7 de fevereiro de 2015
O presente artigo descreve as considerações metodológicas para várias avaliações não invasivas da função e morfologia vascular que são comumente usadas em pesquisas médicas para avaliar diferentes estágios da aterosclerose.
O objetivo geral do experimento a seguir é examinar a arteriosclerose subclínica em diferentes territórios vasculares. Primeiro, a imagem de Doppler a laser com iontoforese de medicamentos vasodilatadores é utilizada para examinar a função endotelial microvascular. Em seguida, a dilatação mediada pelo fluxo e a dilatação mediada por nitrato de glicerina são utilizadas para examinar a função endotelial de grandes vasos.
Por fim, a espessura da camada íntima-média carotídea é analisada em busca de alterações morfológicas avançadas. Os resultados mostram alterações na função endotelial de microvasos e vasos de grande calibre em resposta à estimulação. Além disso, a parede do vaso da artéria carótida também é caracterizada.
Esses métodos podem ajudar a responder perguntas fundamentais na área da fisiologia cardiovascular, como determinar o impacto de intervenções na saúde vascular em diferentes populações clínicas. Primeiro, prepare o imagiador a laser doppler. Deixe-o aquecer por meia hora ou mais.
Calibre a máquina e prepare o software para uso. Além disso, prepare as soluções na câmara de acrílico. Em seguida, leve o participante do estudo até o assento do aparelho de imagem, com o participante levemente reclinado e apoiado em um travesseiro firme, com um cotovelo flexionado em 90 graus e o antebraço confortavelmente posicionado sobre um tapete preto.
Certifique-se de fixar o antebraço ao travesseiro para que permaneça no lugar sobre o tapete. Em seguida, prepare as câmaras de perspex. Primeiro, conecte suas tampas ao controlador de iontoforese.
Em seguida, conecte a câmara contendo acetilcolina à ligação anódica e conecte a câmara contendo nitroprussiato de sódio à ligação catódica. Depois, conecte as duas câmaras à face volar do antebraço fixado utilizando placas adesivas dupla face. Além disso, cubra as câmaras com lamínulas de 32 milímetros.
Agora, no software do scanner, abra a janela de configuração do scanner localizada no canto superior esquerdo da tela inicial. Selecione a guia de digitalização de imagem e determine a área a ser digitalizada clicando no botão marcar no canto inferior direito da janela. Posicione cuidadosamente a cabeça do scanner para que ela digitalize com precisão a área de interesse, se necessário.
Altere manualmente a região de interesse inserindo o tamanho da área de varredura na seção de área de varredura próxima ao topo da janela. Certifique-se de que a região de interesse inclua o diâmetro de cada uma das câmaras de iontoforese e seja grande o suficiente para limitar a variabilidade do fluxo sanguíneo cutâneo. A varredura pode agora ser iniciada após a conclusão da configuração.
Utilize o software de análise de imagem LDI. Para abrir o arquivo de dados, selecione a opção de revisão de imagem na janela principal.
Agora delimite uma região de interesse ao redor dos diâmetros externos de cada câmara. Em seguida, clique no ícone de estatísticas e uma coluna contendo as unidades medianas de perfusão para cada câmara será exibida a partir dos 12 exames de cada câmara. Anote a unidade de perfusão basal e a unidade de perfusão mais alta.
Comece configurando o aparelho de ultrassom Doppler e o software de análise de imagens vasculares com imagem em tempo real. Em seguida, apresente a configuração ao participante e peça que ele se acomode confortavelmente na cadeira. Solicite ao participante do teste que remova qualquer joia do punho e use uma almofada para apoiar o braço de forma confortável.
Em seguida, coloque uma braçadeira de pressão arterial ao redor do punho do participante. Ela deve ser mantida o mais imóvel possível. Depois, fixe a matriz linear de transdutores do aparelho em um suporte estereotáxico.
Em seguida, aperte o grampo no transdutor. Depois, acesse o menu na máquina de ultrassom. Ajuste a frequência de varredura para cinco megahertz e defina a profundidade em cerca de 3,5 centímetros.
Agora, utilizando o transdutor, localize a artéria braquial com varredura longitudinal. Ela geralmente está a dois a dez centímetros acima da fossa antecubital. Em seguida, ajuste o ganho para obter um brilho simétrico nas paredes próxima e distante do vaso.
O Doppler colorido mostrará o pulso sanguíneo arterial passando pela artéria, o que a distinguirá de quaisquer veias. Ajuste a visualização da artéria braquial para que ela seja claramente visível e horizontal na tela. Deve aparecer como duas linhas paralelas contínuas separadas por uma área clara entre as linhas no software.
Use o cursor para marcar a região de interesse e o software registrará automaticamente. O ajuste do diâmetro do vaso na área pode ser feito com os botões X e Y na tela principal. Agora, clique no botão iniciar e imagine a artéria por dois minutos.
Em seguida, pressione inflar para gravar durante cinco minutos enquanto infla o manguito de pressão arterial até as pressões sistólicas. O fluxo sanguíneo para a mão deve ser ocluído pelo manguito após a desinflação do mesmo. Continue a gravação por três minutos.
Neste momento, induz-se a hiperemia, o que estimula a vasodilatação mediada por óxido nítrico. Em seguida, realize um período de repouso de 10 minutos. Depois, localize novamente a artéria braquial e realize uma nova gravação basal do diâmetro da artéria por dois minutos.
Agora, peça ao participante para ingerir sublingualmente um comprimido de 500 gramas de trinitrato de glicerol e continue o registro por cinco minutos. Após cinco minutos, o comprimido deve ser removido e o participante deve ser monitorado quanto a efeitos adversos. Ao analisar os dados, certifique-se de verificar a região basal em busca de artefatos, excluindo quaisquer artefatos antes de calcular a média dos valores restantes para obter o diâmetro basal.
Além disso, durante a análise da dilatação mediada por fluxo, inspecione a região de dilatação máxima detectada automaticamente. Se ela estiver incorretamente identificada, selecione manualmente uma região mais restrita, que contenha o pico. Para esta medição, peça ao participante que se deite confortavelmente em uma cama com um travesseiro.
Em seguida, configure os eletrodos de ECG para um traçado básico. Afixe-os em ambos os braços e no tornozelo esquerdo. Depois, acesse o menu e defina a frequência de varredura como 10 megahertz e a profundidade de gravação entre três e quatro centímetros.
Em seguida, ajuste o ganho como antes. Agora, peça ao participante para girar levemente a cabeça para a esquerda e use o transdutor de arranjo linear para examinar a artéria carótida direita. Procure um ponto de bifurcação no vaso, pois esse ponto mostra a artéria carótida comum se dividindo nas artérias carótidas interna e externa.
Realize a varredura da artéria carótida ao longo de todas as suas seções em plano longitudinal. Identifique a artéria comum interna e externa caso alguma placa seja observada. Salve as imagens agora.
Obtenha pelo menos três imagens de uma seção livre de placa e situada a cerca de um centímetro da bulha carotídea. Peça ao participante que gire a cabeça para o outro lado e repita o procedimento para documentar a artéria carótida esquerda. Posteriormente, analise as imagens fora de linha utilizando o pacote de software de medição arterial, coletando os valores de EIMC e diâmetro do lúmen.
Esteja ciente de que leituras precisas próximas à parede não podem ser obtidas, portanto analise apenas leituras provenientes da parede oposta. A imagem de Doppler a laser com iontoforese foi utilizada em uma mulher saudável de meia-idade sem doença cardiovascular. Houve um aumento acentuado no fluxo sanguíneo mediano com ambos os estímulos.
O fluxo sanguíneo máximo atingiu 455 unidades de perfusão para acetilcolina e 446 unidades de perfusão para nitroprussiato de sódio. A dilatação mediada por fluxo e a dilatação mediada por trinitrato de glicerol foram ambas investigadas em uma mulher jovem saudável, livre de doenças cardiovasculares. O teste de dilatação mediada por fluxo aumentou o diâmetro da artéria em cerca de 10%, e a dilatação mediada por trinitrato de glicerol aumentou o diâmetro da artéria em cerca de 30%. A espessura da camada íntima-média da carótida foi avaliada na artéria carótida esquerda de um indivíduo saudável.
O valor da IMC para a parede distal foi de 0,83 milímetros e o diâmetro do lúmen foi de 7,71 milímetros. As mesmas medidas na artéria carótida direita foram de 0,87 milímetros e 7,8 milímetros após seu desenvolvimento. Essas técnicas abriram caminho para que pesquisadores da fisiologia cardiovascular compreendessem os mecanismos das doenças cardiovasculares em diferentes populações clínicas.
Este artigo discute métodos não invasivos para avaliar a função e a morfologia vasculares, particularmente no contexto da pesquisa sobre aterosclerose.
Avaliações vasculares não invasivas utilizando imagem de Doppler a laser, dilatação mediada pelo fluxo e ultrassonografia carotídea fornecem pontos finais quantitativos essenciais para a detecção precoce da disfunção endotelial e do remodelamento vascular. Essas metodologias permitem que equipes de pesquisa translacional investiguem a saúde vascular, reduzam os riscos associados a hipóteses mecanicistas e reforcem a confiança preditiva na validação de alvos cardiovasculares. A integração dessas técnicas nos fluxos de descoberta e pré-clínicos aprimora a tomada de decisões em portfólios ao possibilitar fenotipagem vascular robusta e reprodutível.
Essas avaliações não invasivas integram-se desde a descoberta inicial até a pesquisa pré-clínica, proporcionando continuidade no fenotipamento vascular e na redução de riscos mecanicistas.