Name: Procedimentos de biópsia de músculo esquelético humano, utilizando a técnica Bergström Modificado (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-10T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 20 s
Description: Aprenda a técnica de biópsia muscular de Bergström modificada para coletar amostras do vasto lateral em voluntários humanos. Este método permite análises histológicas e bioquímicas detalhadas da fisiologia muscular.

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O procedimento de músculo esquelético, como descrito a seguir as orientações do Conselho de Revisão Institucional Appalachian State University. NOTA: A equipe é composta por um operador (Ph.D. ou MD treinados na técnica de biópsia), e pelo menos um, mas o ideal é, três ou mais técnicos. O operador é responsável por conduzir e supervisionar todos os aspectos do procedimento de biópsia do músculo esquelético. Um técnico (técnico de # 1) é imediatamente responsável por auxiliar o operador com todos os aspectos da extração muscular. Isto inclui sendo as &quot;mãos não estéreis&quot; e a aplicação de sucção com uma seringa estéril. Um segundo técnico (técnico de # 2) se envolve em uma conversa com o assunto e massagens perna oposta do sujeito durante o procedimento para minimizar a ansiedade do sujeito. O terceiro técnico (técnico de # 3) é responsável pela manipulação e processamento da amostra do músculo esquelético. Medidas analíticas jusante ditar quantos additional técnicos forem requeridos para processamento / amostra preparar o músculo esquelético. 1. Assunto Preparação <ol><li> Reunir, preparar e organizar os materiais especificados para o procedimento de biópsia muscular (Tabela 1). Descontaminar e esterilizar a agulha Bergström (cânula exterior e trocar interior) eo êmbolo de acordo com a prática padrão 16. </li><li> Reveja o formulário de consentimento com o assunto. A parte de biópsia de músculo esquelético do consentimento para participar formulário utilizado na Universidade Estadual Appalachian é fornecido no suplemento on-line 1. <ol><li> Fale com o tema sobre os aspectos gerais do procedimento de biópsia muscular com foco em possíveis riscos do procedimento, a preparação da pele, a aplicação do anestésico, sensações típicas. Instrua o assunto, leia atentamente o consentimento para participar formulário e assiná-lo para confirmar que o projeto e os procedimentos de estudo são compreendidos. </li></ol></li><li> Confirme se as sem prejuízo não é alérgico a &quot;___ caine&quot; medicações -tipo (por exemplo, lidocaína). </li><li> Instrua o sujeito em decúbito dorsal sobre uma mesa acolchoada com a coxa exposta. Coloque dois underpads absorventes descartáveis ​​com suporte plástico embaixo da perna do sujeito. Posicione a perna de uma forma descontraída, com um pequeno rolo de toalha sob o calcanhar, de modo que o joelho está completamente estendido (elevada ~ 1 cm), colocando, assim, vasto lateral em posição encurtada. </li><li> Ter o operador de instruir o sujeito momentaneamente contrair o músculo da coxa exposta de modo que o local da biópsia pode ser visualizado. Nota: O vasto lateral local da biópsia é apenas anterior à fáscia lata (banda illiotibial), aproximadamente um terço da distância entre a parte superior da patela e do trocânter maior 7. </li><li> Tem a marca do operador logo abaixo (~ 0,5 centímetros) no local da incisão com um marcador permanente ponta fina. </li><li> Já o operador a determinar a espessura da prega aproximado por pinching a prega cutânea. </li><li> Ter o operador e técnicos lavar as mãos com sabão e água morna e vestir luvas descartáveis. </li><li> Já que o operador remova o cabelo a partir de uma região de ~ 15 centímetros x 15 cm em torno do local da biópsia (via tosquiar). Nota: recorte o cabelo do local da biópsia impede que o cabelo fique dentro da incisão durante o procedimento e no fechamento, e depilação permite uma melhor contato entre o fechamento de fita e da pele (ver 3.4). </li><li> Ter o operador de esterilizar a área com compressas de pré-embebido com um anti-séptico tópico, (como iodopovidona ou gluconato de clorexidina para indivíduos alérgicos ao iodo / marisco). Comece no centro e trabalhar em círculos concêntricos em direcção ao bordo exterior da área recortada. No mínimo, repetir mais duas vezes com um novo cotonete umedecido em cada tempo. </li></ol> 2. Biópsia Procedimento <ol><li> Ter o operador remover luvas descartáveis, lavar as mãos com sabão e água quente, e don gl cirúrgico estériloves utilizando técnica asséptica. </li><li> Tenha técnico # 1 presente a cortina fenestrado estéril para o operador. Ter o operador, utilizando uma técnica asséptica, coloque o pano sobre o local da biópsia para manter um campo esterilizado. </li><li> Já técnico # 1 presente ao operador uma seringa de 5 ml, equipado com uma agulha G 21, enquanto se mantém uma técnica asséptica. Limpe o topo do frasco de lidocaína com um algodão embebido em álcool. <ol><li> Ter o operador retirar imediatamente 5 ml de lidocaína. Retire a agulha G 21 da seringa e descarte a agulha em um recipiente apropriado. </li><li> Tenha técnico # 1 presente o operador com uma agulha G-1 ½ polegada 25, mantendo uma técnica asséptica. Ter o lugar operador da polegada de 1 ½ agulha na seringa e evacuar as bolhas de ar da seringa. </li></ol></li><li> Tenha spray de cloreto técnico # 1 acetato no local da incisão (~ 0,5 centímetros acima da marca de tinta indelével na pele) até que a pele parece &quot;branquear&quot;. <ol><li> Have o operador inserir a agulha aproximadamente horizontal para a pele para a derme, aspirar a agulha, e, em seguida, se infiltrar com ~ 100 mL de lidocaína a produzir uma &quot;bolha&quot; de 2-4 mm de diâmetro. <ol><li> Já o operador aspirado na agulha (ligeiramente retirar o êmbolo da seringa) para confirmar que a agulha não foi colocada num vaso de sangue. Se aparecer sangue na seringa, retirar a agulha, descarte em um recipiente apropriado, e começar de novo em 2.3. </li><li> Já o operador avanço da agulha para dentro do tecido subcutâneo, aspirar a agulha, e, em seguida, se infiltrar o tecido com ~ 1 ml de lidocaína, para formar uma vesícula. Uma vez que a bolha tenha diminuído, inserir a agulha de 1 ½ polegada na seringa carregada pela lidocaína verticalmente no local da incisão, parando superficial à fáscia. Nota: O sujeito pode sentir uma ligeira sensação de ardor momentâneo após a injeção inicial de lidocaína (semelhante a uma picada de abelha). </li></ol></li><li> Verifique se o operatou não penetra o músculo com lidocoine porque é miotóxico 17-19. </li><li> Ter aspirado operador a agulha e, em seguida, injetar lentamente os restantes 4 ml de lidocaína ao retirar a agulha da coxa. Coloque gaze estéril sobre o local da injecção e que o motivo para relaxar enquanto o anestésico local tem efeito. </li></ol></li><li> Depois de 2-3 min, tem técnico # 1 presente o operador de um bisturi, mantendo uma técnica asséptica. <ol><li> Já o operador levemente sondar o local da biópsia com a ponta do bisturi, para confirmar que a área é anestesiada. Se necessário, injetar mais 3-4 ml de lidocaína no local da incisão, ver 2.4.1.2. </li></ol></li><li> Ter o operador fazer uma linha reta de 1 cm incisão através da pele e tecidos subcutâneos (~ 2-3 mm acima da marca de tinta) paralela ao fêmur. <ol><li> Ter o operador inserir o bisturi mais profundo para fazer uma incisão através da fáscia no músculo. Faça isso uma vez em cada direção<html> . Nota: O sujeito pode sentir uma pontada ou pressão com o mais profundo corte se os cortes de lâmina de bisturi no músculo. </li><li> Tenha técnico # 2 engajar o assunto na conversa e massagear a perna oposta. </li></ol></li><li> Ter o lugar operador uma quantidade generosa de gaze estéril sobre o local da incisão e biópsia e aplicar pressão direta para a incisão para reduzir o sangramento. <ol><li> Já técnico # 1 ligar o metal torneira de 3 vias para a seringa descartável de 60 mL e o tubo de extensão 30 centímetros (Figura 1). </li><li> Já técnico # 1 conectar uma extremidade do tubo de plástico conector cónica para dentro da extremidade livre do tubo de extensão e firmemente inserir a outra extremidade do tubo de plástico afunilada conector na extremidade mais larga de uma pipeta de ponta de 200 ul com ~ 15-18 mm de a ponta cortada. </li></ol></li></ol>&quot;width =&quot; 500 jpg &quot;/&gt; Figura 1 A agulha Bergström. (A) A agulha Bergström (5 mm), é composto por (a) a cânula exterior e (b) do trocarte interior, os componentes associados incluem (c) do êmbolo, (d) da ponta da pipeta de 200 uL com ~ 15-18 mm cortado , (e) afunilada conector de plástico, (f) 3-forma de metal torneira, (g) 30 centímetros tubo de extensão, e (h) de 60 ml descartável seringa. (B) A agulha Bergström (5 mm) e os componentes associados montados. ( C) O trocarte interior da agulha Bergström (5 mm), retirados de aproximadamente um centímetro abre a janela exterior da cânula. <ol start="9"><li> Depois que o sangramento tenha diminuído, tem técnico # 1 abra a bolsa esterilizados em autoclave e apresentar a agulha de biópsia de 5 mm e trocar interna (Figura 1) para o operador, mantendo uma técnica asséptica. <ol><li> Já o operador montar a agulha (cânula exterior e trocar interior), verificar o alinhamento e ação de deslizamento. </li> &lt;/ Ol&gt; </li><li> Ter o operador segure firmemente o conjunto da agulha (cânula exterior e trocar interior) com ambas as mãos para evitar a trocar interior de girar. Alguma técnico # 1 inserir firmemente a ponta da pipeta na corte a parte superior da porção do trocarte interior da agulha de biopsia com um ligeiro movimento de rotação para baixo. Certifique-se de que técnico # 1 não toca o operador ou a agulha de biópsia, apenas a ponta da pipeta. </li><li> Já o operador introduzir a agulha de biópsia para o tecido através da incisão. Localizar a incisão na fáscia (uma &quot;sensação&quot; adquirida) com a ponta da agulha de biopsia. Avance a agulha apenas após o ângulo fascia e depois a agulha para baixo em direção ao chão, como a agulha é avançada no músculo. Nota: Os indivíduos podem experimentar algum desconforto leve (por exemplo, &quot;pressão profunda&quot;, ou sensação leve cólica) como a incisão através da faseia é localizado com a ponta da agulha de biópsia e a agulha avança para dentro do músculo. <ol> &lt;li&gt; Have técnico # 2 instruir o assunto para ficar &quot;relaxado&quot; e não contrair os músculos da coxa, enquanto o operador está a avançar a agulha no músculo. </li></ol></li><li> Uma vez que a agulha de biópsia está numa posição, que o sinal do operador técnico # 1 para abrir o descartável de 60 ml de uma seringa. <ol><li> Tenha técnico # 1, puxe rapidamente o descartável 60 ml seringa aberta para a marca de 40-50 cc para criar sucção dentro da agulha de biópsia. </li><li> Já que o operador puxe para fora do trocarte interior de aproximadamente 1 cm a abrir a janela exterior da cânula, mantendo a posição do trocarte exterior dentro do músculo. Ter o operador fechar rapidamente a trocar interior para cortar (clip) e recolher a amostra do músculo. Ter o sinal de operador técnico # 1 para liberar sucção. </li><li> Tenha técnico # 1 abra a torneira para o quarto para liberar a sucção. </li><li> Ter o operador girar a agulha de biópsia de 90 ° e repita o processo. Se necessário, tem o operador REPEAt o procedimento de rotação até 3x (para um total de quatro grampos). </li></ol></li><li> Ter o operador aplicar contra-pressão direta sobre o local da incisão com gaze estéril durante a remoção da agulha de biópsia da coxa, tomando cuidado para não pegar fascia ou pele. Se a resistência significativa é sentida, voltar a cortar ao aplicar um movimento de torção para o trocar interior. </li><li> Após a remoção da agulha de biópsia a partir da coxa, têm o operador puxa o trocarte interior traseira 1 cm a inspeccionar visualmente o lúmen da cânula exterior para estimar se uma quantidade adequada de tecido foi recolhido. <ol><li> Tem a mão do operador, a agulha de biópsia para técnico de # 1. Para manter uma técnica asséptica assegurar que técnico # 1 só toca a agulha, o operador não. Tenha técnico # 1 mão a agulha de biópsia para técnico de # 3. </li></ol></li><li> Tenha técnico # 3 Remova o tecido da agulha de biópsia. <ol><li> Tenha técnico # 3 utilização do êmbolo (Figura 1) e um par de pinças de ponta finapara assegurar que todo o tecido muscular é removido do trocarte interior e exterior de uma cânula. </li><li> Já técnico # 3 pesar rapidamente a amostra para confirmar que uma quantidade adequada de tecido muscular foi recolhido e colocar as amostras em um bloco de dissecção gelado. </li></ol></li><li> Tenha técnico # 3 dissecar cuidadosamente tecido conjuntivo e gordura visível das amostras musculares. Já técnico # 3 preparar as amostras de músculo para o armazenamento de acordo com análises a jusante. Por exemplo, colocar imediatamente as amostras em um cryovial e encaixe congelamento em nitrogênio líquido, montar e congelar para histologia, ou coloque em uma cryovial com inibidor de RNase, etc </li><li> Se necessário, repita o procedimento com uma segunda agulha de biópsia esterilizado, mantendo uma técnica asséptica. </li></ol> 3 Encerramento <ol><li> Ter o operador aplicar pressão direta do local da biópsia com gaze estéril e um bloco de gelo por 10-15 min. </li><li> Uma vez que a hemostasia é alcançada, tem o operador de uso de álcool pralmofadas ep para remover sangue seco da área ao redor da incisão. </li><li> Tenha técnico # 1 presente um tubo de cola cirúrgica tópica e aplicador para o operador. Ter o operador montar o tubo de cola cirúrgica e aplicador sem tocar a ponta do aplicador ou a parte superior do tubo. </li><li> Já que o operador puxa a incisão foi fechada com uma mão enquanto se aplica uma única camada de adesivo cirúrgico sobre a parte superior da incisão seco com a outra mão. Após o adesivo cura (~ 90 segundos), aplique a fita closuresperpendicular à incisão. Alternativamente, fechar a incisão com dois estéreis 4-0. </li><li> Ter o operador aplicar pressão direta, colocando fevereiro 03-4 &quot;x 2&quot; compressas de gaze não estéreis no local da incisão e segura com filme adesivo auto-aderente. </li><li> Ter o operador fornecer o tema verbal e instruções escritas sobre tratamento de feridas adequada, as reações normais e anormais, e diretrizes de atividade para os seguintes 1-4 dias (ver on-line supplement 2). </li></ol>

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</ol>

Os autores não têm conflitos de interesse.

Este vídeo apresenta um resumo passo-a-passo do procedimento de biópsia do músculo esquelético utilizado no Laboratório de Performance Humana ASU. Este procedimento, com pequenas modificações, foi usado para coletar cerca de 1.600 biópsias musculares durante os últimos 13 anos. As amostras de biópsia muscular forneceram dados importantes em investigações baseadas nutrição esportiva, levando a descobertas importantes da pesquisa. Há muitas técnicas críticos a ter em conta quando se realiza o ...

A técnica de biópsia percutânea ou &quot;semi-aberto&quot; é utilizado para obter amostras de tecido do músculo esquelético de pacientes humanos e sujeitos da pesquisa. Duchenne (1806-1875) é creditado como o primeiro a construir uma agulha com um trocarte para obter músculo esquelético de indivíduos que vivem por meio de biópsia percutânea 1. Na década de 1960, Bergström introduziu uma agulha de biópsia percutânea semelhante à descrita por Duchenne 2-4. Vinte anos mais tarde, Evans et al. 5 modificada da técnica de aplicação de sucção através do trocarte de corte da agulha Bergström. Esta modificação pode aumentar o rendimento do tecido 3 a 5 vezes e 6,7 é empregue em ambientes de pesquisa e clínicos biomédicos. Esta técnica tem e continuará a promover o diagnóstico de miopatias e nossa compreensão da estrutura e função do músculo esquelético. A técnica de biópsia muscular percutânea é straightforward. Quando feito corretamente, com observância rigorosa técnica asséptica, os riscos associados são mínimas. O procedimento de biópsia muscular é considerada como uma ferramenta de investigação para projectos de investigação. Algumas instituições acadêmicas permitem treinados pesquisadores docentes com doutorado, com supervisão médica direta, para obter biópsias musculares e outros exigem um médico credenciado para realizar a técnica. A equipe de biópsia ASU realizou com sucesso mais de 1.600 biópsias musculares durante os últimos 13 anos 8-15. O objetivo deste vídeo é descrever a agulha Bergström modificado muscular percutânea técnica de biópsia 5 para obter amostras de tecido muscular esquelético do vasto lateral de seres humanos.

<table><tbody><tr><td>Bergstr&ouml; m agulha de biópsia, 5 x 100 mm</td><td>Stille Surgical Inc.</td><td>119-29187-50</td><td>1 ea</td></tr><tr><td>Durasorb blue pad</td><td>Fisher</td><td>22-031-340</td><td>caixa de 300</td></tr><tr><td>Lâminas de barbear descartáveis para preparação</td><td>Moore Medical</td><td>89760</td><td>1 ea</td></tr><tr><td>Creme de barbear</td><td>Moore Medical</td><td>92869</td><td>1 lata</td></tr><tr><td>de cotonete com álcool</td><td>Moore Medical</td><td>98721</td><td>caixa/200</td></tr><tr><td>cotonetes de iodopovidona (pacote com 3</td>) <td>Moore Medical</td><td>90691</td><td>pacote de 50</td></tr><tr><td>máscaras faciais</td><td>Fisher</td><td>19-039-690</td><td>caixa de 50</td></tr><tr><td>luvas estéreis; tamanho 6.5</td><td>Moore Medical</td><td>68128</td><td>caixa de 50 pares de</td></tr><tr><td>luvas estéreis; tamanho 7.0</td><td>Moore Medical</td><td>68129</td><td>caixa de 50 pares</td></tr><tr><td>Luvas estéreis; tamanho 8.5</td><td>Moore Medical</td><td>68132</td><td>caixa de 50 pares</td></tr><tr><td>Fenestrated toalha drapeada</td><td>Moore Medical</td><td>92712</td><td>caixa de 50</td></tr><tr><td>Lidocaína (1% HCl, sem Epi)</td> <td>Dealmed</td><td>427902</td><td>frasco de 30 cc</td></tr><tr><td>Spray de cloreto de etila</td><td>Dealmed</td><td>386020</td><td>3,5 fl. Oz. frasco</td></tr><tr><td>Seringa de 5 ml com agulha de 21 G</td><td>Fisher</td><td>14-827-48</td><td>caixa de 100</td></tr><tr><td>agulha de 25 G 5/8 "</td><td>Fisher</td><td>14-826AA</td><td>caixa de 100</td></tr><tr><td>agulha de 25 G 1 1/2"</td><td>Fisher</td><td>14-826-49</td><td>caixa de 100</td></tr><tr><td>bisturis de uso único com lâmina #11</td><td>Fisher</td><td>0-8927-5B</td><td>caixa de 20</td></tr><tr><td>seringas de 60 ml</td><td>Fisher</td><td>13-689-8</td><td>caixa de tubo de extensão de 40</td></tr><tr><td>~30 polegadas</td><td>Fisher</td><td>14-169-7A</td><td>rolo de torneira de metal de 50 pés</td></tr><tr><td></td><td>Fisher</td><td>01-290-38</td><td>cada</td></tr><tr><td>Conector de tubulação de polipropileno com extremidades cônicas, 3.2 a 5.5 mm</td><td>Fisher</td><td>15-315-28A</td><td>caixa de 100</td></tr><tr><td>ponteiras de pipeta amarelas (1-200 &micro; l)</td> <td>Fisher</td><td>02-681-2</td><td>cortou ~ 15-18 mm da ponta</td></tr><tr><td>Adesivo cirúrgico tópico</td><td>Medline</td><td>MSC091076</td><td>caso de 36 tubos</td></tr><tr><td>Adesivo cirúrgico tópico</td><td>Medline</td><td>MSC091076Z</td><td>caixa de 6 tubos</td></tr><tr><td>Pontos borboleta (tiras adesivas) 1/2 "x 4" (6 por pacote)</td> <td>Moore Medical</td><td>93050</td><td>caixa / 300</td></tr><tr><td>Bandadge, Tira, 3/4 x 3 pol.</td><td>Fisher</td><td>19-027-202</td><td>pacote de 100</td></tr><tr><td>bandagem adesiva (rolos de 5 m)</td> <td>Fisher</td><td>19-027-768</td><td>caixa de 36</td></tr><tr><td>1 "fita cirúrgica de papel</td><td>Fisher</td><td>19-027-761</td><td>caixa de 12</td></tr><tr><td>Suturas (4-0 corte reverso, FS2)</td> <td>Moore Medical</td><td>82926</td><td>caixa de 36</td></tr><tr><td>4 x 4 Almofadas de gaze estéreis</td><td>Moore Medical</td><td>66949</td><td>pkg/50</td></tr><tr><td>2 x 2 Compressas de gaze não estéreis</td><td>Moore Medical</td><td>37336</td><td>pkg/200</td></tr><tr><td>3 x 4 Almofadas não aderentes</td><td>Moore Medical</td><td>74389</td><td>bx/100</td></tr><tr><td>Sacos de autoclave 3.5 x 9</td><td>Moore Medical</td><td>40390</td><td>caixa de 200</td></tr><tr><td>sacos de autoclave 5.25 x 10</td><td>Moore Medical</td><td>40391</td><td>caixa de 200</td></tr><tr><td>Fita indicadora de autoclave</td><td>Moore Medical</td><td>31608</td><td>caixa de 250</td></tr><tr><td>Lab Casacos&mdash; pequeno</td><td>Fisher</td><td>23-900-520A&nbsp;</td><td>10/pk</td></tr><tr><td>Jalecos&mdash; médio</td><td>Fisher</td><td>23-900-520B&nbsp;</td><td>10/pk</td></tr><tr><td>Jalecos&mdash; grande</td><td>Fisher</td><td>23-900-520C&nbsp;</td><td>10/pk</td></tr><tr><td>Toalhetes de pano descartáveis germicidas</td><td>Moore Medical</td><td>62879</td><td>Can/160</td></tr></tbody></table>

procedimentos de biópsia de músculo esquelético humano, utilizando a técnica bergström modificado

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

A técnica de biópsia percutânea permite aos pesquisadores e clínicos para coletar amostras de tecido muscular esquelético. A técnica é segura e altamente eficaz. Este vídeo descreve a técnica de biópsia percutânea com agulha de Bergström modificado para obter amostras de tecido muscular esquelético do vasto lateral de seres humanos. A agulha Bergström consiste de uma cânula exterior com uma pequena abertura (&quot;janela&quot;) para o lado da ponta e um trocarte interior com uma lâmina de corte na extremidade distal. Sob condições assépticas, a anestesia e locais, a agulha avança para dentro do músculo esquelético através de uma incisão na pele, o tecido subcutâneo e fáscia. Em seguida, a aspiração é aplicada ao interior do trocarte, o trocarte exterior é puxado para trás, o tecido do músculo esquelético é puxado para dentro da janela exterior da cânula pela sucção, e o trocarte interior é rapidamente fechada, corte ou recorte da amostra de tecido do músculo esquelético, assim . A agulha é girada em 90 °60, e outro corte é feito. Este processo pode ser repetido mais três vezes. Esta técnica de corte múltiplo normalmente produz uma amostra de 100-200 mg ou mais em indivíduos saudáveis ​​e pode ser feito imediatamente antes, durante e depois de uma sessão de exercício ou outra intervenção. Após vestir pós-biópsia do local da incisão, os indivíduos normalmente retomar suas atividades de vida diária de imediato e podem participar plenamente na atividade física vigorosa dentro de 48-72 horas. Os indivíduos devem evitar exercícios pesados ​​de resistência por 48 horas para reduzir o risco de herniação do músculo através da incisão na fáscia.

O procedimento de biópsia muscular, como descrito acima permite ao pesquisador forma rápida e consistente coletar amostras de tecido muscular esquelético. O rendimento típico, temas esportivos saudáveis ​​é de 200 mg ou mais em uma única passagem com 3-4 clips. O procedimento leva de 15-20 min, mais do que é gasto na preparação para a incisão. Em estudos baseados em exercício, amostras do músculo são muitas vezes tomadas antes e depois do exercício, com uma ou duas amostras coletadas durante a recuperação. Com este proj...

O objetivo deste vídeo é apresentar a técnica de biópsia do músculo esquelético de Bergström modificada em seres humanos.

Procedimentos de biópsia de músculo esquelético humano, utilizando a técnica Bergström Modificado

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

O objetivo geral deste procedimento é usar a técnica de Bergstrom modificada para fazer uma amostra de biópsia do músculo esquelético das laterais vastas de um voluntário humano. Isso é feito anestesiando primeiro a pele e o tecido subcutâneo no local da biópsia. Na segunda etapa, é feita uma incisão através do tecido subcutâneo da pele e da fáscia que se sobrepõe ao músculo esquelético.Em seguida, a agulha de biópsia é avançada através das incisões no músculo esquelético e a amostra de biópsia é coletada na etapa final. A agulha de biópsia é cuidadosamente removida e a incisão é fechada com adesivo cirúrgico. Em última análise, as amostras de biópsia do músculo esquelético podem ser preparadas para análises histológicas e analisadas quanto a alterações bioquímicas e a expressão de proteínas e genes específicos sob várias condições de exercício.Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da fisiologia do músculo esquelético, como quais são as respostas bioquímicas, moleculares e celulares ao exercício extenuante. Demonstrando o procedimento estarão o Dr. Gerald Ferris, o médico do nosso hospital local, e Maschi Tanaka, um técnico do nosso laboratório. Após obter o consentimento informado, instrua o sujeito a deitar em decúbito dorsal em uma mesa acolchoada com a coxa exposta, posicione a perna de maneira relaxada com um pequeno rolo de toalha sob o calcanhar, de modo que o joelho fique totalmente estendido e elevado aproximadamente um centímetro.Em seguida, instrua o sujeito a contrair momentaneamente o músculo exposto da coxa para que o vasto local da biópsia lateral possa ser visualizado logo anterior à fáscia. Lata aproximadamente um terço da distância entre o topo da patela e o trocarte maior. Em seguida, use uma tesoura para remover o cabelo de uma região de aproximadamente 15 por 15 centímetros ao redor do local da biópsia e esterilize a área com cotonetes pré-embebidos em um anti-séptico tópico para colher a biópsia usando EPI adequado e uma técnica séptica.Primeiro borrife cloreto de etila no local da incisão até que a pele pareça branquear. Em seguida, insira uma agulha de calibre 25 horizontalmente na derme, aspire a agulha e dispense aproximadamente 100 microlitros de lidocaína para produzir uma bolha de dois a quatro milímetros de diâmetro sob a superfície da pele. Em seguida, avance a agulha para o tecido subcutâneo, aspire novamente e dispense aproximadamente um mililitro de lidocaína para formar outra bolha.Assim que a segunda bolha diminuir, insira a agulha no local da incisão, parando superficialmente à fáscia, aspire a agulha uma última vez e, em seguida, injete lentamente os quatro mililitros restantes de lidocaína enquanto retira a agulha da coxa. Após dois a três minutos, sonde levemente o local da biópsia com a ponta de um bisturi estéril para confirmar a anestesia. Quando o local estiver pronto, faça uma incisão reta de um centímetro através da pele e dos tecidos subcutâneos em um ângulo de 45 graus em relação ao fêmur.Em seguida, uma vez em cada direção, insira o bisturi fundo o suficiente para fazer uma incisão através da fáscia no músculo. Geralmente, os indivíduos novos neste método devem ser pacientes enquanto aprendem a sentir a mudança na resistência entre o tecido subcutâneo e a fáscia ao administrar o anestésico local e ao cortar a pele, o tecido subcutâneo e a fáscia. Agora introduza a agulha de biópsia no tecido no mesmo ângulo em que a incisão foi feita até que a ponta entre na fáscia.Avance a agulha logo após a fáscia em um ângulo descendente à medida que avança para o músculo. Instrua o sujeito a permanecer relaxado e a não contrair o músculo da coxa enquanto a agulha estiver sendo avançada. Então, quando a agulha de biópsia estiver em posição, abra uma seringa descartável de 60 mililitros até a marca de 40 a 50 mililitros para criar sucção dentro da agulha de biópsia.Puxe o trocarte interno aproximadamente um centímetro para abrir a janela da cânula externa, mantendo a posição da cânula externa dentro do músculo. Em seguida, feche rapidamente o trocarte interno para cortar e coletar a amostra muscular. Em seguida, abra a torneira de parada para liberar a sucção e gire a agulha de biópsia 90 graus, repetindo o processo até três vezes para um total de quatro clipes.Em seguida, remova a agulha de biópsia da coxa após a remoção da agulha. Puxe o trocarte interno um centímetro para trás e inspecione visualmente o lúmen da cânula externa para estimar se uma quantidade adequada de tecido foi coletada. Aplique pressão direta no local da biópsia com gaze estéril e uma bolsa de gelo por 10 a 15 minutos.Durante esse tempo, remova o tecido da agulha de biópsia Após a aplicação da cobertura, feche a incisão com uma mão enquanto aplica uma única camada de adesivo cirúrgico por cima da incisão seca com a outra. Depois que o adesivo curar por cerca de 90 segundos, aplique fechos de fita perpendiculares à incisão, em seguida, coloque três a quatro compressas de gaze não estéreis de duas por duas polegadas sobre o local da incisão e prenda-as com filme adesivo autoaderente para aplicar pressão direta no tecido. Finalmente, dê ao sujeito instruções verbais e escritas sobre o tratamento adequado de feridas, reações normais e anormais e diretrizes de atividades para os dias seguintes, de um a quatro dias.Em um estudo cruzado randomizado controlado por placebo, atletas de resistência do sexo masculino correram em esteiras por três horas a 70% de VO O2 no máximo e consumiram uma bebida de 6% de carboidratos ou placebo a uma taxa de um litro por hora. Biópsias de tecido muscular esquelético foram feitas antes e depois do exercício, e observou-se que a expressão gênica de várias citocinas estava aumentada no tecido muscular esquelético obtido de atletas experientes de resistência após três horas de corrida, curiosamente, apesar de não ter efeito sobre o músculo esquelético, a depleção de glicogênio, a ingestão de carboidratos atenuou os níveis de mRNA de IL seis e IL oito após seu desenvolvimento. Essa técnica abriu caminho para pesquisadores no campo da fisiologia muscular explorarem princípios como a utilização de substrato de combustível durante diferentes intensidades de exercício, dano muscular induzido pelo exercício e sinalização intercelular, entre outros.

human-skeletal-muscle-biopsy-procedures-using-modified-bergstrm

Research

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Este vídeo demonstra a técnica de biópsia muscular percutânea do vasto lateral humano usando o concotoma de Weil-Blakesley.

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