Name: Preparação e caracterização de Individual e Multi-carregadas com droga Fisicamente Entrapped poliméricos Micelles (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-08-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: Aprenda a preparar e caracterizar micelas poliméricas carregadas com fármacos usando o método de evaporação de solvente. Este protocolo demonstra como avaliar estabilidade, tamanho e liberação in vitro para aplicações em sistemas de liberação de medicamentos.

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Este estudo foi apoiado pela doação do AACP New Pharmacy Faculty Research Award Program, Medical Research Foundation of Oregon New Investigator Grant, Oregon State University-Startup fund e Pacific University, School of Pharmacy Start-up fund.

1. Preparação de individuais e multi-drogas Micelles carregado pelo método de fundição de solvente <ol><li> Pesar DTX 1 mg ou 1 mg EVR ou ambas as drogas em 1 mg cada, para as micelas dupla droga (DDM). </li><li> Pesar 15 mg de PEG 2000 - b -PLA 1800 ou PEG 4000 - b -PLA 2200 para qualquer indivíduo ou DDM. </li><li> Dissolve-se os medicamentos e / ou drogas e do polímero em 0,5 ml de acetonitrilo e colocar num frasco de fundo redondo de 5 ml. </li><li> Formar uma película fina de polímero de droga distribuída por evaporação do (s) fármaco -polymer solução de acetonitrilo sob pressão reduzida utilizando um evaporador rotativo. Definir o evaporador rotativo a 100 rpm, a temperatura do banho de água de 40 ° C e uma pressão de vácuo de 260 mbar durante 5 minutos, seguido de uma redução para 100 mbar durante mais 3 min. </li><li> Re-hidratar o filme de fármaco e polímero, com 0,5 ml de água desionizada a 50 ° C e agitar suavemente o frasco para formar as micelas. </li><li> Filtrar o resultadoing solução micelar através de um filtro de nylon de 0,2 um para remover qualquer droga ou contaminantes dissolvidos-un para um tubo de centrífuga de 1,5 ml. </li></ol> 2. Avaliação da droga carregamento e da estabilidade em micelas de fase reversa usando Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC) de <ol><li> Realizar a análise por RP-HPLC com uma coluna C8 equilibriated a 40 ° C num modo isocrático com uma fase móvel de acetonitrilo / água (62/38) contendo ácido fosfórico a 0,1% e 1% de metanol a um caudal de 1 ml / min e um volume de injecção de 10 ul. </li><li> Diluir micelas recém-preparados (Ponto 1) 1: 100 em fase móvel antes de analisar por RP-HPLC para determinar a carga de medicamento inicial. Loja não diluídas micelas individuais e DDM à temperatura ambiente (25 ° C) durante 48 horas e preparar frescos 1: 100 amostras diluídas em fase móvel para re-avaliar por RP-HPLC e determinar medicamento (s) em micelas estabilidade ao longo de 24 horas. </li><li> Monitorar DTX e IVE picos a 227 e 279 nm, respectivamentecom tempos de retenção de 1,7 e 5,7 min, respectivamente. Executar todas as medições em triplicado. Apresentam dados como a carga média ± SD de drogas. </li></ol> 3. Avaliação das micelas de tamanho de partículas por espalhamento dinâmico de luz (DLS) <ol><li> Diluir micelas preparadas de fresco (como descrito na secção 1) em água desionizada a uma razão de 1:20 para dar uma concentração final de polímero de 1,5 mg / ml. </li><li> Medir a intensidade do laser He-Ne (633 nm) a 173 ° para determinar espalhamento. Executar todas as medições a 25 ° C após um pré-equilibração durante 2 min. </li><li> Executar todas as medições em triplicado. Dados apresentam-se como a dimensão média de Z-média ± DP, juntamente com o índice de polidispersibilidade (PDI) da distribuição. </li></ol> 4. Avaliação da In Vitro Drogas lançamento de micelas individuais e DDM <ol><li> Prepare micelas individuais e DDM, conforme descrito na secção 1. Carga de 2,5 ml das micelas numa cassete de diálise com 3 mlum peso molecular de corte (MWCO) de 7000 g / mol. NOTA: Este MWCO foi escolhido para permitir que o fármaco livre (s), juntamente com as moléculas do polímero não associados a difundir livremente para fora da cassete e, assim, assegurar as condições de imersão. </li><li> Coloque as cassetes em 2,5 L de pH 7,4 mM de tampão de fosfato 10 (preparado por diluição de solução stock de 200 mM) e mudar o tampão de cada 3 horas para garantir as condições de imersão. Manter a temperatura do tampão a 37 ° C durante toda a duração da experiência. </li><li> Aos 0, 0,5, 1, 2, 3, 6, 9, 12, 24, e 48 h, retirar 150 ul da solução nas cassetes e substituir com 150 ul de tampão fresco. </li><li> Analisar as amostras usando RP-HPLC, tal como estabelecido na secção 2 para determinar a concentração do fármaco. Curve-se ajustar os dados de liberação da droga (s) com base em um modelo de difusão simples, com uma fase de uma associação exponencial usando software stastitical. </li><li> Calcular o tempo necessário para alcançar 50% de libertação do fármaco (t 1/2) de eACH droga em micelas individuais ou DDM com base no ajuste de curva. Executar todas as medições em quádruplo. </li></ol>

<ol><li>Yokoyama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymeric+micelles+as+a+new+drug+carrier+system+and+their+required+considerations+for+clinical+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Polymeric micelles as a new drug carrier system and their required considerations for clinical trials.</a> Expert Opin Drug Deliv. 7, 145-158 (2010).</li>
<li>Shin, H. C., Alani, A. W., Rao, D. A., Rockich, N. C., Kwon, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-drug+loaded+polymeric+micelles+for+simultaneous+delivery+of+poorly+soluble+anticancer+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Multi-drug loaded polymeric micelles for simultaneous delivery of poorly soluble anticancer drugs.</a> J Control Release. 140, 294-300 (2009).</li>
<li>Adams, M. L., Lavasanifar, A., Kwon, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amphiphilic+block+copolymers+for+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">Amphiphilic block copolymers for drug delivery.</a> J Pharm Sci. 92, 1343-1355 (2003).</li>
<li>Oerlemans, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymeric+micelles+in+anticancer+therapy%3A+targeting%2C+imaging+and+triggered+release%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Polymeric micelles in anticancer therapy: targeting, imaging and triggered release.</a> Pharm Res. 27, 2569-2589 (2010).</li>
<li>Shin, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+3-in-1+polymeric+micelle+nanocontainer+for+poorly+water-soluble+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Pharm%22%5BJournal%5D)">A 3-in-1 polymeric micelle nanocontainer for poorly water-soluble drugs.</a> Mol Pharm. 8, 1257-1265 (2011).</li>
<li>Hasenstein, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antitumor+activity+of+Triolimus%3A+a+novel+multidrug-loaded+micelle+containing+Paclitaxel+Rapamycin%2C+and+17-AAG%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer+Ther%22%5BJournal%5D)">Antitumor activity of Triolimus: a novel multidrug-loaded micelle containing Paclitaxel Rapamycin, and 17-AAG.</a> Mol Cancer Ther. 11, 2233-2242 (2012).</li>
<li>Mazzaferro, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bivalent+sequential+binding+of+docetaxel+to+methyl-beta-cyclodextrin%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">Bivalent sequential binding of docetaxel to methyl-beta-cyclodextrin.</a> Int J Pharm. 416, 171-180 (2011).</li>
<li>Iwase, Y., Maitani, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+and+in+vivo+evaluation+of+liposomal+everolimus+for+lung+carcinoma+and+thyroid+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Pharm+Bull%22%5BJournal%5D)">Preparation and in vivo evaluation of liposomal everolimus for lung carcinoma and thyroid carcinoma.</a> Biol Pharm Bull. 35, 975-979 (2012).</li>
<li>Mishra, G. P., Doddapaneni, B. S., Nguyen, D., Alani, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antiangiogenic+effect+of+docetaxel+and+everolimus+as+individual+and+dual-drug-loaded+micellar+nanocarriers%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Antiangiogenic effect of docetaxel and everolimus as individual and dual-drug-loaded micellar nanocarriers.</a> Pharm Res. 31, 660-669 (2014).</li>
<li>Xu, W., Ling, P., Zhang, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polymeric+micelles%2C+a+promising+drug+delivery+system+to+enhance+bioavailability+of+poorly+water-soluble+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Polymeric micelles, a promising drug delivery system to enhance bioavailability of poorly water-soluble drugs.</a> J Drug Deliv. 2013, 340315(2013).</li>
<li>Lavasanifar, A., Samuel, J., Kwon, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Poly%28ethylene+oxide%29-block-poly%28L-amino+acid%29+micelles+for+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Drug+Deliv+Rev%22%5BJournal%5D)">Poly(ethylene oxide)-block-poly(L-amino acid) micelles for drug delivery.</a> Adv Drug Deliv Rev. 54, 169-190 (2002).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

O uso de micelas poliméricas para administração de medicamentos continua a se expandir devido à sua versatilidade e capacidade de fornecer medicamentos hidrofóbicos para vários estados de doença. Portanto, as técnicas necessárias para preparar e caracterizar essas formulações antes do uso em cultura de células ou animais são um primeiro passo crítico para determinar o melhor emparelhamento entre o medicamento e o polímero. PEG-b-PLA são excelentes copolímeros em bloco anfifílicos para fins de administração de ...

Copolímeros em bloco anfifílicos com estrutura de repetição compostas de domínios hidrofílicos e hidrofóbicos pode auto-montar espontaneamente para formar três montagens macromoleculares tridimensionais conhecidas como micelas poliméricas. Estas estruturas têm um núcleo hidrófobo interior rodeado por uma camada hidrófila. O núcleo hidrofóbico tem a capacidade para incorporar drogas hidrofóbicas, quer por armadilha física através de interacções hidrofóbicas ou por conjugação química sobre a espinha dorsal do polímero. 1 Muitas vantagens existem para a utilização desses copolímeros em bloco, para formar micelas para entrega da droga. Estes incluem incorporação de fármacos fracamente solúveis, melhorar a farmacocinética dos fármacos incorporados, e a biocompatibilidade e / ou a biodegradabilidade dos polímeros torna uma alternativa segura para solubilizadores convencionais. 2 Outra vantagem do uso de micelas poliméricas é o seu tamanho de partícula coloidal, entre 15- 150 nm 3, tornando-os atraentes para paentrega renteral. Por conseguinte, ao longo dos últimos 20 anos, surgiram micelas poliméricas como sistemas de distribuição de drogas viáveis ​​para fármacos pouco solúveis em água, especialmente para a terapia do cancro 3,4. Actualmente existem cinco formulações micelares poliméricos para a terapia do cancro em fase de ensaios clínicos. 4 Quatro das micelas em ensaios clínicos são os copolímeros dibloco baseados em PEG enquanto que a última é um copolímero de tribloco de óxido de polietileno contendo. O tamanho destas micelas variou de 20 nm a 85 nm. A vantagem da utilização de polímeros à base de PEG é a sua biocompatibilidade e, dependendo do segundo bloco também pode ser biodegradável. Recentemente, os sistemas de administração de fármacos à base nova no bloco polyethyleneglycol- ácido -polylactic (PEG-b--PLA) micelas poliméricas têm sido desenvolvidos para a entrega simultânea de vários fármacos anti-cancerígenos. As micelas de PEG-PLA B- são ambos biocompatível e biodegradável. Estes fármacos múltiplos micelas carregadas têm mostrado comoynergistic inibição de diferentes cancros em modelos in vitro e in vivo 2,5,6 e inserem-se no paradigma actual de utilização de vários fármacos em quimioterapia para prevenir a resistência e diminuir a toxicidade. Portanto, há uma grande quantidade de interesse em preparar e caracterizar esses sistemas de entrega de drogas micelares para uso no cancro e outros estados de doença. No trabalho abaixo nós esboçamos um processo passo-a-passo pelo qual tais micelas podem ser preparados e caracterizados antes de avaliá-los em estados de doença de interesse. Para os fins deste trabalho dois agentes anti-cancro fracamente solúveis, docetaxel (DTX) e everolimus (EVR) ter sido escolhido. Ambos DTX e EVR são compostos pouco solúveis em água com solubilidades intrínsecas de água em 1,9 e 9,6 ng / ml, respectivamente. 7,8 Duas PEG polímeros b -PLA com diferentes pesos moleculares foram utilizados neste protocolo como os blocos de construção para a polimérica formulados micelas,estes polímeros são PEG 2000 - b -PLA 1800 (3800 Da) e PEG 4000 - b -PLA 2200 (6200 Da). PEG micelas b -PLA pode, portanto, fornecer uma plataforma única como um nanocarrier para DTX e EVR individualmente e em combinação. Os reagentes necessários / Materiais e equipamentos necessários para preparar e caracterizar estas micelas estão listadas na Tabela 1.

<table><tbody><tr><td>PEG2000-b-PLA1800</td><td>Advanced Polymer Materials, Inc</td><td>6-01- PLA/2000</td><td>PLA MW pode ser especificado no pedido</td></tr><tr><td>PEG4000-b-PLA2200</td><td>Advanced Polymer Materials, Inc</td><td>6-01- PLA/4000</td><td>PLA MW pode ser especificado no pedido</td></tr><tr><td>Docetaxel</td><td>LC Laboratories</td><td>D-1000</td><td>100 mg</td></tr><tr><td>Everolimus</td><td>LC Laboratories</td><td>E-4040</td><td>100 mg</td></tr><tr><td>Acetonitrila</td><td>EMD/VWR</td><td>EM-AX0145-1</td><td>Grau HPLC; 4 L</td></tr><tr><td>Balão de fundo redondo</td><td>Glassco/VWR</td><td>89426-496</td><td>5 ml</td></tr><tr><td>RV 10 Control Evaporadores</td><td>IKA Works</td><td>8025001</td><td>Rotoevaporador</td></tr><tr><td>Shimadzhu HPLC com detector DAD</td><td>Shimadzhu</td><td></td><td>RP-HPLC</td></tr><tr><td>de diálise Slide-a-lyzer MWCO 7000</td><td>Thermo Scientific, Inc</td><td>66370</td><td>3 ml</td></tr><tr><td>Tampão fosfato pH 7,4, 200 mM</td><td>VWR</td><td>100190-870</td><td>500 ml</td></tr><tr><td>Malvern NanoZS</td><td>Malvern Instruments, UK</td><td></td><td>DLS</td></tr><tr><td>Filtro de nylon</td><td>Acrodisc/VWR</td><td>28143-242</td><td>13 mm; 0.2&micro; </td></tr><tr><td>M Ácido fosfórico, NF</td><td>Spectrum Chemical/VWR</td><td>700000-626</td><td>100 ml</td></tr><tr><td>GraphPad Prism</td><td><a href="http://www.graphpad.com/">www.graphpad.com</a></td><td></td><td>Software de análise</td></tr><tr><td>Zorbax SB-C8 Rapid Resolution cartridge&nbsp;</td><td>Agilent Technologies</td><td>866953-906</td><td>4.6 &vezes; 75 mm, 3,5 &#956; m</td></tr></tbody></table>

preparação e caracterização de individual e multi-carregadas com droga fisicamente entrapped poliméricos micelles

Preparation and Characterization of Individual and Multi-drug Loaded Physically Entrapped Polymeric Micelles

Copolímeros em bloco anfifílicos como bloco polyethyleneglycol- ácido -polylactic (PEG- b- PLA) pode auto-montar em micelas acima da concentração micelar crítica formando núcleos hidrofóbicos cercadas por escudos hidrofílicos em ambientes aquosos. O núcleo destas micelas pode ser utilizado para carregar medicamentos hidrofóbicos, fracamente solúveis em água, como o docetaxel (DTX) e everolimus (EVR). Caracterização sistemática da estrutura de micelas e carregamento de drogas capacidades são importantes antes in vitro e estudos in vivo podem ser conduzidos. O objectivo do protocolo aqui descrito é o de proporcionar os passos de caracterização necessárias para obter produtos normalizados micelares. DTX e IVE têm solubilidades intrínsecas de 1,9 e 9,6 ug / ml, respectivamente, de preparação dessas micelas pode ser conseguido através de evaporação de solvente, que aumenta a solubilidade aquosa da DTX e IVE a 1,86 e 1,85 mg / ml, respectivamente. Estabilidade do fármaco em micelas evalmicas situadas à temperatura ambiente durante 48 hr indica que 97% ou mais dos fármacos são retidos na solução. Tamanho das micelas foi avaliado usando dispersão dinâmica de luz e indicou que o tamanho dessas micelas era inferior a 50 nm e dependente do peso molecular do polímero. A libertação do fármaco a partir das micelas foi avaliada por meio de diálise em condições de imersão a pH 7,4 a 37 ° C durante 48 h. Resultados indicam que o ajustamento da curva de libertação do fármaco é accionado por um processo de primeira ordem indicando que ele está orientado difusão.

DTX individual ou micelas EVR e DTX e IVE DDM em micelas de PEG-b--PLA são formuladas com sucesso, quer em PEG 4000 - b -PLA 2200 ou PEG 2000 - b -PLA 1800 (Figura 1). DTX, RVP e o DDM mostraram estabilidade semelhante em PEG 4000 - b -PLA 2200 ou PEG 2000 - 1800 b -PLA mais de 48 h (Figura 2). Carga de droga inicial de EVR em ...

O objetivo deste protocolo é descrever a preparação e caracterização de fármacos fisicamente aprisionados e pouco solúveis em água em sistemas micelares de liberação de fármacos compostos por copolímeros em bloco anfifílico.

Preparação e caracterização de Individual e Multi-carregadas com droga Fisicamente Entrapped poliméricos Micelles

Amphiphilic block copolymers like polyethyleneglycol-block-polylactic acid (PEG-b-PLA) can self-assemble into micelles above their critical micellar ...

O objetivo geral do experimento a seguir é delinear um processo passo a passo para preparar e caracterizar células miocárdicas carregadas com fármacos antes de avaliá-las em estados patológicos de interesse. Isso é alcançado preparando as células miocárdicas pelo método de moldagem em solvente, a fim de gerar células miocárdicas reprodutíveis para o estudo. Como segundo passo, avalia-se a estabilidade do carregamento e o tamanho das células miocárdicas, o que determina a capacidade dessas células de carregar e reter concentrações clinicamente relevantes.Em seguida, determina-se a taxa de liberação do fármaco a partir das células mi, a fim de garantir que as células mi apresentem características apropriadas de liberação in vitro antes da avaliação da estabilidade in vivo. Os resultados mostram que células mi estáveis geradas de forma reprodutível podem fornecer uma plataforma para o desenvolvimento da entrega de fármacos em diversos estados patológicos, com base nas técnicas de avaliação apresentadas aqui. A principal vantagem deste método em relação a métodos existentes, como carga em equilíbrio ou métodos de diálise, é que as miosinas podem ser preparadas muito mais rapidamente, com carregamento reprodutível do fármaco e tamanho controlado.As implicações dessa técnica estendem-se à terapia ou diagnóstico de diversos estados patológicos, pois medicamentos em escala nanométrica oferecem oportunidades além das formas convencionais. Geralmente, indivíduos que estão apenas começando podem ter dificuldades com essas técnicas, mesmo sendo simples, porque ainda é necessário realizar estudos de liberação, não sendo possível avaliar adequadamente o efeito burst. Demonstrarão este procedimento Shaman Duke, meu aluno de pós-graduação, e Deepa, minha colaboradora. Primeiro, pese um miligrama de DTX, um miligrama de EVR e 15 miligramas de PEG 4.000-bloco-PLA 2200 para as células mieloides duplamente carregadas ou DDM. Após a pesagem, dissolva os fármacos e o polímero em 0,5 mililitros de acetonitrila, em seguida transfira a solução para um balão de fundo redondo de cinco mililitros e forme um filme fino de polímero com fármaco distribuído, evaporando a solução de fármaco-polímero em acetonitrila sob pressão reduzida utilizando um evaporador rotatório.Após isso, reidrate o filme polimérico com fármaco utilizando 0,5 mililitros de água desionizada pré-aquecida a 50 graus Celsius e agite suavemente o frasco em banho-maria a 50 graus Celsius para formar as células para camundongos. Adicione a solução a um tubo de centrífuga e gire a 7.200 × g durante três minutos. Aspire a solução com uma seringa e filtre a solução micelar resultante para um novo tubo de centrífuga de 1,5 mililitro utilizando um filtro de náilon de 0,2 mícron para remover qualquer fármaco não dissolvido ou contaminantes. Neste ponto, realize análise por CLAE em fase reversa com uma coluna C8 equilibrada a 40 graus Celsius em modo isocrático com uma fase móvel de acetonitrila e água, diluindo as micelas recém-preparadas em acetonitrila numa proporção de 1:100 antes da análise por CLAE em fase reversa para determinar a carga inicial de fármaco.Após armazenar minhas células não diluídas à temperatura ambiente por 48 horas, prepare amostras diluídas frescas para reavaliar por cromatografia líquida de fase reversa e determinar a estabilidade do fármaco em minhas células ao longo de 48 horas. Monitore os picos de DTX e DVR em 227 e 279 nanômetros, com tempos de retenção de 1,7 e 5,7 minutos, respectivamente. Apresente os dados como média ± desvio padrão da carga de fármaco.Em seguida, dilua as células recém-preparadas e água desionizada em uma proporção de um para 20, para uma concentração final de polímero de 1,5 miligramas por mililitro. Transfira a solução para um vial para medição de espalhamento de luz dinâmico. Meça a intensidade do laser de hélio-neônio a 173 graus para determinar o espalhamento.Apresente os dados como o tamanho médio Z mais ou menos o desvio padrão, juntamente com o índice de polidispersidade ou PDI da distribuição. Após preparar o DDM conforme descrito anteriormente, carregue 2,5 mililitros das minhas células em um cassete de diálise de 3 mililitros com limite de peso molecular de 7.000 gramas por mol. Coloque o cassete em 2,5 litros de tampão fosfato 10 milimolar, pH 7,4, durante os seguintes intervalos.Retire 150 microlitros da solução e substitua por 150 microlitros de tampão fresco. Troque o tampão a cada três horas para garantir condições de sincronização. Analise as amostras utilizando CLAE em fase reversa para determinar a curva de concentração do fármaco.Ajuste os dados de liberação do fármaco com base em um modelo de difusão simples com associação exponencial de uma fase, utilizando o software estatístico D-T-X-E-V-R, e o DDM mostrou estabilidade semelhante em PEG 2000 bloco PLA 1800 ou PEG 2000 bloco PLA 2200 ao longo de 48 horas. Todas as minhas células retiveram 97% ou mais da carga inicial após 48 horas à temperatura ambiente. Com base nos resultados de espalhamento dinâmico de luz, todas as minhas células apresentaram distribuição unimodal com valores de PDI inferiores a 0,2.Com base nos dados, a liberação de DTX a partir de micelas individuais e DDM foi de aproximadamente 60% ao longo de 48 horas. A liberação de EVR a partir de micelas individuais e DDM foi de 60% e 50%, respectivamente. O tempo necessário para 50% da liberação do fármaco a partir de micelas individuais e DDM e os dados de qualidade do ajuste são apresentados aqui.A qualidade do ajuste da curva para todas as minhas células, exceto a individual EVR, é superior a 0,950, o que indica que a suposição de liberação de primeira ordem é uma boa aproximação para explicar a liberação do fármaco a partir das minhas células individuais e do DDM. Uma vez dominadas, essas técnicas podem ser realizadas rotineiramente em uma biblioteca de fármacos e polímeros como minhas células, em questão de horas a semanas. Ao realizar este procedimento, é importante lembrar de caracterizar completamente as minhas células antes de acessar culturas celulares ou modelos animais posteriores. Outros sistemas de liberação, como o sistema de liberação lipossomal, também podem ser avaliados ou caracterizados com o objetivo de responder à questão sobre o papel do sistema de liberação de fármacos na eficácia do tratamento.Após assistir a este vídeo, você deverá ter uma boa compreensão de como preparar e caracterizar células carregadas com fármacos antes de avaliá-las em uma doença de interesse.

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Química

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Aprenda a preparar e caracterizar micelas poliméricas carregadas com fármacos usando o método de evaporação de solvente. Este protocolo demonstra como avaliar estabilidade, tamanho e liberação in vitro para aplicações em sistemas de liberação de medicamentos.

Preparação e caracterização de Individual e Multi-carregadas com droga Fisicamente Entrapped poliméricos Micelles

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