Um novo modelo de Mild Traumatic Brain Injury para ratos jovens

O objetivo geral deste procedimento é gerar uma lesão cerebral traumática leve em ratos juvenis. Isso é feito preparando primeiro a plataforma de indução de lesões. Em seguida, um rato anestesiado é colocado de bruços no papel alumínio marcado.

Uma vez no lugar, um peso é descartado para gerar um golpe de relance na cabeça. O animal é então colocado em decúbito dorsal e o tempo que leva para se escrever é registrado. No dia seguinte, o desempenho é medido no teste de feixe de caminhada.

Portanto, as principais vantagens dessa técnica sobre as outras é que os animais são apenas brevemente anestesiados. É um traumatismo craniano fechado, o que nos permite repetir a lesão no mesmo animal várias vezes, e há um componente rotacional na lesão que é mais clinicamente relevante. As implicações desta técnica se estendem para a terapia de concussão pediátrica e traumatismo cranioencefálico leve, pois o modelo induz sintomatologia clinicamente relevante de forma heterogênea, demonstrando que o procedimento será Irene Ma, técnica em nosso laboratório e harlene haha.

Em estudante de graduação em nosso laboratório. Para configurar o aparelho de lesão cerebral traumática leve, construa um palco em forma de U feito de plástico transparente. Coloque uma esponja na parte inferior do palco para coletar o animal depois que ele cair.

Em seguida, corte um pedaço de papel alumínio com uma lâmina de barbear afiada. Certifique-se de que o papel alumínio marcado suporta o peso corporal do rato, mas não interfere na aceleração após o impacto. Cole o papel alumínio marcado em cima do palco para que fique tau e coloque-o na posição correta embaixo do tubo guia.

Posicione o tubo guia de forma que fique 3.5 centímetros acima do papel alumínio. Em seguida, prenda a linha de pesca no topo de um peso. Coloque o peso dentro do tubo guia e fixe a linha de forma que o peso fique 2,5 centímetros acima da folha.

Essa altura impede que o rato receba vários golpes com segurança. Prenda a linha de pesca ao clamp suporte. Puxe o peso para cima através do tubo guia de plástico com a linha de pesca e segure-o no lugar com um pino Allen posicionado a uma altura de 0.5 metros.

Para começar, confirme a profundidade da sedação em um rato anestesiado e coloque rapidamente o peito do rato no papel alumínio com a cabeça diretamente no caminho do peso em queda. Quando estiver pronto para começar, puxe o pino da chave Allen para permitir que o peso caia verticalmente através do tubo guia de plástico. Uma vez atingido, o rato passará rapidamente por uma rotação de 180 graus e pousará na posição supina.

Remova imediatamente o rato da esponja de coleta e aplique lidocaína tópica na cabeça do rato com um aplicador com ponta de algodão. Em seguida, coloque o rato em decúbito dorsal em uma gaiola limpa e aquecida. Observe o animal até que ele acorde do anestésico e passe da posição supina para a posição prona.

Registre isso como o tempo para gravar o valor para o grupo de controle lesionado simulado. Anestesie o animal e coloque-o no palco conforme demonstrado anteriormente. Em seguida, remova o rato do papel alumínio sem puxar o pino da chave Allen e aplique lidocaína tópica na cabeça.

Coloque o rato em decúbito dorsal em uma gaiola limpa e aquecida e registre o tempo para escrever o valor. Por fim, devolva o rato à sua gaiola de origem depois de recuperar o comportamento normal e repita com o próximo animal de controle. 24 horas após a indução da lesão cerebral, retornar os animais à sala de procedimentos.

Transfira os ratos para uma gaiola limpa e coloque a gaiola doméstica do rato. Na extremidade mais estreita de uma face de viga cônica, a parte aberta da gaiola em direção à extremidade larga da viga. A viga cônica possui uma plataforma central com pequenas saliências que proporcionam segurança.

Coloque uma câmera de vídeo na extremidade larga do feixe e ajuste o foco até que todo o comprimento esteja visível. Quando estiver pronto, coloque o rato na extremidade larga da viga cônica e incentive-o a atravessar a viga em direção à gaiola de origem. Assim que o rato cruzar a viga e entrar na gaiola doméstica, deixe-o descansar por pelo menos 60 segundos.

Para reforçar o local de destino, este é o teste número um e não está incluído na análise. Em seguida, ligue a câmera de vídeo e permita que o rato conclua a tarefa de caminhada do feixe por mais tempo, mantendo os 62º períodos de reforço na gaiola inicial. Depois que o rato tiver concluído todos os testes, devolva-o à gaiola de origem e teste o próximo animal.

Se o animal cair da viga durante o teste, pegue-o imediatamente e coloque-o de volta na viga no local de onde caiu. Para pontuar os dados. Após o teste, registre o número de deslizamentos das patas traseiras e o tempo total para cruzar a viga para cada tentativa individual.

Use esses dados para calcular os valores médios para cada animal e grupo de teste. Este gráfico compara as diferenças médias no tempo para escrever pontuações entre ratos juvenis que sofreram uma única lesão cerebral em comparação com controles simulados. Os ratos feridos exibiram um aumento significativo na duração do tempo necessário para se escrever em decúbito dorsal.

Aqui, o número médio de deslizamentos das patas traseiras na tarefa de caminhada na trave é mostrado para os ratos juvenis que sofreram uma única lesão. Em comparação com ratos feridos simulados, os animais feridos exibiram significativamente mais deslizamentos de patas na viga em comparação com os controles após este procedimento. Outras intervenções não invasivas, como a ludoterapia, podem ser exploradas para determinar se tais intervenções são realmente capazes de melhorar alguns dos déficits sociais que as crianças experimentam após o tratamento. Concussão.

Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como induzir e detectar com segurança uma lesão cerebral traumática leve em roedores juvenis. Isso pode ser repetido em vários momentos.