A imuno-histoquímica e Rotulagem múltipla com anticorpos da espécie hospedeira Mesmas para Estudar Adulto Hippocampal Neurogênese

O objetivo geral deste procedimento é contornar as limitações da imunofluorescência indireta para estudar células progenitoras neurais. Quando não estão disponíveis anticorpos primários adequados de diferentes espécies hospedeiras. Inicialmente, um análogo da timidina é injetado para rotular as células em divisão, após o que o tecido é colhido, processado e fatiado em seções criogênicas.

Em seguida, a imunofluorescência múltipla sequencial é realizada para começar. Um anticorpo primário não marcado é aplicado, que é então ligado por um anticorpo secundário marcado com fluorescência. Em seguida, as perícopes abertas no primeiro anticorpo secundário são bloqueadas com soro da espécie de anticorpo primário, e todas as imunoglobulinas que podem ser reconhecidas pelo segundo anticorpo secundário são cobertas com fragmentos fab não conjugados.