Um método de precipitação de modificação para isolar exossomas urinária

O objetivo geral deste procedimento é projetar um método de precipitação de exossomos modificado que ofereça uma alternativa rápida, escalável e eficaz para o isolamento de exossomos da urina. Isso é feito removendo primeiro grandes células mortas e detritos celulares da amostra de urina por centrifugação, e o snat contendo os exossomos urinários é transferido para um novo tubo. Na segunda etapa, o pellet é dissolvido em solução de isolamento contendo DTT para remover a proteína de queda de cavalo TAM.

Em seguida, após centrifugação adicional, o sobrenadante livre de TP é incubado com reagente exo quick TC durante a noite para precipitar os exossomos no dia seguinte. As amostras tratadas com reagente exo quick TC são centrifugadas uma última vez para obter o pellet de exossomo. Em última análise, processos a jusante, como Western blot e QPCR em tempo real, podem ser realizados nos exossomos para identificar os biomarcadores de interesse.