Name: O uso de alta resolução Termografia Infravermelha (Hrit) para o Estudo da Ice Ice nucleação e propagação de plantas (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 36 s
Description: Aprenda a usar termografia infravermelha de alta resolução para visualizar a formação e propagação de gelo em plantas. Este método demonstra o papel de agentes nucleantes externos no processo de congelamento.

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Esta pesquisa foi financiada pelo Fundo de Ciência Austríaco (FWF): P23681-B16.

1. Preparação de materiais de plantas <ol><li> Utilize qualquer folhas ou plantas inteiras de material sujeito planta (Hosta spp. Ou Phaseolus vulgaris). </li></ol> 2. Preparação de soluções aquosas contendo Ice nucleação ativos (INA) Bactérias <ol><li> Culturas da bactéria INA, Pseudomonas syringae (Estirpe Cit-7) em placas de Petri a 25 ° C em agar Pseudomonas F preparada com 10 g / L de glicerol a 100% por direcção do fabricante. </li><li> Após culturas cresceram suficientemente, lugar a 4 ° C até ser necessário, mas manter a 4 ° C durante dois dias antes de garantir um elevado nível de actividade de nucleação de gelo. </li><li> Raspe bactérias de uma única placa a partir da superfície do agar com um plástico, descartáveis ​​ou reutilizáveis ​​espátula de metal no momento da utilização e em lugar de 10-15 ml de água desionizada numa cuvete descartável de 25 ml. A concentração deve estar no intervalo de 1 x 07-1 outubro x 10 9 · </sup&gt; Ml -1. A solução aparece nublado. Não há necessidade de se confirmar a concentração, utilizando um hemocitómetro ou um espectrofotómetro, tal como concentração precisa ser apenas aproximados. </li><li> Vortex a cuvete para um mínimo de 10 segundos para distribuir as bactérias. Nota: A concentração específica da mistura INA resultante não é importante e o protocolo descrito irá fornecer mais do que um nível adequado de actividade de nucleação de gelo. Esta mistura de bactérias INA e água será usada mais tarde nos experimentos de nucleação. </li></ol> 3. configuração de uma experiência de congelação <ol><li> Coloque a câmara de infravermelhos de alta resolução (SC-660) no interior da caixa de protecção de acrílico de modo a que os projectos de lente através de uma abertura na parte da frente da caixa e os fios de ligação da câmara a uma saída do dispositivo portátil ou gravação através da abertura traseira da caixa . Fixe a tampa da caixa e coloque a caixa de dentro da câmara ambiental ou freezer em um local que vai tudoow o material sujeito planta a ser visto. <ol><li> Fornecer um fundo escuro em torno do material vegetal, forrando as paredes da câmara com papel de construção preto para impedir a interferência de energia infravermelha refletida. </li><li> Montar a câmara com iluminação LED para minimizar o aquecimento da fonte de luz quando gravar imagens em comprimentos de onda visíveis é necessária. Apenas um mínimo de iluminação, tal como um armário de luz operado por bateria ou outro dispositivo de LED pequeno, é necessário para as plantas a ser visível pela câmara. <ol><li> Uma vez que as imagens visíveis do material sujeito planta são tomadas, desligue a iluminação LED. Distribua todas as conexões externas com fio (conexão firewire de computador, cabo de alimentação, etc.) para a câmera através de uma porta ou outra abertura na câmara. </li></ol></li><li> Preencha qualquer espaço extra na porta ou abertura com material isolante de espuma para evitar ou reduzir os gradientes de temperatura dentro da câmara. Ajustar a temperatura inicial da câmara a 1 ° C. </li></ol></li><li> Alinhe plantas ou partes de plantas para que o material vegetal é no campo de visão da câmera-e o material vegetal é visível na tela de visualização remota ou dentro do software escolhido. </li><li> Permitir que as plantas atinjam a 1 ° C durante 30 min a 1 hora, dependendo do tamanho do material de planta, antes de iniciar uma experiência de congelação controlada. Isto garante que a temperatura da planta não vai ficar para trás da temperatura do ar por diversos graus uma vez que o experimento de congelação é iniciada. A equilibração é conseguida quando a temperatura do material vegetal é a menos de 0,5 ° C de temperatura do ar. <ol><li> Coloque uma camada de isolamento de isopor no topo do solo de vasos de plantas se as plantas em vaso são utilizados. Uma vez que as plantas têm equilibrada, iniciar o arrefecimento da câmara. Nota: A camada de isolamento sobre a superfície do solo do vaso reduz a quantidade de perda de calor continuou a partir do vaso ao ar que envolve a planta, e impede que as raízes de freezing, dado que isto não ocorrem tipicamente durante um evento de geada na natureza devido ao enorme reservatório de calor residual presente no solo. </li></ol></li><li> Defina os parâmetros da câmera desejados (paleta de cor, faixa de temperatura, áreas específicas de interesse, etc.), como discutido na 3.4.1-3.4.4. <ol><li> Selecione a paleta de arco-íris para exibir as variações de temperatura enquanto visualiza a imagem ao vivo. </li><li> Definir a amplitude de temperatura de 5 ° C por ajustamento da barra de temperatura localizado logo abaixo da imagem no software. </li><li> Escolha a escala linear (algoritmo), para converter os dados de infravermelhos para a imagem de cor falsa, tal como definido pela paleta seleccionados (arco-íris) e definir o intervalo de temperatura de 5 ° C e para controlar automaticamente com base na imagem. Alternativamente, ajustar o intervalo definido manualmente durante a realização do experimento. <ol><li> Utilizar a temperatura de um ponto específico ou uma temperatura média dentro da área definida de interesse fornecida pelo softwsão. Recuperar os dados de temperatura de todos os pixels da sequência de vídeo gravado ou da informação embutido no arquivo de imagem. Figura 3 mostra uma tela típica de dentro de software ResearchIR. </li></ol></li><li> Posicionar um cursor num local dentro do tecido da planta que representa um ponto específico de interesse. Definir a área de interesse como pontos (1 -3 pixels de tamanho), caixas, linhas, círculos ou elipses. Várias combinações de pontos ou formas pode ser localizada sobre a imagem. </li></ol></li><li> Gravação de uma seqüência de vídeo <ol><li> Ajuste a câmera para gravar a 60 Hz e para a gravação de ser parado manualmente. </li><li> Indicar o local no computador ou disco rígido externo onde o ficheiro de vídeo gravado será colocado. </li><li> Iniciar a gravação. Nota: A gravação de um disco rígido externo é altamente recomendável uma vez que grandes arquivos de vídeo serão gerados. Arquivos de vídeo gravados podem ser mais tarde editada para conter somente a parte que contém o neinformações neces-. Isto irá reduzir significativamente o tamanho do arquivo. </li><li> Diminuir a temperatura da câmara de incrementos de 0,5 -1,0 ° C. Espere até que a temperatura da planta equilibra com a temperatura do ar e, em seguida, baixar a temperatura novamente por 0,5-1,0 ° C. Dependendo da massa de tecido da planta a ser observada e a sua morfologia, de equilíbrio pode levar de 10 a 15 min. Assim, dando uma velocidade de arrefecimento de cerca de 4 ° C / h. </li><li> Continuar dessa maneira até que a planta congela e observações estão concluídas. Terminar a gravação quando o processo de congelação foi concluída. Nota: O tecido da planta se ter equilibrado com a temperatura do ar quando o material de planta e de fundo são da mesma cor, uma vez que estão à mesma temperatura. Uma vez que a temperatura de fundo e a temperatura do tecido da planta são os mesmos, pode ser difícil de visualizar o material vegetal até a temperatura diminuir de novo e não há diferencial de temperatura entre o tecido da planta e umatemperatura IR. </li></ol></li></ol>

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Os autores não têm concorrentes interesses financeiros ou conflitos de interesse.

A água tem a capacidade de supercool a temperaturas bem abaixo de 0 ° C e a temperatura a que a água irá congelar podem ser bastante variável. 36 A temperatura limite para a super-ref rigeração de água pura é de cerca de -40 ° C e é definido como o ponto de nucleação homogénea. Quando a água congela a temperaturas mais altas do que -40 ° C que é provocada pela presença de heterogénea nucleadores que permitem pequenas embriões de gelo para formar o qual, em seguida, servir como um catalisador para a formação d...

Congelamento temperaturas que ocorrem quando as plantas estão em crescimento activo pode ser letal, particularmente se a planta tem tolerância ao congelamento pouca ou nenhuma. Tais eventos geada muitas vezes têm efeitos devastadores sobre a produção agrícola e também podem desempenhar um papel importante na formação da estrutura da comunidade em populações naturais de plantas, especialmente em alpino, ecossistemas sub-árcticas e árcticas 1-6. Os episódios de geadas da Primavera graves tiveram grandes impactos sobre a produção de frutos nos EUA e América do Sul nos últimos anos 7-9 e foram exacerbadas pelo início precoce de tempo quente seguido por mais típicas baixas temperaturas médias. O clima quente no início induz botões para se abrirem, ativando o crescimento de novos brotos, folhas e flores todos os que têm muito pouca ou nenhuma tolerância geada 1,3,10-12. Tais padrões climáticos erráticos foram relatados para ser um reflexo direto das mudanças climáticas em curso e espera-se que seja um padrão de tempo comum para as foresfuturo eeable 13. Os esforços para proporcionar técnicas de gestão econômica, eficazes e respeitadores do ambiente ou agrotóxicos que podem fornecer tolerância a geadas aumento tiveram sucesso limitado por uma série de razões, mas isso pode ser atribuído em parte à natureza complexa do congelamento tolerância e mecanismos de prevenção de congelamento nas plantas. 14 Os mecanismos adaptativos associados com a sobrevivência geada em plantas têm sido tradicionalmente divididos em duas categorias, a tolerância ao congelamento e evitar o congelamento. A categoria anterior está associada com mecanismos bioquímicos regulados por um conjunto específico de genes que permitem que as plantas para tolerar as tensões associadas com a presença e o efeito desidratante de gelo nos seus tecidos. Enquanto a última categoria é normalmente, mas não exclusivamente, associado a aspectos estruturais de uma planta que determinam se, quando e onde as formas de gelo em uma planta 14. Apesar da prevalência de evitar congelamento como um anúnciomecanismo aptive, pouca pesquisa tem sido dedicada nos últimos tempos para a compreensão dos mecanismos subjacentes e regulação de evitar congelamento. O leitor é remetido para uma revisão recente 15 para maiores detalhes sobre este assunto. Enquanto a formação de gelo a baixas temperaturas pode parecer um processo simples, muitos factores que contribuem para a determinação da temperatura à qual o gelo nucleia em tecidos de plantas e como se propaga dentro da planta. Parâmetros como a presença de extrínseco e intrínseco nucleadores de gelo, contra eventos nucleação homogênea heterogêneos, térmico-histerese (anticongelante) proteínas, a presença de açúcares específicos e outras osmolytes, e uma série de aspectos estruturais da planta pode desempenhar um importante papel no processo de congelação em plantas. Colectivamente, estes parâmetros influenciam a temperatura à qual uma planta congela, onde o gelo é iniciada e como ele cresce. Eles podem também afectar a morfologia dos cristais de gelo resultantes.Vários métodos têm sido utilizados para estudar o processo de congelação em plantas sob condições de laboratório, incluindo espectroscopia de ressonância magnética nuclear (RMN) 16, ressonância magnética (MRI) 17, crio-microscopia 18-19, e microscopia eletrônica de varredura de baixa temperatura (LTSEM ). 20 Congelamento de plantas inteiras em ambientes de laboratório e campo, no entanto, tem sido principalmente monitorizadas com termopares. A utilização de termopares para estudar congelamento baseia-se na libertação de calor (entalpia de fusão), quando a água passa por uma transição de fase do estado líquido para um sólido. A congelação é então gravada como um evento exotérmico. 21-23 Mesmo que os termopares são o método típico de escolha no estudo de congelação em plantas, a sua utilização tem muitas limitações que limitam a quantidade de informação obtida durante a ocorrência da congelação. Por exemplo, com termopares é difícil quase impossível de determinar onde o gelo é iniciado em plantas, como se propaga,se propaga a uma taxa ainda, e se alguns tecidos permanecem livres de gelo. Avanços em termografia infravermelha de alta resolução (Hrit) 24-27, no entanto, têm aumentado significativamente a capacidade de obter informações sobre o processo de congelação em plantas inteiras, especialmente quando usado em um modo diferencial de imagem. 28-33 No presente relatório, descrevem a utilização desta tecnologia para o estudo de vários aspectos do processo de congelação e vários parâmetros que afectam onde e gelo e em que a temperatura é iniciada em plantas. Um protocolo irá ser apresentada que vai demonstrar a capacidade da bactéria-nucleação de gelo-activo (INA), Pseudomonas syringae (Cit-7), para actuar como um nucleador extrínseca iniciar a congelação em uma planta herbácea a, uma temperatura abaixo de zero elevado. De alta resolução Infrared Camera O protocolo e exemplos documentados neste relatório utilizar uma alta resolução infravermelhoradiómetro de vídeo. O radiómetro (Figura 1) fornece uma combinação de imagens de espectro visível e infravermelho e dados de temperatura. A resposta espectral da câmera é na faixa de 7,5 a 13,5 mm e fornece 640 x 480 pixels de resolução. Espectro visível imagens geradas pelo construído em câmara pode ser fundido com IR-imagens em tempo real, o que facilita a interpretação de imagens complexas, térmicas. A gama de lentes para a câmera pode ser usada para fazer close-up e observações microscópicas. A câmera pode ser usada em modo stand-alone, ou interface e controlada com um laptop usando software proprietária. O software pode ser utilizado para se obter uma variedade de dados térmicos incorporados nos vídeos gravados. É importante notar que uma grande variedade de radiómetros infravermelhos estão disponíveis comercialmente. Portanto, é essencial que o pesquisador discutir a sua aplicação pretendida com um engenheiro de produto experiente e que o investigador testar a capacidade de qualquer específic radiômetro para fornecer as informações necessárias. O radiômetro de imagem usados ​​no protocolo descrito é colocado em uma caixa de acrílico (Figura 2) isoladas com isopor i n fim de dissuadir a exposição a condensação durante os protocolos de aquecimento e esfriamento. Essa proteção não é necessária para todas as câmeras ou aplicações.

<table><tbody><tr><td>Câmera Infravermelha</td><td>FLIR</td><td>SC-660</td><td>Muitos modelos disponíveis dependendo da aplicação</td></tr><tr><td>Software Analítico Infravermelho</td><td>FLIR</td><td>ResearchIR 4.10.2.5</td><td>$3,500</td></tr><tr><td>Pseudomonas syringae (cepa Cit-7)</td><td></td><td></td><td><a href="mailto:icelab@berkeley.edu">Gentilmente cedido pelo Dr. Steven Lindow, Universidade da Califórnia&nbsp; Berkeley icelab@berkeley.edu< / a ></td></tr> <tr><td>Pseudomonas Agar F</td><td>Fisher Scientific</td><td>DF0448-17-1</td><td></td></tr></tbody></table>

o uso de alta resolução termografia infravermelha (hrit) para o estudo da ice ice nucleação e propagação de plantas

The Use of High-resolution Infrared Thermography (HRIT) for the Study of Ice Nucleation and Ice Propagation in Plants

Eventos de congelamento que ocorrem quando as plantas estão crescendo ativamente podem ser um evento letal, principalmente se a planta não tiver tolerância ao congelamento. Esses eventos de geada geralmente têm efeitos devastadores na produção agrícola e também podem desempenhar um papel importante na formação da estrutura da comunidade em populações naturais de plantas, especialmente em ecossistemas alpinos, subárticos e árticos. Portanto, uma melhor compreensão do processo de congelamento em plantas pode desempenhar um papel importante no desenvolvimento de métodos de proteção contra geadas e na compreensão dos mecanismos de prevenção do congelamento. Aqui, descrevemos um protocolo para visualizar o processo de congelamento em plantas usando termografia infravermelha de alta resolução (HRIT). O uso dessa tecnologia permite determinar os locais primários de formação de gelo nas plantas, como o gelo se propaga e a presença de barreiras de gelo. Além disso, permite examinar o papel dos nucleadores extrínsecos e intrínsecos na determinação da temperatura na qual as plantas congelam e avaliar a capacidade de vários compostos de afetar o processo de congelamento ou aumentar a tolerância ao congelamento. O uso do HRIT permite visualizar as muitas adaptações que evoluíram nas plantas, que impactam direta ou indiretamente o processo de congelamento e, em última análise, permitem que as plantas sobrevivam a eventos de geada.

Ice-atividade de nucleação do gelo + bactéria, Pseudomonas syringae (estirpe Cit-7) Uma gota de 10 ul de água e 10 ml de água contendo P. syringae (Cit-7) foram colocados sobre a superfície abaxial de uma folha Hosta (Hosta spp.) (Figura 4). Tal como ilustrado, a gota de água contendo as bactérias INA congelou primeiro e era responsável por induzir a folha para congelar enquanto a gota de água sobre a superfície da folha permaneceu descongelada. </...

Aqui apresentamos um protocolo que permite visualizar locais de formação de gelo e avenidas de propagação de gelo em plantas utilizando termografia infravermelha de alta resolução (HRIT).

O uso de alta resolução Termografia Infravermelha (Hrit) para o Estudo da Ice Ice nucleação e propagação de plantas

Freezing events that occur when plants are actively growing can be a lethal event, particularly if the plant has no freezing tolerance. Such frost events ...

O objetivo geral do experimento a seguir é demonstrar o papel de agentes nucleantes externos na indução do congelamento de material vegetal e visualizar o processo utilizando termografia infravermelha. Isso é realizado aplicando-se uma gota de água e uma gota de bactérias nucleantes de gelo, ou bactérias INA, na superfície de uma folha da planta em estudo. Como segundo passo, a planta é colocada em temperaturas abaixo de zero e posicionada de forma que possa ser visualizada com uma câmera infravermelha de alta resolução.Os parâmetros da câmera são então estabelecidos, o que permitirá ao pesquisador observar o início e a propagação do gelo. Em seguida, a temperatura da câmara é reduzida lentamente até temperaturas abaixo de zero, a fim de induzir as bactérias INA da superfície a congelarem, o que, por sua vez, induzirá a planta a congelar. Os resultados demonstram o efeito de agentes nucleantes de gelo extrínsecos em induzir as plantas a congelar, em vez de super-resfriar e evitar o congelamento, com base na capacidade da termografia infravermelha de determinar a localização exata do início da formação de gelo e de visualizar como o gelo se propaga por toda a planta.Essa técnica pode não apenas ser usada para visualizar plantas em condições de controle, mas também pode ser empregada no campo, em condições naturais. Compreender como as plantas congelam em condições naturais e obter informações sobre o processo de congelamento pode fornecer novos dados que podem levar a novas técnicas de proteção contra geada, tanto para plantas agrícolas quanto para o entendimento da ecologia vegetal. Além disso, essa técnica tem sido especialmente útil para compreender a ecologia alpina.Juntamente comigo, Eric Burchard, um técnico do meu laboratório demonstrará este processo no próximo vídeo. Para iniciar o cultivo, a bactéria INA Psdo Srini deve ser cultivada em placas de Petri a 25 graus Celsius em ágar pseudos F preparado com 10 gramas por litro de glicerol a 100%, conforme as instruções do fabricante. Após o crescimento suficiente das culturas, coloque-as a quatro graus Celsius por pelo menos dois dias para garantir um alto nível de atividade de nucleação de gelo. Em seguida, raspe as bactérias de uma única placa da superfície do ágar com uma espátula plástica descartável ou metálica reutilizável.Coloque as bactérias em 10 a 15 mililitros de água desionizada. Em um vete descartável de 25 mililitros, a solução parecerá turva. Não é necessário confirmar a concentração utilizando um hemo, citômetro ou espectrofotômetro, pois a concentração precisa ser apenas aproximada.Vortexe o Q Vet por um mínimo de 10 segundos para distribuir as bactérias. Para montar o experimento de congelamento, coloque a câmera infravermelha de alta resolução dentro da caixa de acrílico protetora de modo que a lente projete através da abertura na frente da caixa e os cabos que conectam a câmera a um laptop ou dispositivo de gravação saiam pela abertura traseira da caixa.Distribua todas as conexões externas com fio para a câmera por meio desta porta. Preencha qualquer espaço extra na porta ou abertura com material isolante em espuma para evitar ou reduzir gradientes de temperatura dentro da câmara. Forneça um fundo escuro ao redor do material vegetal forrando as paredes da câmara com papel preto para construção, evitando interferência proveniente da energia infravermelha refletida.Adapte a câmara com iluminação LED para minimizar o aquecimento proveniente da fonte de luz ao registrar imagens apenas em comprimentos de onda invisíveis. Uma iluminação mínima, como uma luz de armário operada por bateria ou outro pequeno dispositivo LED, é necessária para que as plantas sejam visíveis pela câmera e deve ser desligada após a obtenção das imagens visíveis. Fixe a tampa da caixa e coloque a caixa dentro da câmara ambiental em um local que permita a visualização do material vegetal em estudo.Em seguida, ajuste a temperatura inicial da câmara para um grau Celsius. Depois, alinhe as plantas ou partes de plantas de modo que o material vegetal esteja no campo de visão da câmera e visível na tela de visualização remota ou no software escolhido. Pouco antes de fechar a porta da câmara ambiental, aplique 10 microlitros de água na superfície AAL de uma folha utilizando uma micropipeta.Em seguida, utilize uma ponteira descartável separada para aplicar 10 microlitros de uma solução de bactérias INA no lado oposto da mesma superfície de AAL. Antes de iniciar um experimento de congelamento, você deve reduzir a temperatura da câmara para aproximadamente um grau centígrado e permitir que a temperatura das plantas se equilibre nesse valor por cerca de meia hora a uma hora, dependendo do tamanho do material vegetal. Isso garantirá que, ao iniciar o experimento de congelamento e começar a reduzir a temperatura, a temperatura do material vegetal não fique muito atrasada em relação à temperatura do ar dentro da própria câmara.Uma vez que as plantas tenham equilibrado, inicie o resfriamento da câmara e defina os parâmetros desejados da câmera no software de pesquisa de infravermelho. Primeiro, selecione a paleta de arco-íris para exibir as variações de temperatura enquanto visualiza a imagem em tempo real. Em seguida, ajuste a faixa de temperatura para cinco graus Celsius, modificando a barra de temperatura localizada logo abaixo da imagem no software.Escolha a escala linear para converter os dados infravermelhos em uma imagem em cores falsas, conforme definido pela paleta selecionada. Defina a faixa de temperatura em cinco graus Celsius e configure o rastreamento automático com base na imagem. Utilize a temperatura de um ponto específico ou a temperatura média dentro da área de interesse definida fornecida pelo software.Em seguida, posicione um cursor em um local no tecido vegetal que represente um ponto específico de interesse. Defina a área de interesse como pontos, caixas, linhas, elipses ou círculos. Múltiplas combinações de pontos ou formas podem ser localizadas sobre a imagem.Além disso, quaisquer áreas de interesse também podem ser definidas após a conclusão do experimento. Enquanto o pesquisador estiver analisando o arquivo de vídeo ou imagem salvo, para gravar uma sequência de vídeo, configure a câmera para gravar a 60 hertz e pare a gravação manualmente, indicando no computador ou em um disco externo o local onde o arquivo de vídeo gravado será armazenado. Recomenda-se fortemente gravar em um disco rígido externo, já que arquivos de vídeo grandes serão gerados.Para gravar uma sequência de vídeo, configure a câmera para gravar a 60 hertz e para interromper a gravação manualmente, então inicie a gravação. Os arquivos de vídeo gravados podem ser editados posteriormente para conter apenas a parte com as informações necessárias. Reduza a temperatura da câmara progressivamente em 0,5 a 1,0 grau Celsius.Aguarde até que a temperatura da planta se equilibre com a temperatura do ar antes de reduzir novamente a temperatura, da mesma maneira, dependendo da massa do tecido vegetal observado e de sua morfologia. O equilíbrio pode levar de 10 a 15 minutos, resultando em uma taxa de resfriamento de aproximadamente dois a quatro graus Celsius por hora. Prossiga dessa forma até que a planta congele e as observações sejam concluídas.Encerre a gravação quando o processo de congelamento tiver sido concluído. São mostradas aqui imagens em luz visível do caule da azaleia alpina, exibindo folhas presas ao caule central e gemas terminais. O congelamento inicia-se no caule e o gelo se propaga para fora, atingindo as folhas.As gemas terminais permanecem não congeladas e congelam independentemente entre 126 e 164 minutos após o congelamento inicial do caule e das folhas. Durante esse período, o calor de entalpia produzido pelo congelamento do caule e das folhas já se dissipou. Quando uma barreira hidrofóbica é aplicada em plantas de tomate, ela bloqueia o congelamento induzido por bactérias INA na planta.A grande superfície de contato entre a gota INA e a superfície da folha em uma planta não revestida pode ser observada aqui. Por outro lado, há um nível reduzido de contato entre a gota INA e a superfície da folha em uma planta revestida. A planta não revestida à direita sofre uma resposta exotérmica associada ao congelamento da planta.Embora a planta revestida à esquerda permaneça super-resfriada e não congelada a aproximadamente menos seis graus Celsius. Ao utilizar esta tecnologia, é importante empregar taxas apropriadas de resfriamento e observar o processo de congelamento diversas vezes para compreender melhor como interpretar as imagens e vídeos obtidos. O procedimento também pode ser usado em conjunto com termopares para obter uma estimativa mais precisa da temperatura do ar e das temperaturas reais nas quais os eventos de congelamento estão ocorrendo.

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Research

JoVE Journal

Environment

Ambiente

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Longo prazo, de alta resolução de imagem Lapse Confocal Tempo de<em&gt; Cotilédone Arabidopsis</em&gt; Epiderme durante a germinação

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Projetamos um protocolo de fenotipagem baseado em imagem para determinar as respostas morfológicas e fisiológicas a tratamentos únicos e combinados de calor, seca e alagamento. Essa abordagem permitiu a identificação de respostas precoces, tardias e de recuperação em todo o nível da planta, particularmente nas partes acima do solo, e destacou a necessidade de usar vários sensores de imagem.

Fenotipagem baseada em imagem de alto rendimento para determinar respostas morfológicas e fisiológicas a estresses únicos e combinados em batata

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Aprenda a usar termografia infravermelha de alta resolução para visualizar a formação e propagação de gelo em plantas. Este método demonstra o papel de agentes nucleantes externos no processo de congelamento.

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