Name: גישה המתודולוגית להערכות לא פולשני של תפקוד כלי דם ומורפולוגיה (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-02-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 33 s
Description: למד הערכות לא פולשניות של תפקוד כלי דם ומורפולוגיה באמצעות דימות לייזר דופלר ואולטרסאונד. שיטות אלו מאפשרות לחוקרים לבחון את תפקוד האנדותל ועובי דופן העורקים התרדמניים במחקר קרדיווסקולרי.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

המחברים רוצים להודות לד"ר ג'ורג' בלנוס על עזרתו בטכניקת ההרחבה בתיווך זרימה.

הערה: הפרוטוקול כדלקמן הנחיות מועדת המחקר האנושית של דאדלי קבוצת NHS Foundation Trust האתיקה. לבצע את כל הטכניקות המתוארות במעבדה טמפרטורה מבוקרת (21 - 22 C o), עם תאורה והיעדר הרעש יציב. שאל אנשים עוברים הערכות להימנע ממזון, משקה, עישון ופעילות גופני 12 שעות לפני הבדיקה. לעכב תרופות vasoactive עבור שעות לפחות 12 בעת הצורך. 1. לייזר דופלר הדמיה עם Iontophoresis <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל לייזר דופלר Imager (LDI) ולאפשר לסורק לייצוב באופן אוטומטי לכ 30 דקות. הפעל את תוכנת LDI ולחץ על &#39;מדידה&#39; (מסך הבית של התוכנה לאחר מכן ניתן יהיה לראות). במסך הבית, בחר &#39;Ionto פרוטוקול&#39; בשורת המשימות ממוקמות בחלק העליון של החלון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הזנה ידנית של הפרוטוקול (הפרוטוקול המשמש במעבדה שלנו כולל סך של 13 sפחיות, עם זרם חשמלי למשלוח הסמים iontophoretic להגדיר מ2 סריקה כדי לסרוק 11 במתח של 30 מייקרו-אמפר). הסריקה להגדיר 1 כבסיס לסרוק ללא זרם חשמלי, ולסרוק 12 &amp; 13 כמו סריקות התאוששות גם ללא זרם חשמלי. לחץ על אישור כדי לאשר את ההגדרות ולחזור למסך בית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שאל משתתף להירגע בכיסא חצי שכיבה עם זרועם נחה 90 מעלות על כרית נוחה, חברה, ומניח את מחצלת שחורה מתחת לזרוע. הערה: המחצלת מסייעת להגביל מדידות artefact שנוצרו על ידי משטחי רקע המקיפים את הרקמה. חשוב שמשתתפי ARM הם קשור היטב לכרית כך שאין תנועה וחפצים הקשורים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את תקעי קווית בקצה השני של חדר כל פרספקס לבקר iontophoresis. חבר את התא המכיל מינון 2.5 מיליליטר של אצטילכולין% 1 (ACH) לחיבור anodal של הבקר iontophoresis, ולחבר את התא השני מכילמינון 2.5 מיליליטר של 1% נתרן-nitroprusside (SNP) לחיבור cathodal. מערבבים את שני הסוכנים בתא באמצעות 0.5% תמיסת מלח. לחבר את שני תאים להיבט volar של זרועו הימנית של המשתתף באמצעות כריות דבקים דו צדדיות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכסות את התאים על ידי 32 מ&quot;מ coverslips כדי למנוע דליפה של נוזל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני שתתחיל בסריקה, לפתוח את החלון &#39;הגדרת סורק&#39; ממוקם בפינה השמאלית העליונה של מסך הבית. בחר בכרטיסייה &#39;וידאו והמרחק &quot;ובחר את הפונקציה&#39; המרחק אוטומטי &#39;כדי למדוד את מרחקו של ראש הסורק מזרוע המשתתפים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעקבות השלמת מדידת המרחק האוטומטי, בחר בכרטיסייה &#39;התמונה סרוק &quot;ולקבוע את האזור שהוא לסריקה על ידי לחיצה על הכפתור&#39; מארק &#39;בפינה הימנית התחתונה של החלון. במידת הצורך, לשנות את הגודל של האזור של עניין על-ידי הזנה ידנית בגודל שטח הסריקה ל&#39;פינת &amp; Scan# 8217; סעיף בחלק העליון של החלון. ודא שהאזור של עניין כולל את הקוטר של כל אחד מתאי iontophoresis והוא גדול מספיק כדי להגביל את השונות בזרימת דם בעור. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר השלמת ההערכה, לשמור את קובץ הנתונים. פתח את קובץ הנתונים באמצעות תוכנת ניתוח תמונת LDI לביצוע מדידות של זלוף. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ על &#39;סקירת תמונה &quot;בחלון התוכנה הראשי, ולפתוח את קובץ התמונה שהוא להיות מנותחים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להשתמש בתוכנה כדי לסמן את האזור של עניין סביב הקטרים ​​החיצוניים של כל תא. התאם את האזור של עניין, כך שהוא מתאים בצורה נכונה באזור שבו התאים היו נוכחים. לאחר מכן לחץ על הסמל &#39;הסטטיסטיקה&#39; ועמודה המכילה יחידות זלוף החציוני לכל תא יוצגו. שים לב ליחידת זלוף תחילת המחקר, כמו גם את יחידת זלוף הגבוהה ביותר מכל אחד מ -12 הסריקות שקדמו לכל תא. הערה: שיטה זו של ניתוח היאספציפי למעבדה שלנו; עם זאת, ניתן להשתמש בשיטות אחרות כדי להביע את הנתונים המתקבלים מסריקת LDI. לסקירה מקיפה עיינו הנחיות מRoustit ו -12 Cracowski. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לחשב אחוז השינוי בזלוף בתגובה לACH וSNP, לחסר זלוף בסיס מזלוף השיא, הפרד על ידי זלוף תחילת המחקר ולאחר מכן להכפיל ב -100. הערה: במעבדה שלנו, שינויים ביחסיים זלוף לתחילת המחקר הראו מקדם התוך משקיף טוב של וריאציה לACH (7%) וSNP (6%). </li></ol> הרחבה ותיווך זרימה 2. ואת ההתרחבות בתיווך trinitrate Glyceryl <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הפעל את המכונה אולטרסאונד דופלר ומחשב ברשת המכילה ניתוח תמונה של כלי דם תוכנה (VIA). הערה: תוכנת VIA לוכדת תמונה בשידור חי (במהירות של 25 פריימים לשניים) ומספקת מידע על קוטר הכלי, כמו גם את האיכות של הגבולות של כלי הדם שזוהתה על ידי אולטרסאונד. Otחבילותיה תוכנה זמינות אשר עשוי להכיל תכונות והגדרות נוספות. מומלץ להתייעץ מדריכי הפעלה לתוכנה ספציפית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שאל משתתף להירגע בכורסה שכיבה למחצה ומניחים לצד שלהם, אבל ברמה עם לב זרועם על כרית נוחה. הנח שרוול למדידת לחץ דם סביב פרק ​​כף ידו של המשתתף. הערה: החולה צריך להישאל כדי לשמור על זרועם בשקט ככל האפשר כדי למנוע חפצי תנועה במהלך המדידה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אבטח את מתמר המערך ליניארי ממכשיר אולטרסאונד למהדק stereotactic, ולהדק את המהדק באמצעות אומי הפרפר כך שמתמר אולטרסאונד נשאר בתנוחה קבועה. הערה: המהדק יבטיח כי מתמר אולטרסאונד יישאר יציב פעם כלי הדם נמצאים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> במחשב אולטרא-סאונד, לגלול ל&#39;התפריט &#39;ולהגדיר את תדירות הסריקה בשעה 5 MHz ולייעל את העומק (הגדרת העומק המומלצת היא3.5 סנטימטרים) והגדרות רווח על מכשיר אולטרסאונד. התאם את הגדרות רווח כדי להבטיח שיש בהירות סימטריות הקיר הקרוב ורחוק של כלי השיט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות מתמר המערך ליניארי, לאתר את עורק הזרוע שנמצא בדרך כלל 2-10 סנטימטר מעל הפוסות antecubital במטוס הסריקה האורך. בצע את כל שינויים על מנת להבהיר את איכות התמונה בשלב זה. כדי לסייע בזיהוי העורק, להדליק את דופלר הצבע כדי לעזור להראות את זרימת דם בעורקי pulsatile ולהבדיל אותה מזרימת דם ורידים רציפה. הצג את עורק הזרוע אופקי על פני המסך; הוא אמור להופיע כשני קווים מקבילים מוצקים, מופרדים על ידי שטח ברור בין השורות המייצגת את לומן של כלי השיט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לאפשר לתוכנת VIA להקליט קוטר כלי באופן אוטומטי, השתמש בסמן כדי לסמן אזור קבוע מראש של ריבית כדי לזהות ולעקוב אחר הקירות הקדמי וגם האחוריים של העורק. הערה: גודלו של האזור של עניין יכולה להיותלהגדיל או להקטין באמצעות והכפתורים &#39;x&#39; &#39;y&#39; ממוקמים על מסך התוכנה הראשי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ על &quot;התחל&quot; בתוכנת VIA ותמונת העורק למשך 2 דקות. בעקבות זאת, לחץ על &#39;לנפח&#39; בתוכנת VIA ובו זמנית לנפח את השרוול למדידת לחץ הדם ממוקם סביב פרק ​​כף היד לsuprasystolic לחצים (בדרך כלל מעל 220 מ&quot;מ כספית) במשך 5 דקות. הערה: המטרה של שרוול שורש כף היד היא כדי לחסום את זרימת דם לכף היד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 5 דקות להוציא את האוויר שרוול לחץ הדם כדי לגרום לhyperaemia תגובתי אשר, בכלי בריא, יעודד NO-תיווך vasodilatation. הערה: הרחבה Peak יכולה להתרחש עד 180 שניות הבאות דפלציה שרוול, ולכן רצוי להמשיך הקלטת קטרי כלי דם במשך 3 דקות לאחר שחרור שרוול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעקבות תקופת מנוחה של 10 דקות, מחדש לאתר עורק הזרוע באמצעות מתמר המערך ליניארי ולהקליט קריאת קוטר בסיס 2 דקות באותו אופןכצעד 2.7. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ואז שאל את המשתתף למקום לוח 500 מיקרוגרם sublingual glyceryl-trinitrate (GTN) מתחת ללשונם ולהמשיך למדוד את קוטר עורק זרוע ל5 דקות נוספות. לאחר תקופה זו, שואל את המשתתף כדי להסיר את לוח GTN ולפקח על המשתתף כדי לוודא שהם לא חווים כל תופעות לוואי לתרופה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע את כל הניתוח של נתונים לא מקוון. עשרים וחמש נקודות נתונים זמינות עבור כל שנייה של ההערכה; קריסת נתונים זה לתקופות של שנייה אחת ב- Microsoft Excel. לייצא את הנתונים לחבילת ניתוח אותות דיגיטליים ולסנן עם שניות 3 נעו מסנן ממוצע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקים את קוטר הבסיס משניות 120 הנתונים שקדמו לשרוול-האינפלציה. ראייה לבדוק את אזור הבסיס ולהוציא חפצים. ממוצע אזורי הבסיס שנותרו כדי לייצר את קוטר הבסיס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לניתוח התרחבות בתיווך זרימה (FMD), להשתמש בתוכנה כדי לסרוק את ההודעה cuff- באופן אוטומטיאזור הדפלציה להתרחבות שיא ולהשתמש בסמן כדי לסמן שיא זה לבדיקה ויזואלית. אם השיא זוהה בטעות, להשתמש בסמן כדי לבחור אזור מצומצם יותר שבתוכה השיא יכל אז להיות מזוהה. רשום את ערך השיא כקוטר שיא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתונים GTN, לאמץ הליך זהה לזה המשמש בFMD, מלבד חיפוש אחר התרחבות שיא באזור הבא 5 דקות של מתן תרופה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לחשב% FMD ו% GTN, לחסר קוטר בסיס מקוטר השיא, הפרד על ידי קוטר בסיס ולאחר מכן להכפיל ב -100. הערה: במעבדה שלנו, מקדם תוך המשקיף של וריאציה הוא 11% לFMD, ו -12% לGTN. </li></ol> עובי 3. תרדמת אינטימה-מדיה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שאל משתתף למצוא תנוחה נוחה על מיטה, ומניח את כרית מתחת לראש להציע תמיכה לצוואר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את רל (ECG) מוביל לאולטרסאונד דופלר ולאחר מכן לצרף אותם על pגפיים atient. רק נדרש האק&quot;ג בסיסי, כל כך למקם את המוביל המתאים בזרועות ימין ועל השמאל, ועל קרסול השמאל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכן את המכונה אולטרסאונד ידי גלילה ב&#39;התפריט &#39;וקביעת תדירות הסריקה ב 10 MHz ואופטימיזציה עומק (הגדרת העומק המומלצת היא 3-4 סנטימטר) ורווח הגדרות. התאם את הגדרות רווח כדי להבטיח שיש בהירות סימטריות הקיר הקרוב ורחוק של כלי השיט. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שאל משתתף להטות את הראש שלהם מעט שמאלה, ובאמצעות מתמר המערך ליניארי, לסרוק את העורק הראשי הנכון לאורך כל החלקים שלה (העורק משותף, פנימי וחיצוני התרדמה) באמצעות מטוס הסריקה האורך לזהות הנוכחות של כל לוחות. לשמור תמונות המציגות כל ראיה של שלט. כדי לסייע בזיהוי העורק, לחפש נקודת הסתעפות בכלי, כמו זה מראה את עורק התרדמה המשותף מתפצל לעורקי הראש הפנימיים וחיצוניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למדידההתרדמה עובי אינטימה-מדיה f (cIMT), להשיג לפחות 3 תמונות של סעיף של עורק התרדמה המשותף שהנו ללא שלט, והוא הפרוקסימלי 1 סנטימטר לנורה הראשי. להשיג את כל התמונות בשיאו של גל R בECG כמו זה מתאים לחדרית תרוויח והנקודה שבה הספינה נמצאת תחת הסכום של לפחות מאמץ גזירה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור על שלבים 3.4 ו -3.5 בעורק התרדמה השמאלית. שאל את המשתתף להטות את הראש שלהם מעט ימינה למדידה זו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כדי לסייע בהשגת תמונות ברורות של הקירות הקרובים ורחוקים, לתפעל בזהירות את הבדיקה אולטרסאונד במהלך ההערכה כדי להבטיח את הכלי הוא בניצב לקרן אולטרא-סאונד. להשיג זאת על ידי בעדינות שינוי ההטיה והסיבוב של המתמר יחד עם התאמות קלות ללחץ המופעל על הזווית הפרוקסימלי לדיסטלי (תנועה-בוהן העקב) של החללית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ניתוח לבצע בתמונות במצב לא מקוון באמצעות תוכנת מדידת עורקים (AMS) כדי לזהות boun כלי הדםDary פי הקווים של Pignoli. לטעון את התמונה להיות מנותח, ולאחר מכן באמצעות הסמן, ליצור אזור של עניין בסעיף של כלי השיט שהוא חופשי משלט. לחץ על &#39;לזהות&#39; על התוכנה ולהקליט את הערכים המוצגים על המסך לcIMT וקוטר לומן. הערה: ניתן לקבל קריאה מדויקת בלבד מהקיר הרחוק, כל כך להתעלם קריאות מהקיר הקרוב. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> קח שלוש מדידות לכל צד, ולאחר מכן בממוצע אלה לתת הממוצע cIMT לימין ועורקי הראש עזבו בנפרד. עוד בממוצע cIMT משני הצדדים לתת cIMT הכולל. הערה: מקדם התוך המשקיף של וריאציה לטכניקה זו במעבדה שלנו היא 9%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לבצע מדידה של כל שלט תוך שימוש באותה התוכנה על ידי סימון באופן ידני את השלט באמצעות הסמן. לחץ על &#39;מגדיר את&#39; על AMS לחשב echogenicity של השלט והכיתה באופן אוטומטי בהתאם לרגישות שלו לקרע. לחץעל חלון &quot;מאפייני רובד&quot; כדי לראות את המידע הזה. </li></ol>

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים.

כתב היד הנוכחית מפרטת את המתודולוגיה של כמה הערכות שונות של תפקוד ומורפולוגיה של כלי דם שניתן לבצע בכלי הדם ההיקפיים. כל הערכה מספקת מידע על השלבים שונים של טרשת עורקים, ולעזור לאפיין את הפרופיל של כלי הדם של לב וכלי דם שטחים שונים. יש לנו דיווח בעבר כי תפקוד האנדותל כלי דם הוא עצמאי מתפקוד האנדותל כלי גדול באוכלוסייה של חולי דלקת מפרקים שגרונית בסיכון מוגבר של 39 CVD. יתר על כן, הערכות של תפקוד כלי דם ומורפולוגיה היו גם עצמאיות זה מזה באותה הקבוצה של חולים ובחולים עם CVD 40,41. ניתן להסביר ממצאים אלה על ידי ההטרוגניות של תפקוד ומבנה של תאי האנדותל בשטחי כלי דם שונים 38, כמו גם פער זמן אפשרי להתקדמות של שינויים פונקציונליים למורפולוגייםליקויים בכלי השיט. מחקר של השימוטו ועמיתי 42 גילה כי מספר משתתפים בטרשת העורקת שירדו ערכי FMD אבל ערכי cIMT נורמלים. ממצאים אלה מראים כי הבדיקה של טרשת עורקים תת-קלינית תוך שימוש במגוון של שיטות חשובה לפענח את ההשפעות הגלובליות של CVD. חשיבותו של נימי הדם בבריאות ובמחלה היא צוברת תשומת לב גוברת בספרות הרפואית. Microvessels יוצרת שטח פנים הרבה יותר גדולים מכלי גדול שהופכת אותם יעדים משמעותיים לנזק מגירויים מזיקים 43. זה כבר שיערו כי microvessels עשויה להיות המקור העיקרי של מתווכים דלקתיים אשר לחדור האנדותל של כלי גדולים יותר מובילים להיווצרות נגע 43. בחולי סוכרת סוג II, מחלת כלי דם לעתים קרובות מקדימה מחלת כלי גדולה 44, ובאוכלוסיות אחרות בסיכון מוגבר לתחלואה קרדיווסקולרית כגון arthri שגרוניתtis, התערבויות המקטינות את סיכון CVD לשפר כלי דם, אך לא כלי גדול, תפקוד האנדותל 45,46. באופן קולקטיבי, ממצאים אלה מראים כי בדיקה של תפקוד כלי דם עשויה לסייע בהבנת המנגנונים המורכבים שליזום טרשת עורקים. בעבודה הנוכחית, הערכת תפקוד אנדותל כלי דם בוצעה באמצעות LDI עם iontophoresis של סוכני vasoactive. כמה הערכות אחרות ניתן להשתמש כדי להעריך את תפקוד כלי דם כולל capillaroscopy nailfold וplethysmography חסימה ורידית. עם זאת, ההערכה לשעבר מספקת מידע על מורפולוגיה כלי דם בלבד, בעוד השני הוא זמן רב ובחלק מהפרוטוקולים פולשנית עקב ניהול של סוכני vasoactive תוך זרוע 1. בניגוד לכך, LDI מציע גישה פשוטה, בזמן יעיל למדידת זלוף כלי דם של כלי דם בעור בתגובה לסוכני vasoactive המנוהלים אינו invasively. המדידה של זרימת דם בעור צברה הסכמה רחבה בספרות בשל קלות נגישות וקשר חזק עם 12 CVD הוקם. יתר על כן, היתרון של LDI על טכניקות אחרות כגון דופלר Flowmetry לייזר דופלר, הוא שזה יכול בו זמנית לסרוק מספר רב של נקודות באזור נתון, ולכן יכול להסביר חפצים סלולריים תנועה והבדלים המרחבית של זרימת דם בעור, אשר שניהם יכולים להשפיע על זלוף של כלי השיט 47,48. למרות היתרונות ברורים של iontophoresis, חשוב לשים לב כי vasodilatation הנוכחי המושרה (CIV) מiontophoresis עלול לבלבל את ההשפעות של סוכני vasoactive במיוחד על הקתודה. הבחירה של רכב למשלוח סמים יכולה לעזור להפחית את האפקט הזה, עם 0.5% נתרן כלורי (כמו בשימוש בפרוטוקול הנוכחי) יעיל בהגבלת CIV 18. יתר על כן, שימוש בתאים בקוטר גדולים יותר ונוכ חשמל הנמוךדמי שכירות (כפי שבפרוטוקול הנוכחי) כל לעזור להפחית CIV 18. שימוש באתר שליטה גם כבר המליץ ​​12. גורמים ביולוגיים והתנהגותיים יכולים להשפיע גם על האמינות ודירות של הטכניקה. לדוגמא, וריאציה ועישון היממה הוכחו להשפיע 49,50 תפקוד האנדותל כלי דם. תנאי הקלטה קפדניות יש לדבוק במטרה להשיג תוצאות מדויקות וצריכים להיות אחרי הנחיות שנקבעו בעת תכנון פרוטוקולים 12. מדידה של FMD והתרחבות בתיווך GTN מספקת מידע על תפקוד האנדותל בכלי הדם הגדול, ונעשתה שימוש נרחב במחקר של כלי דם לא פולשנית. טכניקת FMD מספקת מידע פונדקאית על NO זמינות ביולוגית ומהווה סמן פרוגנוסטי שימושי של אירועי לב באוכלוסיות קליניות שונות 7-9. בעבודה הנוכחית, הפרוטוקול מובא חשבונות עבור רבים מהגורמים שנחוצים לגירוי מספק של vasodilatation תיווך NO 25. לדוגמא, שרוול המיסוך הוצב דיסטלי לבדיקת אולטרסאונד וסביב מפרק כף היד 27, את משך הזמן של איסכמיה היה 5 דקות 26 ומספיק זמן היה מותר להקליט קוטר השיא &quot;אמיתי&quot; הבא hyperaemia תגובת 28. למרבה הצער, הפרוטוקול לא כולל אפיון פרופיל מאמץ הגזירה כמו תוכנת זיהוי קצוות האוטומטית לא תאפשר הקלטה בו זמנית של קוטר כלי ואות מהירות גל דופק. החישוב של מאמץ גזירה הוא חלק בלתי נפרד ממדידה מדויקת של FMD 26 ואנחנו המלצנו, שבו קבוצות אפשריות, כלי דם מחקר להשתמש בתוכנה המאפשרת מדידות כאלה להתבצע. הערכות של FMD והתרחבות בתיווך GTN הם גם רגישות לשינויים סביבתיים וביולוגיים 24, כמו שינויים קטנים בקוטר כלי דם יכוללעורר תגובת FMD / GTN גדול. לדוגמא, ערכי FMD אופייניים למשתתפים בריאים נעים בין 5-10% 51, אשר תואם את 0.25 - שינוי 0.5mm קוטר העורק לעורק בקוטר של 5 מ&quot;מ. בהתחשב בשינויים קטנים כגון לקוטר העורק, תשומת לב קפדנית צריכה להיות משולם לגורמים טכניים וביולוגיים שעשויים להשפיע על המדידה. ואכן, יכול להיות מושפע על ידי FMD מגוון של גורמים ביולוגיים והתנהגותיים כגון הפעלה אוהדת 52, מניעת שנת 53, צריכת קפאין 54, עישון 55, טיפול נוגד חמצון 56 ושעה ביום 57. בהתאם לכך, חשוב לשלוט על גורמים אלה על ידי שימוש במידע מהנחיות שנקבעו 24,25. הערכה של טרשת עורקים תת-קלינית מתקדמת אבל נעשתה באמצעות cIMT. הטכניקה נוצלה בכמה אוכלוסיות קליניות ומספקת פירוט רב על st עורקיםructure בהשוואה לטכניקות מתוחכמות יותר, כגון הדמיה בתהודה מגנטית 34. כמו בטכניקות של כלי דם האחרים, מדידת cIMT מחייבת בחינה זהירה של גורמים טכניים שיכול להשפיע על המדידה. בדרך כלל, cIMT צריכה להתבצע באזורים חופשיים משלט, בקיר המרוחק של עורק התרדמה המשותף. בדומה לFMD, מדידת cIMT מבוצע באמצעות בדיקת אולטרה סאונד ברזולוציה גבוהה וכך הוא מאוד ידידותי לתלויה. דיווח מקדם שונה טווח (CofV) 2.4-18.3% 58, ואילו עבור FMD זה הוא 1 - 84% 59. עם זאת, גם כאשר שני הטכניקות מבוצעות על ידי ultrasonographers המוסמך עם גורמים חיצוניים מבוקר היטב, נותר CofV 58,60,61 גבוהים. אחת סיבות לכך יכולות להיות שהניתוח של גבולות של כלי דם מתבצע באמצעות שיטות ידניות 60,61. ניתוח כזה יכול להפחית אמינות כחפצי הדמיה כגון גבולות שווא, רעש מultraso<html> אות und, ועיוות של כלי יכולים להשפיע על פרשנות של התמונה 22. ההתפתחויות האחרונות בתוכנת קצה איתור אוטומטית רציפה השתפרו מאוד זיהוי של קיר גבולות של כלי דם 21,22. במחקר הנוכחי, תוכנת VIA שימשה למדידת קוטר עורק הזרוע, תוך AMS שימש לזהות cIMT. השימוש בתוכנות אלה מקטינים באופן משמעותי את תלות מפעיל, אך במקרה של AMS, מידה מסוימת של שליטת מפעיל היא עדיין זמינה במצבים שבם איכות תמונה יכולה להיות עניה 62. מעבדות המשתמשות בתוכנה אוטומטית גילוי קצה בדרך כלל נוטות להיות נמוך CofV 58,63,64, ובכך זה צריך להיות המטרה של כל מעבדות המחקר של כלי הדם לשלב מדידה אוטומטית של גבולות של כלי דם, על מנת להבטיח דיוק של התוצאות. זה גם תרגול טוב כדי לדווח על תוצאות של מחקרי שחזור עבור פרוטוקולים ספציפיים בעת פרסום תוצאות מחקר. = &quot;Jove_content&quot; ילדה&gt; למרות הערכות של תפקוד כלי דם משמשות באופן שגרתי במחקר קליני, הגבלה של הטכניקות היא שערכים נורמטיביים לLDI עם iontophoresis וFMD לא קיימות. לכן חשוב שגיל בריאים וקבוצות שליטה בהתאמה מין נבחנים כדי להשוות ממצאים בקבוצת הניסוי. למרות שהטכניקות הללו לקשר עם פרוגנוזה גרועה במגוון רחב של אוכלוסיות עם ראיות של CVD 6-9, יש עדיין מחסור במחקרים שבדקו את הקשר בין תפקוד האנדותל העני ותוצאות קרדיווסקולריות שליליות כגון אוטם שריר לב ושבץ. מחקרים פרוספקטיביים נוספים נדרשים לענות על צורכים אלה. מגבלה נוספת היא השימוש של מפעילים אנושיים לבצע ההערכות ולבצע את הניתוח. זה מציג מקור פוטנציאלי של הטיה; עם זאת, זה יכול להיות מוגבל על ידי מסנוור המפעיל לתוצאות או הבטחת שהקורא הוא שונה מהמפעיל. זהכמו כן, חשוב להבטיח שהקורא כדלקמן פרוטוקול סטנדרטי לניתוח נתונים, כך שכל הנתונים מנותחים באופן עקבי. לסיכום, כתב היד הנוכחית מספקת מידע מפורט על הצעדים מתודולוגיים הצורך לבצע בהצלחה הערכות של כלי-דם קטן ואת התפקוד האנדותל כלי גדול, כמו גם מורפולוגיה של כלי דם של מחזור הדם ההיקפי. כאשר נעשה שימוש יחד, ההערכות לספק מידע עולמי על השלבים השונים של טרשת עורקים. מחקרים פרוספקטיביים נוספים שבחנו את תפקיד אבחון הפוטנציאל של טכניקות אלה מוצדקים.

האנדותל הוא השכבה הפנימית ביותר של כלי הדם, והוא מעורב בשמירה על הומאוסטזיס כלי דם באמצעות הרגולציה של מספר רב של תהליכי vasoactive. הפרעה לתהליכים אלה יכולה להשפיע כלי לטרשת עורקת ומעלה את הסיכון למחלות לב וכלי דם (CVD) 1. תפקוד האנדותל היקפי הוא אינדיקטור טוב של מומים בשלב המוקדמים של קיר כלי הדם 2. יתר על כן, באמצעים של תפקוד האנדותל היקפי הוכחו משקפים את תפקוד האנדותל כלילית 3-5, ובתור שכזו נחשבים למנבאים טובים של מחלת לב וכלי דם 6-9. זה אולי לא מפתיע בהתחשב בכך שטרשת העורקת היא כעת מוערך באופן כללי להיות הפרעה מערכתית 10. הערכות של תפקוד האנדותל היקפי בדרך כלל לכמת את תגובת vasodilatory של כלי השיט לגירוי ספציפי, עם הנחתה של התגובה הרשלנית מעידה על אנדותלתפקוד לקוי של 11, וניתן למדידה במיטות כלי דם שונות. הערכות של שינויים מבניים מתקדמים בכלי יכולות להיות מאופיינות על ידי בדיקת אולטרה סאונד של עובי אינטימה-מדיה. בזרימת הדם, Flowmetry הלייזר דופלר (LDF) והדמיה הלייזר דופלר (LDI) עם iontophoresis של אגוניסטים vasodilator יכולים לספק מידע שימושי על זלוף כלי הדם 12. שני טכניקות מדידת היסט דופלר נוצר על ידי אור מפוזר מהזזת תאי דם אדומים. זלוף מיוצג כשטף דם ולא זרימת דם (מיליליטר / דקה), עם שטף דם המשקף מהירות ממוצעת תאי דם אדום וריכוז. מדידה של שטף דם קשור באופן ליניארי עם דם בפועל זרימה 13. ההערכה של LDI מציעה יתרונות רבים על פני LDF, משום שבניגוד LDF, LDI יכול לסרוק על פני שטח עצום ובכך היווה ההטרוגניות בזרימת דם בעור ומגביר את שחזור של הטכניקה12. הגירוי להגברת שטף דם במהלך LDI מסופק על ידי iontophoresis של אצטילכולין אגוניסטים vasodilator (ACH) וnitroprusside נתרן (SNP), הלהעריך את תפקוד האנדותל תלוי והאנדותל-עצמאי בהתאמה, לעור באמצעות זרם חשמלי חלש 14. ברגע שדרך העור, ACH נקשר לקולטנים אנדותל מוסקריניים תא שחרור תחמוצת חנקן vasodilator (NO). השימוש בSNP ישירות מפעיל קולטנים תאי שריר חלק, כדי לאפשר vasodilatation המרבי של כלי השיט ובדיקה של שלמות שריר חלק 15. יש כמה אי-ודאות בשאלות האם התרחבות בתיווך אח כרוכה NO בכלל, כACH עשוי לעורר מסלולים הלא-NO כגון מסלולים בתיווך cycloxygenase 12. אף על פי כן, יש לנו דיווח בעבר כי תגובות ACH וSNP לקויים באוכלוסיות חולה בסיכון מוגבר למחלה קרדיווסקולארית 16 וכי התערבויות תרגיל ידועות כדי לשפר את NO בioactivity גם לשפר את שטף דם בתיווך אח באמצעות LDI 17. הרכב להובלת הסוכנים לmicrovessels העור לעתים קרובות כולל נתרן כלורי או 18,19 מים deionised. תפקוד האנדותל כלי הדם ניתן לכמת באמצעות גישות שונות, עם מוליכות עורית של כלי דם - תוצר של שטף מחולק בלחץ דם, המשמשות במחקרים שבם לחץ דם עשוי להשתנות על פני תקופת המחקר (כלומר, במהלך פעילות גופנית או טיפול נגד יתר לחץ דם) 12. כימות נוסף נפוץ הוא לחשב את השטח מתחת לעקומה לשטף דם או להביע אחוז העלייה בשטף מנקודת ההתחלה. חשוב לציין כי אין הנחיות שנקבעו להצגת נתונים, אך חוקרים צריכים לנצל את גישה שמראה שחזור טוב. בכלי הגדול, בתיווך זרימת הרחבה (FMD) ורחבה בתיווך glyceryl-trinitrate (GTN) מבוצעות לישבניםהאנדותל תלוי של ותפקוד האנדותל-עצמאי בהתאמה 20. FMD מתבצע בדרך כלל בעורק הזרוע שבי שרוול משמש כדי לחסום את זרימת דם בעורקים במשך 5 דקות; שחרורו של השרוול גורם לעלייה פתאומית בזרימת דם (hyperaemia תגובה) דרך עורק הזרוע וכתוצאה מכך ההתרחבות בתיווך גזירה-מתח של כלי השיט. תחילת המחקר ובקוטר שחרור לאחר שרוול-הם לכמת על ידי ההדמיה אולטרה סאונד של כלי השיט עם ההערכות הבאות של קוטר כלי מבוצע באופן ידני 20 או באמצעות תוכנת זיהוי קצוות אוטומטיים 21,22. השימוש בGTN עוזר לקבוע אם ליקויים בvasodilatation הן בשל הפסד בשלמות תא שריר חלק, או שחרור לקוי של NO מתאי האנדותל 23. FMD וGTN באים לידי ביטוי כאחוז העלייה ביחסי קוטר כלי פוסט גירוי-לקוטר הבסיס. ההערכה הנכונה של FMD דורשת מספרשיקולים חשובים ב24,25 פרוטוקול מחקר. משך חסימת שרוול חייב להיות מתוזמן היטב; 5 דקות של חסימת שרוול מספיקה לרחבת תיווך-NO בעוד תוצאות חסימת שרוול ארוך שבאינו NO תיווך הרחבה 26. בדומה לכך, מיקום של שרוול המיסוך סביב פרק כף היד ודיסטלי מבדיקת אולטרסאונד בעיקר מפעיל NO-תיווך הרחבה, ואילו מיקום שרוול על הזרוע העליונה והפרוקסימלי לבדיקה באופן חלקי בלבד מגרה NO 27. כמו כן, חשוב למדוד את התרחבות השיא הבאה דפלציה שרוול על פני תקופה ממושכת של זמן, כמו מדידת קוטר שיא תוך 60 שניות הראשונות שלאחר דפלציה שרוול יכול לזלזל FMD על ידי 25 - 40% 28. ואכן, תקופה של 180 שניות עשויה להיות מספיק בלכידת קוטר שיא אמיתי, עם רוב ערכי שיא המתרחשים בתוך 120 שניות הראשונות 28. הגירוי לFMD כרוךזה ייצור לחץ גזירה, אשר מפעיל קולטנים ספציפיים האנדותל לשחרר NO 29. עם זאת, מאמץ גזירה יכול גם להפעיל כמה גורמים אחרים vasoactive (שחלקם עלול לגרום להיצרות כלי דם) 30, שהופך אותו חיוני שגירוי מאמץ הגזירה עורר משקף התרחבות מNO מסלולים מ-26. כמו כן, חשוב לתת דין וחשבון לגירוי מאמץ הגזירה במהלך FMD, עם חישוב של שיעור גזירה (מהירות / קוטר) המשמש כמדד הולם של מאמץ גזירה, אך לא בהכרח משקף זרימת שיא 31. המלצות פיסיולוגיות האחרונות מצביעות על כך שפרופיל מאמץ הגזירה תמיד צריך להיות מאופיינים כאשר מערכות אולטרסאונד מאפשרות מדידה בו זמנית של מהירות גל דופק והדמיה B-מצב פעיל במצב 25 דו-צדדי. הערכה של עורקי הראש באמצעות אולטרסאונד B-מצב יכול לספק מידע על עובי אינטימה-מדיה התרדמה (cIMT), והייתה describ הראשוןed בשנת 1986 על ידי Pignoli ועמיתים 32. הערכה של cIMT משקפת התפשטות של תאי שריר חלק באינטימה של כלי השיט והוא מנבא שימושי של אירועים קליניים בטרשת עורקים המוקדמים 33. אולטרסאונד התרדמה יכול לחזות במקרים רב מבנה עורקים טוב יותר מאשר בטכניקות דומות (כגון הדמיה בתהודה מגנטית או הערכות צילום חזה) 34. בנוסף, מקורבי cIMT עם מספר גורמי סיכון CVD הקלאסיים כוללים הזדקנות, יתר לחץ דם, דיסליפידמיה ו-35. שינויים בקירות של עורק התרדמה בדרך כלל ביוזמת ירידה בזמינות ביולוגית NO אשר מקדמת דלקת בתוך הכלי 36. נקודות הסתעפות עורק התרדמה משותפת, עורק התרדמה פנימי ותרדמה יכולות לשמש כדי לקבוע cIMT, כמו כל אתר יכול באופן דומה לחזות אירועי לב וכלי דם 37. בכתב היד הנוכחית, אנו מספקים מתודולוגיה מפורטת על הערכה של microvasculaתפקוד האנדותל r (LDI עם iontophoresis), פונקציה גדולה אנדותל הכלי (FMD וGTN) ומורפולוגיה של כלי דם (cIMT). טרשת עורקים היא תהליך רב-שלבים שמתחיל בחוסר תפקוד האנדותל ומסתיים בנגעים טרשתיים בעורקי מוקדי הגדולים. הרציונל לבחירת ההערכות לעיל הוא שהם משקפים את השלבים השונים של טרשת עורקים ולעזור להסביר את הטבע הטרוגנית של כלי הדם 38. יתר על כן, יש לנו הראינו בעבר כי באוכלוסייה של חולים בסיכון מוגבר למחלה קרדיווסקולארית, תפקוד האנדותל כלי דם היה עצמאי מתפקוד האנדותל כלי גדול 39, וההערכות תפקודיות היו עצמאיות מהערכות מבניות של כלי הדם 40. לכן, הערכות הגלובליות של כלי הדם יכולות לעזור לפענח את השלבים השונים של טרשת עורקים.

<table><tbody><tr><td>לייזר דופלר הדמיה</td><td>Moor Instruments, דבון, בריטניה</td><td>moorLDI2</td><td></td></tr><tr><td>Iontophoresis Controller</td><td>Moor Instruments, דבון, בריטניה</td><td>MIC2</td><td></td></tr><tr><td>Miochol-E 20 מ"ג</td><td>נוברטיס בריטניה</td><td>נקבע על ידי הרופא</td><td>אצטילכולין לתפקוד תלוי אנדותל</td></tr><tr><td>Nitroprussiat Fides 50 מ"ג</td><td>רוטפארם ספרד</td><td>נקבע על ידי רופא</td><td>נתרן ניטרופרוסיד לתפקוד בלתי תלוי באנדותל</td></tr><tr><td>דופלר אולטרסאונד</td><td>סימנס PLC, קמברלי בריטניה</td><td>Accuson Antares</td><td></td></tr><tr><td>גליצריל טריניטראט 500 מק"ג</td><td>Alpharma, Barnstaple, UK</td><td>נקבע על ידי רופא</td><td></td></tr></tbody></table>

גישה המתודולוגית להערכות לא פולשני של תפקוד כלי דם ומורפולוגיה

A Methodological Approach to Non-invasive Assessments of Vascular Function and Morphology

האנדותל הוא הציפוי הפנימי ביותר של כלי הדם ומעורב בשמירה על הומאוסטזיס בכלי הדם. נזק לאנדותל עלול לגרום לכלי הדם לטרשת עורקים ולהגביר את הסיכון למחלות לב וכלי דם. הערכות של תפקוד האנדותל ההיקפי הן אינדיקטורים טובים לחריגות מוקדמות בדופן כלי הדם ומתואמות היטב עם הערכות של תפקוד האנדותל הכלילי. כתב היד הנוכחי מפרט את הצעדים המתודולוגיים החשובים הדרושים להערכת תפקוד האנדותל המיקרו-וסקולרי באמצעות הדמיית דופלר בלייזר עם יונטופורזה, תפקוד אנדותל כלי דם גדולים באמצעות הרחבה מתווכת זרימה, וטרשת עורקים קרוטידית באמצעות אולטרסאונד עורק הצוואר. כמו כן מוצג דיון על השיקולים המתודולוגיים של כל אחת מהטכניקות, וניתנות המלצות למחקר עתידי.

הדמיה דופלר לייזר עם Iontophoresis יחידות שטף דם החציון הבאים סריקות ההדמיה דופלר לייזר מבריא נקבה חופשית בגיל העמידה מCVD מוצגות באיור 1. הייתה עלייה ניכרה בשטף דם החציוני עבור שני אח וSNP. שטף דם בתחילת מחקר עמד 48 יחידות זלוף לאח, ו -67 יחידות זלוף לSNP. שטף דם שיא בתגובה לACH היה 455 יחידות זלוף, ולSNP 446 יחידות זלוף. זו הניבה 831% ו- 566% גידול בזלוף (ביחס לנקודת התחלה) לאח וSNP בהתאמה. הערכים המסופקים הם מאוד תלויים בציוד המשמש לבדיקת שטף דם בעור יחד עם גורמים סביבתיים. התרחבות בתיווך זרימה והתרחבות בתיווך trinitrate Glyceryl איור 2 מציג את קטרי תחילת המחקר ובשיא לFMD והערכות GTN מגבר צעיר ובריא ללא CVD.קוטר בסיס של עורק הזרוע היה 3.0 מ&quot;מ להערכות FMD וGTN. קוטר השיא במבחן FMD היה 3.3 מ&quot;מ, ואילו להערכת GTN זה היה 3.9 מ&quot;מ, אשר מתאים לגידול של 10 ושל 30% בזרימת דם בהתאמה, בהשוואה לתחילת מחקר. התרדמה עובי אינטימה-מדיה איור 3 מציג את עורק התרדמה השמאלי של אדם בריא. חישוב ערכי cIMT מתבצע באמצעות תוכנת קצה איתור אוטומטית. CIMT בקיר המרוחק היה 0.83mm וקוטר לומן של כלי השיט היה 7.71mm. התוצאות עבור עורק התרדמה תקין באותו האדם היו 0.87mm לcIMT, ו7.80mm לקוטר לומן. כאשר ממוצע הקריאה משני הצדדים, cIMT היה 0.85mm, וקוטר לומן היה 7.76mm. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/52339/52339fig1highres.jpg" /> איור 1. ChanGES בשטף דם בתגובה להדמית דופלר לייזר עם iontophoresis. לאחר השלמת בסיס לסרוק למדוד שטף דם בתחילת מחקר, 10 סריקות (סריקת 1 עד 10) עם iontophoresis של אח וSNP באמצעות 30 מייקרו-אמפר חשמל נוכחי בוצעו. בעקבות iontophoresis, 2 סריקות התאוששות בוצעו. ACH = אצטילכולין; SNP = nitroprusside נתרן. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/52339/52339fig2highres.jpg" /> איור 2. זרימה בתיווך וglyceryl trinitrate תיווך הרחבה. הגרף מציג את קוטר הבסיס ועלייה ברורה בקטרים ​​השיא הבאים יישום של גירויי הרחבה בתיווך trinitrate תיווך הזרימה וglyceryl. FMD = התרחבות בתיווך זרימה; GTN = התרחבות בתיווך trinitrate glyceryl. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/52339/52339fig3highres.jpg" /><br/&gt; איור 3. סריקת אולטראסאונד של עורק התרדמה. סריקת אולטרסאונד של עורק התרדמה השמאלי מוצגת עם אזור של עניין להציב 1cm מנורת התרדמה (נקודת הסתעפות). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52339/52339fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו .</a>

המאמר הנוכחי מתאר את השיקולים המתודולוגיים למספר הערכות לא פולשניות של תפקוד כלי הדם והמורפולוגיה המשמשות בדרך כלל במחקר רפואי להערכת שלבים שונים של טרשת עורקים.

The endothelium is the innermost lining of the vasculature and is involved in the maintenance of vascular homeostasis.  Damage to the endothelium may ...

המטרה הכללית של הניסוי הבא היא לבחון ארתרוסקלרוזיס תת-קלינית באזורי כלי דם שונים. ראשית, נעשה שימוש בדימיון דופלר בלייזר עם יונטופורזה של תרופות מרחיבות כלי דם כדי לבחון את התפקוד האנדותליאלי של כלי דם זעירים. לאחר מכן, נעשה שימוש בהרחבה תלוית זרימה (flow mediated dilatation) ובהרחבה המתווכת על ידי גליצרין טריטראט כדי לבחון את התפקוד האנדותליאלי של כלי דם גדולים.לבסוף, עובי השכבה האינטימה-מדיה של העורק התהומי מנותח כדי לבחון שינויים מורפולוגיים מתקדמים. התוצאות מראות שינויים בתפקוד האנדותל של כלי דם קטנים וכלי דם גדולים בתגובה לגירוי. בנוסף, מאופיין גם דופן העורק התהומי.שיטות אלו יכולות לסייע במתן מענה לשאלות מפתח בתחום הפיזיולוגיה של מערכת הלב וכלי הדם, כגון קביעת ההשפעה של התערבויות על בריאות כלי הדם באוכלוסיות קליניות שונות. ראשית, הכינו את מד הדופלר הלייזר (laser doppler imager). אפשרו למכשיר להתחמם במשך חצי שעה או יותר.יש לכייל את המכשיר ולהכין את התוכנה לשימוש. כמו כן, יש להכין את התמיסות בתא הפרספקס. לאחר מכן, יש להביא את המשתתף במחקר לכיסא הדמיה, כאשר המשתתף נשען מעט לאחור על כרית יציבה, מרפק אחד מכופף בזווית של 90 מעלות ואמה זו מונחת בנוחות על משטח שחור.יש לוודא שזרוע האמה מקובעת לכרית כך שתישאר במקומה על המזרן. לאחר מכן, הכין את תאי הפרספקס. ראשית, חבר את התקתקים שלהם לבקר האיונטופורזה.לאחר מכן, חברו את התא המכיל acetylcholine לחיבור האנודי (Anodal), ואת התא המכיל sodium nitro perside לחיבור הקטטר. לאחר מכן, חברו את שני התאים להיבט הוולרי (voler) של האמה המקובעת באמצעות רפידות דבק דו-צדדיות. כמו כן, כסו את התאים באמצעות כיסויי זכוכית (cover slips) במידה של 32 מילימטר.כעת, בתוכנת הסורק, פתחו את חלון הגדרות הסורק הממוקם בצד שמאל למעלה של מסך הבית. בחרו בלשונית סריקת תמונה (image scan) וקבעו את השטח לסריקה על ידי לחיצה על כפתור הסימון (mark) בפינה הימנית התחתונה של החלון. במידת הצורך, מקמו את ראש הסורק בזהירות כך שיסרוק במדויק את האזור המבוקש.שנו ידנית את אזור העניין (region of interest) על ידי הזנת גודל שטח הסריקה במקטע שטח הסריקה (scan area) בחלק העליון של החלון. ודאו שאזור העניין כולל את הקוטר של כל אחד מתאי האיונטופוריה ושהוא גדול מספיק כדי להגביל שונות בזרימת הדם בעור. כעת ניתן להתחיל את הסריקה לאחר השלמת הגדרות הסריקה.השתמש בתוכנת LDI לניתוח תמונות. כדי לפתוח את קובץ הנתונים, בחר באפשרות סקירת התמונה (image review) בחלון הראשי.כעת סמנו אזור עניין סביב הקטרים החיצוניים של כל תא. לאחר מכן לחצו על סמל הסטטיסטיקה, ועמודה המכילה את יחידות הפרפוזיה החציוניות עבור כל תא תוצג מכל אחת מ-12 הסריקות של כל תא. רשמו את יחידת הפרפוזיה של קו הבסיס ואת יחידת הפרפוזיה הגבוהה ביותר.התחילו בהגדרת מכשיר האולטרסאונד דופלר ותוכנת ניתוח תמונות כלי דם בדימות חי. לאחר מכן, הכירו למשתתף את מערך הבדיקה ובקשו ממנו להירגע בכיסא. בקשו מהמשתתף בבדיקה להסיר כל תכשית מהשורש והשתמשו בכרית כדי שיוכל להניח את זרועו בנוחות.לאחר מכן, הניחו מד לחץ דם מסביב לפרק ידו של המשתתף. יש להחזיקו ללא תנועה ככל האפשר. כעת, קבעו את מערך המתמרים הליניארי של המכשיר למלחץ סטריאוטקטי.כעת הדקו את התפסן על המתמר. לאחר מכן, היכנסו לתפריט במכשיר האולטרסאונד. הגדירו את תדר הסריקה ל-5 MHz ואת העומק לכ-3.5 cm.כעת, באמצעות המתמר, אתר את העורק הזרועי (brachial artery) באמצעות סריקה אורכית. הוא נמצא בדרך כלל במרחק של 2 עד 10 סנטימטרים מעל הגומחה המרפקית (antecubital fossa). לאחר מכן, כוון את ההגבר (gain) כדי להשיג בהירות סימטרית בדופן הקרובה ובדופן הרחוקה של כלי הדם.דופלר צבעי יראה את הדם העורקי פועם בתוך העורק, דבר שיבדיל אותו מורידים כלשהם. הגדירו את התצוגה של העורק הזרועי (brachial artery) כך שייראה בבירור ובאופן אופקי על המסך. בתוכנה, הוא אמור להופיע כשני קווים מקבילים ומוצקים המופרדים על ידי אזור בהיר בין הקווים.השתמשו בסמן כדי לסמן את אזור העניין והתוכנה תבצע הקלטה באופן אוטומטי. ניתן לבצע התאמה של קוטר כלי הדם באזור באמצעות כפתורי X ו-Y במסך הראשי. כעת, לחצו על כפתור ההתחלה ובצעו דמיון של העורק למשך שתי דקות.לאחר מכן לחצו על inflate כדי להקליט למשך חמש דקות תוךما ניפוח חגורת לחץ הדם ללחצים סיסטוליים S. זרימת הדם לכף היד צריכה להיחסם על ידי החגורה לאחר התרוקנותה. המשיכו להקליט למשך שלוש דקות.בשלב זה, מודעת היפרמיה, המעוררת התרחבות כלי דם המתווכת על ידי חנקן חמצני (nitric oxide). לאחר מכן, יש להמתין 10 דקות למנוחה. לאחר מכן, העבירו את מיקום העליל בעורק הזרוע (brachial artery) ובצעו הקלטת בסיס חדשה של קוטר העורק למשך שתי דקות.כעת, בקש מהנבדק לבלוע תת-לשונית טבליה של גליצריל טריטרט במשקל 500 גרם ולהמשיך בהקלטה למשך חמש דקות. לאחר חמש דקות, יש להוציא את הטבליה ולעקוב אחר הנבדק כדי לזהות תופעות לוואי. בעת ניתוח הנתונים, ודא כי בדקת את אזור קו הבסיס לארטפקטים, והסר ארטפקטים כלשהם לפני מיצע הערכים שנותרו כדי לקבל קוטר בסיס.כמו כן, במהלך ניתוח ההרחבה המתווכת על ידי זרימה (flow mediated dilation), יש לבחון את האזור שזוהה אוטומטית עבור שיא ההרחבה. אם הזיהוי אינו מדויק, בחרו ידנית באזור מוגדר יותר המכיל את השיא. לצורך מדידה זו, הנחו את הנבדק לשכב בנוחות על מיטה עם כרית.לאחר מכן, הגדירו את מושאי ה-ECG לרישום בסיסי. חברו אותם לשתי הזרועות ולקרסול השמאלי. לאחר מכן, עברו לתפריט והגדירו את תדירות הסריקה ל-10 megahertz ואת עומק ההקלטה לשלושה עד ארבעה סנטימטרים.לאחר מכן, התאימו את הגבר (gain) כפי שנעשה קודם לכן. כעת, בקשו מהמשתתף להטות את ראשו מעט שמאלה והשתמשו במתמר בעל מערך ליניארי כדי לסרוק את העורק הקרוטידי הימני. חפשו נקודת התפצלות בכלי הדם, שכן זו מעידה על התפצלות העורק הקרוטידי המשותף לעורקים הקרוטידיים הפנימי והחיצוני.סרוק את העורק התרדמי (carotid artery) לאורך כל מקטעי הניסוי במישור אורכי. זהה את העורקים הפנימיים והחיצוניים המשותפים במידה ונצפתה פלאק. שמור את התמונות כעת.צלמו לפחות שלושה תמונות של חתך הנקי מפלאק ונמצא במרחק של כסנטימטר מהבצלב הקרוטידי (carotid bulb). בקשו מהמשתתף להטות את ראשו לצד השני וחזרו על הפעולה כדי לתעד את העורק הקרוטידי השמאלי. לאחר מכן, נתחו את התמונות באופן לא מקוון באמצעות חבילת תוכנת מדידת עורקים, תוך איסוף הערכים עבור CIMT וקוטר הלומן.שימו לב כי לא ניתן לקבל קריאות מדויקות מהדופן הקרובה, ולכן יש לנתח רק קריאות מהדופן הרחוקה. דימוי לייזר דופלר עם יונטופוריה בוצע באישה בריאה בגיל העמידה ללא מחלה קרדיווסקולרית. נרשמה עלייה ניכרת בזרימת הדם החציונית עם שני הגירויים.זרימת הדם השיא הגיעה ל-455 יחידות פרפוזיה עבור אצטילכולין ול-446 יחידות פרפוזיה עבור sodium nitro proxide. הרחבה בתיווך זרימה והרחבה בתיווך glycerol tritrate נבדקו שתיהן באישה צעירה ובריאה ללא מחלות קרדיווסקולריות. הבדיקה להרחבה בתיווך זרימה העלתה את קוטר העורקי בכ-10%, וההרחבה בתיווך glycerol tritrate העלתה את קוטר העורקי בכ-30%. עובי השכבה האינטימה-מדיה של העורקי נבדק בעורקי הגרוני השמאלי של אדם בריא.ערך ה-CIMT עבור הדופן הרחוקה היה 0.83 מילימטרים וקוטר הלומן היה 7.71 מילימטרים. אותן מדידות בעורק הת carotid הימני היו 0.87 מילימטרים ו-7.8 מילימטרים לאחר פיתוחן. טכניקות אלו סללו את הדרך עבור חוקרים בפיזיולוגיה של מערכת הלב וכלי הדם להבין את המנגנונים של מחלות לב וכלי דם באוכלוסיות קליניות שונות.

a-methodological-approach-to-non-invasive-assessments-vascular

Research

JoVE Journal

Medicine

רפואה

Capillaroscopy היא לא פולשנית מתודולוגיה, זולה יחסית להמחשת זרימת הדם באופן ישיר. טכניקת זרימת דם הזרוע מספקת מדדים מקובלים לא פולשנית של תפקוד האנדותל.

הערכה בלתי פולשנית של תפקוד כלי דם והאנדותל

מדידת מהירות גל דופק (PWV) מעריכה קשיות עורקים על ידי מערכת מבוססת tonometry המודדת את המהירות שבה גל לחץ הדם נוסע לאורך עץ העורקים, בדרך כלל דומים לזמן שלוקח גל זה לנסוע מאב העורקים יורד (באמצעות התרדמה עורק כתחליף) לעורק הירך. PWV תרדמה-הירך מגדיל שניים עד פי שלושה על פני תוחלת החיים של המבוגרים.

Pulse Wave Velocity בדיקה בבולטימור מחקר האורך של הזדקנות

מידת חוסר תפקוד כלי דם ותורמים מנגנונים פיסיולוגיים ניתן להעריך בחולים עם מחלת כליות כרונית על ידי מדידת התרחבות עורק זרוע בתיווך זרימה, מהירות גל הדופק של אב העורקים, וביטוי חלבון תא האנדותל בכלי דם.

הערכה של תפקוד כלי דם בחולים עם מחלת כליות כרונית

תפקוד לקוי של האנדותל קשור למצבי מחלה רבים והוא ניבוי של אירועי לב וכלי דם שליליים בבני אדם. הרחבת כלי דם בתיווך זרימה (FMD) היא שיטת אולטרסאונד לא פולשנית של הערכת תפקוד האנדותל. אפשרויות המתודולוגיות וניסיון מפעיל עשויות להשפיע על תוצאות. גישה שיטתית לFMD במחקרים בבני אדם נדונה כאן.

אולטראסאונד הערכה של האנדותל-Dependent זרימה בתיווך התרחבות של עורק הזרוע במחקר קליני

Videomicroscopy מערכות משמשות כדי לבחון מאפיינים פונקציונליים של רקמת שומן מבודדת רבים בתגובה לגירויים פיזיולוגיים ולא תרופתי. טכניקה זו ניתן לבחון פנוטיפים microvascular בתחומים שונים רקמת שומן בבני מהשמנת יתר.

הערכה של רקמת שומן אנושי הפונקציה Microvascular באמצעות Videomicroscopy

מאמר זה מתאר בדיקת כתמי לציטין מבוססת וניתן לשחזור עבור כל ההכנות לרשתית ההר ואת הפרוטוקולים הנדרשים למדידה כמותית של פרמטרים וסקולריים משתנים לעתים קרובות ברטינופתיות שגשוג ולא מתרבות.

כימות של פרמטרי כלי דם ברשתיות הר שלמות של עכברים עם רטינופתיות שאינן מתרבות ושגשוגות

הפרוטוקול הנוכחי מתאר את המושגים והיישום הטכני של טכניקת המיוגרפיה הטנסומטרית באמצעות מערכת מיוגרף רב-תאית בהערכת ex vivo ניסיונית של תפקוד אנדותל אבי העורקים של עכבר.

מדידה של כלי דם תלויי אנדותל באבי העורקים החזי של העכבר באמצעות מיוגרפיה של תא נפח קטן טנסומטרי

מאמר זה מציג פרוטוקול שלב אחר שלב לבידוד והערכה תפקודית של ענפי עורקי כליה אנושיים, המאפשר מחקרים פרה-קליניים לפיתוח תרופות.

מיקרודיסקציה רב-שכבתית ופרופיל פונקציונלי-מבני של ענפי עורקי הכליה האנושיים

המאמר הנוכחי מציג את הפרטים הנוגעים ליישום של אימון התנגדות משויך חסימת כלי הדם אצל חולים IBM.

דם הדרכה ספיגה עבור שררת גוף הכללה: גישה טיפולית חדשנית

מצב כפול הדמיה המערכת פותחה עבור הערכה ללא מגע של חמצון הרקמות עורית ותפקוד כלי הדם.

Dual-mode הדמיה של חמצון רקמות עורית ועל תפקוד כלי הדם

למד הערכות לא פולשניות של תפקוד כלי דם ומורפולוגיה באמצעות דימות לייזר דופלר ואולטרסאונד. שיטות אלו מאפשרות לחוקרים לבחון את תפקוד האנדותל ועובי דופן העורקים התרדמניים במחקר קרדיווסקולרי.

גישה המתודולוגית להערכות לא פולשני של תפקוד כלי דם ומורפולוגיה

גלה סרטונים נוספים