Name: O Teste de Natação Forçada como um modelo de Depressive-like Comportamento (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-02T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 42 s
Description: Aprenda o teste de natação forçada para avaliar comportamento depressivo em roedores usando camundongos. Este método permite testar a eficácia de antidepressivos e estudar os mecanismos da depressão em modelos pré-clínicos.

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Esta pesquisa foi apoiada pela Israel Science Foundation (concessão nº 738/11), pelo Instituto Nacional de Psicobiologia de Israel (NIPI-7-2011-12) e pela Open University Foundation

NOTA: Todos os protocolos experimentais foram aprovados pelo Comitê Internacional para Cuidados e Uso de Animais em Israel. Foram feitos todos os esforços para minimizar o número de animais utilizados e seu sofrimento. 1. Preparação para o teste de natação forçada <ol><li> Use duas salas adjacentes. Usar um quarto como uma &quot;sala de espera&quot; para manter os animais antes do teste comportamental, e o outro para a realização do procedimento. </li><li> Preparar os recipientes de vidro cilíndrico transparente (o única restrição que o número de recipientes é o espaço disponível) medindo 50 cm de altura e um diâmetro de 20 cm. Nota: É possível executar vários animais ao mesmo tempo na mesma sala. Se assim for, separe os recipientes de um outro usando uma tela escura para que os animais não vão ver uns aos outros durante o procedimento. </li><li> Prepare a câmara (s) de vídeo na frente dos recipientes, de modo que cada câmara percebe um ou mais recipientes de uma maneira que wmal permitem a observação clara do comportamento dos animais, mais tarde, durante a exibição do filme. </li><li> Prepare gaiolas secagem limpas, lâmpadas de calor e almofadas de calor para os animais que tenham concluído o procedimento para evitar a hipotermia. Verifique se o fundo da gaiola tem papel mata-borrão e alterá-lo quando estiver molhada. Não coloque as gaiolas na sala de testes. NOTA: Certifique-se de não misturar animais de gaiolas diferentes, enquanto eles estão ficando nas gaiolas de secagem transitórios. </li></ol> 2. manejo dos animais antes do teste <ol><li> Animais da casa em um quarto com ciclo claro / escuro de 12 horas de luz. </li><li> Durante os dias do procedimento experimental dar os animais o livre acesso a comida e água, excepto durante o tempo específico de permanência no centro do procedimento. </li><li> Quando usando ratos, manipulação dos animais durante cerca de 2 min diariamente, 5 dias antes do início do procedimento experimental. </li></ol> 3. Processo de Formação Oprocedimento é realizado de forma diferente para ratos e ratinhos. NOTA: Para ambos os camundongos e ratos, observar os animais enquanto eles estão na água em todos os momentos. No caso de um animal aparece em perigo grave (por exemplo, muito cansado, não pode ficar até float) remover o animal da água e excluí-la do experimento. <ol><li> Para camundongos - Há uma sessão 6 min longo, dividido em pré-teste (o 2 primeiro min) e teste (o último 4 min). <ol><li> Para os ratinhos a obter aclimatados ao ambiente de teste, o transporte dos animais nas suas gaiolas pelo menos 30 minutos antes do teste comportamental da sala de espera. </li><li> Encher os cilindros com água da torneira a 25 ° C e ajustar a profundidade da água de acordo com o tamanho do rato &quot;, de modo que não se pode tocar no fundo do recipiente com as suas pernas traseiras. </li><li> Marcar o cilindro com o número de animais, para efeitos de identificação do animal, mais tarde, durante a visualização da metragem. </li><li>Ligue a câmera de vídeo / s e, em seguida, colocar cada rato no recipiente cilindro cheio de água durante 6 min. </li><li> Após 6 min ter decorrido, desligue a câmera / s, retire o mouse a partir do recipiente e colocá-lo na gaiola secagem transitória com a lâmpada de calor acima dela ea almofada de calor sob ele. Os ratos devem ser cuidadosamente monitorizados continuamente, e enquanto se recuperava nesta jaula. Para este efeito, é possível colocar um termómetro ao nível dos ratinhos para garantir que a temperatura no recinto não exceda 37 ° C. Além disso, colocar a gaiola de modo a que nem toda ela cai sob a lâmpada ou sobre a almofada; isso permite que o mouse para mover-se para uma área mais fria, se desejar. </li><li> Troque a água depois de cada sessão, para evitar qualquer influência sobre a próxima mouse. </li></ol></li><li> Para os ratos - Há 2 sessões, 24 horas de intervalo. A primeira sessão é a fase de pré-teste (15 min) e a segunda sessão é a fase de teste (5 min). <ol><li> A fim de que os ratos para se adapte às condições detestando ambiente, transportar os animais em suas gaiolas, pelo menos, 30 min antes do teste comportamental para a sala de espera. </li><li> Encher os cilindros com água da torneira a 23 ± 1 ° C e ajustar a profundidade da água de acordo com o tamanho do rato, de modo a que ele não pode tocar no fundo do recipiente com as suas pernas traseiras. </li><li> Marcar o cilindro com o número de animais, para efeitos de identificação do animal, mais tarde, durante a visualização da metragem. </li><li> Coloque cada rato no recipiente cilindro cheio de água durante 15 min. </li><li> Após 15 min de terem decorrido remover o rato a partir do recipiente e coloca-se na gaiola de secagem transiente com a lâmpada de calor acima dela e a almofada de calor sob ele. O rato deve ser de perto e continuamente monitorados enquanto se recuperava nesta jaula. Para este efeito, é possível colocar um termómetro ao nível do rato para se certificar de que a temperatura no recinto não exceda 37 ° C. Além disso, colocar a gaiola de modo a que nem toda ela falls sob a lâmpada ou sobre a almofada; isso permite que o rato para mover-se para uma área mais fria, se desejar. </li><li> Troque a água depois de cada sessão, para evitar qualquer influência sobre o próximo rato. NOTA: Este é o fim da fase de pré-teste. </li><li> Vinte e quatro horas mais tarde, a fim de que os ratos para obter aclimatados ao ambiente de teste, o transporte dos animais nas suas gaiolas pelo menos 30 minutos antes do teste comportamental da sala de espera. </li><li> Encher os cilindros com água da torneira a 23 ± 1 ° C e ajustar a profundidade da água de acordo com o tamanho do rato, de modo a que ele não pode tocar no fundo do recipiente com as suas pernas traseiras. </li><li> Marcar o cilindro com o número de animais, para efeitos de identificação do animal, mais tarde, durante a visualização da metragem. </li><li> Ligue a câmera de vídeo / s e, em seguida, coloque o rato no recipiente cilindro cheio de água durante 5 minutos. Certifique-se de que cada rato é testado no mesmo recipiente e posição na sala como no dia anterior. </li&gt; <li> Após 5 min ter decorrido ligar a câmera / s, retire o rato a partir do recipiente e colocá-lo na gaiola secagem transitória com a lâmpada de calor acima dela ea almofada de calor sob ele. O rato deve ser de perto e continuamente monitorados enquanto se recuperava nesta jaula. Para este efeito, é possível colocar um termómetro ao nível do rato para se certificar de que a temperatura no recinto não exceda 37 ° C. Além disso, colocar a gaiola de modo a que nem toda ela cai sob a lâmpada ou sobre a almofada; isso permite que o rato para mover-se para uma área mais fria, se desejar. </li><li> Troque a água depois de cada sessão, para evitar qualquer influência sobre o próximo rato. NOTA: Este é o fim da fase de testes. </li></ol></li></ol> 4. A Codificação Comportamental Para ratos, codificar o último 4 min definida como a fase de teste. Para os ratos, codificar a 5 min da etapa de teste. <ol><li> Código da duração do tempo gasto como &quot;Immobile&quot; se o mouse está flutuandocom a ausência de qualquer movimento excepto as necessárias para manter o nariz acima da água. </li><li> Código da duração do tempo gasto como &quot;Lutando / escalada&quot; se movimentos rápidos dos membros anteriores são observados de modo que as patas dianteiras quebrar a superfície da água. </li><li> Código da duração do tempo gasto como &quot;Piscina&quot; Se o movimento dos membros anteriores ou pélvicos em uma forma de remo é observado. NOTA: É possível utilizar uma forma alternativa de codificar estes comportamentos, este inclui um método de amostragem de tempo. Classifique o natação, lutando ou imobilidade, como a freqüência dos episódios em 5 seg intervalos durante a sessão de teste. </li></ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

O FST é usado para monitorar o comportamento depressivo-like e baseia-se no pressuposto de que a imobilidade reflecte uma medida de desespero comportamental 3. As principais vantagens deste processo residem na sua operação relativamente fácil e resultados rápidos. Além disso, sua sensibilidade para uma ampla gama de medicamentos antidepressivos que faz com que seja um teste de rastreio adequado é uma das características mais importantes que levam à sua alta validade preditiva 29. Importante, este t...

A depressão é um transtorno psiquiátrico que ameaçam a vida e uma grande preocupação de saúde pública mundial, com uma incidência de 5% e uma prevalência de 15-20%. Além disso, estima-se que até 2020 a depressão será nos três maiores contribuintes para o peso da doença 1,2. A depressão está associada com deficiência, diminuição da qualidade de vida, aumento dos custos relacionados com a saúde e é considerado um fator de risco principal para muitas doenças, incluindo doenças cardiovasculares, metabólicas e distúrbios neuropsiquiátricos 3,4 .Current tratamentos fármaco-terapêutica têm limitado a eficácia e estão associados com muitos efeitos colaterais deletérios 5,6. Por isso, uma melhor compreensão da fisiopatologia desta doença junto com o desenvolvimento de tratamentos inovadores e melhoradas continua a ser crucial. Assim, os modelos animais são essenciais para o avanço da investigação neste domínio. Existem diversos modelos utilizados para o estudo desta desordem (&lt;em&gt; por exemplo, teste de preferência sacarose, teste de suspensão pela cauda) com o teste de natação forçada (FST, também conhecido como teste de Porsolt após o desenvolvedor deste modelo 7,8), sendo um dos ensaios mais comumente utilizados 7,9-12. Durante a FST um animal é colocado num recipiente cheio com água do qual não pode escapar. O animal vai primeiro tentar escapar, mas, eventualmente, vai expor a imobilidade (ou seja, flutuando com a ausência de qualquer movimento, exceto se forem necessários para manter o nariz fora da água). O FST é um modelo muito popular em investigação animal para uma série de razões. Primeiro, ela envolve a exposição dos animais ao stress, que se mostrou ter um papel na tendência para a depressão maior 12-14. Além disso depressão é muitas vezes visto como uma falta de habilidade para lidar com o estresse 15-17. Em segundo lugar, o tratamento farmacológico com antidepressivos antes do teste foi mostrado para reduzir a imobilidade no TNF &lt;sup&gt; 18-23. Por conseguinte, é muitas vezes utilizado como um ensaio de rastreio de novos compostos com propriedades antidepressivas potenciais 15-17,24. Além disso, o FST foi mostrado para compartilhar alguns dos fatores que são influenciados ou alterados por depressão em seres humanos, tais como mudanças no consumo de alimentos, alterações do sono e anedonia 15-17,24 droga retirada induzida. Esta é também a razão pela qual este teste é por vezes utilizado para avaliar o comportamento depressivo-como em camundongos mutantes, com aumento ou diminuição da imobilidade basal (em comparação com &#39;do tipo selvagem&#39; ratos) 25,26.

<table><tbody><tr><td>Computador</td><td>Dell</td><td></td><td>Intel&#174; Núcleo&#153; i3-2120 cpu @ 3.30 GHz, 4 GB ram</td></tr><tr><td>Câmera</td><td>VIDO</td><td>AU-CB422</td><td>B/W CCD CAMERA&nbsp; http://www.vido-europe.com/products_detail.asp?id=33&pcategory=2</td></tr><tr><td>Software de codificação</td><td>Biobserve</td><td></td><td>FST Analysis http://www.biobserve.com/products/fst/index.html</td></tr><tr><td>Lâmpada de aquecimento</td><td>Ikea</td><td>AA-19025-3</td><td>ESPRESSIVIO 400.504.46&nbsp;- Lâmpada G4 de 20W&nbsp; http://www.ikea.com/ms/en_US/customer_service/assembly/E/E00050467.pdf</td></tr><tr><td>Aquecimento&nbsp; travesseiro</td><td>Sachs</td><td>EF-188B</td><td>38*38cm Aquecimento&nbsp; travesseiro http://www.sachs.co.il/eng/lego_tree.php?instance_id=21&actions=show&id= 604</td></tr></tbody></table>

o teste de natação forçada como um modelo de depressive-like comportamento

The Forced Swim Test as a Model of Depressive-like Behavior

O objetivo do presente protocolo é descrever o teste de nado forçado (FST), que é um dos ensaios mais comumente usados para o estudo do comportamento depressivo em roedores. O FST baseia-se na suposição de que, ao colocar um animal em um recipiente cheio de água, ele primeiro fará esforços para escapar, mas eventualmente exibirá imobilidade que pode ser considerada como reflexo de uma medida de desespero comportamental. Este teste tem sido amplamente utilizado porque envolve a exposição dos animais ao estresse, o que demonstrou ter um papel na tendência à depressão maior. Além disso, o FST demonstrou compartilhar alguns dos fatores que são influenciados ou alterados pela depressão em humanos, incluindo mudanças no consumo de alimentos, anormalidades do sono e anedonia induzida por abstinência de drogas. As principais vantagens desse procedimento são que ele é relativamente fácil de executar e que seus resultados são analisados de forma fácil e rápida. Além disso, sua sensibilidade a uma ampla gama de medicamentos antidepressivos que o torna um teste de triagem adequado é uma das características mais importantes que levam à sua alta validade preditiva. Apesar de seu apelo, este modelo tem uma série de desvantagens. Primeiro, a questão do aumento crônico é problemática neste teste porque, na vida real, os pacientes precisam ser tratados por pelo menos várias semanas antes de sentirem qualquer alívio de seus sintomas. Por último, devido ao caráter aversivo do FST, é importante ter em conta as possíveis influências que este possa ter na estrutura/função cerebral se as análises cerebrais forem realizadas de acordo com este procedimento.

Os seguintes resultados são baseados em dados não publicados do nosso laboratório. Neste experimento, os ratos do sexo feminino adulto ICR foram testados após 3 semanas de tratamento com o inibidor da recaptação da serotonina (ISRS) escitalopram ou novo tratamento anti-depressivo e anti-ansiedade herbal (NHT) (para mais informações sobre o tratamento à base de plantas, ver 12 , 27,28). One-way ANOVA revelou que o tratamento reduziu comportamento depressivo-like no FST [F (2,58) = 4,88, p &lt;0,05]. Análise Du...

Este protocolo descreve o teste de nado forçado, que é usado para o estudo do comportamento depressivo em roedores. Este procedimento envolve colocar um animal em um recipiente cheio de água que eventualmente levará à exibição de comportamento de imobilidade, que é considerado um reflexo do desespero comportamental.

O Teste de Natação Forçada como um modelo de Depressive-like Comportamento

The goal of the present protocol is to describe the forced swim test (FST), which is one of the most commonly used assays for the study of depressive-like ...

O objetivo geral deste procedimento é induzir um comportamento semelhante à depressão em roedores e testar o efeito de terapêuticas para o estudo da depressão. Isso é realizado primeiramente preparando recipientes cilíndricos de vidro transparente, preenchidos com água até uma profundidade na qual o camundongo não consiga tocar o fundo com as patas traseiras. O segundo passo é colocar cada animal em um recipiente cilíndrico com água e filmar o comportamento dos camundongos por um total de seis minutos.O passo final é codificar a duração do tempo gasto em agitação móvel e natação utilizando um software de análise do teste de nado forçado. Em última análise, o teste de nado forçado é usado para demonstrar que, ao colocar um animal em um recipiente cheio de água, ele eventualmente apresentará imobilidade. Isso pode ser uma medida de desespero comportamental.O tratamento com medicamentos antidepressivos e ansiolíticos pode alterar esses comportamentos. A principal vantagem desta técnica em relação aos métodos existentes, como o teste de preferência pela sacarose, é que ela é relativamente fácil de realizar e os resultados são analisados de forma simples e rápida. A duplicação desta técnica estende-se à terapia ou ao diagnóstico da depressão.Sua sensibilidade a uma ampla gama de antidepressivos torna-o um teste de triagem adequado para o teste de natação forçada. Utilizou-se dois cômodos adjacentes, sendo um deles como sala de espera para acomodar os animais antes dos testes comportamentais, e o outro para realizar o procedimento.Prepare recipientes cilíndricos de vidro transparentes medindo 50 centímetros de altura por 20 centímetros de diâmetro. Em seguida, posicione câmeras de vídeo em frente aos recipientes de modo que cada câmera capte um ou mais recipientes, permitindo a observação clara do comportamento dos animais ao visualizar as gravações. Além disso, prepare gaiolas de secagem limpas, lâmpadas de aquecimento e mantas térmicas para os animais que concluíram o procedimento.Para evitar hipotermia, certifique-se de que o fundo da gaiola tenha papel absorvente e troque-o quando ficar molhado. Para realizar o procedimento de treinamento em camundongos, há uma sessão de seis minutos dividida em pré-teste nos dois primeiros minutos e teste nos últimos quatro minutos, a fim de acostumar os camundongos ao ambiente de teste. Transporte os animais para a sala de espera em suas gaiolas de origem pelo menos 30 minutos antes dos testes comportamentais.Encha os cilindros com água da torneira a 25 graus Celsius e ajuste a profundidade da água de acordo com o peso do camundongo, de modo que ele não consiga tocar o fundo do recipiente com as patas traseiras. Marque o cilindro com o número do animal para fins de identificação do animal ao visualizar as imagens; em seguida, ligue as câmeras de vídeo e coloque cada camundongo no recipiente cilíndrico com água por seis minutos. Após decorridos seis minutos, desligue as câmeras e retire o camundongo do recipiente.Coloque o camundongo na gaiola de secagem temporária com a lâmpada de calor acima e o tapete aquecido abaixo. Troque a água após cada sessão para evitar qualquer influência sobre o próximo camundongo. O desempenho da codificação comportamental pode ser realizado por um experimentador cego em relação à condição dos camundongos ou por um software de análise do teste de natação forçada.Primeiro, codifique a duração do tempo gasto como imóvel. Se o camundongo estiver flutuando sem qualquer movimento, exceto os movimentos necessários para manter o nariz acima da água, então codifique a duração do tempo gasto como agitação ou escalada. Se forem observados movimentos rápidos dos quatro membros, de modo que as patas dianteiras ultrapassem a superfície da água, finalmente codifique a duração do tempo gasto como natação.Se forem observados movimentos das patas dianteiras ou traseiras de forma semelhante ao remar neste experimento. Camundongos fêmeas adultos ICR foram tratados após três semanas de tratamento com o inibidor seletivo da recaptação de serotonina, citalopram, ou com o novo tratamento fitoterápico antidepressivo e ansiolítico, NHT. Tanto o citalopram quanto o NHT reduziram a imobilidade e, portanto, o comportamento semelhante à depressão no teste de natação forçada. Além disso, o tratamento com citalopram resultou em níveis mais elevados de comportamento de luta no teste de natação forçada.Por outro lado, o tratamento com citalopram ou com o NHT não teve efeito sobre o comportamento de natação após este procedimento. Outros métodos, como análises histológicas e bioquímicas, podem ser realizados para responder perguntas adicionais, como a natureza do mecanismo neural subjacente a esse comportamento semelhante à depressão.

the-forced-swim-test-as-a-model-of-depressive-like-behavior

Research

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

O teste de natação forçada é validado como uma abordagem experimental para avaliar a eficácia do antidepressivo potencial em roedores. Animais experimentais são colocados em um tanque de água e fugir de comportamentos relacionados à mobilidade é quantificado. Os procedimentos comuns para a versão do mouse deste teste são descritos.

O Mouse Teste de Natação Forçada

O teste de tail-suspensão é validado como um procedimento experimental para avaliar a eficácia antidepressiva de tratamentos com drogas em camundongos. Os ratos são suspensos por suas caudas de seis minutos e escapar comportamentos relacionados são avaliados. Descrevemos os procedimentos utilizados na condução do teste de suspensão da cauda.

O Teste de Suspensão da cauda

Este vídeo demonstra o método de indução de estresse crônico em um camundongo por meio de imobilização repetida, levando à liberação de corticosterona e redução da atividade do receptor de glutamato nos neurônios, o que resulta em comportamento semelhante à depressão.

Induzindo comportamento semelhante à depressão em um camundongo por meio do estresse de imobilização

Este protocolo descreve um novo modelo pelo qual ratos saudáveis podem contrair depressão durante um determinado tempo periodthrough contágio pela exposição a crônica imprevisível salientou ratos (CUS).

Um novo método para induzir um comportamento parecido com depressão em ratos

Aqui, apresentamos um protocolo para apresentar um modelo do rato de fadiga central usando o modificado método de plataforma múltipla (MMPM).

Um rato do modelo de fadiga Central usando um modificado método de plataforma múltipla

Uma bateria de testes comportamentais abrangente das habilidades motoras, humor — incluindo a interação social, depressão e ansiedade — e cognição destina-se a avaliação repetida das alterações comportamentais relacionadas à neurodegeneração em camundongos.

Uma bateria de testes comportamentais para a avaliação repetida das habilidades motoras, humor e cognição em ratos

Este artigo fornece um protocolo simplificado e estandardizado para a indução do comportamento depressivo-como em ratos cronicamente imobilizados usando um restringidor. Além disso, explicam-se comportamentos e técnicas fisiológicas para verificar a indução da depressão.

Um protocolo de estresse de imobilização crônica para induzir o comportamento semelhante à depressão em camundongos

O modelo de rato de desespero crônico (MDL) da depressão consiste em sessões repetitivas de natação forçada e outra fase de natação retardada como leitura. Representa um modelo adequado para a indução de um estado crônico depressivo estável por pelo menos 4 semanas, para avaliar intervenções de tratamento subcrático e agudo.

Modelos Animais de Depressão - Modelo de Desespero Crônico (MDL)

Este artigo apresenta um protocolo para a indução de um modelo único de transtorno bipolar em ratos que captura tanto o comportamento semelhante à mania quanto o depressivo.

Desenvolvendo um modelo de rato para transtorno bipolar

Este protocolo descreve o estabelecimento de um modelo de rato para depressão pós-AVC (PSD) combinando oclusão da artéria cerebral média (MCAO) com estresse leve crônico, contenção comportamental e isolamento de alojamento, além da avaliação dos efeitos terapêuticos da prescrição Yi-nao-jie-yu (YNJYP) por meio de testes comportamentais.

Efeito da Prescrição Yi-Nao-Jie-Yu na Depressão Pós-AVC em ratos usando Oclusão da Artéria Cerebral Média Combinada com Contenção Comportamental

Esse protocolo fornece uma estrutura para avaliar mudanças comportamentais induzidas pelo estresse em Drosophila melanogaster. Combinar ensaios complementares permite quantificar atividade, exploração e tomada de decisão para moscas individuais. A abordagem é flexível e pode ser adaptada a uma ampla gama de estudos que investigam biologia do estresse, metabolismo e função neurocomportamental.

Fenotipagem Comportamental Multimodal de Estados Semelhantes à Depressão Induzidos pelo Estresse em Drosophila melanogaster

Aprenda o teste de natação forçada para avaliar comportamento depressivo em roedores usando camundongos. Este método permite testar a eficácia de antidepressivos e estudar os mecanismos da depressão em modelos pré-clínicos.

O Teste de Natação Forçada como um modelo de Depressive-like Comportamento

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