Isolation and Intravenous Injection of Murine Bone Marrow Derived Monocytes

Martin Wagner; Helen Koester; Christian Deffge; Soenke Weinert; Johannes Lauf; Alexander Francke; Jerry Lee; R. C. Braun- Dullaeus; Joerg Herold

doi:10.3791/52347

Isolamento e injecção intravenosa de Murino de Medula Óssea Derivado monócitos

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Immunology and Infection
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Isolation and Intravenous Injection of Murine Bone Marrow Derived Monocytes

Isolamento e injecção intravenosa de Murino de Medula Óssea Derivado monócitos

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December 27, 2014

DOI: 10.3791/52347-v

Martin Wagner¹, Helen Koester¹, Christian Deffge¹, Soenke Weinert¹, Johannes Lauf¹, Alexander Francke², Jerry Lee³, R. C. Braun- Dullaeus¹, Joerg Herold¹

¹Department for Cardiology, Angiology and Pneumology,Otto von Guericke University Magdeburg, ²Herzzentrum Dresden, Universitätsklinikum an der Technischen Universität Dresden,Technische Universität Dresden, ³Department of Public Health and Primary Care,University of Cambridge

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Aqui apresentamos um protocolo que gera grandes quantidades de monócitos murinos a partir de medula óssea heterogênea para aplicações translacionais. Em comparação com outros, esse novo método ajuda a reduzir o número de animais sacrificados e reduz os custos, evitando métodos caros, como a separação de células magnéticas de alto gradiente (MACS).

Olá, meu nome é Helen Kuster e estou trabalhando no Grupo de Pesquisa Cardiovascular do Dr. Harold e professor da Auto Vica University em MacBook. Estamos interessados na caracterização do isolamento de monócitos marinhos para uso em veículos no crescimento de vasos colaterais. As seguintes etapas principais são necessárias para o cultivo de monócitos derivados da medula óssea, primeiro anestésico de camundongo e luxação cervical, segunda extração e enxágue do fêmur.

Terceira filtragem da medula óssea. Quarto para etapas de lavagem com quinto médio, cultivo das células em placas de fixação ultrabaixas. Sexta citometria de fluxo.

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