Name: Técnica para as aquisições de fígado de porco e Transplante ortotópico usando um Active Porto-Caval Shunt (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 27 s
Description: Aprenda o transplante hepático ortotópico em porcos utilizando um shunt porto-cava-jugular ativo para manter hemodinâmica estável durante todo o procedimento cirúrgico.

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O estudo foi apoiado por bolsas de pesquisa da Roche Organ Transplant Research Foundation (ROTRF) e da Astellas. Markus Selzner foi apoiado por um Prêmio de Desenvolvimento de Carreira ASTS. Matthias Knaak foi apoiado pela Bolsa de Pesquisa Astellas. Agradecemos a Uwe Mummenhoff e à família Birmingham por seu generoso apoio.

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Os autores não têm nada a divulgar.

Experimental suína transplante hepático ortotópico é um procedimento desafiador para um ambiente de pesquisa, sem os recursos de terapia intensiva de um cenário clínico. Complicações possíveis incluem instabilidade hemodinâmica, hemorragia, isquemia de órgãos, hipotermia, e metabólica, bem como respiratória, descompensação. Para qualquer grupo de pesquisa, formação processual suficiente da técnica cirúrgica 5, bem como a anestesia 14,15 porco é obrigatória a fim de alcançar resultados representativos e reprodutíveis. Muitos subtilezas técnicas têm sido descritos na literatura, especialmente em relação à fase de reconstrução vascular 5. O protocolo de transplante hepático ortotópico descrito acima fornece as informações necessárias para um modelo de substituição de cava que assemelha-se o transplante hepático ortotópico humano. Os resultados fornecidos demonstrar sobrevivência do animal confiável e recuperação do enxerto em ambos os modelos HBD e DCD. O protocolo é aplicável em cenários de sobrevivência de curto prazo utilizados na reperfusão do enxerto experiments, por exemplo, bem como em modelos de sobrevivência a longo prazo, tais como estudos de tolerância. Um grande obstáculo de suíno transplante hepático ortotópico é relativamente pobre tolerância de cava e da veia portal pinçamento. Congestão esplâncnica durante a fase anepática provoca hipertensão venosa capilar e danos que podem levar à isquemia intestinal major e instabilidade hemodinâmica, a ponto de um choque irreversível mesmo após reperfusão de órgãos 7. Desde a veia cava é completamente imersos em parênquima hepático, um procedimento piggy-back-preservando cava não é viável. A oclusão total da veia cava, durante a fase de reconstrução cava prejudica a estabilidade hemodinâmica do porco. Embora alguns relatos mostram que o transplante hepático ortotópico suína pode ser realizado durante a cava e da veia portal oclusão total de menos de 25 min 16,17, uma técnica de bypass porto-cava-jugular para o tempo de reconstrução vascular é a opção mais segura e mais prática 7- 9,18. Em thexperiência e dos autores, uma derivação porto-jugular passivo não é o ideal para manter o hemodinamicamente estável porco durante a fase anepática. O modelo de bypass, incluindo descompressão ativa de ambos cava infrahepatic e veia portal, permite uma fase de reconstrução calma das anastomoses cava e portal supra-hepáticas, mesmo com tempo de pinçamento prolongado devido a complicações imprevistas. Ao contrário do que relatórios anteriores 7, uma esplenectomia não é obrigatória quando o cateter de derivação portal é removido. Ambos artéria e veia esplênicas estão fechados sobre a meio caminho ao longo do comprimento do baço deixando a metade proximal suficientemente perfusão. Complicações como hemorragia ou embolia devido a desvio de desconexão são evitáveis, garantindo que o desvio é colocada com cuidado e protegido adequadamente. Em sobrevivência a longo prazo transplante hepático ortotópico experimentos, a anastomose do ducto biliar é considerado um ponto fraco, devido à sua alta taxa de complicações 19. O tecido biliar é muito frágil e needs cuidado especial quando está sendo manipulado. Muitas técnicas de anastomose diferentes têm sido descritas 5,19. Uma anastomose end-to-end é tecnicamente fácil e associado com o mínimo de complicações 19. Uma sutura contínua com uma agulha de não corte, incluindo grandes secções do tecido conjuntivo peribiliary parece ser superior a um sutura interrompida. O ducto biliar é colocado sob tensão desnecessária quando os pontos únicos de sutura interrompida estão atadas. Isso pode resultar em lágrimas de tecidos e vazamentos biliares consecutivos. O material de sutura - absorvível ou não absorvível - geralmente não é importante, dada a sua duração limitada até que o porco é encerrado. Para os modelos de sobrevivência a longo prazo ao longo de vários meses, suturas absorvíveis - como no transplante hepático ortotópico humano - são preferíveis. Cuidados específicos devem ser tomados com o pós-operatório follow-up. Alimentação suficiente e de fornecimento de fluido, um protocolo de alívio da dor de confiança, e uma imunossupressão adequadaregime são obrigatórios. Para as experiências de longo prazo, a imunossupressão parece particularmente importante. Em comparação com outros mamíferos, os porcos mostram uma surpreendentemente baixa taxa de rejeição imunológica após o transplante hepático ortotópico 20,21. Infiltrações de células redondas são máxima durante a segunda semana após o transplante e diminuir espontaneamente, mesmo sem imunossupressão. Rejeição é raramente a causa da morte após o transplante hepático ortotópico suíno 22. No entanto, mesmo com o protocolo de imunossupressão, envolvendo a administração de esteróides IV e inibidores da calcineurina po mencionado aqui, a rejeição do enxerto é indicado por um ligeiro aumento de transaminases a partir de cerca de 4 dias após o transplante hepático ortotópico e confirmada por aparente campo portal de infiltração de células redondas. Inibidores da calcineurina pode ser dada, quer po 23,24 ou iv 25,26; Ambos os métodos têm desvantagens. Mesmo com ajudas aplicação oral, a quantidade real de atingir o trato gastro-intestinal permanece indefinida. Por outro lado, a infusão intravenosa contínua, emcaneta de um porco com um animal ativo é difícil. Assim, a aplicação iv deve ser realizada como um bolus, o que resulta em picos de concentração de droga elevada, juntamente com os potenciais efeitos tóxicos. No entanto, ambos os métodos de aplicação parece permitir a sobrevivência a longo prazo. Semelhante a um ambiente clínico, recomenda a profilaxia pós-operatório úlcera de estresse. Sangramento pós-operatório de úlceras pépticas é um problema freqüente e pode estar relacionada com uma disfunção hepática 27. Depois de alguns casos de hemorragia digestiva em ambos os grupos transplante hepático ortotópico, os autores começaram a profilaxia regular com pantoprazol e não experimentar qualquer hemorragia gastrointestinal desde então. Manutenção rigorosa de condições estéreis no intra-operatório, comparáveis ​​com as condições de uma sala de cirurgia, clínica e consequentes profilaxia antibiótica, diminui o risco de complicações infecciosas. Em conclusão, este artigo pferece informações práticas para o estabelecimento de um programa de transplante hepático ortotópico suína em um ambiente de pesquisa. Dedicação suficiente, prática, e trabalho de equipa é importante, a fim de diminuir o período de aprendizagem, para produzir resultados fiáveis, e para reduzir os custos e o número de animais de pesquisa.

O transplante hepático (transplante hepático ortotópico) é a única opção de tratamento para pacientes com doença hepática em estágio final ou carcinoma hepatocelular avançado. Para os últimos 25 anos, o número de candidatos na lista de espera tem aumentado gradualmente e agora excede em muito o número de enxertos disponíveis. Na maioria das regiões de transplante, de 20 a 30% dos pacientes em lista de espera para transplante de fígado morrem sem receber um transplante de órgão ou são excluídos devido à progressão da doença. Estratégias para aumentar a lista de dadores e, assim, o número de enxertos disponíveis, são desesperadamente necessários. Critérios de alocação de órgãos estendidas, de preservação do enxerto prolongado, e de indução de tolerância imunológica ainda representam grandes desafios clínicos 1-3. Por isso, a investigação experimental transplante hepático ortotópico é fundamental, a fim de otimizar a prática clínica transplante hepático ortotópico. Porcina transplante hepático ortotópico é um modelo experimental bem estabelecido que se assemelha o transplante hepático ortotópico humana em muitos aspectos, incluindo a Ltamanho iver, anatomia, fisiologia e 4-6. Assim, tornou-se um método experimental padrão em campos de pesquisa, tais como técnicas cirúrgicas, fisiologia, imunologia, preservação e lesão de isquemia-reperfusão. Numerosas técnicas de aquisição de enxerto, hepatectomia destinatário e, em particular, a reconstrução vascular, foram descritos na literatura 5. A escolha da técnica apropriada varia de acordo com a preferência do pesquisador e capacidade técnica. Em contraste com a situação humana, congestão splanchnic durante a fase anepática representa um problema importante no transplante hepático ortotópico porcino. Isquemia intestinal subsequente e dano vascular congestiva pode causar instabilidade hemodinâmica grave, comprometendo a sobrevivência de porco e, assim, o sucesso da experiência 7-9. Portanto, a descompressão intestinal suficiente é obrigatória, especialmente em ambientes experimentais tecnicamente menos refinados. Nósing um ativo shunt porto-cava-jugular para a duração da fase de anepática é uma opção confiável para evitar o congestionamento intestinal. O sistema pode ser usado para as experiências iniciais de reperfusão, bem como cenários de sobrevivência a longo prazo. O protocolo a seguir contém todas as informações para um modelo estável e reprodutível transplante de fígado em suínos, incluindo os contratos fígado do doador, operação destinatário, incluindo hepatectomia e técnicas de reconstrução navio end-to-end, e cuidados pós-operatórios.

<table><tbody><tr><td>Sulfato de atropina 15 mg/30ml</td><td>Rafter 8 Produtos</td><td>238481</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina 0,3 mg/ml</td><td>RB Pharmaceuticals LDT</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Cefazolina 1 g</td><td>Pharmaceutical Partners of Canada Inc.</td><td></td><td></td>2237138</tr><tr><td>Solução Oral de Ciclosporina 5.000 mg/50 ml</td><td>Novartis Pharmaceuticals Canada Inc.</td><td></td><td></td>2150697</tr><tr><td>Citrato de Fentanil 0,25 mg/5 ml</td><td>Sandoz Canada Inc.</td><td></td><td></td>2240434</tr><tr><td>Heparina 10.000 UI / 10 ml</td><td>Leo Pharma A / S</td><td>453811</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano 99,9%, 250 ml</td><td>Pharmaceutical Partners of Canada Inc.</td><td></td><td></td>2231929</tr><tr><td>Cloridrato de Cetamina 5000 mg/50 ml</td><td>Bimeda-MTC Animal Health Inc.</td><td></td><td></td>612316</tr><tr><td>Ringer com lactato' s + 5% Dextrose, 0,5 L</td><td>Baxter Corporation</td><td>61131</td><td></td></tr><tr><td>Lacteted Ringer' s, 1 L</td><td>Baxter Corporation</td><td>61085</td><td></td></tr><tr><td>Metronidazol 500 mg/100 ml</td><td>Baxter Corporation</td><td>870420</td><td></td></tr><tr><td>Midazolam 50 mg/10 ml</td><td>Parceiros Farmacêuticos do Canadá Inc.</td><td></td><td></td>2242905</tr><tr><td>Pantoprazol 40 mg</td><td>Sandoz Canada Inc.</td><td></td><td></td>2306727</tr><tr><td>Cloreto de potássio 40 mEq/20 ml</td><td>Hospira Healthcare Corporation</td><td>37869</td><td></td></tr><tr><td>Propofol 1.000 mg/100 ml</td><td>Pharmascience Inc.</td><td></td><td></td>2244379</tr><tr><td>Sulfato de Protamina 50 mg/5 ml</td><td>Parceiros Farmacêuticos do Canadá Inc.</td><td></td><td></td>2139537</tr><tr><td>Solução salina 0,9%, 1 L</td><td>Baxter Corporation</td><td>60208</td><td></td></tr><tr><td>Bicarbonato de sódio 50 mEq/50 ml</td><td>Hospira Healthcare Corporation</td><td>261998</td><td></td></tr><tr><td>Solu-Medrol 500 mg</td><td>Pfizer Canada Inc.</td><td></td><td></td>2367963</tr><tr><td>Ácido Tranexâmico 1.000 mg / 10 ml</td><td>Pfizer Canada Inc.</td><td></td><td></td>2064413</tr><tr><td>Solução da Universidade de Wisconsin, SPS-1 Sistemas de Recuperação de Órgãos SPS-1</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Xilocaína Endotraqueal 10 mg/50 ml</td><td>AstraZeneca</td><td>2003767</td><td></td></tr><tr><td>Appose ULC 35 W grampeador de pele</td><td>Covidien Canadá</td><td>803712</td><td></td></tr><tr><td>Maxon, 1</td><td>Covidien Canadá</td><td>606173</td><td></td></tr><tr><td>Sofsilk, 0</td><td>Covidien Canadá</td><td>S606</td><td></td></tr><tr><td>Sofsilk, 2-0</td><td>Covidien Canadá</td><td>S405</td><td></td></tr><tr><td>Sofsilk, 3-0</td><td>Covidien Canadá</td><td>S404</td><td></td></tr><tr><td>Surgipro II, 4-0</td><td>Covidien Canadá</td><td>VP581X</td><td></td></tr><tr><td>Surgipro II, 5-0</td><td>Covidien Canadá</td><td>VP725X</td><td></td></tr><tr><td>Surgipro II, 6-0</td><td>Covidien Canadá</td><td>VP733X</td><td></td></tr><tr><td>Cateter i.v, 18 G</td><td>BD Canadá</td><td>381147</td><td></td></tr><tr><td>Cateter TPN Cook, 9.5 Fr</td><td>Cook Medical Company</td><td>C-TPNS-9.5-90</td><td></td></tr><tr><td>PSI Kit para cateter de bainha, 8.5 Fr</td> Linha de bomba de infusão <td>Arrow International</td><td>ASK-09803-UHN</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Smith Medical ASD Inc.</td><td>21-0442-25</td><td></td></tr><tr><td>Conjunto de administração de fígado (linha de descarga)</td><td>CardioMed Supplies Inc</td><td>17175</td><td></td></tr><tr><td>Mallinckrodt, tubo traqueal, 6,5 mm</td><td>Covidien Canada</td><td>86449</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de conexão de sucção Med-Rx</td><td>Benlan Inc.</td><td>70-8120</td><td></td></tr><tr><td>Bolsa de Órgãos</td><td>CardioMed Supplies Inc</td><td>2990</td><td></td></tr><tr><td>Ponta de Sucção</td><td>Tyco Healthcare Group LP</td><td>8888501023</td><td></td></tr><tr><td>Valleylab, Lápis de Cauterização</td><td>Covidien Canada</td><td>E2515H</td><td></td></tr><tr><td>Valleylab, Eletrodo de Retorno do Paciente Conector</td><td>de Bypass Covidien Canada</td><td>E7507</td><td></td></tr><tr><td>3/8" x 1/4"</td><td>Raumedic AG</td><td>955083-001</td><td></td></tr><tr><td>Conector de Bypass 3/8" x 3/8" Luer Lock</td><td>Raumedic AG</td><td>955163-001</td><td></td></tr><tr><td>Conector de Bypass Y 3/8" x 3/8" x 1/4"</td><td>Raumedic AG</td><td>961360-002</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de Bypass 1/4" x 1/16"</td><td>Raumedic AG</td><td>039505-010</td><td></td></tr><tr><td>Tubo de Bypass 3/8" x 3/32"</td><td>Raumedic AG</td><td>039535-005</td><td></td></tr><tr><td>Bomba Centrífuga Rotaflow</td><td>Maquet-Dynamed</td><td>HC 2821</td><td></td></tr><tr><td>Anel de Fixação de Mangueira de Aço Inoxidável, 5mm</td><td>Oetiker</td><td>16700007</td><td></td></tr><tr><td>Afastador Abdominal</td><td>Medite GmbH</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>De Bakey &ndash; Beck, braçadeira de cava infra-hepática</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB519R</td><td></td></tr><tr><td>Deithrich, braçadeira atraumática (veia portal)</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB525R</td><td></td></tr><tr><td>Gregory Bulldog Clamp, curvado</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB382R</td><td></td></tr><tr><td>Gregory Bulldog Clamp, reto</td><td>Aesculap Inc.</td><td>FB381R</td><td></td></tr><tr><td>Potts - De Martel, Tesoura</td><td>Aesculap Inc.</td><td>BC648R</td><td></td></tr><tr><td>Satinsky, braçadeira de cava supra-hepática</td><td>Aesculap Inc.</td>Braçadeira de tubulação simétrica <td>FB605R</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Codman Instruments</td><td>198010</td><td></td></tr><tr><td>Máquina de anestesia, Optimax</td><td>Moduflex Anesthesia Equipment</td><td>SN5180</td><td></td></tr><tr><td>Medidor de vazão de desvio, HT 110</td><td>Transonic Systems Inc.</td><td></td><td></td>HT110B11106</tr><tr><td>Sonda do medidor de vazão, H6XL</td><td>Transonic Systems Inc.</td><td>H6Xl689</td><td></td></tr><tr><td>Bomba de Terapia de Calor, T / Bomba</td><td>Gaymar Industries Inc</td><td>TP500-G89D19</td><td></td></tr><tr><td>Bomba de Infusão 3.000</td><td>SIMS Graseby LTD.</td><td></td><td></td>SN300050447</tr><tr><td>Vapor de Isoflurano 19.1</td><td>Draeger Medical Canada Inc.</td><td>N / A</td><td></td></tr><tr><td>Monitor, Datex AS 3</td><td>Instrumentarium Corp. / Hitachi</td><td>D-VHC14-23-02</td><td></td></tr><tr><td>Unidade de acionamento centrífugo</td><td>Rotaflow Maquet-Dynamed</td><td>952301</td><td></td></tr><tr><td>Rotaflow Console</td><td>Maquet-Dynamed</td><td>706035</td><td></td></tr><tr><td>Almofada de terapia de temperatura</td><td>Gaymar Industries Inc</td><td>TP26E</td><td></td></tr><tr><td>Valleylab Force Tx</td><td>Valleylab Inc.</td><td></td><td>Ventilador 216151480</td></tr><tr><td>, AV 800</td><td>DRE Medical Equipment</td><td>40800AVV</td><td></td></tr><tr><td>Warm Touch, Sistema de Aquecimento do Paciente</td><td>Nellcor/ Covidien Canadá</td><td>5015300A</td><td></td></tr></tbody></table>

técnica para as aquisições de fígado de porco e transplante ortotópico usando um active porto-caval shunt

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

O sucesso do transplante de fígado resultou em uma dramática escassez de órgãos. A cada ano, um número considerável de pacientes na lista de espera para transplante de fígado morre sem receber um transplante de órgão ou é excluído da lista devido à progressão da doença. Mesmo após um transplante bem-sucedido, a rejeição e os efeitos colaterais da imunossupressão continuam sendo as principais preocupações para a sobrevida do enxerto e a morbidade do paciente. 
A pesquisa experimental em animais tem sido essencial para o sucesso do transplante de fígado e ainda desempenha um papel fundamental no desenvolvimento da prática clínica de transplante. Em particular, o modelo de transplante de fígado ortotópico suíno (OLTx) é ideal para pesquisas clinicamente orientadas por sua grande semelhança com o tamanho, anatomia e fisiologia humanos. 
A descompressão da congestão intestinal durante a fase anepática do OLTx suíno é importante para garantir a sobrevivência confiável do animal. O uso de um shunt porto-caval-jugular ativo alcança excelente descompressão intestinal. O sistema pode ser usado para experimentos de sobrevivência de curto e longo prazo. O protocolo a seguir contém todas as informações técnicas para um modelo de transplante hepático estável e reprodutível em suínos, incluindo cuidados pós-operatórios com animais.

Em um primeiro estudo de transplante, um modelo de dador bater-coração (HBD, n = 5) foi comparado com um modelo TDC (n = 10) expostas a 45 min de isquemia quente in situ. Em ambos os grupos, os enxertos foram preservados em gelo durante 10 horas após a aquisição. No grupo HBD, 100% dos porcos receptores sobreviveu até ao fim do acompanhamento no dia 5 após o transplante. No grupo DCD, apenas 50% dos receptores sobreviveu porcos durante 5 dias, devido a problemas de coagulação ou descompensação metabólica, como resultado da diminuição da função do fígado pós-operatório. Todas as amostras de sangue foram coletadas a partir do cateter venoso central. Após centrifugação, as amostras de soro foram obtidas e analisadas para a lesão hepatocelular (aspartato aminotransferase, AST), a função biliar (bilirrubina e fosfatase alcalina total), e função hepática (INR). O curso de tempo de cada marcador é mostrado nas Figuras 2-5. <p class="jove_content" n de ast atingiu um pico ao fim horas u l no grupo hbd e dcd p="0,13)" voltou a valores quase normais ap dias. do mesmo modo da fosfatase alcalina foram marcadamente aumentada quando comparado com o enquanto bilirrubina total era est umol longo gradualmente at dia grande desvio padr dos heterogeneidade mostra uma les biliar peculiar deste grupo. inr como marcador fun hep mostraram tend semelhante aos ast. restauradas tinha mais baixos em compara> Figura 1. Esquema do shunt porto-cava-jugular. O bypass é preenchido com solução de Ringer com lactato. Em seguida, a parte da veia cava é presa com uma pinça tubulação, as partes jugulares e esplênicos estão ligados aos cateteres pré-estabelecidos, o desvio é aberto, e da bomba centrífuga é iniciado após o pinçamento da veia porta. Após a ressecção do fígado, a parte da veia cava do bypass é inserido e fixado na infrahepatic coto da veia cava, cranial para as veias renais. A braçadeira de tubo é libertado para permitir a descompressão da veia cava, para além da descompressão porta. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/52055/52055fig2.jpg"> Figura 2. aspartato aminotransferase (AST) (HBD n = 5, n = 10 DCD). AST é um marcador sensível da lesão hepatocelular. A ré picoer 24 horas é inferior no HBD do que no grupo DCD, sugerindo lesão de reperfusão menos hepática; o menor desvio padrão mostra resultados mais homogêneos no grupo HBD. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/52055/52055fig3.jpg"> Figura 3. A bilirrubina total (HBD n = 5, n = 10 DCD). A bilirrubina total, como um marcador de depuração biliar e integridade do ducto biliar, mostra uma tendência estável e homogénea com valores inferiores a 10 mmol / L no grupo de HBD. A curva de bilirrubina no grupo DCD aumenta gradualmente ao longo do tempo e mostra um desvio-padrão elevado, sugerindo lesão biliar em apenas uma porção do grupo experimental. <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/52055/52055fig4.jpg"> Figura 4. A fosfatase alcalina (HBD n = 5, n = 10 DCD). A fosfatase alcalina ié um indicador de lesão biliar. Os valores para o grupo de HBD são mais baixas do que a do grupo DCD, o que implica menos lesão biliar. <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/52055/52055fig5.jpg"> Figura 5. INR (HBD n = 5, DCD n = 10). Um valor alto indica INR função hepatocelular diminuída devido à diminuição da liberação de fatores de coagulação. Em ambos os grupos HBD e DCD, os valores de INR regresso aos valores normais de 5 dias após o transplante, sugerindo que a recuperação da função do fígado. Os valores para o grupo de HBD aparecem inferior.

A pesquisa experimental em animais desempenha um papel fundamental no desenvolvimento da prática clínica de transplante. O modelo de transplante de fígado ortotópico suíno (OLTx) se assemelha muito às condições humanas e é frequentemente usado em pesquisas clinicamente orientadas. O protocolo a seguir contém todas as informações para um modelo OLTx suíno confiável usando um shunt porto-caval-jugular ativo.

Técnica para as aquisições de fígado de porco e Transplante ortotópico usando um Active Porto-Caval Shunt

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

O objetivo geral deste procedimento é realizar de forma confiável um transplante hepático alogênico em suínos, garantindo uma hemodinâmica animal estável durante e no pós-operatório. Isso é feito implementando primeiro um shunt jugular cava portal ativo antes do pinçamento cruzado da veia CVA e da veia porta, a fim de evitar congestão intestinal durante a fase de implantação. Em seguida, é realizado um transplante hepático ortotópico pela técnica de substituição de cava, iniciando-se pela anastomose do cabo supra-hepático.Em seguida, a veia porta é anastomosa e o fígado é reperfundido. Finalmente, o shunt jugular caval portal é removido e as anastomoses remanescentes da veia infra-hepática cva, da artéria hepática e do ducto colédoco são concluídas. Por fim, o porco desmamou a anestesia e foi monitorado de perto no pós-operatório.A principal vantagem desta técnica sobre os métodos existentes, como oclusão vascular total ou inance passiva, é que, nesta técnica em particular, a congestão esplênica durante a fase anabólica é completamente evitada. Desta forma, evitamos hipertensão venosa e danos capilares que podem levar a grande isquemia intestinal e instabilidade hemodinâmica Após a excisão do fígado de um porco doador e anestesia do porco receptor de acordo com o protocolo de texto, colocou um porco receptor em decúbito dorsal em uma mesa cirúrgica em cima de uma almofada de aquecimento. Após a intubação, use a geometria da tampa para confirmar que ela foi realizada corretamente com oximetria de pulso na cauda ou orelha do porco.Monitore a frequência cardíaca e a saturação de oxigênio. Execute a técnica de Seldinger para inserir um indutor de bainha na veia jugular externa esquerda que será usado posteriormente para um bypass jugular do cabo portal ativo. Depois de inserir um cateter de nutrição parenteral total na veia jugular externa direita em condições estéreis, dissecar a artéria carótida direita e inserir um cateter de polipropileno para monitoramento invasivo da pressão arterial.Em seguida, use dois laços de seda zero para envolver a artéria para permitir a ligadura de emergência. Em seguida, faça uma laparotomia na linha média e insira um afastador abdominal para obter acesso suficiente ao quadrante superior direito. Em seguida, em etapas intermediárias, divida o ligamento duodenal hepato próximo ao fígado entre os laços.Identifique, divida e marque os ramos da artéria hepática e do ducto biliar. Em seguida, dissecar a artéria hepática no sentido retrógrado até atingir a divisão da artéria gastroduodenal. Em seguida, libere a veia porta do tecido aderente usando um CVA vena mobilizado por eletrocautério do retroperitônio do lado direito para expor o hélio do baço aproximadamente metade ao longo do comprimento do baço.Limpe cuidadosamente a artéria e a veia esplênicas das camadas peritoneais aderentes. Em seguida, use laços de seda 4 2 0 para envolver a artéria e a veia esplênica. Insira um indutor de bainha francesa 8.5 com dois orifícios adicionais na ponta do cateter na veia esplênica apontando distalmente em direção à veia porta com um dos dois laços zero.Fixe o cateter distalmente à sua inserção e use outro laço de dois zeros para fechar a veia proximal à inserção. Em seguida, encha a solução salina em um desvio que consiste em uma cabeça de bomba centrífuga, um tubo jugular e um influxo de um ramo portal e um ramo caval. Coloque uma braçadeira de tubulação na extremidade proximal da tubulação caval.Em seguida, conecte o portal e a abertura jugular do bypass a ambos os cateteres introdutores da bainha e use um anel de fixação de mangueira de metal para vedar a conexão. Coloque a cabeça da bomba centrífuga na posição da bomba três minutos após a administração de 1000 miligramas de ácido texa e 10.000 UI de heparina por via intravenosa. Abra as pinças de ambos os cateteres introdutores da bainha e prenda a veia porta.Em seguida, ligue a bomba centrífuga a cerca de 1.500 rodadas por minuto. Em seguida, usando um grampo cruzado de braçadeira traseira deba, o AVC da veia infra-hepática apenas cranial às veias renais. Aplique pressão firme no tecido hepático para espremer uma parte do sangue remanescente.Em seguida, usando um grampo cruzado statsky, aperte a veia cava hepática superior, incluindo uma borda diafragmática enquanto retrai o fígado coddly. Agora corte o AVC da veia supra-hepática diretamente em sua borda para o tecido hepático e corte a veia porta perto do hélio hepático aproximadamente quatro centímetros cranial ao clamp AVC infra-hepático. Faça um orifício na parede anterior da veia cava neste orifício.Posicione o conector da abertura do cabo de desvio com uma trava de isca voltada anteriormente com um laço de seda zero. Prenda o conector na cva infra-hepática. Em seguida, abra a braçadeira da tubulação do ramal do cabo do bypass.Por fim, abra o grampo CVA infra-hepático para permitir um bypass jugular do cabo, além do bypass jugular portal existente. Depois de aumentar a velocidade da bomba para cerca de 2.500 tiros por minuto, confirme se o fluxo de saída de desvio no lado jugular está entre 900 e mil mililitros por minuto. Usando quatro pontos de polipropileno monofilamento zero.Feche todas as três veias frênicas oste osteos no lado receptor no ponto de abertura do AVC hepático. Quatro suturas de polipropileno monofilamento zero de braço duplo dentro, fora em ambos os cantos do AVC hepático SUP no lado receptor. Depois de colocar o órgão doador na cavidade abdominal, apare o AVC da veia hepática S do doador para caber no lado do receptor.Usando as agulhas internas dos pontos do canto lateral do destinatário, faça-o dentro do ponto do canto externo em cada um dos lados da cva doadora super hepática. Uma vez que o receptor e o doador Áustria estejam aproximados, amarre ambas as terminações da sutura esquerda. Em seguida, faça um ponto externo interno da parede traseira da kava receptora ao lado da gravata e passe por cima da parede traseira.Idealmente, evitando a parede da kava com a sutura restante passando sobre a parede frontal do canto esquerdo. Em seguida, amarre as duas suturas usadas para as paredes traseira e frontal. Depois de aparar a veia porta doadora em um comprimento adequado, use seis pontos de polipropileno monofilamentar zero para realizar uma anastomose da veia porta término-terminal, conforme demonstrado pouco antes de completar a parede frontal, use outra linha de descarga para intubar o lúmen da hava infra-hepática e com um litro de solução salina em temperatura ambiente.Lave a solução UW através da veia porta hava infra-hepática. Em seguida, complete a anastomose e amarre as suturas deixando aproximadamente 0,5 centímetros de fator de crescimento. Em seguida, coloque outro grampo traseiro deba no doador infra-hepático cva.Abra o grampo S hepático CVA e verifique se há sangramento. Em seguida, abra a pinça portal para reperfundir o fígado, reprenda o lado receptor da veia cava infra-hepática e coloque uma braçadeira de tubulação na parte do cabo do bypass. Depois de parar a bomba centrífuga, corte os laços do conector do cabo e remova-o.Devolva o sangue restante do bypass ao porco através do cateter jugular. Agora feche a pinça, o cateter jugular e desconecte o bypass. Então, depois de administrar 100 miligramas de sulfato de protamina para antagonizar uma heparina, use cinco suturas de monofilamento zero para realizar uma anastomose término-terminal da AVC infra-hepática.Novamente, reperfundiu o AVC inferior infra-hepático liberando ambos os grampos. Depois de aparar um remendo aórtico ao redor do tronco celíaco do doador, coloque uma pinça de buldogue na artéria hepática comum proximalmente à junção da artéria gastroduodenal. Uma vez que a artéria hepática tenha sido lavada com heparina, use seis pontos de polipropileno monofilamentar zero para anesti os.O osteo arterial termina a fim em uma técnica de pára-quedas em execução, então reperfunde-se abrindo primeiro os grampos distal e depois o buldogue proximal com suturas de monofilamento 2 6 0. Use a técnica de corrida para anestesiar o ducto biliar de ponta a ponta. Após verificar a hemostasia, remova o cateter introdutor da bainha da veia esplênica.Use os dois laços restantes para fechar as extremidades proximal e distal com a sutura absorvível de monofilamento tamanho um. Feche a parede abdominal. Finalmente, use um grampeador de pele ou faça uma sutura de dois zero para fechar a pele.Consulte o protocolo de texto para cuidados pós-operatórios. Em nosso primeiro estudo de transplante, 100% dos porcos receptores que receberam fígados de um doador com batimentos cardíacos ou HBD sobreviveram até o final do acompanhamento, cinco dias após o transplante. No entanto, apenas 50% dos porcos que receberam fígados de doadores após morte circulatória ou DCD chegaram à análise de acompanhamento de cinco dias de amostras de sangue de lesão hepatocelular.A função biliar e hepática mostrou que os níveis de ST atingiram um pico após 24 horas em ambos os grupos. Isso foi muito maior no grupo DCD em comparação com o grupo HCD e retornou a valores quase normais após cinco dias. Da mesma forma, como mostrado neste gráfico, os valores de fosfatase alcalina aumentaram acentuadamente após 36 horas no grupo DCD quando comparado ao grupo HBD, conforme demonstrado aqui.Enquanto a bilirrubina total foi estável no grupo HPD, ela aumentou gradualmente no grupo DCD até o quinto dia e mostra um alto desvio padrão sugerindo lesão biliar em apenas uma parte do grupo experimental. Nesta figura, o INR, como marcador da função hepática, mostrou uma tendência semelhante aos valores de A ST que atingiram o pico em 24 horas e foram restaurados para valores quase normais. Depois de cinco dias Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como usar um bypass venoso ativo durante o transplante ortotópico de fígado de porco.Desta forma, garantimos condições estáveis e mais estáveis durante todo o procedimento.

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