Name: Avaliação da invasão bacteriana de células cardíacas na cultura e colonização cardíaca em camundongos infectados usando listeria monocytogenes (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-27T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 18 s
Description: Aprenda a avaliar a invasão bacteriana de células cardíacas por Listeria monocytogenes em cultura e em camundongos infectados. Este protocolo permite estudar a colonização cardíaca e a patogenicidade microbiana.

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Este trabalho foi apoiado pelas bolsas do Serviço Público de Saúde AI41816 e AI099339 (N.E.F.) e pela F31AI094886-01 (P.D.M.) da NIAID. Os conteúdos são de responsabilidade exclusiva de seus autores e não representam necessariamente as opiniões oficiais das fontes de financiamento.

<ol><li>Freitag, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+hot+dogs+to+host+cells%3A+how+the+bacterial+pathogen+Listeria+monocytogenes+regulates+virulence+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Future+Microbiol%22%5BJournal%5D)">From hot dogs to host cells: how the bacterial pathogen Listeria monocytogenes regulates virulence gene expression.</a> Future Microbiol. 1, 89-101 (2006).</li>
<li>Drevets, D. A., Bronze, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Listeria+monocytogenes%3A+epidemiology%2C+human+disease%2C+and+mechanisms+of+brain+invasion%5BTitle%5D)+AND+%22FEMS+Immunol+Med+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Listeria monocytogenes: epidemiology, human disease, and mechanisms of brain invasion.</a> FEMS Immunol Med Microbiol. 53, 151-165 (2008).</li>
<li>Farber, J. M., Peterkin, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Listeria+monocytogenes.+a+food-borne+pathogen%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Listeria monocytogenes. a food-borne pathogen.</a> Microbiol. Rev. 55, 476-511 (1991).</li>
<li>Lecuit, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+how+Listeria+monocytogenes+targets+and+crosses+host+barriers%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Microbiol+Infect%22%5BJournal%5D)">Understanding how Listeria monocytogenes targets and crosses host barriers.</a> Clin Microbiol Infect. 11, 430-436 (2005).</li>
<li>Lecuit, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+listeriosis+and+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Microbes+Infect%22%5BJournal%5D)">Human listeriosis and animal models.</a> Microbes Infect. 9, 1216-1225 (2007).</li>
<li>Bou Ghanem, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((InlA+promotes+dissemination+of+Listeria+monocytogenes+to+the+mesenteric+lymph+nodes+during+food+borne+infection+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">InlA promotes dissemination of Listeria monocytogenes to the mesenteric lymph nodes during food borne infection of mice.</a> PLoS Pathog. 8, e1003015(2012).</li>
<li>Melton-Witt, J. A., Rafelski, S. M., Portnoy, D. A., Bakardjiev, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oral+infection+with+signature-tagged+Listeria+monocytogenes+reveals+organ-specific+growth+and+dissemination+routes+in+guinea+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Oral infection with signature-tagged Listeria monocytogenes reveals organ-specific growth and dissemination routes in guinea pigs.</a> Infect Immun. 80, 720-732 (2012).</li>
<li>Alonzo, F. 3rd, Bobo, L. D., Skiest, D. J., Freitag, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+subpopulations+of+Listeria+monocytogenes+with+enhanced+invasion+of+cardiac+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Evidence for subpopulations of Listeria monocytogenes with enhanced invasion of cardiac cells.</a> J Med Microbiol. , (2011).</li>
<li>Adler, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+pseudotumor+of+the+heart+caused+by+Listeria+monocytogenes+infection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Infect%22%5BJournal%5D)">Inflammatory pseudotumor of the heart caused by Listeria monocytogenes infection.</a> J Infect. 58, 161-163 (2009).</li>
<li>Antolin, J., Gutierrez, A., Segoviano, R., Lopez, R., Ciguenza, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocarditis+due+to+Listeria%3A+description+of+two+cases+and+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">Endocarditis due to Listeria: description of two cases and review of the literature.</a> Eur J Intern Med. 19, 295-296 (2008).</li>
<li>Brouqui, P., Raoult, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocarditis+due+to+rare+and+fastidious+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Microbiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Endocarditis due to rare and fastidious bacteria.</a> Clin Microbiol Rev. 14, 177-207 (2001).</li>
<li>Brusch, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+infections+in+the+immunosuppressed+patient%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Dis+Clin+North+Am%22%5BJournal%5D)">Cardiac infections in the immunosuppressed patient.</a> Infect Dis Clin North Am. 15, 613-638 (2001).</li>
<li>McCue, M. J., Moore, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocarditis+with+microabscess+formation+caused+by+Listeria+monocytogenes+associated+with+myocardial+infarct%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Pathol%22%5BJournal%5D)">Myocarditis with microabscess formation caused by Listeria monocytogenes associated with myocardial infarct.</a> Hum Pathol. 10, 469-472 (1979).</li>
<li>Menard, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+L-type+calcium+channel+expression+during+retinoic+acid-induced+differentiation+of+H9C2+cardiac+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Modulation of L-type calcium channel expression during retinoic acid-induced differentiation of H9C2 cardiac cells.</a> J Biol Chem. 274, 29063-29070 (1999).</li>
<li>Czuprynski, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Listeria+monocytogenes%3A+silage%2C+sandwiches+and+science%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Health+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Listeria monocytogenes: silage, sandwiches and science.</a> Anim Health Res Rev. 6, 211-217 (2005).</li>
<li>Grundler, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+surface+proteins+InlA+and+InlB+are+interdependently+required+for+polar+basolateral+invasion+by+Listeria+monocytogenes+in+a+human+model+of+the+blood-cerebrospinal+fluid+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Microbes+Infect%22%5BJournal%5D)">The surface proteins InlA and InlB are interdependently required for polar basolateral invasion by Listeria monocytogenes in a human model of the blood-cerebrospinal fluid barrier.</a> Microbes Infect. 15, 291-301 (2013).</li>
<li>Zeldovich, V. B., Robbins, J. R., Kapidzic, M., Lauer, P., Bakardjiev, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invasive+extravillous+trophoblasts+restrict+intracellular+growth+and+spread+of+Listeria+monocytogenes%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Invasive extravillous trophoblasts restrict intracellular growth and spread of Listeria monocytogenes.</a> PLoS Pathog. 7, e1002005(2011).</li>
<li>Kimes, B. W., Brandt, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Properties+of+a+clonal+muscle+cell+line+from+rat+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+cell+research%22%5BJournal%5D)">Properties of a clonal muscle cell line from rat heart.</a> Experimental cell research. 98, 367-381 (1976).</li>
<li>McMullen, P. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+sequence+of+Listeria+monocytogenes+07PF0776%2C+a+cardiotropic+serovar+4b+strain%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Genome sequence of Listeria monocytogenes 07PF0776, a cardiotropic serovar 4b strain.</a> J Bacteriol. 194, 3552(2012).</li>
</ol>

Os autores não relatam interesses financeiros concorrentes.

L. monocytogenes é um patógeno humano generalizado e bem caracterizado, capaz de causar uma série de manifestações diferentes da doença15. A bactéria foi descrita anteriormente por sua capacidade de translocar através de barreiras, como a barreira hematoencefálica e as barreiras placentárias-fetais, a fim de alcançar e colonizar o sistema nervoso central e desenvolver feto, respectivamente. A capacidade in vivo do organismo de colonizar esses tecidos é muitas vezes complementada por uma capac...

Listeria monocytogenes é um patógeno intracelular gram-positivo capaz de causar doenças graves em populações suscetíveis, incluindo idosos, gestantes, pessoas com HIV/AIDS e pessoas que recebem quimioterapia1. A infecção nessas populações é frequentemente resultado da ingestão de produtos alimentares contaminados, e a maioria das infecções estão associadas a surtos de alimentos em larga escala2,3. Em humanos e outros mamíferos, L. monocytogenes é capaz de translocar através da fronteira epitelial do intestino delgado, sendo posteriormente transportado para o fígado4,5. Modelos animais sugerem que as bactérias ingeridas se replicam dentro do villi intestinal e transitam para o fígado através da veia portal ou se espalham através dos linfonodos mesentéricos na corrente sanguínea, levando à disseminação hematógena no fígado e ao baço6,7. No fígado e no baço, a bactéria é capaz de mediar a absorção tanto em fagocitos profissionais quanto em células parenchímicas residentes, e rapidamente estabelece infecções dentro desses órgãos. À medida que a carga bacteriana aumenta, inúmeras bactérias são dispersas de volta ao sangue, onde são capazes de colonizar ainda mais tecidos suscetíveis, incluindo o sistema nervoso central e a placenta (onde estão presentes). A colonização desses locais impede manifestações mais comuns de listeriose em humanos, incluindo meningite, encefalite e aborto fetal2.
Subpopulações selecionadas de L. monocytogenes têm sido recentemente mostrados com uma capacidade aprimorada de invadir e replicar dentro do tecido cardíaco8. As manifestações de envolvimento cardíaco são variadas, e vão desde endocardite e pericárite, até miocardite fulminante completa com anormalidades de condução9-13. O número total de casos cardíacos de L. monocytogenes por ano é baixo, mas pode ser subestimado, pois essa faceta de infecção não é geralmente bem reconhecida. A colonização do coração por patógenos muitas vezes requer predisposições hospedeiras, como danos valvulares pré-existentes ou válvulas cardíacas artificiais. Há, no entanto, isolados de L. monocytogenes que foram identificados que são notáveis por sua capacidade de colonizar os corações dos animais infectados na ausência de qualquer dano cardíaco e/ou anormalidades8.
Aqui são descritos métodos in vitro e in vivo para avaliar a colonização bacteriana do tecido cardíaco dentro de animais infectados usando ensaios de invasão na cultura tecidual, bem como infecções animais vivos. Esses métodos têm se mostrado úteis não apenas para identificar cepas com potencial para colonizar tecido cardíaco em animais infectados, mas também devem ser úteis para a identificação de produtos genéticos bacterianos que servem para melhorar a invasão celular cardíaca e/ou resultar em alterações na patologia cardíaca. Esses métodos facilitam a comparação do cardiotropismo entre múltiplas cepas. Para os métodos aqui descritos, l. monocytogenes 10403S é usado como um representante bem estudado de uma cepa não cardiotrópica e o isolado clínico 07PF0776 é usado como um exemplo representativo de uma cepa cardiotrópica. Essas duas cepas foram escolhidas para fornecer uma comparação para a invasão bacteriana de células cardíacas in vitro e colonização de corações de camundongos infectados in vivo. O isolado 07PF0776 é um isolado clínico recuperado de um abscesso interventricular que causou uma arritmia fatal em um paciente HIV+8. L. os isolados de monocytogenes podem variar em seu potencial de virulência, e dada a propensão para listeria infectar pessoas com imunossupressão e gestantes, as pessoas dentro dessas populações devem ter cuidado ao avaliar diferentes isolados clínicos.

<table><tbody><tr><td></td><td>Difco BHI Broth Base</td><td>237200</td><td>2 kg de pó de infusão de coração cerebral (sem ágar)</td></tr><tr><td>Difco</td><td>Agar</td><td>214510</td><td>2 kg de ágar granulado</td></tr><tr><td>Difco</td><td>BHI Agar</td><td>241810</td><td>2 kg de pó de infusão de coração cerebral com ágar 7,5%</td></tr><tr><td>in vitro</td><td>LB Broth Base</td><td>12975-084</td><td>2 kg de base de caldo Luria em pó (sem ágar)</td></tr><tr><td></td><td>Fisher Glass Lamínulas</td><td>12-545-80</td><td>12 mm lamínulas de vidro</td></tr><tr><td>Falcon</td><td>Placa de cultura de tecidos de 24 poços</td><td>35-3047</td><td>24 poços, placa de cultura de tecidos tratada com plasma</td></tr><tr><td>Falcon</td><td>14mL Tubo de poliestireno</td><td>352051</td><td>14 ml Tubos de poliestireno</td></tr><tr><td>Falcon</td><td>96 poços Placa de fundo em U Falcon de 96 poços</td><td>35-3077</td><td>Placa de 96 poços não tratada com cultura de tecidos</td></tr><tr><td>Corning</td><td>0,05% Tripsina, 0,53 mM EDTA (1X)</td><td>25-052-CI</td><td>Solução estoque de tripsina EDTA para cultura de tecidos</td></tr><tr><td>Corning</td><td>DMEM (glicose alta, piruvato alto)</td> <td>15-013-</td><td>Mídia DMEM sem FBS, glutamina ou antibióticos</td></tr><tr><td>Solução Corning</td><td>Pen/Strep/Glut</td><td>30-009-CI</td><td>Mistura de estoque de penicilina, estreptomicina e L-glutamina para cultura de tecidos</td></tr><tr><td>Corning</td><td>Gentamicin</td><td>30-005-CR</td><td>50 mg/ml Estoque, solução de gentamicina para cultura de tecidos</td></tr><tr><td>, Cellgro (Corning)</td><td>L-glutamina</td><td>25005197</td><td>estoque, L-glutamina solução sem antibióticos</td></tr><tr><td>Denville</td><td>75cm^2 Balão</td><td>T1225</td><td>75 cm2 frasco tratado para cultura de tecidos</td></tr><tr><td>Denville</td><td>1,5mL tubos de microcentrífuga</td><td>2013004</td><td>tubos de microcentrífuga de 1,5 ml</td></tr><tr><td>ATCC</td><td>H9c2 Cardíaco Mioblastos</td><td>CRL-1446</td><td>Mioblastos cardíacos de rato</td></tr><tr><td>Hyclone</td><td>Fetal Bovino Soro Bovino Fetal</td><td>SH30070.63</td><td>Soro Fetal Bovino</td></tr></tbody></table>

avaliação da invasão bacteriana de células cardíacas na cultura e colonização cardíaca em camundongos infectados usando listeria monocytogenes

Assessing Bacterial Invasion of Cardiac Cells in Culture and Heart Colonization in Infected Mice Using Listeria monocytogenes

Listeria monocytogenes é um patógeno intracelular facultativo gram-positivo que é capaz de causar infecções invasivas graves em pacientes imunocomprometidos, idosos e gestantes. As manifestações mais comuns de listeriose em humanos incluem meningite, encefalite e aborto fetal. Uma sequência significativa, mas muito menos documentada de infecção invasiva de L. monocytogenes envolve o coração. A taxa de mortalidade por doença cardíaca pode ser de até 35% apesar do tratamento, porém muito pouco se sabe sobre a colonização de L. monocytogenes de tecido cardíaco e suas patologias resultantes. Além disso, tornou-se recentemente evidente que as subpopulações de L. monocytogenes têm uma capacidade aumentada de invadir e crescer dentro do tecido cardíaco. Este protocolo descreve em detalhes métodos in vitro e in vivo que podem ser usados para avaliar o cardiotropismo de L. monocytogenes isolados. Métodos são apresentados para a infecção de míbios cardíacos de rato H9c2 na cultura tecidual, bem como para a determinação da colonização bacteriana dos corações dos camundongos infectados. Esses métodos são úteis não apenas para identificar cepas com potencial para colonizar tecido cardíaco em animais infectados, mas também podem facilitar a identificação de produtos genéticos bacterianos que servem para melhorar a invasão de células cardíacas e/ou promover alterações na patologia cardíaca. Esses métodos também preveem a comparação direta do cardiotropismo entre múltiplas cepas de L. monocytogenes.

Isolados selecionados de L. monocytogenes exibem maior invasão de células cardíacas na cultura celular e em modelos de infecção de camundongos. A Figura 1 mostra um exemplo de como as colônias bacterianas podem aparecer após o revestimento de suspensões na mídia ágar. Este método permite uma avaliação precisa das CFUs dentro de uma amostra sem o uso de um grande número de placas de mídia ágar. A Figura 2 mostra um exemplo de um ensaio baseado em cultura tecidual comparando a cap...

Listeria monocytogenes causa infecções fetais em gestantes e meningite em populações suscetíveis. Subpopulações de bactérias podem colonizar tecido cardíaco, causando miocardite em pacientes e animais de laboratório. Aqui apresentamos um protocolo que descreve como avaliar a invasão de células cardíacas L. monocytogenes in vitro e colonização cardíaca em animais infectados.

Avaliação da invasão bacteriana de células cardíacas na cultura e colonização cardíaca em camundongos infectados usando listeria monocytogenes

Listeria monocytogenes is a Gram-positive facultative intracellular pathogen that is capable of causing serious invasive infections in immunocompromised ...

O objetivo geral deste procedimento é fornecer métodos eficientes para avaliar a infecção microbiana de células cardíacas utilizando modelos in vivo e in vitro de colonização cardíaca e invasão de células cardíacas. Isso é realizado primeiramente cultivando culturas bacterianas e coletando, lavando e ressuspendendo as células bacterianas em solução salina tamponada com fosfato. Em seguida, monocamadas de células cardíacas cultivadas em lamínulas de vidro são infectadas com uma suspensão bacteriana, ou a suspensão bacteriana é inoculada em camundongos por meio de injeções na veia caudal.Em seguida, as células cardíacas são incubadas na presença de gentamicina para eliminar bactérias extracelulares, seguido de lise celular para recuperação. Bactérias ou animais infectados são monitorados quanto ao bem-estar dois a três dias após a infecção e, em seguida, sacrificados para isolamento dos órgãos-alvo. Por fim, suspensões de células e órgãos são diluídas e semeadas utilizando um método de plaqueamento por pontos para determinar o número de bactérias viáveis associadas às células ou órgãos-alvo.No final, as colônias bacterianas são contadas em meio ágar para determinar a eficiência da in

assessing-bacterial-invasion-cardiac-cells-culture-heart-colonization

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Imunologia e Infecção

Listeria monocytogenes é um organismo modelo para estudar as respostas imunológicas e suscetibilidade genética para as bactérias intracelulares em camundongos. Este método permite que sejam medidos carga bacteriana e gerar uma única célula suspensões de fígado e do baço de ratos para análise FACS para determinar mudanças em células do sistema imunológico devido à infecção por Listeria.

Medir a carga bacteriana e resposta imune em camundongos infectados com Listeria monocytogenes</em

Fonte: McMullen, P. D., Freitag, N. E. Avaliação da invasão bacteriana de células cardíacas em cultura e colonização cardíaca em camundongos infectados usando Listeria monocytogenes. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra a injeção de Listeria monocytogenes na veia caudal de um camundongo para estabelecer infecção sistêmica. Ele mostra a circulação bacteriana, a colonização de órgãos e a quantificação da carga bacteriana no coração por meio da homogeneização do tecido, realização de diluições...

Quantificação da Carga Bacteriana no Coração do Camundongo Após a Injeção na Veia Caudal de Listeria monocytogenes

Este vídeo demonstra um método para estabelecer um modelo de infecção em tecidos placentários para estudar a propagação da infecção. Uma cultura de órgãos placentários ex vivo é infectada com Listeria monocytogenes, um parasita intracelular facultativo. As bactérias invadem trofoblastos extravilosos (EVTs) para entrar no tecido placentário e depois se propagam para outras células por meio da disseminação célula a célula.

Uma técnica para estabelecer um modelo de infecção bacteriana em uma cultura de órgãos ex vivo

Este vídeo demonstra a quantificação da carga bacteriana infecciosa do cérebro de camundongo perfundido infectado com Listeria monocytogenes.

Avaliação da colonização bacteriana em um cérebro de camundongo após infecção por Listeria monocytogenes

Este artigo descreve um novo método para a infecção oral de camundongos,...

Transmissão Oral de<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; Em camundongos através de ingestão de alimentos contaminados

A Listeria monocytogenes é uma bactéria patogénica gram positiva frequentemente utilizado como um importante modelo para o estudo de parasitismo intracelular. Imagiologia tarde L. monocytogenes fases de infecção dentro do contexto de telas de ARN pequenos interferentes permite o estudo global de vias celulares necessários para a infecção bacteriana de células hospedeiras alvo.

Imagiologia inLC Secreção para investigar infecção celular pelo patógeno bacteriano<em&gt; Listeria monocytogenes</em

Streptococcus pneumoniae forma lesões microscópicas discretas e não purulentas no coração. Está delineado o protocolo para um modelo murino de formação de microlesões cardíacas. São fornecidas instruções sobre visualização de microlesões usando microscopia, discriminação entre microlesões precoces e tardias e métodos para detectar remodelação cardíaca em corações de animais convalescentes.

Visualização de<em&gt; Streptococcus pneumoniae</em&gt; Dentro Microle- cardíacas e remodelação cardíaca Subsequente

Este protocolo descreve como para inocular ratinhos C57BL / 6J com a estirpe de Listeria monocytogenes EGD (L. monocytogenes) e para medir o interferão-γ (IFN-γ) respostas de células assassinas naturais (NK), as células T assassinas naturais (NKT), e adaptativa linfócitos T após a infecção. Este protocolo descreve como também a realização de estudos de sobrevivência de ratinhos após a infecção com uma dose de LD 50 modificada do agente patogénico.

Infecção experimental com<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; Como um modelo para estudar o anfitrião Respostas interferão-y

Um protocolo detalhado de um modelo de mouse para enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) colonização usando bactérias bioluminescência-etiquetado é apresentado. A detecção destas bactérias bioluminescentes por um não-invasivo na vivo sistema de animais vivos de imagem pode avançar nossa compreensão atual da colonização de EHEC.

Deteção de colonização Enterohemorrhagic Escherichia Coli murino Host pelo sistema não-invasivo na Vivo bioluminescência

Durante a infecção, a Listeria monocytogenes é capaz de atravessar a barreira hemato - encefálica para colonizar o cérebro. Neste protocolo, demonstramos como avaliar a colonização bacteriana de órgãos após a infecção de camundongos. Está previsto um procedimento para executar a perfusão de órgão inteiro para determinação específica dos números bacterianas do parênquima cerebral.

Listeria monocytogenes Infecção do cérebro

Descrevemos dois ensaios in vitro e in vivo de infecção que podem ser usados para analisar as atividades dos fatores do hospedeiro-codificação.

Usando um patógeno bacteriano para sonda para celular e organísmica-nível Host respostas

Aprenda a avaliar a invasão bacteriana de células cardíacas por Listeria monocytogenes em cultura e em camundongos infectados. Este protocolo permite estudar a colonização cardíaca e a patogenicidade microbiana.

Avaliação da invasão bacteriana de células cardíacas na cultura e colonização cardíaca em camundongos infectados usando listeria monocytogenes (Vídeo) | JoVE Journal

Avaliação da invasão bacteriana de células cardíacas na cultura e colonização cardíaca em camundongos infectados usando listeria monocytogenes

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