Procedimentos de biópsia de músculo esquelético humano, utilizando a técnica Bergström Modificado

O objetivo geral deste procedimento é usar a técnica de Bergstrom modificada para fazer uma amostra de biópsia do músculo esquelético das laterais vastas de um voluntário humano. Isso é feito anestesiando primeiro a pele e o tecido subcutâneo no local da biópsia. Na segunda etapa, é feita uma incisão através do tecido subcutâneo da pele e da fáscia que se sobrepõe ao músculo esquelético.

Em seguida, a agulha de biópsia é avançada através das incisões no músculo esquelético e a amostra de biópsia é coletada na etapa final. A agulha de biópsia é cuidadosamente removida e a incisão é fechada com adesivo cirúrgico. Em última análise, as amostras de biópsia do músculo esquelético podem ser preparadas para análises histológicas e analisadas quanto a alterações bioquímicas e a expressão de proteínas e genes específicos sob várias condições de exercício.

Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da fisiologia do músculo esquelético, como quais são as respostas bioquímicas, moleculares e celulares ao exercício extenuante. Demonstrando o procedimento estarão o Dr. Gerald Ferris, o médico do nosso hospital local, e Maschi Tanaka, um técnico do nosso laboratório. Após obter o consentimento informado, instrua o sujeito a deitar em decúbito dorsal em uma mesa acolchoada com a coxa exposta, posicione a perna de maneira relaxada com um pequeno rolo de toalha sob o calcanhar, de modo que o joelho fique totalmente estendido e elevado aproximadamente um centímetro.

Em seguida, instrua o sujeito a contrair momentaneamente o músculo exposto da coxa para que o vasto local da biópsia lateral possa ser visualizado logo anterior à fáscia. Lata aproximadamente um terço da distância entre o topo da patela e o trocarte maior. Em seguida, use uma tesoura para remover o cabelo de uma região de aproximadamente 15 por 15 centímetros ao redor do local da biópsia e esterilize a área com cotonetes pré-embebidos em um anti-séptico tópico para colher a biópsia usando EPI adequado e uma técnica séptica.

Primeiro borrife cloreto de etila no local da incisão até que a pele pareça branquear. Em seguida, insira uma agulha de calibre 25 horizontalmente na derme, aspire a agulha e dispense aproximadamente 100 microlitros de lidocaína para produzir uma bolha de dois a quatro milímetros de diâmetro sob a superfície da pele. Em seguida, avance a agulha para o tecido subcutâneo, aspire novamente e dispense aproximadamente um mililitro de lidocaína para formar outra bolha.

Assim que a segunda bolha diminuir, insira a agulha no local da incisão, parando superficialmente à fáscia, aspire a agulha uma última vez e, em seguida, injete lentamente os quatro mililitros restantes de lidocaína enquanto retira a agulha da coxa. Após dois a três minutos, sonde levemente o local da biópsia com a ponta de um bisturi estéril para confirmar a anestesia. Quando o local estiver pronto, faça uma incisão reta de um centímetro através da pele e dos tecidos subcutâneos em um ângulo de 45 graus em relação ao fêmur.

Em seguida, uma vez em cada direção, insira o bisturi fundo o suficiente para fazer uma incisão através da fáscia no músculo. Geralmente, os indivíduos novos neste método devem ser pacientes enquanto aprendem a sentir a mudança na resistência entre o tecido subcutâneo e a fáscia ao administrar o anestésico local e ao cortar a pele, o tecido subcutâneo e a fáscia. Agora introduza a agulha de biópsia no tecido no mesmo ângulo em que a incisão foi feita até que a ponta entre na fáscia.

Avance a agulha logo após a fáscia em um ângulo descendente à medida que avança para o músculo. Instrua o sujeito a permanecer relaxado e a não contrair o músculo da coxa enquanto a agulha estiver sendo avançada. Então, quando a agulha de biópsia estiver em posição, abra uma seringa descartável de 60 mililitros até a marca de 40 a 50 mililitros para criar sucção dentro da agulha de biópsia.

Puxe o trocarte interno aproximadamente um centímetro para abrir a janela da cânula externa, mantendo a posição da cânula externa dentro do músculo. Em seguida, feche rapidamente o trocarte interno para cortar e coletar a amostra muscular. Em seguida, abra a torneira de parada para liberar a sucção e gire a agulha de biópsia 90 graus, repetindo o processo até três vezes para um total de quatro clipes.

Em seguida, remova a agulha de biópsia da coxa após a remoção da agulha. Puxe o trocarte interno um centímetro para trás e inspecione visualmente o lúmen da cânula externa para estimar se uma quantidade adequada de tecido foi coletada. Aplique pressão direta no local da biópsia com gaze estéril e uma bolsa de gelo por 10 a 15 minutos.

Durante esse tempo, remova o tecido da agulha de biópsia Após a aplicação da cobertura, feche a incisão com uma mão enquanto aplica uma única camada de adesivo cirúrgico por cima da incisão seca com a outra. Depois que o adesivo curar por cerca de 90 segundos, aplique fechos de fita perpendiculares à incisão, em seguida, coloque três a quatro compressas de gaze não estéreis de duas por duas polegadas sobre o local da incisão e prenda-as com filme adesivo autoaderente para aplicar pressão direta no tecido. Finalmente, dê ao sujeito instruções verbais e escritas sobre o tratamento adequado de feridas, reações normais e anormais e diretrizes de atividades para os dias seguintes, de um a quatro dias.

Em um estudo cruzado randomizado controlado por placebo, atletas de resistência do sexo masculino correram em esteiras por três horas a 70% de VO O2 no máximo e consumiram uma bebida de 6% de carboidratos ou placebo a uma taxa de um litro por hora. Biópsias de tecido muscular esquelético foram feitas antes e depois do exercício, e observou-se que a expressão gênica de várias citocinas estava aumentada no tecido muscular esquelético obtido de atletas experientes de resistência após três horas de corrida, curiosamente, apesar de não ter efeito sobre o músculo esquelético, a depleção de glicogênio, a ingestão de carboidratos atenuou os níveis de mRNA de IL seis e IL oito após seu desenvolvimento. Essa técnica abriu caminho para pesquisadores no campo da fisiologia muscular explorarem princípios como a utilização de substrato de combustível durante diferentes intensidades de exercício, dano muscular induzido pelo exercício e sinalização intercelular, entre outros.