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JoVE Journal Bioengineering
Isolation of Cellular Lipid Droplets: Two Purification Techniques Starting from Yeast Cells and Human Placentas

Isolamento de celulares lipídicas Gotas: Duas técnicas de purificação Começando a partir de células de levedura e placentas humanas

Full Text
20,498 Views
09:41 min
April 1, 2014

DOI: 10.3791/50981-v

Jaana Mannik*1, Alex Meyers*2, Paul Dalhaimer1,2

1Department of Biochemistry and Cellular and Molecular Biology,University of Tennessee, 2Department of Chemical and Biomolecular Engineering,University of Tennessee

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Duas técnicas de isolamento de gotículas lipídicas celulares a partir de 1) células de levedura e 2) placentas humanas estão apresentadas. A peça central de ambos os processos é a centrifugação de gradiente de densidade, onde a camada flutuante resultante contendo as gotículas podem ser facilmente visualizadas por olho, extraiu-se, e quantificada por análise de Western Blot quanto à pureza.

O objetivo geral deste procedimento é isolar gotículas lipídicas do tecido. Isso é feito primeiro dissecando e separando o tecido placentário. Em seguida, as células da oleína são homogeneizadas.

Em seguida, as organelas são separadas por várias etapas de centrifugação. Finalmente, a camada flutuante contendo as gotículas lipídicas é coletada e as gotas lipídicas são caracterizadas. Em última análise, a microscopia de fluorescência e a análise de sangue ocidental são usadas para mostrar a pureza da fração de gotículas lipídicas.

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Bioengenharia Issue 86 Lipid gota corpo de lipídios gordura corporal o corpo de óleo fermento placenta as células das vilosidades da placenta o isolamento purificação gradiente de densidade centrifugação

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