Name: Quantificação de Proteção Neurovascular sequência repetitiva Hypoxic Pré-condicionamento e Transient Oriente oclusão da artéria cerebral em ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-04T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 48 s
Description: Aprenda a quantificar a neuroproteção em camundongos usando pré-condicionamento hipóxico repetitivo e oclusão da artéria cerebral média. Este método mede simultaneamente o volume do infarto e a integridade da barreira hematoencefálica.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Agradecimentos especiais ao laboratório Gidday por seu trabalho no desenvolvimento do protocolo RHP, bem como ao Neuro-Models Facility (UTSW) por sua assistência nas cirurgias tMCAo. Este trabalho foi apoiado por doações da American Heart Association (AMS), The Haggerty Center for Brain Injury and Repair (UTSW; AMS) e Fundação de Pesquisa de Paralisia Espástica do Distrito de Illinois-Eastern Iowa da Kiwanis International (JMG).

Os autores não têm nada a divulgar.

Uma única exposição à hipóxia sistêmica (ou seja, 2 horas de 11% O 2) em camundongos &quot;transitoriamente&quot; protege o cérebro de tMCAO, 29 ou seja, a resposta epigenética ao desafio hipóxico pré-condicionamento é de curta duração, eo fenótipo linha de base é restaurada dentro dias. Apresentações repetitiva do estímulo pré-condicionamento hipóxico alargar drasticamente a duração do fenótipo neuroprotector. 6 Muitos estudos têm demonstrado que a frequência, amplitude e duraç...

Como a principal causa de incapacidade em adultos e a quarta principal causa de morte, acidente vascular cerebral é um dos estados patológicos mais debilitantes que afectam a população adulta dos Estados Unidos. 1 Os modelos animais de acidente vascular cerebral permitir a investigação experimental de novos métodos de reduzir a lesão isquémica e melhorar a recuperação pós-acidente vascular cerebral. Uma nova avenida para tal investigação translacional é pré-condicionamento. Pré-condicionamento é o uso intencional de um estímulo não prejudicial para reduzir a lesão a partir de uma subsequente e mais grave, ferimento. 2 o pré-condicionamento hipóxica foi mostrado para produzir alterações pleiotrópicos no cérebro que fornecem protecção contra derrame em tanto in vivo e in vitro . 3 No entanto, uma única exposição à hipóxia só oferece neuroproteção de curto prazo, induzindo menos de 72 horas de tolerância contra a isquemia em ratos adultos. 4 Mesmo depois de quatro semanas de 14 horas exposição diária à hipóxia hipobárica, Lin et al. found neuroproteção que só foi sustentado por uma semana. 5 hipóxico pré-condicionamento repetitivo (RHP) é caracterizada por variações estocásticos em frequência, duração e intensidade da exposição hipóxia. Em contraste com um desafio único de pré-condicionamento, RHP induz um fenótipo cerebroprotective que dura até oito semanas em ratinhos. 6 RHP redução dos volumes de enfarte, barreira sangue-cérebro (BBB) ​​uma ruptura, inflamação vascular, e a diapedese de leucócitos para semanas após a última exposição hipóxica . RHP especificamente redução da inflamação no cérebro isquémico por redução de células T, monócitos, e populações de macrófagos, mantendo ao mesmo tempo as populações de células B no hemisfério isquémico. 7 Na verdade, RHP induziu um fenótipo imunossupressora em ratos antes de qualquer lesão do SNC, incluindo acidente vascular cerebral. As células B tratadas com RHP isolados a partir de ratos saudáveis ​​tratados com RHP exibiram um fenótipo anti-inflamatório único, com uma regulação negativa tanto de apresentação de antigénio e produção de anticorpos. Oredução global nos mecanismos imunes adaptativas pró-inflamatórios faz RHP uma excelente metodologia para induzir imunossupressão endógena para não só as doenças inflamatórias do SNC-específicos, mas também lesões ou doenças sistémicas modelos que incluem uma patologia pró-inflamatória. RHP reduz tanto o volume de enfarte e certificação interrupção na sequência de uma oclusão transiente da artéria cerebral média (tMCAO). Os modelos animais de acidente vascular cerebral, tais como a tMCAO comumente usados, melhorar dramaticamente a compreensão da patofisiologia de acidente vascular cerebral, bem como a concepção de Neurotherapeutics mais eficazes. Primeiro desenvolvido por Koizumi et al., Em 1986, o procedimento tMCAO 8 é um método amplamente utilizado de induzir acidente vascular cerebral em roedores e um dos métodos preferidos para a investigação de inflamação após a reperfusão. Como os métodos para tMCAO evoluir, o uso mais recente de filamentos revestidos com silicone reduzir ainda mais o risco de hemorragia subaracnóide em comparação com outros modelos 9,10 &lt;/ Sup&gt; e melhorar a confiabilidade, embora, infelizmente tMCAO muitas vezes produz uma grande variação de volumes de infarto. 11-13 A maioria desses estudos delinear regiões infarto em seções cerebrais coronais por coloração com cloreto de 2,3,5 trifeniltetrazólio (TTC), considerado um padrão-ouro para infarto quantificação, pois é uma maneira simples e barata de produzir resultados reproduzíveis vivas. TTC serve como um substrato de desidrogenases presentes na mitocôndria. Quando fatias de cérebro são expostos à solução de TTC, TTC é tomado selectivamente em células vivas, onde o seu produto de redução não-solúvel, formazano, precipita-se para uma cor vermelho escuro em mitocôndrias viáveis. Por causa da disfunção mitocondrial no tecido isquémico, este tecido permanece branco, permitindo a diferenciação do tecido danificado e saudável. 14 RHP também reduz a certificação perturbação no hemisfério isquêmico. 6 Portanto, a dupla quantificação da integridade BBB dentro da mesma bchuvas como o volume de enfarte baseada em TTC 15 determinações iria fornecer informações úteis sobre a eficácia plena da protecção endógena, e as relações causais entre potenciais BBB perturbações e infarto em animais tratados e não tratados. O afluxo de sangue periférico através de uma certificação interrompido, secundária a acidente vascular cerebral, aumenta populações de leucócitos, citocinas pró-inflamatórias, estresse oxidativo, edema vasogênico e transformação hemorrágica no hemisfério isquêmico, finalmente, aumentar as taxas de infecção e mortalidade em pacientes com acidente vascular cerebral isquêmico 16,17. Um método comum de medir a certificação ruptura em modelos animais é através de quantificação de azul de Evans (EB) vazamento de corante no cérebro. 15,18-21 EB liga-se selectivamente a albumina do soro, uma proteína globular (PM = 65 kDa) que não atravessa a certificação em animais não lesionados. 22 Seguindo acidente vascular cerebral isquémico, EB se infiltra no cérebro, e fluoresce a 620 nm, permitindo a medição da densidade óptica within o parênquima ferido perfundidos. 22 A densidade óptica é directamente proporcional à permeabilidade da BHE quando EB foi lavada para fora da vasculatura cortical post mortem por perfusão transcardíaca. Com o processamento imediato dos cérebros TTC-corada em animais com a administração EB, tanto o volume do enfarte e a certificação perturbação pode ser quantificada de forma eficaz. Deve notar-se, no entanto, que a lesão neuronal e a certificação perturbação não são processos concomitantes no cérebro pós-AVC, 23,24 de modo que a selecção de tempo de sacrifício é uma consideração importante. O protocolo que se segue detalha a RHP método, o método tMCAO para induzir uma oclusão arterial temporária que modela oclusões da artéria cerebral média em pacientes humanos, os métodos histológicos e para a determinação dupla neuronais e vasculares terminais lesão do derrame. TTC mede a morte celular e danos nos tecidos cumulativo, o que permite a quantificação de um enfarte vol globalume, enquanto EB prevê a quantificação dos danos hemisférica BBB.

<table><tbody><tr><td>Medidores de vazão, reguladores</td><td>VetEquip, Inc</td><td>Pedido especial</td><td>Quatro medidores de vazão são conectados a um tubo de PVC flexível de 6,0 mm que se conecta à porta de entrada em cada câmara de indução com um conector fêmea de plástico. Esses medidores de vazão são aparafusados a uma barra de metal de 6,5" x 1" x 1". Esta barra de metal é aparafusada a um manômetro MI-246-P com uma saída DISS. Este manômetro e equipamento medidor de vazão pode ser conectado a cada novo cilindro de gás com uma chave inglesa.</td></tr><tr><td>21% O2 tanque</td><td>AirGas</td><td>OX USP200</td><td></td></tr><tr><td>11% O2 tanque</td><td>AirGas</td><td>Pedido</td><td></td>especial</tr><tr><td>8% O2 tanque&nbsp;</td><td>Pedido</td><td></td>especial <td>de AirGas</td></tr><tr><td>15 L câmaras de indução</td><td>VetEquip</td><td>941454</td><td></td></tr><tr><td>Moor Laber Dopper Flow&nbsp;</td><td>Moor Instruments&nbsp;</td><td>sonda de 0,8 mm de diâmetro moorVMS-LDF1-HP</td><td>&nbsp;</td></tr><tr><td>Iluminador de Alta Intensidade</td><td>Microscópio Estéreo Zoom Nikon</td><td>NI-150</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>NIkon</td><td>SMZ800</td><td>Outros microscópios cirúrgicos podem ser usados.&nbsp;</td></tr><tr><td>Kent Scientific Right Temperature CODA</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>Descontinuado</td><td>A substituição recomendada é o PhysioSuite com Monitoramento de Temperatura RightTemp e Controle Homeotérmico (Kent Scientific, #PS-RT).</td></tr><tr><td>Hovabator Incubator</td><td>Stromberg's</td><td>2362-E</td><td>Nosso modelo é o 2362N. 2362E é um modelo posterior e inclui um termostato eletrônico.</td></tr><tr><td>V010 Sistema de anestesia</td><td>VetEquip</td><td>901807</td><td>Inclui: mangueira de oxigênio de alta pressão de dez pés, estrutura, medidor de vazão, conjunto de descarga de oxigênio, vaporizador, circuito de respiração, câmara, narizes, tubulação de evacuação de gases residuais e dois filtros VapoGuard</td></tr><tr><td>250 ml de isoflurano&nbsp;</td><td>Butler Schein</td><td>NDC-11695</td><td></td></tr><tr><td>D-6 Vet Trim Animal Aparador Sem Fio&nbsp;</td><td>Andis&nbsp;</td><td>#23905</td><td>Lâminas de substituição estão disponíveis na Andis (#23995)</td></tr><tr><td>Betadine&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>19-898-867&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Q-tips</td><td>Vários vendedores&nbsp;</td><td>Número de catálogo não disponível&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Almofadas de Gaze</td><td>Fisher Scientific</td><td>67622</td><td></td></tr><tr><td>Campo cirúrgico</td><td>Fisher Scientific</td><td>GM300&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Suturas de Seda&nbsp;</td><td>Look/Div Surgical Specialties</td><td>SP115</td><td></td></tr><tr><td>Suturas de Nylon</td><td>Look/Div Surgical Specialties</td><td>SP185</td><td></td></tr><tr><td>Durmont #5 fórceps (2)&nbsp;</td><td>Ferramentas de Belas Ciências&nbsp;</td><td>11251-35</td><td>45&deg;</td></tr><tr><td>Tesoura Cirúrgica</td><td>Ferramentas de Ciência Fina</td><td>14028-10</td><td></td></tr><tr><td>3 mm Vannas</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>INS600177</td><td>Hartman</td></tr><tr><td>Hemostats&nbsp;</td><td>Ferramentas Científicas Finas</td><td>13002-10</td><td></td></tr><tr><td>Filamentos de Oclusão Pedido</td> de <td>Especialidade</td><td>da Universidade de Washington</td><td>Os filamentos são revestidos com silicone na Universidade de Washington e fornecidos às instalações da UTSW por uma taxa.</td></tr>Papel de Filtro <tr><td>Evans Blue</td><td>Sigma Aldritch</td><td>E2129-10G</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Sigma Aldritch</td><td>WHA1001150</td><td>150 mm, círculos, Grau 1&nbsp;</td></tr><tr><td>Barcos de Pesagem</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-202-101</td><td>2.5" de diâmetro</td></tr><tr><td>0.9% Injeção de Cloreto de Sódio USP&nbsp;</td><td>Baxter Pharmaceutics&nbsp;</td><td>2B1321</td><td></td></tr><tr><td>Seringa de insulina de 0,3 cc com agulha de 29 gauge</td><td>Becton Dickinson Labware</td><td>309301</td><td></td></tr><tr><td>Flat bottom restrain&nbsp;</td><td>Braintree Scientific&nbsp;</td><td>FB&nbsp; M</td><td>2.0" diâmetro</td></tr><tr><td>TTC</td><td>Sigma</td><td>T8877</td><td></td></tr><tr><td>10x PBS, pH 7.4</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP399-20</td><td></td></tr><tr><td>Banho-maria</td><td>Vários vendedores&nbsp;</td><td>Número de catálogo não disponível&nbsp;</td><td>Os tubos de cintilação com TTC podem ser mantidos manualmente em água morna corrente como alternativa ao banho-maria.</td></tr><tr><td>Placa de isopor</td><td>Vários vendedores&nbsp;</td><td>Número de catálogo não disponível&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Kit de Seringa Grande</td><td>PumpSystems Inc</td><td>P-SYRKIT-LG</td><td></td></tr><tr><td>Bomba de Perfusão</td><td>PumpSystems Inc</td><td>NE-300&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Seringa de 60 cc</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9203256</td><td></td></tr><tr><td>conjunto de infusão alada de calibre 27</td><td>Kawasumi Laboratories, Inc</td><td>D3K1-25G 1</td><td></td></tr><tr><td>frasco de cintilação de 20 ml</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-367-126</td><td></td></tr><tr><td>Espátula de aço inoxidável</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-373-25A</td><td></td></tr><tr><td>Alto acrílico 1.0 mm cérebro de camundongo, coronal</td><td>CellPoint Científico&nbsp;</td><td>Número de catálogo não disponível&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Lâminas de aço inoxidável de 0,21 mm, 25 pk</td><td>CellPoint Scientific&nbsp;</td><td>Número de catálogo não disponível&nbsp;</td><td>As lâminas de criostato reutilizáveis são uma alternativa barata.</td></tr><tr><td>4% de paraformaldeído</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>SC-281692</td><td></td></tr><tr><td>Lâminas de microscópio Superfrost&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-15</td><td></td></tr><tr><td>HP Scanjet G4050</td><td>Vários vendedores&nbsp;</td><td>Número de catálogo não disponível&nbsp;</td><td>Outros scanners comerciais são adequados para esta etapa do protocolo.</td></tr><tr><td>ImagemJ&nbsp;</td><td>National Institute of Health</td><td>Número do catálogo não disponível&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Balança Analítica</td><td>Mettler Toledo</td><td>XSE 205U</td><td></td></tr><tr><td>Forno Compacto de Precisão&nbsp; &nbsp;</td><td>Thermo Scientific&nbsp;</td><td></td><td></td>PR305225M</tr><tr><td>tubos de microcentrífuga de 1,7 ml (Eppendorfs)</td><td>Denville Scientific&nbsp;</td><td>C2170</td><td></td></tr><tr><td>Formamida</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP228-100</td><td></td></tr><tr><td>Placas de 96 poços</td><td>Fisher Scientific</td><td>07-200-9</td><td></td></tr><tr><td>Epoch Microplate Spectrophotometer&nbsp;</td><td>BioTek&nbsp;</td><td>Número de catálogo não disponível&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

quantificação de proteção neurovascular sequência repetitiva hypoxic pré-condicionamento e transient oriente oclusão da artéria cerebral em ratos

Quantification of Neurovascular Protection Following Repetitive Hypoxic Preconditioning and Transient Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Modelos animais experimentais de acidente vascular cerebral são ferramentas inestimáveis ​​para a compreensão do AVC e desenvolvendo estratégias de tratamento mais eficazes. Um protocolo de 2 semanas para o pré-condicionamento repetitivo hipóxica (RHP) induz a proteção a longo prazo contra a lesão do sistema nervoso central (SNC) em um rato modelo de acidente vascular cerebral isquêmico focal. RHP consiste em 9 exposições estocásticos a hipoxia, que variam em termos de duração (2 ou 4 h) e intensidade (8% e 11% de O 2). RHP reduz os volumes de enfarte, barreira sangue-cérebro (BBB) ​​uma ruptura, e a resposta inflamatória pós-derrame durante semanas após a última exposição a hipoxia, sugerindo uma indução de longo prazo de um fenótipo do SNC de protecção endógena. A metodologia para a quantificação dual de volume do enfarte e a certificação perturbação é eficaz na avaliação da protecção neurovascular em ratinhos com RHP ou outros neuroprotectores putativos. Camundongos adultos machos Swiss Webster foram pré-condicionados por RHP ou exposições de duração equivalente a 21% de O <sub&gt; 2 (ou seja, sala de ar). A oclusão da artéria 60 min transitória cerebral média (tMCAO) foi induzida duas semanas após a última exposição hipóxica. Tanto a oclusão e reperfusão foram confirmados por transcraniana dopplerfluxometria a laser. Vinte e duas horas após a reperfusão, Azul de Evans (EB) foi administrado por via intravenosa através de uma injecção na veia da cauda. 2 horas mais tarde, os animais foram sacrificados por overdose e secções do cérebro foram corados com isoflurano 2,3,5- cloreto de trifeniltetrazólio (TTC). Os volumes de enfarte foram então quantificadas. Em seguida, EB foi extraído do tecido ao longo de 48 horas para determinar BBB interrupção após tMCAO. Em resumo, RHP é um protocolo simples, que pode ser replicado, com um custo mínimo, para induzir protecção endógena neurovascular a longo prazo de uma lesão acidente vascular cerebral em ratos, com o potencial de translação para outros estados de doença pró-inflamatórias baseados em CNS e sistémicas.

Este estudo incluiu 25 ratinhos Swiss Webster machos que tinham 10 semanas de idade no início da randomização em RHP (n = 10) ou 21% de O 2 (n = 15) grupos. Duas semanas após a exposição final RHP, procedimentos cirúrgicos foram realizados, com grupos cegos e contrabalançadas entre os dias. Seguindo tMCAO, um rato morreu durante a recuperação pós-operatória e um rato foi excluído do estudo porque não cumpria o critério de reperfusão CBF. Ambos os ratos foram excluídos do grupo O 2 de 21%...

Este protocolo descreve o pré-condicionamento hipóxico repetitivo ou breves exposições à hipóxia sistêmica que reduzem os volumes de infarto e a ruptura da barreira hematoencefálica após oclusão transitória da artéria cerebral média em camundongos. Ele também detalha a quantificação dupla do volume do infarto e da ruptura da barreira hematoencefálica após o AVC para avaliar a eficácia da proteção neurovascular.

Quantificação de Proteção Neurovascular sequência repetitiva Hypoxic Pré-condicionamento e Transient Oriente oclusão da artéria cerebral em ratos

Experimental animal models of stroke are invaluable tools for understanding stroke pathology and developing more effective treatment strategies. A 2 week ...

O objetivo geral do experimento a seguir é quantificar a neuroproteção após o condicionamento hipóxico repetitivo ou RHP, medindo simultaneamente o volume do infarto e a integridade da barreira hematoencefálica. Isso é alcançado submetendo camundongos a nove exposições estocásticas à hipóxia, que variam em duração e intensidade, a fim de proporcionar proteção neurovascular contra o acidente vascular cerebral. Em seguida, o acidente vascular cerebral é induzido no camundongo, seguido pela injeção de azul de Evans.O azul de Evans liga-se seletivamente à albumina e permite a quantificação da ruptura da barreira hematoencefálica após o sacrifício do animal, subsequente à injeção. O cérebro é removido e corado com TTC para quantificar o volume do infarto. Os resultados demonstram os benefícios neuroprotetores do condicionamento prévio repetitivo à hipóxia em camundongos após acidente vascular encefálico isquêmico.A principal vantagem dessa técnica em relação a métodos existentes, como o condicionamento hipóxico com exposição única, é que o RHP produz neuroproteção por pelo menos oito semanas em camundongos. Esse método de dupla quantificação pode responder perguntas fundamentais na pesq

quantification-neurovascular-protection-following-repetitive-hypoxic

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Existem evidências, que o pré-condicionamento isquêmico (PC) - um desafio isquêmico não-prejudicial ao cérebro - confere uma proteção transitória a um insulto isquêmico prejudicial subseqüente. Nós estabelecemos a oclusão da artéria carótida comum bilateral (BCCAO) como um estímulo pré-condicionamento isquémico para induzir tolerância precoce (TI) para a isquemia cerebral focal transiente (induzida pela oclusão da artéria cerebral média, MCAO) em C57BL6 / J mice.

Oclusão bilateral artéria carótida comum como um estímulo pré-condicionamento adequados para induzir a tolerância isquêmica início da Isquemia Cerebral Focal

Fonte: Zheng, Y., et al. Modelos experimentais para estudar a neuroproteção do pós-condicionamento ácido contra isquemia cerebral. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra a aplicação do pós-condicionamento ácido (APC) para avaliar seus efeitos neuroprotetores contra lesão isquêmica em um modelo de camundongo de oclusão da artéria cerebral média (MCAO). Ele descreve as etapas envolvidas na reperfusão no modelo MCAO e a aplicação de APC durante a reperfusão para mitigar a excitotoxicidade, o...

 Avaliação dos efeitos neuroprotetores do pós-condicionamento ácido em um modelo de camundongo com isquemia cerebral

Fonte: Poinsatte, K., et al., Quantificação da proteção neurovascular após pré-condicionamento hipóxico repetitivo e oclusão transitória da artéria cerebral média em camundongos. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra o método de pré-condicionamento hipóxico repetitivo (RHP) expondo um camundongo a ciclos de hipóxia controlados antes de induzir um acidente vascular cerebral isquêmico. O experimento avalia seus efeitos na estabilidade da barreira hematoencefálica, adaptação neuronal e...

Adaptação neuronal ao pré-condicionamento hipóxico repetitivo em camundongos

Fonte: Lee, S. E., et al. Avaliação dos efeitos neuroprotetores do extrato de Glycyrrhizae Radix et Rhizoma usando um modelo transitório de camundongo com oclusão da artéria cerebral média. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra o procedimento para avaliar o efeito neuroprotetor de um composto de teste em um modelo de camundongo com oclusão da artéria cerebral média. O composto entra no cérebro, previne a morte neuronal e reduz o volume do infarto, confirmando seu efeito neuroprotetor em...

Avaliando os efeitos neuroprotetores de um composto de teste em um modelo de camundongo com oclusão da artéria cerebral média

A fim de compreender a patofisiologia de acidente vascular cerebral, é importante o uso de modelos fiáveis. Este documento descreve um dos modelos de AVC mais utilizados em camundongos, denominado o meio modelo de oclusão da artéria cerebral (MCAo) (também denominado o filamento intraluminal ou modelo de sutura) com a reperfusão.

Abordagem cirúrgica para oclusão da artéria cerebral média e reperfusão induzida por acidente vascular cerebral em ratos

oclusão cirúrgica de um ramo distal da artéria cerebral média (MCAo) é um modelo usado com freqüência em pesquisa acidente vascular cerebral experimental. Este manuscrito descreve a técnica básica de MCAo permanente, combinada com a inserção de uma janela craniana lateral, que oferece a oportunidade para microscopia intravital longitudinal em ratinhos.

Lateral Crônica Cranial Janela Preparação Ativa In Vivo Observação Após Distal Middle Cerebral Oclusão da Artéria em Ratos

Descrevemos um modelo de camundongo de AVC induzido pela oclusão da artéria cerebral média usando uma sutura revestida de silicone. O protocolo pode ser aplicado para induzir oclusão permanente ou isquemia temporária, seguida de reperfusão.

Indução de Acidente Vascular Cerebral Isquêmico e isquemia-reperfusão em ratos usando a técnica de oclusão da artéria Oriente e Visualização de infarto Área

O pós-condicionamento ácido protege contra a isquemia cerebral. Aqui apresentamos dois modelos para executar a APC. Eles são obtidos, respectivamente, transferindo fatias corticostriatais para o tampão ácido após a privação de oxigênio-glicose in vitro e pela inalação de 20% de CO 2 após a oclusão da artéria cerebral média in vivo .

Modelos experimentais para estudar a neuroproteção do pós-condicionamento ácido contra a isquemia cerebral

Para investigar a fisiopatologia do AVC, é criado um modelo do rato de isquémia-reperfusão cerebral. Nós distalmente ligate da artéria cerebral média direita e artéria carótida comum direita e restaurar o fluxo sanguíneo após 10 ou 40 min de isquemia.

Modelo de Mouse de dois vasos oclusão de isquémia-reperfusão Cerebral

Este protocolo descreve o modelo de isquemia cerebral focal transitória em camundongos através da oclusão intraluminal da artéria cerebral média. Além disso, exemplos de avaliação de resultados são mostrados usando ressonância magnética e testes comportamentais.

Modelo de Oclusão Transitória da Artéria Cerebral Média do Acidente Vascular Encefálico

Aqui, apresentamos um protocolo para estabelecer um modelo de oclusão da artéria cerebral média distal (dMCAO) por meio de eletrocoagulação transcraniana em camundongos C57BL/6J e avaliar o comportamento neurológico subsequente e as características histopatológicas.

Indução de AVC Isquêmico Agudo em Camundongos Usando a Técnica de Oclusão Distal da Artéria Média

Aprenda a quantificar a neuroproteção em camundongos usando pré-condicionamento hipóxico repetitivo e oclusão da artéria cerebral média. Este método mede simultaneamente o volume do infarto e a integridade da barreira hematoencefálica.

Quantificação de Proteção Neurovascular sequência repetitiva Hypoxic Pré-condicionamento e Transient Oriente oclusão da artéria cerebral em ratos (Vídeo) | JoVE Journal

Quantificação de Proteção Neurovascular sequência repetitiva Hypoxic Pré-condicionamento e Transient Oriente oclusão da artéria cerebral em ratos

Explorar mais vídeos