Name: Um All-a laser Endotelial Transplant (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-07-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 59 s
Description: Aprenda um transplante endotelial totalmente a laser para cirurgia de córnea usando laser femtosegundo. Esta técnica minimamente invasiva melhora a adesão do tecido doador e reduz o risco de deslocamento.

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Os autores agradecem a FORTE projeto, financiado pela Região Toscana (POR Creo FESR 2007-2013, Bando Unico R &amp; S 2012), os FP7 ECHORD UE ++ Experiência LA-ROSES que apoiaram parcialmente as actividades de investigação, eo 7. ° PQ BiophotonicPlus Project &quot;LITE&quot; concedido pela Região Toscana.

O estudo foi realizado com a aprovação do Comitê de Ética prospectivamente do hospital; foi obtido consentimento informado. O estudo foi em adesão aos princípios da Declaração de Helsinki. 1. Preparação de Doadores endotélio <ol><li> Use uma córnea doadora elaborado pelo banco de olhos local à temperatura ambiente. </li><li> Na sala de cirurgia, puxe a córnea do doador de seu contêiner de entrega e separou a solução para preservação de tecido e nutrição que é usado para o transporte de córnea. </li><li> Coloque o doador córneo-escleral aro mais de uma câmara anterior artificial, na qual um líquido possa fluir e criar uma pressão variável; cobrir a córnea com a cabeça de retenção de tecido. </li><li> Ligue a câmara anterior artificial (AAC) através de um conector de 3 vias para uma seringa cheia com a preservação da córnea e nutrição líquida. </li><li> Use o anel de compressão para manter o retentor firmemente no lugar. </li><li> Use a syrInge ligado à AAC para manter a pressão intracameral: encher a câmara anterior com a solução de preservação do tecido até atingir a pressão óptima (ver 1.7). Feche o conector. </li><li> Testar a pressão dentro da câmara anterior com um dedo. Alterar a pressão no interior, até atingir a pressão interna direita (na gama de 60-70 mmHg). Feche o conector de 3 vias. </li><li> Meça a espessura da córnea do doador com Coerência Óptica Thomography (OCT). Manter a câmara anterior com que córnea em uma posição fixa na frente das óptica do aparelho e, em seguida, tomar uma aquisição espessura-OCT completo. </li></ol> 2. Preparação de laser femtosegundo endotélio Donor <ol><li> Execute aplanação da córnea do doador sob o dispositivo a laser de femtossegundos. Use o laser femtosec para cortar o tecido do doador com três cortes subsequentes: corte lateral posterior, lamelar completo e corte lateral anterior. Defina os seguintes parâmetros para os três cortes.<ol><li> Para o corte total lamelar (padrão de quadro, a começar), definida a profundidade de corte que corresponde ao ponto mais fino da córnea do doador (medido com a OCT como descrito em 1.8), sempre subtraindo 95 uM. Definir a energia de impulsos na gama de 0,8-0,9 μJ (dependendo da profundidade de trabalho). Definir o diâmetro de 8,7 milímetros. Defina a separação ponto tangencial a 2 m. Defina a separação ponto radial até 2 m. </li><li> Para o corte lateral anterior, defina a profundidade posterior 30 mm mais profundo do que o corte lamelar anterior completo. Defina a energia de pulso para 2,10 μJ; o diâmetro de 8,6 mm; a separação local a 3 um, enquanto a camada de separação a 3 um. </li><li> Para o corte do lado posterior, localize a profundidade anterior da face posterior 30 um corte anterior de corte lamelar completo. Defina a profundidade posterior a 900 mm. Defina a energia de pulso para 2,10 μJ; o diâmetro e 8,3 mm; a separação local a 2 uM; a separação da camada de 2 um. </li></ol></li&gt; </ol> 3. Destinatário Preparação Eye <ol><li> Preparar o paciente para a cirurgia. Faça uma incisão na córnea 4,00 milímetros em 12 horas com 4,0 milímetros de lâmina pré-calibrado. Faça uma paracentese de limbo com um 1,2 milímetros de lâmina pré-calibrado, colocado a duas horas. Faça outro paracentesis limbo às 6 horas com um 30 ° faca facada. </li><li> Insira um mantenedor da câmara anterior na câmara anterior do paciente, através das 2 paracentesis o&#39;clock. </li><li> Execute uma diâmetro 8,2 milímetros descemetorexis circular com o gancho dedicado. </li><li> Tira a membrana Descemet e endotélio do estroma posterior e remover os tecidos com um gancho de Descemet. </li></ol> 4. Cromóforo Preparação <ol><li> Coloque 1 mg de Indocianina pó verde em um tubo de microcentrífuga de 1,5 ml. </li><li> Adicionar 9 mg de água estéril (a solução ICG água é de 10% w / w). </li><li> Misturar o pó manualmente ICG e a água com um agitador de metal. </li&gt; </ol> 5. Coloração de endotélio Donor <ol><li> Coloque o endotélio dador para a parte mais larga de um neg-injector, com o lado de dentro em contacto com a superfície do injector. </li><li> Manchar o lado interior do endotélio do dador com a solução cromóforo, na sua parte periférica, usando uma espátula. O tecido corretamente manchado tem uma cor esverdeada homogénea. Esperar 3 min antes de iniciar o passo 5.3. </li><li> Puxe o endotélio doador na parte anterior da Busin-injector, rolou. </li></ol> 6. Inserir o endotélio Donor <ol><li> Segure e insira o endotélio doador dobrado usando uma pinça atraumática coaxiais para lenticule endotelial. </li><li> Remover o mantenedor da câmara anterior. </li><li> Suturar a incisão na córnea ea paracentese (realizada no passo 3.1) com um único stich Nylon 10.0. </li><li> Injectar uma bolha de ar para desdobrar o tecido do doador e para pressioná-lo contra a córnea destinatário. A bolha de ar deve completely preencher o espaço na câmara anterior. </li></ol> 7. solda a laser <ol><li> Coloque a lentícula doador no centro da córnea do receptor, a partir do interior de um gancho ou de mover o ar do lado de fora da bolha da córnea com uma espátula. </li><li> Usar um laser de diodo emitindo a 810 nm, equipado com um diâmetro de 300 ^ M de núcleo de fibra óptica estéril, com 0,22 como uma abertura numérica (NA). </li><li> Mantenha a ponta da fibra de fora do globo ocular, e entregar a luz laser para o endotélio coradas, através do tecido da córnea transparente. A ponta da fibra está em configuração sem contato. </li><li> Use as seguintes configurações para o laser: modo de emissão local único, 70-80 duração do impulso ms, 35-40 mJ por impulso. He-Ne visando feixe diante. </li><li> Entregar os pontos de laser único na periferia manchado do endotélio doador. Entregar os pontos sequencialmente: o aspecto final é um anel de manchas na periferia da lentícula dador. A distância entre dois adjamanchas centavo centro é o dobro de um diâmetro do ponto. </li><li> Aplicar uma lente de contato no olho do paciente, juntamente com 0,3% de tobramicina e 0,1% dexametasona suspensão oftálmica. </li></ol>

<ol><li>Tan, D. T., Dart, J. K., Holland, E. J., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Corneal transplantation.</a> Lancet. 379 (9827), 1749-1761 (2012).</li>
<li>El Husseiny, M. A., Manero, F., Gris, O., Elies, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Historical+Review+and+Update+of+Surgical+Treatment+for+Corneal+Endothelial+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol+Ther%22%5BJournal%5D)">Historical Review and Update of Surgical Treatment for Corneal Endothelial Diseases.</a> Ophthalmol Ther. , (2014).</li>
<li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+tissue+welding+in+ophthalmic+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Laser tissue welding in ophthalmic surgery.</a> J Biophotonics. 1 (4), 331-342 (2008).</li>
<li>Pini, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combining+femtosecond+laser+ablation+and+diode+laser+welding+in+lamellar+and+endothelial+corneal+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+SPIE+Ophthalmic+Technologies+XVIII%22%5BJournal%5D)">Combining femtosecond laser ablation and diode laser welding in lamellar and endothelial corneal transplants.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XVIII. 6 (844), 684411-1-684411-7 (2008).</li>
<li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((All-laser%27+endothelial+corneal+transplant+in+human+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+SPIE+Ophthalmic+Technologies+XXII%22%5BJournal%5D)">All-laser' endothelial corneal transplant in human patients.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XXII. 8209, 82091O-1-82091O-3 (2012).</li>
<li>Rossi, F., Pini, R., Menabuoni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+and+model+analysis+on+the+temperature+dynamics+during+diode+laser+welding+of+the+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Opt%22%5BJournal%5D)">Experimental and model analysis on the temperature dynamics during diode laser welding of the cornea.</a> J Biomed Opt. 12 (1), 014031-1-014031-7 (2007).</li>
<li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-assisted+corneal+welding+in+cataract+surgery%3A+retrospective+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Laser-assisted corneal welding in cataract surgery: retrospective study.</a> J Cataract Refract Surg. 33 (9), 1608-1612 (2007).</li>
<li>Buzzonetti, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+Welding+in+Penetrating+Keratoplasty+and+Cataract+Surgery+in+Pediatric+Patients.+Early+Results%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Laser Welding in Penetrating Keratoplasty and Cataract Surgery in Pediatric Patients. Early Results.</a> J Cataract Refract Surg. 39 (12), 1829-1834 (2013).</li>
<li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%27anvil%27+profile+in+femtosecond+laser-assistedpenetrating+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The 'anvil' profile in femtosecond laser-assistedpenetrating keratoplasty.</a> Acta Ophthalmol. 91 (6), e494-e495 (2013).</li>
<li>Canovetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-assisted+penetrating+keratoplasty%3A+one+year%E2%80%99s+results+in+patients%2C+using+a+laser-welded+%E2%80%9Canvil%E2%80%9D-profiled+graft%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Laser-assisted penetrating keratoplasty: one year’s results in patients, using a laser-welded “anvil”-profiled graft.</a> Am J Ophthalmol. 158 (4), 664-670 (2014).</li>
</ol>

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.

O transplante endotelial &quot;todo o laser&quot; é uma abordagem original para o transplante de córnea minimamente invasiva. Todos os procedimentos descritos no âmbito do protocolo foram realizados na sala de cirurgia, observando-se o procedimento de higiene e esterilização que são práticas comuns durante cirurgias, tais como o uso de luvas esterilizadas, vestido, máscara e boné. A solução ICG foi preparado na sala de cirurgia, logo antes de sua aplicação na coloração do endotélio doador. O...

Neste trabalho apresentamos uma abordagem original à ceratoplastia endotelial, baseado no uso de um laser femtosegundo para preparar tecido do doador e um laser de diodo infravermelho próximo para soldá-lo para a cama destinatário. Medição intra-operatório da córnea doadora é necessário para projetar corretamente as dimensões do tecido doador. Ceratoplastia endotelial tem sido propostos nos últimos anos para substituir ceratoplastia penetrante no tratamento de doença endotelial 1,2. A principal vantagem desta técnica é uma recuperação visual mais rápida, com relação a ceratoplastia penetrante, anestesia reduzida durante a cirurgia, uma diminuição do risco de rejeição do enxerto e a preservação da integridade do olho. O principal fator de risco é pós-operatória luxação doador lenticule. A técnica padrão é realizado através da inserção do endotélio doador na sua posição final, em que é mantida através da injecção de uma bolha de ar: sem suturas são utilizadas por causa da chara mecânica, biofísico e dimensionalcteristics do endotélio. Além disso, a recuperação da acuidade visual pode ser limitada, principalmente devido a uma incompatibilidade entre os tecidos do doador e do receptor, devido a um tecido grosso transplantado. Aqui nós apresentamos um procedimento na execução de ceratoplastia endotelial que pode superar esses problemas principais. O endotélio dador pode ser assegurada na sua posição final pela utilização da técnica de soldadura a laser. Este é um processo fototérmico controlada e localizada: ele pode ser induzida na interface dador / receptor. Tem sido estudada nos últimos dez anos e proposto em ceratoplastia penetrante e no transplante de endotélio 3-5. A luz de infravermelho próximo (comprimentos de onda: 810 nm) emitida por um diodo de laser de baixa potência é fornecida para o tecido biológico no local da ferida. A córnea é naturalmente transparente para este comprimento de onda: a fim de fazer este tecido para absorver a luz de laser, é necessário pintar com um cromóforo. O corante proposto é uma saturar estérilsolução de água d de indocianina verde (ICG). Demonstrou-se que quando o tecido da córnea é adequadamente coradas com esta preparação ICG, que mostra um pico de absorção a 810 nm 6. Além disso, o ICG é amplamente utilizado no diagnóstico clínico e a sua segurança foi já demonstrada em seres humanos. A córnea absorve a luz coradas energia laser de diodo e o principal efeito resultante é a subida de temperatura controlada no local de soldadura. Sem efeitos térmicos são induzidas nos tecidos não coradas. O aumento da temperatura provoca desnaturação térmica reversível no colagénio do estroma, com uma closuring imediata das paredes da ferida após arrefecimento. Este efeito de soldagem a laser foi primeiramente demonstrada em cirurgia de catarata e ceratoplastia penetrante 7,8 9,10. Uma abordagem otimizada que estamos apresentando neste trabalho foi estudado para aplicação em ceratoplastia endotelial. Na cirurgia proposta, pontos de laser de solteiro (com duração de dezenas de milissegundos) arE fornecida ao tecido, resultando num efeito fototérmico localizada dentro da dimensão local (algumas centenas de m de diâmetro): o efeito é induzida uma soldadura a laser de disco, composto por um fotocoagulação do colagénio confinado na interface doador / hospedeiro. O resultado da desnaturação do colagénio no local da soldadura é uma forte aderência entre os tecidos doadores e hospedeiros, proporcionando assim um efeito de sutura que é impossível de obter com a técnica padrão (pontos). O tecido recupera sua aparência natural em um curto seguimento (1 mês) e a aderência entre tecidos doador / hospedeiro é melhorada pela solda fornecido na fase muito precoce da fase de cura. Para evitar o outro risco principal do ceratoplastia endotelial, ou seja, o transplante de um tecido dador de espessura, intracirúrgico tomografia de coerência óptica (OCT) é utilizado: um dispositivo comercial mede a espessura da córnea do doador, de modo que um perfil de corte correcto pode ser concebido com aa laser femtosec. O transplante endotelial proposta de &quot;tudo a laser&quot; parece, assim, para melhorar os resultados clínicos desta cirurgia minimamente invasiva.

<table><tbody><tr><td>Indocianina Green</td><td>Pulsion Medical Systems, Alemanha</td><td>ICG-PULSION (http://www.pulsion.com/international-english/perfusion/icg-pulsion/)</td><td>Produto alternativo: IC-GREEN, Akorn&nbsp; Inc., Lake Forest, Illinois- EUA (http://www.icginjection.com/)</td></tr><tr><td>Laser de femtosegundo&nbsp;</td><td>Abbott Medical Optics,&nbsp; Abbott Laboratories Inc. Abbott Park, Illinois, EUA</td><td>iFS150 (http://www.abbottmedicaloptics.com/products/refractive/ilasik/ifs-advanced-femtosecond-laser)</td><td></td></tr><tr><td>Tomografia de Coerência Óptica (OCT)</td><td>Carl-Zeiss Meditec, Dublin, Califórnia- EUA (http://www.zeiss.com/meditec/en_de/home.html)</td><td>Laser</td> de Diodo Visante <td></td></tr><tr><td></td><td>E.l.En. Grupo s.pa., Calenzano-FI, Itália (http://www.elengroup.com/en/divisions/medical)</td><td>Mod. WELD 800</td><td></td></tr><tr><td>Câmara Anterior Artificial</td><td>CORONET, produtos de enxerto de córnea. Network Medical Products Ltd. Coronet House, Kearsley Road, Ripon, North Yorkshire, HG4 2SG, Reino Unido</td><td>Câmara Anterior Artificial (A.A.C.) com cabeças grandes e pequenas de retenção de tecido. Código 51-935 (http://www.networkmedical.co.uk/ophthalmic_artificial_ anterior_chamber.html)</td><td></td></tr><tr><td>Solução para preservação e nutrição de tecidos&nbsp; &nbsp;</td><td>Al. CHI.MI.A. Srl, Viale Austria 14, 35020 - Ponte S. Nicol&ograve; - PD &nbsp; ITÁLIA</td><td>Mídia Carry-C para deturgescência da córnea e transporte em temperatura ambiente - 12 x 50 ml (http://www.alchimiasrl.com/en/organ-culture-at-31&deg;-c-eb/carry-c-eb)</td><td></td></tr></tbody></table>

um &quot;all-a laser&quot; endotelial transplant

An &#8220;All-laser&#8221; Endothelial Transplant

A ceratoplastia endotelial assistida por "todo o laser" é um procedimento realizado com um laser de femtossegundo usado para cortar o tecido doador na profundidade pretendida e um laser de diodo infravermelho próximo para soldar o tecido da córnea. A técnica proposta permite atingir os três principais objetivos da ceratoplastia endotelial: um controle preciso da espessura do tecido doador; sua fácil inserção no leito receptor e um risco reduzido de luxação da lentícula doadora. A espessura da córnea do doador é medida na sala de cirurgia com tomografia de coerência óptica (OCT), a fim de projetar corretamente as dimensões do tecido do doador. Um laser de femtossegundo é usado para cortar a córnea do doador. O olho receptor é preparado por remoção manual da membrana descemética. O endotélio doador é inserido em um injetor de Busin, o lado interno periférico é corado com um cromóforo adequado (uma solução aquosa de verde de indocianina O tecido transplantado é colocado no local final e correto e, em seguida, a soldagem a laser de diodo é induzida de fora do globo ocular. O procedimento foi realizado em mais de 15 pacientes, evidenciando uma melhora no desempenho cirúrgico, com boa recuperação da acuidade visual e redução do evento de luxação da lentícula do doador.

O procedimento cirúrgico &quot;todo o laser&quot; é proposta para realizar transplantes de córnea minimamente invasiva. O procedimento é fácil de realizar (ver Figura 1): no que diz respeito a um transplante endotelial padrão somente as etapas de medir a espessura da córnea, coloração do tecido do doador e fornecer a luz de laser são adicionados. As vantagens conseguidas pela maior parte compensar um aumento do tempo de cirurgia de alguns minutos. A utilização intra-operatória de OCT para medir a espess...

Um procedimento totalmente a laser é proposto no transplante endotelial. A técnica cirúrgica baseia-se no uso de um laser de femtossegundo para preparar o tecido doador. A técnica de soldagem a laser é então usada para fixar o endotélio doador na posição correta.

Um &quot;All-a laser&quot; Endotelial Transplant

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an ...

O objetivo geral deste procedimento é realizar uma cirurgia minimamente invasiva a laser para o transplante de ententes finas da córnea. Isso é feito medindo primeiro a córnea do doador e cortando-a com um segundo laser Femto. Em seguida, as incisões são feitas no leito da córnea do receptor e a membrana desme e o endotélio são removidos em preparação para o tecido doador.Em seguida, o retalho doador é corado e inserido em sua posição final. Finalmente, o ácuo emprestado pelo doador é soldado a laser à córnea receptora. Em última análise, a adesão do endotélio do doador pode ser observada um dia após a cirurgia.A principal melhoria desta técnica em relação ao método existente, como o padrão, é que, com o retalho empunhado a laser, o risco de luxação é reduzido após a cirurgia. As implicações desta técnica se estendem para a cirurgia de transplante de córnea porque a aplicação do procedimento de soldagem a laser também foi estudada em neurocirurgia e otorrinolaringologia. Geralmente, as pessoas novas neste método não terão dificuldades porque é muito fácil de executar.Para começar na sala de cirurgia, remova a córnea do doador de seu recipiente de entrega em temperatura ambiente e reserve a solução de transporte da córnea. Conecte a câmara anterior artificial ou a a C através de um conector de três vias a uma seringa cheia de preservação e nutrição da córnea. Líquido. Coloque a borda escleral da córnea doadora sobre uma câmara artificial na qual um líquido possa fluir e criar pressão variável.Em seguida, com a cabeça de retenção de tecido, cubra a córnea. Em seguida, use um anel de compressão para segurar o retentor firmemente no lugar. Em seguida, com a seringa conectada ao A A C, para manter a pressão intracameral, use solução de preservação tecidual para preencher a câmara anterior até atingir a pressão ideal.Em seguida, feche o conector de três vias usando um dedo. Teste a pressão dentro da câmara anterior, ajustando-a até que a pressão interna correta seja atingida. Para medir a espessura da córnea doadora, manter a câmara anterior com a córnea em posição fixa e com tomografia de coerência óptica ou OCT.Faça uma medição de OCT de espessura total para cortar o tecido doador Após a explicação do aplicativo, comece com um lam completo ou corte definindo a profundidade de corte correspondente ao ponto mais fino da córnea doadora menos 95 mícrons. Defina a energia de pulso na faixa de 0.8 a 0.9 micro joules. Defina o diâmetro para 8,7 milímetros.Defina a separação de pontos tangenciais para dois micrômetros e defina a separação de pontos radiais para dois micrômetros onde o lado anterior é cortado. Defina a profundidade posterior, 30 micrômetros mais profunda do que a lâmina completa anterior. Cortar. Defina a energia de pulso para 2,10 microjoules, o diâmetro para 8,6 milímetros para o lado posterior. Cortar.Localize a profundidade anterior do lado posterior e corte 30 micrômetros anteriormente ao lam ou corte completo. Defina a profundidade posterior para 900 micrômetros. Defina a energia de pulso para 2.10 micro joules.O diâmetro para 8,3 milímetros, a separação de pontos para dois micrômetros e a separação de camadas para dois micrômetros. Em seguida, faça o corte para preparar o paciente para a cirurgia com uma lâmina pré-calibrada de 1,2 milímetro. Faça uma paracentese límbica das duas horas até a paracentese das duas horas.Insira um mantenedor da câmara anterior na câmara anterior do paciente. Em seguida, usando uma facada de 30 graus. Faça uma segunda paracentese límbica às seis horas.Use uma lâmina pré-calibrada de 2.0 milímetros para fazer uma incisão na córnea de 2.00 às 12 horas. Em seguida, com um gancho dedicado, execute um 8.2 milímetros de diâmetro circular desme ou eixo. Retire a membrana desme e o endotélio do estroma posterior e use um gancho desme para remover os tecidos.Para preparar o cromóforo para corar o tecido doador, adicione um miligrama de indocianina verde ou pó de ICG a um tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitro. Em seguida, adicione nove miligramas de água estéril com um agitador de metal. Misture manualmente a solução ICG para suspender o pó.Coloque o endotélio doador na parte mais larga de um abuso e injetor com o lado interno em contato com a superfície do injetor. Usando uma espátula, adicione a solução de cromo quatro no lado interno do endotélio doador para corá-lo com uma cor verde homogênea. Depois de esperar três minutos, role o endotélio e insira-o na parte anterior do injetor de busin.Usando uma pinça coaxial atraumática, agarre e insira o endotélio doador dobrado com um único ponto de náilon 10.0. Suturar a incisão da córnea e a paracentese. Injete uma bolha de ar preenchendo completamente o espaço da câmara anterior para desdobrar o tecido do doador e pressione-o contra a córnea receptora.Em seguida, remova o mantenedor da câmara anterior de dentro com um gancho ou usando uma espátula para mover a bolha de ar do lado de fora. Coloque o lenti do doador no centro da córnea receptora. Defina um laser DDE emitindo a 810 nanômetros com um diâmetro de núcleo de 300 micrômetros, fibra óptica estéril e uma abertura numérica de 0,22 usando as configurações listadas aqui para o laser e, mantendo a fibra óptica fora do globo ocular e em configuração sem contato sequencialmente, forneça pontos de laser únicos ao longo da periferia do endotélio corado através do tecido transparente da córnea.O aspecto final é um anel de manchas na periferia do lenti doador. A distância entre os centros de dois pontos adjacentes é o dobro do diâmetro de um ponto. Quando a soldagem a laser estiver concluída, aplique 0,3% de tobramicina e 0,1% de dexametasona suspensão oftálmica no olho do paciente.Em seguida, aplique uma lente de contato. Este procedimento cirúrgico a laser realiza um transplante de córnea minimamente invasivo em relação a um transplante endotelial padrão. Apenas as etapas de medição da espessura da córnea, coloração do tecido doador e entrega da luz laser são adicionadas.As vantagens alcançadas compensam em grande parte um aumento do tempo cirúrgico de alguns minutos. O uso da OCT intraoperatória para medir a espessura da córnea do doador e o laser de femtossegundo usado para personalizar as dimensões da lentícula do doador permite melhorar a adesão da interface doador-hospedeiro em comparação com a não realização da medição da espessura da córnea do doador, como mostrado aqui, o que resulta em baixa adesão na periferia. Ao fazer isso, a cirurgia é projetada de acordo com as necessidades e características morfológicas de cada paciente.Em uma técnica padrão, não é possível suturar o tecido doador de forma alguma devido às suas características biomecânicas e localização. No entanto, o procedimento de soldagem a laser fornece um anel completo de pontos cobrindo o diâmetro externo da interface doador receptor e fornece um fechamento imediato da interface. Um dia após a cirurgia, um endotélio parcialmente soldado mostra luxação do doador occu, exceto nos locais de solda.Após este procedimento, outros métodos como a otoplastia anterior podem ser realizados para questões adicionais como como evitar o uso de procedimentos padrão após seu desenvolvimento. Essa técnica abriu caminho para pesquisadores no campo da microcirurgia explorarem a sutura em tecidos finos, locais inacessíveis, como na anastomose término-terminal em cirurgia cerebral. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa ideia de como realizar uma otoplastia de cerquete endotelial com baixo risco de deslocamento linical após a cirurgia.Este assunto nos fornece linical muito fino que adere ao receptor med com uma boa satisfação de nosso paciente.

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Para alguns pacientes, a única opção para preservação de fertilidade é a criopreservação de tecido ovariano. Infelizmente, revascularização atrasada prejudica a viabilidade folicular. Aqui, apresentamos um protocolo para co transplante de tecido ovariano humano com células endoteliais para utilização como uma estratégia baseada em célula combinando acelerada perfusão com uma entrega parácrina direto de moléculas bioativas.

Co transplante de tecido ovariano humano com células endoteliais engenharia: uma combinação de estratégia baseada em célula acelerado perfusão com entrega direta parácrina

Descemet's Stripping Only é um procedimento experimental em que pacientes com gutae córnea central resultante da Distrofia Corneal Endotelial De Fuchs têm a membrana de Descemet despojada para células periféricas para regenerar a camada endotelial. Apresentamos nova metodologia simulando DSO em córneas humanas distróficas ex vivo com cura acelerada estimulada pelo eFGF1 (NM141).

Um modelo de cultura de órgãos córneas humanas de descascamento de descemet apenas com cura acelerada estimulada pelo fator de crescimento do fibroblasto projetado 1

Aqui, descrevemos uma plataforma que permite imagens in vivo não invasivas de esferoides hepáticos enxertados na câmara anterior do olho do camundongo. O fluxo de trabalho abrange desde a geração de esferoides de células hepáticas primárias até o transplante para o olho do camundongo e imagens in vivo em resolução celular por microscopia confocal.

Imagens in vivo de esferoides hepáticos enxertados na câmara anterior do olho do camundongo

Este protocolo descreve um modelo de transplante intestinal baseado em ratos com ileostomia para avaliação temporal da intervenção medicamentosa na rejeição do enxerto.

Um Modelo de Rejeição de Enxerto de Rato de Transplante Intestinal com Ileostomia Exteriorizada para Avaliação de Prognóstico Longitudinal

Este artigo apresenta um protocolo para a entrega precisa guiada por ultrassom de células-tronco vasculares à parede do vaso aórtico. A técnica atinge efetivamente a parede do vaso e promove o reparo vascular em aneurismas e dissecções da aorta.

Entrega de células-tronco guiadas por ultrassom de precisão para reparo vascular em doenças da aorta

Apresentamos um modelo reprodutível de camundongo de alotransplante composto vascularizado de membros posteriores para pescoço, heterotópico. Esse protocolo supermicrocirúrgico, envolvendo anastomoses de vasos de 0,3 a 0,5 mm, integra guiagem com filamento de náilon e algemamento venoso. Ela oferece uma plataforma confiável para estudos translacionais sobre tolerância, lesões por isquemia-reperfusão e mecanismos imunológicos em alotransplante composto vascularizado.

Transplante Heterotópico de Membro Posterior para Pescoço no Camundongo: Um Modelo Supermicrocirúrgico de Alotransplante Composto Vascularizado

Determinando o enxerto de células do doador representa um desafio em ratinho ósseas modelos de transplante de medula que carecem bem definidos marcadores fenotípicos. Nós descrevemos uma metodologia para quantificar o enxerto de células de doadores do sexo masculino em camundongos fêmeas receptoras de transplante. Este método pode ser utilizado em todas as estirpes de ratinho para o estudo de funções HSC.

Usando Quantitative PCR em tempo real para determinar enxerto célula dadora num modelo murino de osso Competitiva Marrow Transplantation

Aprenda um transplante endotelial totalmente a laser para cirurgia de córnea usando laser femtosegundo. Esta técnica minimamente invasiva melhora a adesão do tecido doador e reduz o risco de deslocamento.

Um "All-a laser" Endotelial Transplant

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