Name: A Patient-Like Orthotopic Singênico Rato Modelo de carcinoma hepatocelular Metástase (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-10-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 6 s
Description: Aprenda a estabelecer um modelo ortotópico singênico de rato para estudar metástase de carcinoma hepatocelular. Este método permite investigar a resposta imune no crescimento tumoral, oferecendo vantagens sobre modelos xenotransplantados.

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Gostaríamos de agradecer a Pascal DuBois pela revisão do artigo. Os autores também gostariam de agradecer ao pessoal do Animal Facility do Hunter College da City University of New York. Este trabalho foi apoiado por uma bolsa do NIH RCMI para o Hunter College.

Declaração de ética Todos os estudos com animais foram aprovados pelo cuidado e uso Comitê Institucional Animal (IACUC) da Hunter College of The City University of New York. Nota: Oito ratos BALB / c foram utilizados neste procedimento experimental. Cinco ratinhos BALB / c foram implantados com 5 x 10 6 BNL 1ME A.7R.1 carcinoma hepatocelular células de rato para produzir os tumores primários. Três ratinhos BALB / c sem implantes foram usadas como controlos. BNL A.7R.1 1ME é uma linha celular de carcinoma hepatocelular murino que foi derivada através de transformação química a partir da linha celular de hepatócitos não tumorigénico murino BNL CL.2. BNL 1ME A.7R.1 foi obtida a partir da American Type Culture Collection (ATCC). 1. Pré-cirurgia <ol><li> Certifique-se de que os ratos para todas as cirurgias de sobrevivência são saudáveis. Para assegurar que os ratos são saudáveis, inspeccionar sinais de desidratação por tenting da pele. Não utilize ratos com qualquer evidência de doença ou distress nestas experiências. </li><li> Pesar ratos para garantir que eles não estão abaixo do peso. Assegure-se que o peso é, pelo menos, 16-20 gramas. </li><li> Prepare 5 × 10 6 BNL 1ME A.7R.1 células do rato HCC para a implantação per mouse: <ol><li> Aspirar media de 10 ml de 60% - 70% de cultura de células confluentes prato de células HCC A.7R.1 rato BNL 1ME. Lavar duas vezes com 5 ml de PBS. Adicionar 2 ml de tripsina para o prato e incubar a 37 ° C numa incubadora humidificada com ar e 5% de CO 2 durante 5 min. </li><li> Subsequentemente, pipeta de 10 uL de células tripsinizadas em um hemocitómetro manual para contagem de células sob um microscópio com uma ampliação de 10X. Contar o número total de células encontradas nas quatro grandes quadrados de canto e multiplicar pelo factor de diluição pelo número total de células. Em seguida, divida pelo número de quadrados contados e multiplicar por 10 6 para a concentração de células (células por ml). </li><li> Usando o cálculo, coletar 5 milhões de células por rato em estéril1,5 ml tubos de microcentrífuga. Rotular 1,5 ml microtubos. </li></ol></li><li> Ressuspender as 5 x 10 6 células BNL 1ME A.7R.1 rato HCC em 100 ul de solução salina tamponada com fosfato (PBS). Mantenha estas células em gelo até a implantação em cirurgia. </li><li> Executar as atividades necessárias para a preparação de ratos para a cirurgia, tais como a indução da anestesia e cabelo recorte longe de equipamentos e materiais esterilizados para evitar a contaminação. </li><li> Induzir a anestesia geral em ratos por inalação de isoflurano utilizando um vaporizador de isoflurano, juntamente com oxigénio a uma taxa de fluxo constante de 1 concentração L por min (aprox. 2,1%). Nota: O sistema é auto-suficiente, e inclui um vaporizador de precisão, um suprimento de oxigênio e um botijão de carvão que está ligado a um circuito de respiração necessária para o gás / anestésico limpeza. </li><li> Certifique-se de que a anestesia é adequada para impedir o animal de sofrer dor durante a cirurgia. Execute-toe pitada e observar animais para não-responsiveness para confirmar a anestesia. </li><li> Naquele tempo, mudar a linha de válvula, vedação à caixa e aberto ao cone do nariz. </li><li> Assim que o rato é anestesiado, aplicar uma pequena quantidade de uma pomada oftálmica para as córneas como uma medida preventiva a secagem e danos. </li><li> Subsequentemente, o animal se mover para a área de preparação, com o cone do nariz adequadamente colocado e ligado (para a manutenção da anestesia). Prepare o local da incisão cirúrgica para a cirurgia por depilação a esta área de preparação. </li><li> Certifique-se de que a área de cirurgia é em um local livre de todas as outras atividades. </li><li> Certifique-se de que a superfície de trabalho é resistente e adequadamente higienizado, unsoiled e antes da cirurgia livre de desordem. Coloque um pedaço estéril de linho ou bandeja cirúrgica sobre ele. </li><li> Certifique-se de que o campo operatório está disponível apenas para pessoas que exercem a cirurgia. Certifique-se de que a sala cirúrgica é limpo e varreu com um limpador adequado e aspergidos com um disinfe apropriadoctant. </li><li> Assegure-se que também é posicionada afastada da portas e janelas, como correntes de ar podem espalhar pó levando à contaminação do sítio. </li><li> Realizar a cirurgia sobrevivência com instrumentos esterilizados. Ou mergulhar instrumentos num desinfectante de acordo com a recomendação do fabricante ou autoclave. Use suprimentos básicos que são estéreis pronto para uso. </li><li> Instrumentos distintos de acordo com a função de ajudar a prevenir a contaminação de áreas estéreis. </li><li> Raspar aproximadamente 1 polegada em torno do local da incisão (incisão na linha média) para aceder ao fígado do animal. Remover o cabelo a partir do animal para longe do local da cirurgia. </li><li> Após a depilação, esfregue a área com um desinfetante e sabão (betadine cirúrgica matagal) e lavar o excesso com uma solução desinfetante de distância PBS estéril. Realizar isso várias vezes, com todo o processo de esfoliação com duração de aproximadamente 5 min. Remover e descartado as luvas utilizadas. </li><li> Depois, mude para roupas protetoras como Surgical vestido, top matagal, e máscara facial. Em seguida, higienizar as mãos com esfoliação solução adequada antes de colocar luvas cirúrgicas. Nota: Este é um passo necessário para evitar derramamento e contaminar o local da cirurgia com potenciais contaminantes. </li></ol> 2. Cirurgia <ol><li> Fornecer uma fonte externa de calor para o calor durante todo o período da anestesia. O animal pode experimentar alguns hipotermia porque anestesia provoca distúrbios da termorregulação; portanto, manter a temperatura do corpo. </li><li> Coloque o mouse sobre as suas costas durante toda a cirurgia. </li><li> Corrigir os membros dianteiros, membros posteriores e cauda do mouse na tabela de cirurgia com pedaços de fitas cirúrgicas. </li><li> Faça uma linha reta incisão imediatamente inferior ao xyphisternum. </li><li> Usar um afastador cirúrgico auto-retenção estéril para expor o fígado. </li><li> Com uma seringa com uma agulha de 20G, lentamente e cuidadosamente, injectar 100 ul de PBS contendo 5 x 10 6 BNL 1ME A.7R.1células de rato HCC no lobo direito do fígado. </li><li> Após a remoção da agulha, aplicar um cotonete esterilizado durante pelo menos 1 min para parar qualquer sangramento potencial devido à alta vascularização do fígado. </li><li> Feche o tecido subcutâneo com uma sutura absorvível seguido de fechamento da pele usando grampos cirúrgicos. Posteriormente, limpar a ferida mais uma vez com betadine matagal. Nota: Isso irá garantir o fechamento da ferida cirúrgica. </li><li> Subcutaneamente dar 100 ul de solução salina normal. </li></ol> 3. Pós-cirurgia <ol><li> Imediatamente após a cirurgia, transferir o mouse para uma gaiola limpa com um cartão de identificação pós-cirurgia para notificar cuidadores da condição mouse. Fornecer alimentos e água. Nota: Em nossa experiência, um rato que acaba de passar por cirurgia se sairá melhor se alojado sozinho com o alimento úmido e água para o período inicial de 24 horas pós-cirurgia. </li><li> Manter o animal aquecido com uma lâmpada de calor que gera calor, não ultrapassando 38 ºC. vcif um termômetro para medir a temperatura até que o mouse está totalmente recuperado. </li><li> Casa do animal em uma gaiola de preferência com roupa de cama de papel para garantir conforto. </li><li> Após a recuperação inicial, monitorar o animal para sinais de desconforto, sangramento, dor e angústia. Dê buprenorfina (0,05 -0,1 mg / kg) para aliviar a dor. Estreitamente monitorizar a actividade, comportamento e aparência, assim como água e o consumo de alimentos durante cerca de 2 horas. Se ambulatorial, mover o animal de volta para a área de habitação periódica normal dos ratos e continuar a acompanhar em intervalos de 6-12 h para 24 horas pós-cirurgia. Executar uma verificação de peso se o desejar. </li><li> No entanto, se o animal está tendo problemas de recuperação, tomar medidas de cuidados de suporte apropriados. Se os ratos são incapazes de recuperar, humanamente euthanize camundongos através de asfixia com CO2 e deslocamento cervical. Siga as orientações institucionais aprovados para a eutanásia. </li><li> Pós-cirurgia, verifique se há evidência clínica de HCC que normalmente é observable redução tão significativa no escore de condição corporal. Nota: Neste ponto, um tumor primário tem provavelmente desenvolvido no fígado e depósitos metastáticos têm probabilidade desenvolvidas nos pulmões. </li><li> Neste ponto, sacrificar todos os ratos (experimental e controle) envolvidos no experimento por eutanásia humanitária. Sujeitar os ratinhos para o dióxido de carbono asfixia: libertação muito lenta de dióxido de carbono no interior da câmara ao longo de um período de 5 a 10 minutos. Isto fará com parada respiratória. </li></ol>

<ol><li>Sheng, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capture%2C+release+and+culture+of+circulating+tumor+cells+from+pancreatic+cancer+patients+using+an+enhanced+mixing+chip%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">Capture, release and culture of circulating tumor cells from pancreatic cancer patients using an enhanced mixing chip.</a> Lab on a Chip. 14, 89-98 (2014).</li>
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<li>Chambers, A. F., Groom, A. C., MacDonald, I. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissemination+and+growth+of+cancer+cells+in+metastatic+sites%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">Dissemination and growth of cancer cells in metastatic sites.</a> Nature Reviews Cancer. 2, 563-572 (2002).</li>
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<li>Stolpe, A., Pantel, K., Sleijfer, S., Terstappen, L. W., den Toonder, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circulating+tumor+cell+isolation+and+diagnostics%3A+toward+routine+clinical+use%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Circulating tumor cell isolation and diagnostics: toward routine clinical use.</a> Cancer Research. 71, 5955-5960 (2011).</li>
<li>Saad, F., Pantel, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+current+role+of+circulating+tumor+cells+in+the+diagnosis+and+management+of+bone+metastases+in+advanced+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Future+Oncology%22%5BJournal%5D)">The current role of circulating tumor cells in the diagnosis and management of bone metastases in advanced prostate cancer.</a> Future Oncology. 8, 321-331 (2012).</li>
</ol>

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.

Neste artigo, uma descrição detalhada do método é dado que foi relatado recentemente por Ogunwobi e colegas de concretizar a criação de um modelo de camundongo singênico orthotopic de HCC metástase (Figura 2) 3. A taxa de absorção de tumores para este procedimento é geralmente elevada. Nós já observamos uma taxa de take tumor de 100% 3. No entanto, a taxa de absorção pode ser variável dependendo da competência do investigador. Em um experimento recente realizado por um novo aluno d...

O carcinoma hepatocelular (CHC) é um dos cânceres mais letais, com prognóstico ruim e baixa expectativa de vida. Quase todas as mortes relacionadas ao câncer são devidas à disseminação metastática da doença do órgão de origem para outros órgãos distantes2-6. A progressão do CHC é um processo complexo. Portanto, ser capaz de modelar o microambiente tumoral que é naturalmente encontrado no CHC metastático em modelos animais pode ser uma maneira bem-sucedida e útil de revelar mecanismos relevantes em humanos. 7Infelizmente, os mecanismos da metástase do câncer ainda não estão claros. Portanto, há necessidade de estabelecer modelos animais que nos permitam elucidar os mecanismos moleculares subjacentes às metástases de cânceres como o CHC3,5.
Os sistemas de modelo de camundongo são uma abordagem muito útil para delinear mecanismos e avaliar novas estratégias para o tratamento de cânceres humanos metastáticos5,8. Os vários sistemas de modelos de camundongos que existem atualmente são uma prova dos esforços dos pesquisadores para retratar corretamente a complexidade da doença5,8,9.
Ogunwobi e colegas usaram recentemente uma abordagem cirúrgica de sobrevivência para demonstrar o estabelecimento de um novo modelo ortotópico de camundongo singênico para o estudo de metástase no CHC3. Seu trabalho estabeleceu um modelo de camundongo "semelhante ao paciente" que recapitula características de HCCs agressivos e metastáticos3. Eles demonstraram ainda que esse sistema de modelo de camundongo pode ser usado para estudar a biologia das células tumorais circulantes e que isso tem potencial para obter novos insights sobre os mecanismos da metástase do câncer3.
O objetivo deste artigo é descrever em detalhes a metodologia usada para estabelecer este modelo de camundongo ortotópico singênico "semelhante ao paciente" de metástase3 de CHC. A metodologia de como implantar células de HCC de camundongo BNL 1ME A.7R.1 diretamente no fígado (o órgão de origem) da cepa de camundongo de laboratório imunocompetente do tipo selvagem, BALB/c3 usando cirurgia de sobrevivência será descrita. Ao contrário de outros modelos de tumor de xenoenxerto de camundongo, onde células tumorais humanas são implantadas em camundongos imunodeficientes, esse sistema é singênico e, portanto, adequado para estudar o papel do sistema imunológico na metástase tumoral3,5,8. Essa abordagem provavelmente será amplamente utilizada para estudar os mecanismos de metástase em cânceres de órgãos sólidos.

<table><tbody><tr><td>Pinça de Micro Dissecação&nbsp;</td><td>Roboz</td><td>(RS-5040)</td><td>Ponta 0,20 x 0,12 mm</td></tr><tr><td>Graefe Micro Dissecante Pinça, ponta curva serrilhada</td><td>Roboz</td><td>(RS-5111)</td><td>1 X 2 dentes, largura da ponta curva 0,6 mm</td></tr><tr><td>Micro Dissecante Retractor-Agricola (3 por 3 pinos)</td><td>Roboz</td><td>(RS-6501)</td><td>Sem corte 3 X 3 pinos, profundidade 4 mm, spread 25 mm</td></tr><tr><td>Micro Dissecting Retractor-Goldstein (3 por 3 pinos)</td><td>Roboz</td><td>(RS-6503)</td><td>Sem corte, 3 X 3 pinos, profundidade 4 mm, spread 19 mm</td></tr><tr><td>Paquímetro Jameson (Mede tumores)</td><td>Roboz</td><td>(RS-6466)</td><td>Escala de 80 mm/3 polegadas, cromado&nbsp;</td></tr><tr><td>Tesouras de Micro Dissecação, grandes anéis de sissors, lâminas retas e afiadas</td><td>Roboz</td><td>(RS-5852)</td><td>23 mm, comprimento 4 polegadas, hastes planas e anéis grandes</td></tr><tr><td>Bisturi com lâminas, para procedimentos delicados de dissecação</td><td>Roboz</td><td>(RS-9861-36)</td><td></td></tr><tr><td>Cabo de bisturi&nbsp;</td><td>Roboz</td><td>(RS-9884)</td><td></td></tr><tr><td>Solid Littauer Stitch Sissors</td><td>Roboz</td><td>(RS-7074)</td><td>Comprimento 4.5 polegadas</td></tr><tr><td>Porta-agulha marrom, para fácil amarração de sutura</td><td>Roboz</td><td>(RS-7960)</td><td>Mandíbula convexa, serrilhas finas</td></tr><tr><td>Reflex 7MM clipes de ferida com reflexo 7 aplicador de clipe</td><td>Roboz</td><td>(RS-9262)</td><td>método alternativo seguro de fechamento de feridas</td></tr><tr><td>Bandeja de instrumentos e tampa</td><td>Roboz</td><td>RT-1350S</td><td></td></tr><tr><td>Mini-clipper com lâmina destacável</td><td>Roboz</td><td>(RS-5903)</td><td></td></tr><tr><td>Germinator 500 (o Terminador de Germes) Esterilizador a Seco</td><td>Roboz</td><td>Ds-400, Ds-401, DS-501</td><td>Para descontaminação rápida de instrumentos de micro-dissecação.&nbsp; &nbsp; Os instrumentos descontaminam em 15 segundos.</td></tr><tr><td>Agulhas de microinjeção</td><td>VWR</td><td>BD305125</td><td>25G Agulha</td></tr></tbody></table>

a &quot;patient-like&quot; orthotopic singênico rato modelo de carcinoma hepatocelular metástase

A "Patient-Like" Orthotopic Syngeneic Mouse Model of Hepatocellular Carcinoma Metastasis

A maioria das mortes relacionadas ao câncer é causada pela metástase do câncer, e não pelo próprio tumor primário. No entanto, os mecanismos subjacentes da metástase do câncer ainda não estão claros. Modelos animais são essenciais para elucidar os mecanismos e avaliar novas estratégias para o tratamento de cânceres metastáticos. Aqui, é fornecida uma descrição detalhada de um modelo de camundongo singênico ortotópico "semelhante ao paciente" para explorar os mecanismos de metástase de tumores de órgãos sólidos. A implantação cirúrgica de sobrevivência de células de carcinoma hepatocelular de camundongo BNL 1ME A.7R.1 diretamente no fígado (o órgão de origem) da linhagem de camundongo de laboratório imunocompetente do tipo selvagem, BALB/c é descrita. O sucesso e a reprodutibilidade dessa metodologia recomendam seu uso generalizado na elucidação dos mecanismos biológicos da metástase do câncer de órgãos sólidos.

Os fígados de ratos Balb / c foram implantados com 5 x 10 6 BNL 1ME A.7R.1 células rato HCC. Evidência clínica de desenvolvimento HCC foi observado 63 dias pós-cirurgia. Consequentemente, os ratos foram humanamente eutanasiados. A necropsia foi realizada nos ratos sacrificados. Os pulmões eo fígado foram ressecados e um exame cuidadoso bruta foi realizada para identificar tumores macroscópicos. Em um rato, um tumor superficial foi observada sobre a superfície do fígado com alguma ligação à parede abdominal <s...

A propagação metastática do câncer é a principal causa de mortes relacionadas ao câncer. Nós fornecemos uma descrição detalhada da nossa metodologia cirurgia sobrevivência para o estabelecimento de um sistema modelo singï¿½ico rato &quot;paciente-like&quot; orthotopic para o estudo dos mecanismos de metástases em tumores de órgãos sólidos.

A &quot;Patient-Like&quot; Orthotopic Singênico Rato Modelo de carcinoma hepatocelular Metástase

The majority of cancer-related deaths are caused by the metastasis of the cancer rather than the primary tumor itself. Yet, the underlying mechanisms of ...

O objetivo geral deste procedimento é estabelecer um sistema de modelo murino ortotópico sinogênico semelhante ao paciente para estudar os mecanismos de metástase no carcinoma hepatocelular. Isso é realizado primeiramente preparando células murinas de carcinoma hepatocelular para implante. Na segunda etapa, o abdômen de um animal sinogênico receptor é aberto e as células são cuidadosamente injetadas no lobo direito do fígado.No fim das contas, o sucesso e a reprodutibilidade desta metodologia recomendam seu uso amplo para elucidar os mecanismos biológicos da metástase do carcinoma hepatocelular. A principal vantagem desta técnica em relação a técnicas existentes, como modelos de tumor xenógraftico em camundongos, é que nosso sistema de modelo tumoral sintético permite investigar o papel da resposta imune na metástase tumoral. Michelle Nadu, uma estudante de graduação do nosso laboratório, demonstrará este procedimento comigo. Para preparar as células para implante, comece lavando duas vezes uma cultura de células de carcinoma hepatocelular com 60 a 70% de confluência com cinco mililitros de PBS.Incube a cultura celular com dois mililitros de tripsina a 37 graus Celsius. Após cinco minutos, conte as células e dilua-as a cinco vezes 10 à quinta células por mililitro de PBS. Em seguida, transfira alíquotas de 100 microlitros das células para um tubo microcêntrifugo estéril de 1,5 mililitro por camundongo, e coloque as células no gelo.Antes de iniciar o procedimento cirúrgico, confirme o nível adequado de anestesia por meio do aperto nos dedos dos pés. Aplique pomada nos olhos de um camundongo adulto saudável de 16 a 20 gramas e realize a depilação em uma área de aproximadamente uma polegada ao redor da linha média do abdômen do animal. Em seguida, coloque um par de luvas de látex e lave a pele exposta várias vezes com uma solução detergente desinfetante, seguida por uma lavagem com PBS estéril por aproximadamente cinco minutos.Após o preparo da pele, descarte as luvas e coloque o equipamento de proteção individual apropriado. Forneça uma fonte externa de calor para prevenir hipotermia anestésica durante o procedimento e, em seguida, fixe fita cirúrgica nas patas e na cauda do animal para manter o camundongo em posição supina. Em seguida, faça uma incisão reta imediatamente inferior ao processo xifoide do esterno e use um retrator cirúrgico estéril auto-retrátil para abrir a cavidade abdominal.Quando o fígado estiver visível, aspire uma alíquota de células em uma seringa de um mililitro equipada com uma agulha de 20 gauge e injete lentamente e com cuidado todos os 100 microlitros das células de carcinoma hepatocelular no lobo direito do fígado. Após a remoção da agulha, aplique um cotonete estéril por pelo menos um minuto para interromper qualquer sangramento. Em seguida, utilize um fio absorvível para fechar o tecido subcutâneo, seguido pelo fechamento da pele.Com clipes cirúrgicos, limpe a ferida com outro anti-séptico e administre, por via subcutânea, 100 microlitros de solução salina normal. Em seguida, imediatamente após a cirurgia, transfira o camundongo para uma gaiola limpa, sem companheiros e com cama de papel, por pelo menos 24 horas. Esses fígados de camundongos BSY foram implantados com cinco vezes 10 à sexta potência de células de carcinoma hepatocelular murino ME.A, conforme acabou de ser demonstrado.Evidência clínica do desenvolvimento de carcinoma hepatocelular foi observável 63 dias depois, conforme indicado pela seta em um camundongo. Um tumor superficial foi observado na superfície do fígado com alguma aderência à parede abdominal. Os pulmões desse camundongo exibiram uma morfologia anormal, apresentando também áreas de necrose hemorrágica visível.Em um segundo camundongo, o fígado apresentou-se macroscopicamente anormal, com a anormalidade assemelhando-se fortemente a um tumor superficial, conforme esperado no controle. Camundongos que não foram implantados não desenvolveram tumores nem no fígado nem nos pulmões. Uma vez dominado, este modelo de camundongo sincrônico ortotópico pode fornecer uma boa plataforma para elucidar os mecanismos biológicos da metástase e do carcinoma hepatocelular.

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Medicine

Medicina

Duas técnicas podem ser usadas para estabelecer esse modelo: injeção de uma suspensão de células de câncer na parede cecal ou transplante de um pedaço de tumor subcutâneo para o ceco. Este modelo é útil para estudar a progressão natural do câncer colo-retal e testes de novos agentes terapêuticos contra o câncer colorretal.

Modelo rato ortotópico de câncer colorretal

Este modelo ortotópico de cancro de próstata humana permite a quantificação do tamanho do tumor, as células tumorais, e a formação de metástases distinta circulante para o pulmão. Como as células deve escapar o principal órgão, entrar na corrente sanguínea, e implantar em um site secundário, este modelo recapitula efetivamente o cenário em seres humanos.

Um Modelo murino de próstata humana Metástase Ortotópico

A modelo pré-clínico, murino de metástases hepáticas realizado através de uma técnica de injeção hemispleen.

Um Modelo murino de metástases hepáticas pré-clínica

Um modelo de tumor primário do cancro da mama ortotópico e remoção cirúrgica do tumor primário para prolongar a vida do rato para gerar metástase espontânea são descritos. O crescimento do tumor e progressão são monitorados e quantificado por imagens de fluorescência da luciferase.

Um modelo de camundongo ortotópico de câncer de mama espontânea metástase

O câncer de próstata é a segunda causa mais comum de mortes relacionadas ao câncer nos Estados Unidos. Um modelo de câncer ortotópico fornece uma abordagem útil para entender a biologia do câncer de próstata e avaliar a eficácia dos regimes terapêuticos. Este protocolo descreve as etapas detalhadas necessárias para estabelecer um modelo ortotópico de camundongo com câncer de próstata.

Pré-clínica Ortotópico Modelo murino de cancro da próstata humano

Implementação de um modelo ortotópico de carcinoma de células renais, em ratinhos imunocompetente proporciona o investigador um sistema clinicamente relevante definida pela presença de um primárias metástases tumorais e pulmonares renais no mesmo animal. Este sistema pode ser usado para testar pré-clinicamente uma variedade de tratamentos in vivo.

Um carcinoma de células Singênico Rato Modelo de metastático renal para Quantitativa e Longitudinal Avaliação da pré-clínicos Terapias

Aqui, nós descrevemos o desenvolvimento de um modelo murino clìnica relevante do cancro do fígado que recapitulando as características imunes típicas do cancro hepatocelular (HCC).

Um modelo de camundongo de câncer hepatocelular induzido por hepatócitos oncogênico, decorrente do ajuste da inflamação e fibrose hepática

Modelos ortotópicos de camundongos de melanoma uveal uveal uveal do fígado foram criados usando técnicas cirúrgicas de implantação ortotópica com esquema tumoral derivado do paciente e técnicas de injeção de agulha com linhas de células de melanoma uveal humana cultivadas.

Geração de uma plataforma de xenoenxerto de melanoma uveal humano ortotópico do fígado em camundongos imunodeficientes

Aqui, apresentamos um protocolo para criar xenoenxertos de carcinoma hepatocelular ortotópico com e sem ligadura da artéria hepática e realizamos tomografia por emissão de pósitrons (PET) não invasiva de hipóxia tumoral usando [18 F]Fluoromisonidazol ([18 F]FMISO) e [18 F]Fluorodesoxiglicose ([18F]FDG).

Imagem PET/MR não invasiva em um modelo ortotópico de carcinoma hepatocelular em camundongo

Aloenxertos ortotópicos singênicos de adenocarcinoma ductal pancreático (ADP) de camundongos recapitulam a biologia, os fenótipos e as respostas terapêuticas dos subtipos da doença. Devido à sua rápida e reprodutível progressão tumoral, são amplamente utilizados em estudos pré-clínicos. Aqui, mostramos práticas comuns para gerar esses modelos, injetando culturas de PDAC murino singênico no pâncreas.

Aloenxertos Ortotópicos Singênicos de Camundongos para Modelo de Câncer de Pâncreas

Aprenda a estabelecer um modelo ortotópico singênico de rato para estudar metástase de carcinoma hepatocelular. Este método permite investigar a resposta imune no crescimento tumoral, oferecendo vantagens sobre modelos xenotransplantados.

A "Patient-Like" Orthotopic Singênico Rato Modelo de carcinoma hepatocelular Metástase

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