procedimento relativamente simples, várias técnicas podem ajudar a maximizar o volume de pontos coletados. Antes da coleta começa, garantindo a mão de um participante é quente e, portanto, que os vasos sanguíneos se dilatam, vai ajudar o fluxo de sangue uma vez que o dedo está perfurado. Usando aquecedores de mão ou ter umparticipante executar suas mãos em água morna pode ajudar com este processo. Ordenhar o dedo antes da coleta de sangue vai puxar a ponta do dedo e aquecer a mão para ajudar o fluxo sanguíneo. A ordenha é um processo que melhora com a prática. Os coletores devem usar qualquer técnica que achar mais confortável e eficaz, mas a abordagem mais comum envolve a ordenha manual do participante com a mão em frente ao colecionador. Este método permitirá que o polegar do coletor de trabalhar em profundidade palma do participante, enquanto a mão oposta pode estabilizar o pulso do participante. Como exemplo, se um estavam coletando sangue de um dedo na mão esquerda do participante, o coletor seria estabilizar o pulso do participante com a sua mão esquerda e leite com a mão direita. Erros comuns cometidos durante a ordenha não incluem o uso de um aperto firme, puxando a pele acima da mão, em vez de trabalho para os músculos para puxar o sangue para a ponta dos dedos. É também importante para evitar pinoching o dedo com a mão ordenha ou segurando firmemente o pulso do participante com a mão nonmilking, os quais impedem o fluxo sanguíneo. Ao perfurar a dedo, fazer a punção o mais profundamente possível, pressionando firmemente a lanceta no dedo antes da alta. Uma punção superficial resulta em menor fluxo de sangue e de coagulação mais rápido. Após a perfuração do dedo, trabalhando rapidamente é fundamental. Fina sangue leva a mais fácil coleta e manchas maiores. Após a punção, o sangue torna-se mais e mais viscoso até coagulação. Quanto menos tempo necessário para coletar as manchas de sangue no cartão, maior o seu volume. O ideal é o sangue do participante será suficiente fina que cai vai cair de seu próprio peso, mas isso não será o caso para todos os participantes, como o sangue de algumas pessoas é mais grosso ou coágulos mais rápido do que outros. Se o sangue é muito grosso para cair do dedo, o cartão de filtro deve ser trazido para o sangue para a coleção. When trazer o cartão para o sangue é importante para manter o cartão em contacto com a gota, enquanto ele está pendurado a partir do dedo durante o tempo possível, em vez de apenas limpando o sangue para o cartão. Isto irá ajudar a puxar o sangue do dedo para maximizar o tamanho da mancha. Esta técnica requer mãos firmes para manter contato entre o sangue eo cartão. Com as duas mãos, uma para segurar a mão participantes e um para segurar o cartão, e mantendo as duas mãos em contacto uns com os outros ajuda a estabilizar o cartão eo sangue juntos. Áreas de pesquisa avançadas, tais como a avaliação de risco cardiometabólico, há muito tempo invocado biomarcadores, como a proteína C-reativa (PCR), insulina e hemoglobina glicosilada (HbA1C) para a detecção precoce dos riscos e os esforços de prevenção, bem como biomarcadores de &quot;endpoints rígidos&quot; para a doença cardiovascular (DCV) e mortalidade associada à doença cardiovascular 12. Epidemiologia clínica freqüentemente avalia biomarcadores para prospectively prever resultados de risco cardiometabólico, como doença cardíaca e diabetes tipo II. Talvez o mais utilizado de todos os biomarcadores é o escore de risco de Framingham, um composto que inclui a pressão arterial, os níveis de colesterol HDL e os níveis totais de cholesterols que demonstrou utilidade na previsão de DCV 13. No entanto, o escore de Framingham tem experimentado algumas controvérsias técnicas, e tem limitações em estudos voltados para ligar os fatores sociais e ambientais para a saúde, o que sugere a necessidade de biomarcadores mais precisos e específicos relacionados com a investigação cardiovascular. Há um número de kits disponíveis comercialmente utilizando técnicas de ELISA ou similares disponíveis para o ensaio de amostras de DBS. Necessária para o ensaio de amostras de DBS são o uso de etapas específicas e optimizadas de eluição para levar as amostras secas em solução 2. Esta é uma área em expansão de investigação como ensaios para mais analitos estão sendo desenvolvidos atualmente 1. Entre ªe ensaios já validados e sendo amplamente utilizados são o colesterol 2, CRP 10,14,15, IgE16, EBV 9,15, a leptina 17 e cyotkines 18. Há uma série de laboratórios especializados na análise de DBS, incluindo a Universidade de Washington Departamento de Medicina Laboratorial (UW Lab Med) Biomarcador Laboratory (Diretor: Mark Wener). Tendo em conta que um painel de biomarcadores, ao invés de um biomarcador solitário, é mais útil nas áreas de pesquisa cardiovascular e diabetes, os biomarcadores devem ser considerados, juntamente com uma variedade de fatores contextuais, a fim de maximizar a sua utilidade. Pesquisa de biomarcadores pode ser caro no entanto, tanto financeiramente como no tempo de coleta de dados. Assim, embora seja vital para escolher biomarcadores que são precisas, durável e versátil, o trabalho ea família investigação biomarcador deve estar radicado na praticidade, selecionando biomarcadores que são de baixo custo, apropriado e pode ser recolhida rapidamente wiª facilidade. Além disso, considerações de ordem prática, muitas vezes resultar em uma incapacidade de maximizar simultaneamente preço, qualidade e velocidade dentro de um procedimento. Aqui encontram-se os próximos passos na pesquisa de biomarcadores de saúde dentro de estudos de campo e da população. O campo de pesquisa de biomarcadores está atualmente em um período de forte crescimento, no entanto, a maior parte do trabalho ainda está por vir.

Biomarcadores podem fornecer informações valiosas sobre os processos biológicos que variam de normal a patogênica que pode contribuir para a doença clinicamente identificável 1. Em ambientes de pesquisa, manchas de sangue seco (DBS) estão se tornando cada vez mais preferido para punção venosa como um método para coleta de biomarcadores no sangue total. Recolha DBS é simples, relativamente fácil, menos invasiva, em seguida, a punção venosa, e requer o mínimo de requisitos de armazenamento (isto é, as amostras não precisam de ser imediatamente congelados e pode ser armazenado durante um longo período de tempo em um ambiente estável congelador antes do ensaio). Amostras DBS pode ser testado para uma variedade de diferentes analitos, incluindo o colesterol, a proteína C-reactiva, a hemoglobina glicosilada, anticorpos contra o vírus de Epstein-Barr, e diversas citoquinas. Punção venosa tem sido o padrão-ouro para a coleção de biomarcadores no sangue. No entanto, a obtenção, armazenamento e transporte de amostras de sangue requer aderênciasce a uma série de protocolos e códigos de saúde, que pode não ser possível em certos protocolos de pesquisa. Flebotomistas deve ser oficialmente certificadas para a punção venosa, enquanto procedimentos de amostragem de DBS são mais simples e não necessitam de certificação oficial. Coleta de sangue venoso também exige mais equipamentos do que a coleção DBS (ou seja, agulhas, tubos, torniquetes), e mais esforço de pós-colheita. Punção venosa devem ser processados ​​(por exemplo, soro ou plasma extraído a partir da amostra de sangue através de centrifugação ou de repousar à temperatura ambiente durante um determinado período de tempo) e congelados entre -20 ° C e -70 ° C imediatamente a fim de evitar a degradação dos analitos , enquanto que as amostras de DBS deve simplesmente ser deixada secar ao ar e, em seguida, pode ser armazenada à temperatura ambiente durante uma semana ou mais, dependendo de o analito, antes da transferência para um congelador 2. Amostras DBS são menos caros do que para coletar amostras de punção venosa, por razões descritas acima. Amostras DBS tambémocupam menos espaço, reduzindo os custos de transporte e armazenamento antes do ensaio. O uso de saliva como biomarcador tornou-se fundamental em estudos biobehavioral. Saliva oferece um método simples, não invasivo para coletar biomarcadores e tornou-se o padrão para o trabalho de campo que visa medir o cortisol ou cotinina 3-5. A urina é outra amostra que podem ser recolhidos de forma não invasiva e podem ser utilizados em estudos de nível de população para ensaios de melatonina ou de toxicologia. Embora ambos urina e saliva oferecer para a frente os procedimentos de coleta que são capazes de ser concluída pelos próprios participantes, nem todos os analitos pode ser medida em estes meios. DBS oferece uma simples e de baixo custo, alternativa para punção venosa e estão se tornando cada vez mais uma ferramenta de pesquisa implementado no campo e estudos populacionais 6.

<table><tbody><tr><td>Toalhetes Microbianos Asepti II</td><td>EcoLab</td><td>D12330345</td><td>envio de terceiros</td></tr><tr><td>Sacos de resíduos de risco biológico</td><td>VWR</td><td>14220-092</td><td>Sacos de polipropileno autoclavável de alta resistência, barril</td></tr><tr>de<td>resíduos de risco biológico</td> de 2 mil <td>Tyco</td><td>58578-092</td><td>8 g Recipiente</td></tr> deslizante para <tr><td>objetos cortantes</td><td>BD Medical</td><td>BD305487</td><td>1.4 qt</td></tr><tr><td>Chux</td><td>VWR</td><td>82020-845</td><td>Absorventes de bancada</td></tr><tr><td>Luvas</td><td>VWR</td><td>XSmall: 89038-267</td><td>Luvas</td></tr><tr><td></td><td></td> de nitrilo sem pó e sem látex <td>Pequeno: 89038-268</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>Médio: 89038-270</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>Grande: 89038-272</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>XLarge: 89038-274</td><td></td></tr><tr><td>Desinfetante para as mãos (por exemplo Purell)</td><td>Johnson Johnson</td><td>89040-210</td><td>Envio de terceiros</td></tr><tr><td>Toalhetes com álcool</td><td>Webcol e Curity</td><td>82003-856</td><td>Almofadas de preparação</td></tr><tr><td>Gaze</td><td>Versalon</td><td>82004-826</td><td>Esponjas não tecidas</td></tr><tr><td>Band-Aids</td><td>Nutramax Stat Strips</td><td>15431-475</td><td></td></tr><tr><td>Lancetas</td><td>Owen Mumford</td><td>82028-060</td><td>3.0 mm, 21 G&nbsp;</td></tr><tr><td>Cartões de coleta de papel de proteína</td><td>Whatman</td><td>Custom-build</td><td>903 Protein Saver Papel de coleta</td></tr><tr><td>Dessecante</td><td>VWR</td><td>61161-319</td><td>Esponjas de umidade</td></tr><tr><td>Sacos de amostras</td><td>Sacos de risco biológico reutilizáveis Lab Guard, ITW Minigrip</td><td>56766-370</td><td>6 pol x 9 pol</td></tr><tr><td>Refrigerador de armazenamento de amostras</td><td>Igloo</td><td>Playmate Mini</td><td>4 qt; direto do fabricante</td></tr></tbody></table>

secas coleta de sangue mancha de biomarcadores de saúde para maximizar a participação em estudos populacionais

Dried Blood Spot Collection of Health Biomarkers to Maximize Participation in Population Studies

Biomarcadores são indicadores biológicos diretamente-medidos de doença, saúde, exposições, ou outra informação biológica. Na população e as ciências sociais, os biomarcadores precisa ser de fácil obtenção, transporte e analisar. Manchas de sangue seco atender a essa necessidade, e podem ser coletadas no campo com altas taxas de resposta. Estes elementos são particularmente importantes em projetos de estudo longitudinal, incluindo intervenções onde o atrito é fundamental para evitar, e altas taxas de resposta melhorar a interpretação dos resultados. Coleção secas amostra mancha de sangue é simples, rápido e relativamente indolor, menos invasiva, em seguida, a punção venosa, e exige requisitos de armazenamento campo mínimos (ou seja, as amostras não precisam ser imediatamente congelado e pode ser armazenado por um longo período de tempo em um ambiente estável congelador antes ensaio). As amostras podem ser analisadas para uma variedade de diferentes analitos, incluindo o colesterol, a proteína C-reactiva, a hemoglobina glicosilada, numerosas citocinas, e outras analitos, bem como fornecer material genético. Recolha DBS é descrito como empregada em diversos estudos recentes.

<img alt="Figura 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50973/50973fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50973/50973fig1.jpg" /> Figura 1. Secas amostra mancha de sangue. Uma placa de coleção é mostrada com quatro, válido pontos coletados no processo de secagem. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50973/50973fig1highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver imagem ampliada.</a> <img alt="Figura 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50973/50973fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50973/50973fig2.jpg" /> Figura 2. Boa e má amostras de sangue seco. Resultados de sucesso (à direita) e sem sucesso (à esquerda) coleção DBS são mostrados. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50973/50973fig2highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver maior im</a>idade. <img alt="Figura 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50973/50973fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50973/50973fig3.jpg" /> Figura 3. Gestores atitudes e práticas associadas com o risco de doença cardiometabólico empregado 6. Este valor foi modificado a partir do Berkman, LF, Buxton, OM, Ertel, K. &amp; Okechukwu, práticas C. do Gestor relacionadas ao trabalho familiar equilíbrio prever cardiovascular empregado risco e duração do sono em ambientes de cuidados prolongados. Jornal de Psicologia da Saúde Ocupacional 115, 316-329 (2010). Trabalhadores expostos a gestores com dezenas trabalho-família meados ou baixos de abertura e criatividade para ajudar com o trabalho de seus funcionários e família precisam, têm chances aumentadas estatisticamente significativas de ter dois ou mais riscos cardiovasculares (fumante atual, obesidade, pressão alta ou campanha publicitáriartension, colesterol alto e alto de hemoglobina glicosilada (Hb A1C) ou diagnóstico de diabetes). Painéis superior e médio representam valores médios ± desvios-padrão para o colesterol total avaliado pela mancha de sangue seco e Hb A1C avaliada por dispositivo de ponto de atendimento (que também pode ser mensurado de forma confiável por manchas de sangue seco). Painel inferior mostra o risco de doença cardiovascular pelo escore gerente. Análise restrita aos enfermeiros e outros funcionários que prestam atendimento direto indicam que a exposição para os gerentes com baixa criatividade e abertura questões relacionadas ao trabalho-família pode ser particularmente importante para estes indivíduos (OR para baixa pontuação WF = 6,4, p = 0,01). Todos os modelos de controle de idade, sexo, salário, educação, raça / etnia e local de trabalho. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50973/50973fig3highres.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver imagem ampliada.</a>

Biomarcadores são indicadores biológicos diretamente-medidos de doença ou de saúde. Na população e as ciências sociais, os biomarcadores precisa ser de fácil obtenção, transporte e analisar. Secas mancha de sangue (DBS) coleção atende a essa necessidade, podem ser coletadas no campo com altas taxas de resposta e analisados ​​para uma variedade de biomarcadores.

Secas Coleta de Sangue Mancha de Biomarcadores de saúde para maximizar a participação em Estudos Populacionais

Biomarkers are directly-measured biological indicators of disease, health, exposures, or other biological information. In population and social sciences, ...

O objetivo do seguinte procedimento é coletar amostras de sangue seco ou DBS, uma alternativa simples e economicamente viável à venipuntura. Isso é realizado primeiramente aquecendo as mãos do participante. Em seguida, seleciona-se um dedo e o limpa-se.A mão e o dedo são massageados para aumentar o fluxo sanguíneo no local da punção. Em seguida, o dedo é furado com uma lanceta de segurança e gotas de sangue são coletadas em papel de filtro. Por fim, o local da punção é limpo e enfaixado.Uma vez que as amostras estão secas, a amostra coletada é acondicionada para armazenamento ou envio. Em última análise, as amostras de sangue seco coletadas com sucesso podem ser analisadas quanto a diversos biomarcadores, como colesterol, proteína C-reativa e hemoglobina glicada. A principal vantagem dessa técnica em relação à venopunção é que a coleta de amostras de sangue seco é simples, relativamente indolor e menos invasiva do que a venopunção.Embora a dominação dessa técnica exija mais tempo, ela pode ser aprendida e implementada com alguns dias de instrução e treinamento. Como são fáceis de obter, transportar e analisar, as amostras de sangue seco em papel-filtro permitem o estudo de biomarcadores em campo e em nível populacional, em pesquisas nas quais a coleta de amostras por venopunção é difícil ou inviável. Os biomarcadores medidos a partir de amostras de sangue seco podem fornecer informações valiosas sobre os processos biológicos subjacentes à saúde ou ao risco de doenças crônicas.Ao coletar amostras de sangue seco em papel-filtro, lembre-se sempre de usar equipamentos de proteção individual, como jaleco, luvas, calças compridas, calçados fechados, um suporte protetor para o laboratório e óculos de segurança, se desejado. Após obter o consentimento, pergunte com qual mão o participante prefere realizar o procedimento e, em seguida, selecione um dedo para a coleta. Em seguida, peça ao participante para esfregar as mãos uma contra a outra para aquecê-las e estimular o fluxo sanguíneo.Limpe o dedo selecionado duas vezes com um cotonete umedecido com álcool, aguardando a secagem completa do álcool a cada vez. Assim como todos os materiais usados na coleta, descarte imediatamente os cotonetes em um recipiente para resíduos biológicos perigosos. Agora, imobilize o braço do participante para evitar movimentos durante a coleta e, para relaxar os músculos do braço e da mão, mantenha a mão do participante posicionada de forma confortável abaixo do nível do coração, com os músculos relaxados.Para facilitar o fluxo sanguíneo, use o polegar e o indicador para massagear suavemente a mão e o dedo selecionado, apertando-o lentamente e com firmeza enquanto desloca a pressão da palma até a ponta do dedo. Empurre o sangue em direção à ponta do dedo. Em seguida, pressione firmemente um micro lanceta contra o dedo do participante perpendicularmente à impressão digital e entre o centro do dedo e a base da unha no lado ulnar do dedo, e dispare a lanceta.Descarte imediatamente a lanceta usada no recipiente para materiais perfurocortantes e, em seguida, remova com um pedaço de gaze estéril a primeira gota de sangue. Descarte imediatamente a gaze e, então, faça uma massagem suave na mão, iniciando no punho e seguindo até a base do dedo, mantendo a mão do participante abaixo do nível do coração com uma inclinação para baixo. Massageie o dedo até que uma grande gota fique pendurada na ponta do dedo e, então, posicione cuidadosamente um pedaço de papel de coleta abaixo do dedo, permitindo que a gota caia por seu próprio peso.Se o sangue estiver muito viscoso ou as gotas forem muito pequenas para cair por seu próprio peso, aproxime lentamente o papel de coleta da gota de sangue para coletá-la por ação capilar, sem tocar o dedo no papel de coleta. Para prevenir coagulação, continue massageando o dedo do participante para manter o fluxo sanguíneo. Após a coleta das amostras de sangue seco, limpe o local da punção de qualquer sangue residual.Em seguida, enfaixe o local da punção para prevenir contaminação potencial. Assegure-se de que o papel de coleta possa permanecer em pé livremente, permitindo a circulação de ar por trás da amostra. Coloque o cartão de coleta sobre uma almofada protetora.Disponha as cartelas com espaçamento para permitir uma boa circulação de ar entre elas. Deixe as amostras secarem por pelo menos 15 a 30 minutos. Uma mancha de cor marrom avermelhada escura indica secagem suficiente para o armazenamento.Após confirmar que as amostras estão secas, feche a tampa do cartão de coleta. Em seguida, coloque um sachê de dessecante em um saco para amostras de risco biológico e, depois, coloque o cartão de coleta dentro do saco sem permitir que as amostras de sangue toquem o exterior. Aplane o saco para remover o excesso de ar e, em seguida, feche-o firmemente.Em seguida, com todos os passos de coleta de sangue concluídos, remova os equipamentos de proteção individual. Por fim, coloque a amostra acondicionada em um recipiente térmico para transporte ou armazenamento temporário, evitando temperaturas elevadas. Aqui, são mostradas coletas de sangue seco válidas.As amostras têm pelo menos 0,375 polegadas de diâmetro, medido a partir da parte traseira do cartão de coleta, e são de tamanho aproximadamente igual em ambos os lados da área de coleta, indicando saturação completa através do papel filtro. Manchas de sangue seco problemáticas são demonstradas para comparação nestas imagens. Por exemplo, as manchas não devem se sobrepor, pois a sobreposição resulta em excesso de amostra.Evite que haja conhecimento sobre o volume da amostra de sangue; as gotas não devem ser espalhadas na área de coleta, pois isso representa uma saturação incompleta e geralmente é acompanhado pela falta de penetração até o lado oposto do papel. A implementação bem-sucedida de amostras de DBS em estudos populacionais permite a análise de biomarcadores nos quais a coleta por punção venosa poderia ser inviável. Esses gráficos demonstram uma aplicação desse tipo em um estudo sobre o risco de doenças cardiometabólicas em funcionários, previsto com base em um estilo gerencial flexível.Por exemplo, o colesterol total nas amostras de sangue seco em papel-filtro neste experimento foi determinado como correlacionado com chances significativamente aumentadas de apresentar dois ou mais riscos cardiovasculares em funcionários que trabalhavam para gestores com escores médios ou baixos de equilíbrio entre trabalho e família. Após assistir a este vídeo, você deverá compreender como coletar, acondicionar e armazenar corretamente e com segurança manchas de sangue seco. Uma vez dominada, esta técnica pode ser realizada em menos de 10 minutos com pouca inconveniência para o participante.Ao realizar este procedimento, é importante seguir todas as precauções padrão. Equipamentos de proteção individual devem ser usados em todos os momentos, e materiais contaminados e resíduos biológicos devem ser descartados adequadamente. Ao coletar biomarcadores nos locais onde as pessoas vivem ou trabalham — seres humanos em liberdade, por assim dizer — e de maneira que não seja desconfortável para elas, podemos obter maiores níveis de participação em nossos estudos de pesquisa.Também somos capazes de avaliar os mecanismos pelos quais nosso ambiente e contexto social afetam a saúde e a doença.

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Medicine

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Descrevemos uma metodologia para o processamento de sangue total para obter uma variedade de componentes para análise posterior. Otimizamos um protocolo simplificado que permite o processamento simultâneo rápido e de alto rendimento de amostras de sangue total em um ambiente não clínico.

Fracionamento rápido e isolamento de componentes de sangue total em amostras obtidas a partir de uma configuração de base comunitária

Aqui descrevemos um ensaio de cromatografia líquida de alta eficiência-espectrometria de massa em tandem (HPLC-MS/MS) para quantificar o imunossupressor tacrolimus em manchas de sangue seco usando uma etapa de precipitação de proteína manual simples e extração em coluna online.

Quantificação do imunossupressor tacrolimus em manchas de sangue seco utilizando LC-MS / MS

A preparação e o processamento de manchas de sangue seco (DBS) para sua análise final ainda mal são padronizados para a maioria das aplicações de diagnóstico. Para superar esta lacuna, um abrangente protocolo passo a passo é sugerido e posteriormente avaliado no que respeita à sua eficácia para a detecção de marcadores de infecções virais.

Manchas de sangue seco - preparação e processamento para uso em imunoensaios e em técnicas moleculares

Este protocolo descreve um método simples e útil para armazenar o sangue periférico e soro/plasma para análises a jusante, tais como avaliação de nucleotídeo único (SNP) de polimorfismo e ensaio de ELISA.

Secas de sangue e soro manchas como uma ferramenta útil para o armazenamento de amostra avaliar biomarcadores de câncer

Este protocolo detalha a preparação clinicamente implementável de biosamples de PBMC e plasma de alta qualidade no local do ensaio clínico que pode ser usado para análise de biomarcadores translacionais.

Preparação de pelotas de células mononucleares de sangue periférico e plasma de uma única coleta de sangue em locais de ensaio clínico para análise de biomarcadores

Detalhamos os procedimentos consistentes e de alta qualidade usados ao longo dos processos de amostragem biológica e aérea em campos indianos durante um grande ensaio clínico randomizado e controlado. Os insights obtidos a partir da supervisão de aplicações de tecnologias inovadoras, adaptadas para avaliação de exposição em regiões rurais, permitem melhores práticas de coleta de dados de campo com resultados mais confiáveis.

Visualizando procedimentos de coleta de dados de campo de avaliações de exposição e biomarcadores para o ensaio da Rede de Intervenção em Poluição do Ar Domiciliar na Índia

Um protocolo é apresentado para a determinação de biomarcadores de baixa abundância a partir de amostras secas de soro exemplificadas com o biomarcador progastrina-releasing peptide (ProGRP). Esferas magnéticas revestidas com anticorpos são usadas para a limpeza seletiva e enriquecimento de um peptídeo proteotípico ProGRP. O peptídeo capturado é posteriormente analisado por cromatografia líquida-espectrometria de massas em tandem.

Microamostragem em Análise de Proteínas de Baixa Abundância Baseada em Espectrometria de Massa

Este protocolo descreve a coleta e preservação de amostras de sangue de pacientes neonatais e pediátricos e a aplicação de scRNA-seq, proteômica e citometria de fluxo espectral para caracterizar as populações de células imunes dessas amostras.

Mapeamento da Imunidade Infantil com Entrada Mínima: Perfil Integrativo de Célula Única e Multiômico

Nós descrevemos um modelo de rato do transtorno de estresse pós-traumático (TEPT), que revela as alterações persistentes na função neuroendócrina eo atraso de longo prazo, resposta de medo exagerado, característico de pacientes com TEPT. O modelo animal e os métodos descritos aqui são úteis para correlacionar biomarcadores em núcleos do cérebro, que são mecanicista, mas não pode ser medido em pacientes com biomarcadores em células brancas do sangue periférico, os quais podem.

Biomarcadores em um modelo animal para Revelando correlatos neurais, hematológica e Comportamental do TEPT

Validação com rendimento elevado de candidatos a biomarcadores múltiplos pode ser realizada por meio de ELISA sequencial de modo a minimizar de congelamento / descongelamento e utilização de amostras de plasma preciosos. Aqui, nós demonstrar como executar sequencialmente ELISAs para seis diferentes biomarcadores de plasma...

High Throughput ELISA sequencial para a validação dos biomarcadores da doença enxerto-versus-hospedeiro aguda

Aprenda a coletar amostras de sangue seco em papel de filtro para análise de biomarcadores de saúde. Este método simples e menos invasivo que a punção venosa facilita estudos populacionais em campo.

Secas Coleta de Sangue Mancha de Biomarcadores de saúde para maximizar a participação em Estudos Populacionais

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