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DOI: 10.3791/52652-v
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A análise das propriedades fisiológicas dos neurônios sensoriais olfativos ainda enfrenta limitações técnicas. Aqui, nós os registramos por meio de patch-clamp perfurado em uma preparação intacta do epitélio olfatório em camundongos direcionados ao gene. Esta técnica permite a caracterização das propriedades da membrana e respostas a ligantes específicos de neurônios que expressam receptores olfativos definidos.
O objetivo geral deste procedimento é medir as mudanças nas propriedades da membrana dos neurônios sensoriais olfativos em resposta a estimulantes de odor. Isso é feito dissecando primeiro o epitélio olfatório e transferindo-o para uma câmara perfundida. O segundo passo é localizar e escolher um OSN de interesse ao microscópio.
O botão dendrítico do OSN escolhido é então fixado e analisado enquanto é estimulado com odores. Em última análise, o clampeamento perfurado de botões dendríticos OSN caracteriza as propriedades funcionais do OSN no nível da membrana. Este método pode ajudar a abordar questões-chave nos campos olfativos, como o registro de neurônios olfativos, sensoriais, expressando receptores de arte de odor definidos, e também gravações de patch clamp.
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