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JoVE Journal Biology
A Method of Permeabilization of Drosophila Embryos for Assays of Small Molecule Activity

Um método de permeabilização de Drosophila Os embriões para Ensaios de pequena molécula Atividade

Full Text
13,049 Views
10:04 min
July 13, 2014

DOI: 10.3791/51634-v

Matthew D. Rand1

1Department of Environmental Medicine,University of Rochester School of Dentistry and Medicine

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Introdução de moléculas pequenas para o embrião de Drosophila em desenvolvimento oferece um grande potencial para a caracterização de actividade biológica de novos compostos, medicamentos e toxinas, bem como para sondar as vias de desenvolvimento fundamentais. Métodos descritos aqui delinear medidas que superem as barreiras naturais para essa abordagem, ampliando a utilidade do modelo embrião Drosophila.

O objetivo geral do experimento a seguir é preparar embriões de drosófila viáveis com casca de ovo permeável para testar a bioatividade de drogas ou toxinas de pequenas moléculas introduzidas. Isso é feito tratando primeiro os embriões em estágio de desenvolvimento com alvejante diluído para remover as camadas externas da casca do ovo coriônico. O segundo passo é permear os embriões com um solvente que esgota a fina camada de casca de ovo cerosa que bloqueia solutos de pequenas moléculas.

O terceiro passo é tratar os embriões com uma droga ou toxina e um corante para avaliar simultaneamente a permeabilidade da casca do ovo e introduzir um composto de interesse. Após o desenvolvimento adicional, os embriões podem ser visualizados diretamente ou processados para imuno-histoquímica. Em última análise, os resultados podem mostrar a atividade de uma droga ou toxina no desenvolvimento dos tecidos, conforme determinado por microscopia fluorescente com imunorreagentes ou laços vitais.

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