Géis de poliacrilamida para Invadopodia e Tração Força Ensaios sobre as células cancerosas

O objetivo geral deste procedimento é criar géis de poliacrilamida que possam ser usados em ensaios de invasor, pó e força de tração para estudar as propriedades invasivas e contráteis das células cancerígenas. Isso é feito ativando primeiro as lamínulas de 14 milímetros nos mundos dos pratos de flor de vidro para garantir que os géis de poliacrilamida estejam ligados ao vidro. Em seguida, as soluções de poliacrilamida para ambos os ensaios são preparadas para produzir géis com diferentes rigidezes ou propriedades mecânicas.

Em seguida, os ensaios de pódios invadidos são preparados com uma fina camada de matriz extracelular marcada com fluorescência para detectar a degradação. Finalmente, os ensaios são semeados com células cancerígenas para incubação durante a noite, seguidas de fixação e coloração do invasor, placas de pódios e imagens de células vivas das placas de força de tração. Em última análise, a microscopia de fluorescência é usada para obter imagens de invasores, pódios e degradação da matriz extracelular.