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JoVE Journal Biology
Real Time Measurements of Membrane Protein:Receptor Interactions Using Surface Plasmon Resonance (SPR)

Medições em tempo real de proteína de membrana: Receptor Interações Usando Superfície Plasmon Resonance (SPR)

Full Text
23,544 Views
09:35 min
November 29, 2014

DOI: 10.3791/51937-v

Nurit Livnat Levanon1, Elena Vigonsky1, Oded Lewinson1

1Department of Biochemistry, The Bruce and Ruth Rappaport Faculty of Medicine,The Technion-Israel Institute of Technology

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Superfície Plasmon Resonance (SPR) é um método livre de marcador para a detecção de interacções biomoleculares em tempo real. Nisto, um protocolo para uma proteína de membrana: interação experimento receptor é descrita, ao discutir os prós e contras da técnica.

O objetivo geral do experimento a seguir é demonstrar uma interação do receptor de proteína usando plasma de superfície e ressonância. Isso é obtido pela injeção dos íons de níquel sobre o ácido nitro triacético ou matriz NT a. Em seguida, uma das proteínas, denominada ligante, é imobilizada no chip do sensor após uma injeção em branco.

A segunda proteína denominada analito é injetada sobre o ligante imobilizado. Para detectar uma interação entre as duas proteínas, os resultados mostram que as duas proteínas interagem transitoriamente com as associações do analito e se dissociam do ligante. A afinidade da interação pode ser calculada com base nas taxas de dissociação e dissociação medidas das duas proteínas.

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