Name: Detectar alterações no coróide Vasculature em um modelo do rato de Degeneração Macular relacionada com a Idade de-curso Tempo Indocianina Verde Angiografia (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-02-19T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 24 s
Description: Aprenda a detectar alterações vasculares na coroide em modelos de ratos com degeneração macular relacionada à idade usando angiografia com verde de indocianina em série temporal. Este método permite caracterizar lesões coroidianas com imagens de alta qualidade comparáveis a estudos humanos.

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Este trabalho foi financiado pelo NIH conceder 1R01EY022901, o Prêmio de Desenvolvimento de Carreira de Investigação para Prevenir Cegueira (RPB), CMReeves &amp; MA Reeves Foundation, E. Matilda Ziegler Foundation for the Blind, Cavaleiros Templários Fundação Eye, e um donativo incondicional ao Departamento de Oftalmologia na Universidade de Utah do RPB. Agradecemos Balamurali Ambati para assistência técnica no Spectralis Multi-Modalidade Imaging System e Zhang Tao para discussões e comentários sobre o manuscrito.

1. Preparação de Instrumentos <ol><li> O procedimento é realizado numa sala de procedimentos numa instalação para animais. </li><li> Usar máscaras, gorros de cabelo, aventais cirúrgicos estéreis, pé-capas, luvas e antes de iniciar o experimento. </li><li> Aquecer a água numa proveta de ~ 40 ° C numa placa de aquecimento. </li><li> Colocar uma almofada azul estéril em cima de uma almofada de aquecimento que vai ser usado mais tarde para manter a temperatura do corpo do rato durante o exame. Ligue a almofada de aquecimento. </li><li> Prepare o Sistema de Imagem: <ol><li> Retire a tampa protetora contra poeira e ligar o laser. </li><li> Retire a lente de 55 ° e montá-lo na máquina. </li><li> Abra o software de imagem do computador e insira as informações do mouse para a imagem latente sob a folha de um novo paciente (por exemplo, genótipo, idade, etc.). Em &quot;Tipo de dispositivo&quot;, escolha o modo de infravermelho (IR). </li></ol></li></ol> Nota: Foi relatado que o uso of uma lente asférica dupla externa pode melhorar a qualidade de imagem 17-20 embora tenhamos nenhum problema na obtenção de imagens de alta qualidade pelo IV-AIV sem o uso de lentes externas (ver resultados representativos, Figuras 1-4). 2. Cauda Veia Injeção de AIV <ol><li> Dilatar rato olhos com 1% de solução oftálmica Tropicamida e esperar 5 min. </li><li> Pesar o mouse para determinar a quantidade de anestesia (ketamina / xilazina / acepromazina 65-100/10-20/1-3 mg / kg) necessário. </li><li> Recuperar uma seringa estéril de 1 ml, juntamente com uma agulha G 32. Injectar o rato por via intraperitoneal com os anestésicos (13 mg / ml de cetamina, 2,6 mg / ml de xilazina 0,3 mg / ml de acepromazina, em PBS estéril). Aguarde até que o mouse é totalmente anestesiado (~ 5 min). </li><li> Coloque a cauda do rato em 40 ° C de água quente para causar vasodilatação da veia. </li><li> Recuperar uma seringa de 1 ml com uma agulha G 32. Retirar a quantidade desejada de ICL, tipicamente 50 ul de 1 mg / mL de ICG, a qual é esterilizada por filtração com um filtro de seringa de 0,2 uM para um tubo estéril para um ratinho de 25 g (2 mg / kg). Tenha cuidado para não introduzir qualquer ar dentro da seringa. </li><li> Seque a cauda com um algodão embebido em álcool para esterilizar a área a ser injectado. </li><li> Segurar a cauda com uma mão, de modo que a veia lateral da cauda é ascendente. Com o bisel da agulha virada para cima, a agulha de injectar ~ 2 milímetros para dentro da veia com um ângulo mínimo. Tenha cuidado para não perfurar a veia. Retire-se a seringa ligeiramente e procurar vestígios de fluxo de sangue para dentro do cubo da agulha, o que indica que a agulha foi inserida dentro da veia com sucesso. </li><li> Lentamente injetar ICG na veia. Deve haver resistência mínima ao injetar. Retire a agulha e aplique uma compressa de álcool diretamente ao local da injeção para ~ 5-10 seg para evitar qualquer sangramento. O mouse está pronto para a imagem latente. No fim de pegar a primeira fase (0-4 min após a injeção), é ESSEntial a imagem com o mouse rapidamente. </li></ol> Nota: Mouse olhos podem facilmente ficar seca e pode desenvolver catarata sob anestesia. É importante manter o olho húmido através da aplicação de PBS estéril, durante o procedimento. Limpe o excesso de PBS com um cotonete estéril antes da gravação AIV. Outros laboratórios têm usado uma lente de contato para evitar a desidratação da córnea 17-20. 3. ICG Angiografia <ol><li> Comece a tirar fotos de 30-40 segundos após a injeção ICG, o que permite a captura da fase inicial de enchimento de coróide até circulações da retina e coróide são com brilho máximo (0-4 min). A vasculatura da retina é melhor visualizado em foco ~ 35-45 dioptrias e vasculatura coroidal é visualizado em 10-15 dioptrias. Nota: Durante o primeiro exame de um modelo animal, recomenda-se a captura de imagens de todos os ângulos (nasal, temporal dorsal e ventral) para identificar todos abno possívelrmalities na vasculatura. Durante a fase inicial, ambas as artérias e veias da coróide médias e grandes são bem visualizados. No modelo animal usado neste protocolo, as lesões da coróide (por exemplo polipoidal dilatações) podem começar a aparecer 1 min para a fase precoce. </li><li> Defina o foco da imagem na vasculatura. Controle de brilho e foco usando o módulo de controle e botão de foco, respectivamente. Estes valores são ajustáveis ​​digitalmente e são facilmente mantidos constantes. Mantenha a distância do olho do rato para a lente da câmara constante para assegurar uma qualidade de imagem é reprodutível utilizando a técnica que se segue. Nota: Uma vez que o dispositivo só pode uma imagem de parte do olho posterior, vamos tentar manter o foco, o brilho, ea distância entre a lente da câmera eo olho do rato constante à medida que a imagem inteira do olho posterior a partir de ângulos diferentes. A chave para isso é alinhar a luminescência em forma de círculo emitida pelo ICG através do olho com o campo de view da câmara. Isto é realizado, fazendo da esquerda para a direita, os ajustes para cima e para baixo, e em-e-para fora da posição da câmera até que a imagem inteira não tem áreas escuras. Quando o luminescência e do campo de visão da câmara estão alinhados, a distância do olho para a lente vai ser reprodutível para o próximo conjunto de imagens, bem como a uma distância óptima para a imagem de qualidade. </li><li> Uma vez que a vasculatura está em foco, capturar os quadros de imagem, premindo o botão preto redonda sobre o módulo de aquisição. O botão redondo preto também pode ser usado para reduzir ou aumentar o sinal de ICG para a melhor qualidade de imagem. </li><li> Determine o ângulo de visão ideal e profundidade de focagem para lesões coróide imagem. É importante manter a posição do olho, a profundidade de focagem, e outras configurações de dispositivos fixos de todo o curso de AIV-tempo. As imagens são salvas pressionando botão adquirir no painel da tela de toque do módulo de aquisição. </li><li> Adquirir imagens na fase intermediária de 6-15 min popainjeção er. Nota: Tanto a coróide e vasos da retina tornam-se menos distinta. Vasculatura coróide aparece fluorescência difusa. Lesões da coróide expositoras hiperfluorescência emergir em contraste com o desvanecimento circundante normal, a fluorescência de fundo. </li><li> Adquirir as imagens da fase tardia de 17-25 minutos após a injeção. Nota: hiperfluorescência desaparece. Ambos os vasos da coróide e da retina não são mais visíveis. A cabeça do nervo óptico torna-se preto. Lesões coróide hiperfluorescente tem contraste máximo com o fundo desaparecendo. </li><li> Depois de terminar a aquisição de imagens, aplicar um gel lubrificante ocular claro para rato olhos e deixar o mouse em uma almofada de aquecimento para a recuperação. </li><li> Retornar ratos para suas gaiolas e área de espera. Exportar imagens como arquivos TIFF ou JPEG, para posterior análise. </li></ol> Nota: O tempo de cada fase não é absoluta. Descobrimos que o tempo de eAfase ch pode mudar, dependendo da quantidade de ICG injetado. Mais ICG tende a prolongar a cada fase. A melhor maneira de definir uma fase é de acordo com as principais características de cada uma das fases acima.

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YF é um inventor de duas patentes pendentes que são relevantes para o modelo do rato AMD utilizado neste trabalho. SK, ZB, e ADJ tem nada a revelar.

Neste estudo, demonstramos o uso de AIV a imagem lesões coróide em camundongos transgênicos HtrA1. As características do início, do meio e fases tardias da AIV no nosso modelo do rato corresponde ao longo do tempo bem em estudos humanos 1. Isso é importante para fazer melhores comparações entre patologia e animais fenótipos humanos, que são de valor inestimável para a pesquisa sobre mecanismos fisiopatológicos e estratégias de tratamento de condições relacionadas com a coróide como AMD. <p class="jove_con...

Angiografia com indocianina verde (AIV) é um teste de diagnóstico para problemas de imagem relacionados aos vasos sanguíneos no olho. O espectro de absorção de ICG varia 790-805 nm, enquanto que o espectro de emissão varia 770-880 nm, com o pico de emissão a 835 nm 1. Isto é diferente do outro corante popular, fluoresceína de sódio, cujo espectro cai na gama do visível. O espectro de infravermelho permite ICG para penetrar através do epitélio pigmentar da retina (RPE), fluido serosanguinolento, e exsudados lipídicos, os quais podem bloquear facilmente visualização por angiografia de fluoresceina baseado em fluoresceína de sódio (FA). ICG é de 98% na vasculatura, resultando em menos extravasamento ligado à proteína, permitindo reforçada imagiologia de vasos coroidais e lesões coróide 1,2. AIV é quase a única opção de visualizar vasos da coróide, que é posterior ao RPE. Figura 1 mostra a comparação de AIV e FA na vasculatura imagem em rato olhos. FA pode be utilizado para a imagem do bem vasculatura retiniana mas não a vasculatura de coróide. Em contraste, AIV pode ser utilizado para a imagem da retina e tanto vasculatura coróide. AIV é realizada com sistemas de imagem digital de alta resolução ou oftalmoscópios de varredura a laser (SLO) em conjunto com câmeras de vídeo infravermelho-sensíveis, que usaremos neste estudo. Na clínica, AIV tem sido recomendado para o diagnóstico de uma série de distúrbios coriorretinianas envolvendo a vasculatura coroidal incluindo polipoidal coróide vasculopatia (PCV), Retinal angiomatoso Proliferação (RAP), estrias angióides, viteliforme distrofia macular, coriorretinopatia serosa central, hemangioma de coróide, hemorragia da retina macroaneurysms arteriolares, tumores da coróide, e certas formas de uveíte posterior 1,3. A combinação de AIV com FA e Tomografia de Coerência Óptica (OCT) fornecem ferramentas poderosas para os médicos no diagnóstico e tratamento de macular relacionada à idade exsudativadegeneração (AMD) 4-10. AIV é especialmente útil para o diagnóstico de condições que envolvem a coróide. Na verdade, AIV é considerada o padrão ouro para o diagnóstico de PCV, uma variante da DMRI exsudativa 11-13. PCV é caracterizada por uma rede de vasos de ramificação com dilatações polipoidal terminais na vasculatura coróide 11-13. PCV é freqüentemente associada com destacamentos serossanguinolenta recorrentes do EPR ​​e retina com vazamento e sangramento das componentes polipoidal 11,14,15. Recentemente, relataram a geração do primeiro modelo animal PCV por expressar transgenicamente HTRA1 humano, uma serina-protease multi-funcional, no rato epitélio pigmentado da retina (RPE) 16. Nós mostramos que o aumento HTRA1 induzida características do PCV, por exemplo, lesões polipoidal. Aqui demonstramos o uso do curso de tempo AIV por injeção na veia da cauda em pesquisa AMD usando o nosso modelo HTRA1 mouse. Nossos dados sugerem queIV-AIV é superior a IP (ou subcutânea (SC))-AIV que são actualmente usados ​​no campo de 17,18 para a caracterização de lesões na coróide. Declaração em Pesquisa Animal Experimentos em animais foram realizados de acordo com protocolos aprovados pelo Institutional Animal Care e do Comitê Use (IACUC) e foram realizados de acordo com a Declaração de ARVO para o uso de animais em Ophthalmic and Vision Research.

<table><tbody><tr><td>Sistema de imagem multimodal Spectralis</td><td>Heidelberg Engineering, Alemanha</td> Solução oftálmica de tropicamida <td>SPECTRALIS HRA+OCT</td><td></td></tr><tr><td>(1%)</td><td>Bausch & Lomb</td><td>NDC 24208-585-64</td><td>para dilatação de pupilas</td></tr><tr><td>GenTeal Gel</td><td>Genteal</td><td>NDC 58768-791-15</td><td>&nbsp; Gel Lubrificante Transparente para os Olhos&nbsp;</td></tr><tr><td>Cetamina</td><td>Vedco Inc</td><td>NDC 50989-996-06</td><td></td></tr><tr><td>Xilazina</td><td>Lloyd Laboratories</td><td>NADA 139-236</td><td></td></tr><tr><td>Acepromazina</td><td>Vedco Inc</td><td>NDC 50989-160-11</td><td></td></tr><tr><td>32-G Agulha</td><td>Steriject</td><td>PRE-32013</td><td></td></tr><tr><td>Seringa de 1 ml</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>Indocianina Verde</td><td>Pfaltz & Bauer</td><td>I01250</td><td></td></tr></tbody></table>

detectar alterações no coróide vasculature em um modelo do rato de degeneração macular relacionada com a idade de-curso tempo indocianina verde angiografia

Detecting Abnormalities in Choroidal Vasculature in a Mouse Model of Age-related Macular Degeneration by Time-course Indocyanine Green Angiography

Indocianina Verde Angiografia (ou AIV) é uma técnica realizada por oftalmologistas para diagnosticar anormalidades da coróide e da retina vasculatura de várias doenças oculares, como a degeneração macular relacionada à idade (DMRI). AIV é especialmente útil para a imagem da vasculatura coróide posterior do olho, devido à sua capacidade de penetrar através da camada pigmentada com o seu espectro de infravermelho. Curso de tempo AIV pode ser dividido em início, meio e fases tardias. As três fases fornecer informações valiosas sobre a patologia de problemas oculares. Apesar de curso de tempo AIV por via intravenosa (IV) de injeção é amplamente utilizado na clínica para o diagnóstico e tratamento de problemas de coróide, AIV por injeção intraperitoneal (IP) é comumente utilizado em pesquisas com animais. Aqui demonstramos a técnica para obter imagens de alta resolução do curso em tempo AIV em ratos por injeção venosa cauda e confocal de varredura a laser oftalmoscopia. Usamos essa técnica para a imagem da coróide lesões em um modelo de mouse relacionadas com a idade degeneração macular. Embora seja muito mais fácil de introduzir ICG para a vasculatura do rato por IP, os nossos dados indicam que é difícil obter imagens reprodutíveis do curso tempo ICGA por IP-AIV. Em contraste, AIV via injeção na veia da cauda fornece imagens de alta qualidade ICGA curso em tempo comparáveis ​​aos estudos humanos. Além disso, mostramos que AIV realizado em camundongos albinos dá imagens mais nítidas de vasos da coróide do que aquela realizada em ratos pigmentados. Sugerimos que curso a tempo IV-AIV deve tornar-se uma prática padrão na pesquisa AMD com base em modelos animais.

Foi realizado curso de tempo AIV em camundongos transgênicos HtrA1 e ninhada WT de controle, sendo que ambos estão no fundo CD1. O fundo CD1 albino foi escolhida para facilitar a angiografia com indocianina verde (AIV) imagem (ver discussão). Alguns aneurisma como dilatações começaram a aparecer na fase inicial do rato HTRA1 (Figura 2, uma seta vermelha indica a dilatação na ponta de um navio e um círculo vermelho indica uma lesão polipoidal tipo cluster). Os vasos coróides são claramente visíveis em am...

Indocianina Verde Angiografia (ou AIV), realizado pela injeção veia da cauda fornece imagens de alta qualidade do curso tempo AIV para caracterizar anormalidades no rato coróide.

Detectar alterações no coróide Vasculature em um modelo do rato de Degeneração Macular relacionada com a Idade de-curso Tempo Indocianina Verde Angiografia

Indocyanine Green&#160;Angiography (or ICGA) is a technique performed by ophthalmologists to diagnose abnormalities of the choroidal and retinal ...

O objetivo geral deste procedimento é detectar anormalidades na vasculatura coroidal em modelos murinos de degeneração macular relacionada à idade, utilizando endoinjeção em verde e geografia ao longo do tempo. Isso é realizado primeiramente preparando os animais e o corante para injeção. O segundo passo consiste em realizar injeções na veia da cauda com incy em verde.As próximas imagens do olho são adquiridas nas fases inicial, intermediária e tardia da angiografia com incy verde, as quais são então exportadas e analisadas. Em última análise, o curso temporal da angiografia com incy verde pode ser utilizado como um procedimento padrão para caracterizar diversos tipos de lesões na coroide da degeneração macular relacionada à idade. Modelos de camundongo.A principal vantagem desta técnica em relação aos nossos métodos existentes, como a injeção intraperitoneal de endo signin verde, é que ela fornece imagens de alta qualidade ao longo do tempo, comparáveis aos estudos em humanos. Para iniciar o procedimento, vista a vestimenta apropriada para o trabalho com animais. Isso inclui colocar jalecos cirúrgicos, capas estéreis para os pés, toucas para os cabelos, máscaras faciais e luvas. Em seguida, prepare o aquecedor a ser usado durante a aquisição de imagens ligando o sistema, ajustando a temperatura para 37 graus Celsius e cobrindo-o com uma placa azul estéril.Em seguida, ligue uma placa aquecedora e aqueça um béquer com água até 40 graus Celsius. Prepare o sistema de imagem antes da injeção na veia caudal pré-aquecendo o laser e acoplando uma lente de 55 graus ao equipamento. Em seguida, abra o software de imagem e insira as informações de identificação do camundongo para a aquisição de imagem em uma nova planilha de paciente.No tipo de dispositivo, escolha o modo infravermelho. Com o sistema de imagem configurado, dilate os olhos do camundongo com uma solução oftálmica de tropicamida a 1%, e aguarde cinco minutos. Durante esse período, pese o camundongo para determinar a quantidade de anestesia necessária.Em seguida, injete uma mistura de cetamina, xilazina e acepromazina por via intraperitoneal conforme descrito no protocolo de texto complementar. Aguarde cerca de cinco minutos até que o camundongo esteja completamente anestesiado. Em vez de cobrir os olhos do camundongo anestesiado com pomada oftálmica, aplique PBS estéril nos olhos a cada dois minutos ou insira lentes de contato especializadas para evitar que sequem e desenvolvam cataratas.Uma vez anestesiado, coloque a cauda do camundongo em água a 40 graus Celsius por 20 a 30 segundos para dilatar a veia da cauda. Em seguida, use uma seringa de um mililitro equipada com uma agulha de 32 gauge para aspirar dois microlitros por grama de peso corporal de uma solução de verde de indocianina a um miligrama por mililitro. Tenha cuidado para não introduzir bolhas de ar na seringa.Em seguida, segure a cauda com uma das mãos de modo que a veia lateral da cauda fique voltada para cima e limpe a cauda com um cotonete umedecido em álcool para esterilizar a área a ser injetada. Então, insira a agulha cerca de dois milímetros na veia com um ângulo mínimo, com a bisel da agulha voltada para cima. Puxe levemente o êmbolo da seringa e observe a presença de sangue fluindo para dentro do hub da agulha, indicando que a agulha foi inserida com sucesso na veia.Em seguida, injete lentamente a solução de verde de indocianina. Deve haver resistência mínima ao injetar após a injeção inicial. Retire a agulha e aplique um cotonete com álcool diretamente no local da injeção por cinco a dez segundos para interromper qualquer sangramento.O camundongo está então pronto para a aquisição de imagens após a injeção na veia da cauda. Transfira rapidamente o camundongo para o sistema de imagem previamente preparado para obter imagens durante a fase inicial do enchimento coroidal. Primeiro, defina a imagem, focando na vasculatura de interesse.Foque entre 35 e 45 dioptrias para a vasculatura retiniana e entre 10 e 15 dioptrias para a vasculatura coroidal. Em seguida, controle o brilho utilizando o módulo de controle, ajuste digitalmente os valores de foco e brilho e, uma vez definidos, mantenha-os constantes para esse tipo de imagem. Além disso, mantenha constante a distância entre o olho do camundongo e a câmera.Para garantir qualidade de imagem reproduzível. Realize a triagem inicial obtendo imagens de toda a região posterior do olho a partir de diferentes ângulos. Comece alinhando a luminescência em formato circular emitida pelo corante verde de indocianina com o campo de visão da câmera.Para conseguir isso, faça ajustes da esquerda para a direita, de cima para baixo e de dentro para fora na posição da câmera até que toda a imagem esteja em foco e não apresente áreas escuras. Registre as configurações ideais do dispositivo para procedimentos repetidos.Uma vez que a vasculatura esteja em foco, capture os quadros de imagem pressionando o botão preto redondo no módulo de aquisição. Esse botão também pode ser usado para reduzir ou aumentar o sinal de indoc e verde, visando obter a melhor qualidade de imagem. Para examinar uma área específica da lesão com base nos resultados do rastreamento anterior, configure o sistema de imagem utilizando o ângulo e as configurações do dispositivo previamente determinados como ideais.Mantenha fixa a posição do ângulo de visão do olho, profundidade de foco e demais configurações do dispositivo durante todo o tempo do procedimento. Salve as imagens pressionando o botão de aquisição no painel de tela sensível ao toque do módulo de aquisição. Continue adquirindo imagens na fase inicial até que as circulações retiniana e coroidal atinjam o brilho máximo.Isso pode levar até quatro minutos. Em seguida, continue a aquisição de imagens na fase intermediária entre seis e 15 minutos após a injeção. Como pode ser observado aqui, os vasos coroidianos tornam-se menos nítidos nesta fase e aparecem como fluorescência difusa.Além disso, lesões coroidianas que exibem hiperafluorescência emergem a seguir, adquirindo imagens na fase tardia entre 17 e 25 minutos após a injeção. Durante esta fase, a hiperafluorescência desaparece e os vasos não são mais visíveis. Além disso, a cabeça do nervo óptico torna-se escura e as lesões coroidianas apresentam contraste máximo com o fundo em desvanecimento.Após concluir a aquisição das imagens, aplique um lubrificante transparente IGEL nos olhos do camundongo e deixe o animal sobre uma placa aquecida para recuperação. Assim que recuperarem algum movimento, devolva os camundongos às suas gaiolas e área de alojamento. Por fim, exporte todas as imagens como arquivos de imagem ou arquivos de vídeo para análise posterior.É mostrada aqui uma comparação entre a angiografia com fluoresceína baseada em fluoresceína de sódio e a angiografia com endocyt em verde na imagem do sistema vascular retiniano e coroidal de camundongos. Embora os vasos retinianos possam ser visualizados usando tanto a AF quanto a AICG, os vasos coroidais só podem ser observados com a AICG. Abaixo estão imagens do sistema vascular coroidal obtidas após injeção na veia caudal de endocyt em verde em camundongos selvagens.Nenhuma dilatação ou lesão foi encontrada em qualquer das etapas de imagem no camundongo transgênico HT A um. No entanto, tanto dilatações quanto lesões polipoides do tipo agregado foram encontradas na fase inicial, e várias lesões adicionais apareceram na fase intermediária e tornaram-se mais evidentes na fase tardia. Para comparar entre injeção intravenosa na cauda e injeção intraperitoneal da verde de indocianina na qualidade de imagem, camundongos transgênicos HRA um adicionais foram submetidos à imagem após injeção IP. A vascularização coroidal é, em sua maioria, invisível cinco minutos após a injeção para ambos os camundongos e é invisível por mais de 12 minutos no camundongo.Nos painéis inferiores, além da raiz da injeção, a cor do pigmento também influencia a qualidade das imagens. Aqui, um camundongo pigmentado e um albino foram comparados utilizando o tempo decorrido da IV incy em verde, uma geografia. O camundongo albino apresentou imagens muito mais nítidas dos vasos coroidianos grandes e pequenos nas fases inicial e intermediária, e forneceria um bom background de cruzamento para estudos futuros nesta área após seu desenvolvimento.Essa técnica abriu caminho para pesquisadores na área de pesquisa da visão explorarem anormalidades coroidianas em modelos murinos.

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Research

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Medicine

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