Name: Humano vasto lateral Biópsia de músculo esquelético Usando o Weil-Blakesley Conchotome (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-04T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 16 s
Description: Aprenda a técnica de biópsia percutânea do músculo vasto lateral usando o conchotome de Weil-Blakesley. Este método minimiza o desconforto do participante e fornece tecido suficiente para análises histoquímicas e moleculares em contextos clínicos e de pesquisa.

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Gostaríamos de agradecer aos participantes do estudo por tornar este trabalho possível e à equipe do NIHR Southampton Biomedical Research Center e do Wellcome Trust Clinical Research Facility, University Hospital Southampton pela assistência nas medições do estudo.
Este trabalho foi apoiado pelo NIHR Southampton Biomedical Research Centre, Nutrition, MRC Lifecourse Epidemiology Unit e pela University of Southampton. Este relatório é uma pesquisa independente do NIHR BRC Funding Scheme. As opiniões expressas nesta publicação são dos autores e não necessariamente do NHS, do NIHR ou do Departamento de Saúde. A AMB é apoiada por uma bolsa de pesquisa clínica do NIHR, a HPP é apoiada pelo NIHR Southampton Biomedical Research Center.

declaração de ética: Uma descrição do procedimento de biópsia muscular seguimos dentro da nossa instituição segue agora. O procedimento de biópsia muscular é utilizada no Estudo sarcopenia Hertfordshire que tenha sido aprovada pelo número Comité de Investigação Hertfordshire 07 / Q0204 / 68. Todos os participantes assinaram termo de consentimento 20. NOTA: Um único operador pode realizar o procedimento, auxiliado por um assistente que pode envolver o participante na conversa, a fim de reduzir a ansiedade e garantir que eles são confortáveis ​​em todos os momentos. O quarto procedimento deve ser equipado com uma pia, um sofá ajustável em altura, superfícies limpas e um carrinho de procedimento. 1. Prepare o Participante (Figura 2) <ol><li> Peça ao participante para colocar confortavelmente, supina em um sofá. Expor a coxa preferido do vinco na virilha. Espalhe uma folha absorvente descartável sob a coxa exposta. Certifique-se de que a perna permanece reto e relaxado durante todo o procedimento, masa coxa é tenso momentaneamente para delinear o vasto lateral. </li><li> Marcar o local procedimento de cerca de dois terços para baixo uma linha imaginária a partir da espinha ilíaca ântero-superior à patela. </li></ol> 2. Prepare a pele (Figura 2) <ol><li> Raspar a pele para aproximadamente 4 cm de diâmetro em torno do local da biópsia proposto com uma lâmina de barbear estéril e limpar a pele com um algodão embebido em álcool. NOTA: Isso é para evitar qualquer aprisionamento de cabelo subseqüentes na ferida durante o processo de cicatrização. Este passo é opcional de acordo com a preferência do operador. </li><li> Infiltrar na pele e fáscia sobreposta com anestesia local. Use uma agulha 25 G para levantar uma bolha subcutânea de lidocaína a 2%, em seguida, se infiltrar mais profundamente no tecido subcutâneo com uma agulha 23 G. Destinam-se a penetrar, pelo menos, metade de uma polegada, dependendo do conteúdo do tecido subcutâneo no local da biópsia. Esta profundidade deve ser suficiente para assegurar as FAS sobrejacentesCIA é anestesiado. Permitir 2-5 min para que o anestésico para a ação. Confirmar anestesia sondando a pele suavemente com a ponta da lâmina agulha ou bisturi. </li></ol> 3. Preparar um campo estéril (Figura 2) <ol><li> Lavar as mãos com sabão e manter as mãos limpas até que um avental estéril é usado. Cobrir as mãos com luvas estéreis antes de criar um campo estéril no carrinho de procedimento. </li><li> Esterilizar o local da biópsia com solução de álcool / clorexidina isopropílico 2% ou um desinfectante da pele de iodo base. Aplique uma cortina estéril com uma abertura adesiva para expor o local da biópsia, mas também para manter um campo esterilizado. </li></ol> 4. Execute o procedimento (Figura 2) <ol><li> Com um bisturi tamanho 11, fazer uma 5 - incisão 10 mm sobre a pele e para baixo e através da faseia sobrejacente. Insira a ponta cortante fechada do conchotome através da incisão em um ângulo reto ao eixo longo do fêmur, a uma meia profundidade média de uma polegada. Se necessário, usara mão livre para segurar e suportar o coxa em torno do local da biópsia, enquanto a ponta do conchotome é aberto e fechado dentro do músculo. </li><li> Rodar o conchotome através de 90 - 180 ° para cortar o músculo. Retirar o conchotome e abra a ponta em gaze estéril umedecido por soro fisiológico estéril. Repetir o procedimento dentro do local da ferida única, se necessário, para se obter o tecido muscular suficiente. Transferir a gaze para um recipiente colocado em gelo. Transferir o recipiente para a preparação de um laboratório para processar o músculo de acordo com o protocolo institucional local. </li></ol> 5. Pós Processo (Figura 2) <ol><li> Aplicar pressão direta sobre a ferida para até 5 min. Fechar a ferida com Steri-tiras, colocando-os em paralelo para a ferida, em oposição a ângulos rectos para evitar potencialmente removendo o tecido da cicatriz e reabertura da ferida se os Steri-tiras são removidos inadvertidamente. Coloque um penso absorvente estéril sobre os Steri-tiras e amarre uma de duas camadascurativo para a compressão e prenda com fita adesiva. </li><li> Explicar o método curativo para o participante como eles terão de realizar uma troca de curativo 3 - 4 dias após o procedimento. Certifique-se que o participante remove a ligadura de compressão antes de ir para a cama mais tarde naquela noite. </li></ol> 6. Pós Biópsia Advice <ol><li> Informará o participante que é comum a experiência de alguns rigidez coxa que pode ser aliviada por exercícios leves (por exemplo., Caminhar). Use analgesia simples, como paracetamol. Avisar o participante sobre dormência transitória ao redor do local da biópsia que pode persistir por até duas semanas, bem como a complicação potencial de infecção da ferida. </li></ol> 7. Instruções para o procedimento Mensagem Assunto <ol><li> Peça ao participante para evitar a atividade vigorosa durante 72 horas (como escalada, corrida, levantamento de peso). Peça ao participante para evitar imersão em água por 48-72 horas. No entanto, instruir o PARTICIPANt para envolver película aderente ou similar em torno do local da biópsia quando um chuveiro para manter o curativo seco. </li><li> Peça o participante para mudar o penso ao fim de 3 - 4 dias, e remover as tiras steri-depois de uma semana. NOTA: O participante deve ser dado instruções escritas para cuidados pós-biópsia, curativos peças e detalhes de contato de emergência da equipe responsável por realizar o procedimento. </li></ol>

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Nenhum declarou.

Para garantir a segurança dos participantes e realizar a biópsia muscular de forma eficiente, é fundamental prestar atenção aos passos críticos no âmbito do protocolo. Os participantes devem ser selecionados depois de considerar cuidadosamente os critérios de exclusão para evitar complicações, como sangramento e cicatrização de feridas pobre. assepsia rígida ao longo do processo é essencial. Aplicação da técnica correcta vai assegurar o conforto participante, minimizar o trauma indesejável p...

Obtenção de músculo esquelético para o diagnóstico de uma miopatia e outras doenças degenerativas neuromusculares se baseia em métodos seguros e eficazes, que sejam aceitáveis ​​e não neutralizante aos pacientes 1. Historicamente, os métodos de obtenção de tecido muscular para análise incluiu biópsias abertas realizada sob anestesia geral ou a partir post mortem. Estas técnicas permitiram a visualização direta do músculo e permitiu um pedaço maior de músculo a ser feita a biópsia. Dadas as potenciais desvantagens destas técnicas têm para o paciente em termos de internação e de recuperação, métodos &quot;semi-abertas&quot; percutâneas biópsia muscular foram introduzidas como alternativas. Esta técnica foi realizada pela primeira vez por Duchenne (1806-1875), que usou uma agulha auto-construído com um trocarte e foi capaz de obter uma amostra de músculo de um sujeito vivo sem anestesia geral 2. Desde então, várias formas de agulhas de biopsia foram usadas 3,4,5. No entanto, a biopsia needle desenvolvido por Bergstrom em 1962 tem sido o mais utilizado na prática clínica; tanto em crianças e adultos, assim como na pesquisa 6,7,8,9,10. Possui um trocar afiada, uma cânula de corte e uma haste de empurrar para expulsar a biópsia pós tecido. Rendimentos musculares obtidos com este procedimento foram relatados para variar de 25 -293 mg após amostragem repetida 11,9. Henriksson introduziu o conchotome Weil-Blakesley em 1979 como um método alternativo biópsia muscular semi-aberto (Figura 1) 12. O instrumento é uma estrutura única, ao contrário do construto Bergstrom e está concebido como um fórceps com uma ponta cortante afiada. O tamanho da ponta pode variar de 4 mm a 6 mm de largura. Quando as duas extremidades da ponta cortante se opõem, um oco que é formado assegura a captura do músculo. O conchotome é inserido através de uma 5 - mm incisão na pele 10 e evita a necessidade de um trocarte para penetrar o músculo e a fáscia sobrejacente como um scalpeL pode ser utilizado para fazer uma faixa para baixo para o músculo. Este método permite a penetração do tecido controlada com um elevado grau de manobrabilidade 13,14. É especialmente útil para sites onde a pressão indevida poderia danificar estruturas neurovasculares ou subjacentes ósseas por exemplo., No local do tibial anterior 15,14. rendimentos musculares usando o conchotome pode ser variável e em nossa prática 20 - 200 mg de músculo foi obtido após amostragem repetida. Uma vantagem potencial da conchotome sobre a agulha Bergstrom, para além do elevado grau de maneabilidade que oferece, é que a ponta cortante não necessita de ser afiada ou substituído tão frequentemente como o trocarte da Bergstrom construir 16. O objectivo global da biópsia muscular usando o conchotome Weil Blakesley é obter quantidades suficientes de tecido muscular para permitir histoquímica e análise molecular, tanto para diagnóstico e pesquiestudo ch. É um procedimento simples e seguro que pode ser aprendida facilmente. Com esta técnica, músculo adequado para biópsia inclui bíceps, tríceps, deltóide, gastrocnêmio, tibial anterior, sóleo e os sacrospinals 17,15,7,18,14. A parte mais externa do vasto lateral é o local mais comum usado para a biópsia, pois evita as principais estruturas neurovasculares na coxa. É identificado cerca de dois terços para baixo uma linha imaginária que une a espinha ilíaca ântero-superior e da patela. Dados morfologia do músculo, por exemplo área myofibre, proporções myofibre, a densidade capilar derivado do vasto lateral de amostragem estão amplamente disponíveis na literatura permitindo a comparação entre os estudos 11,19.

<table><tbody><tr><td>Conchotome de Weil-Blakesley</td><td>Gebr&uuml; der Zepf Medizintechnik, D&uuml; rbheim, Alemanha</td><td>Nenhum</td><td>Ponta de mordida de 6 mm</td></tr><tr><td>5 ml de lidocaína a 2%</td><td>Uso genérico</td><td>Nenhum</td><td>Um frasco para injetáveis de 5 ml deve ser suficiente para anestesia adequada</td></tr><tr><td>Cotonete com álcool</td><td>Uso genérico</td><td>Nenhuma</td><td></td></tr><tr><td>Seringa de 5 ml</td><td>Uso genérico</td><td>Nenhum</td><td></td></tr><tr><td>Agulhas estéreis de 25 G e 23 G</td><td>Uso genérico</td><td>Nenhum</td><td></td></tr><tr><td>Bisturi estéril tamanho 11</td><td>Uso genérico</td><td>Nenhum</td><td></td></tr><tr><td>Quadrados de gaze estéreis</td><td>Uso genérico</td><td>Nenhum</td><td></td></tr><tr><td>Cloreto de sódio 0,9% 10 ml</td><td>Fannin</td><td>1122/002/001</td><td></td></tr><tr><td>Steri-Drape&trade; Campo Pequeno com Abertura Adesiva</td><td>3M</td><td>1020</td><td></td></tr><tr><td>ChloraPrep 2% w/v /70% v/v solução cutânea&nbsp;</td><td>CareFusion</td><td>270400</td><td>Dois</td></tr><tr><td>Steri-Strip&trade; Fechos de pele adesivos reforçados de 1/4 polegada x 3 polegadas</td><td>3M</td><td>R1541</td><td></td></tr><tr><td>PRIMAPORE curativo estéril 15 cm x 8 cm</td><td>Smith & &nbsp; Sobrinho</td><td>66000318</td><td></td></tr><tr><td>Bandagem de crepe de algodão Hospicrepe 233 7,5 cm x 4,5 m</td><td>Hartmann</td><td>915562</td><td></td></tr><tr><td>Bandagem coesiva flexível Co-Plus LF</td><td>BSN</td><td>2904565</td><td></td>médica</tr><tr><td>Folha absorvente descartável</td><td>Uso genérico</td><td>Nenhum</td><td></td></tr><tr><td>Fita micropore ou transpore</td><td>Uso genérico</td><td>Nenhum</td><td></td></tr><tr><td>Bata estéril com papel estéril toalhas</td><td>Uso genérico</td><td>Nenhum</td><td></td></tr><tr><td>Luvas estéreis</td><td>Uso genérico</td><td>Nenhum</td><td></td></tr></tbody></table>

humano<em&gt; vasto lateral</em&gt; biópsia de músculo esquelético usando o weil-blakesley conchotome

Human Vastus Lateralis Skeletal Muscle Biopsy Using the Weil-Blakesley Conchotome

biópsia muscular percutânea usando o conchotome Weil-Blakesley está bem estabelecida tanto na prática clínica e na pesquisa. É uma técnica segura, eficaz e bem tolerada. O conchotome Weil-Blakesley tem uma ponta cortante afiada com um 4 - ampla oco 6 mm. Ele é inserido através de um 5 - incisão na pele mm 10 e pode ser manobrado para a penetração nos tecidos controlada. A ponta é aberto e fechado no interior do tecido e, em seguida, rodado de 90 ° -180 para cortar o músculo. A quantidade de músculo obtido na sequência repetida de amostragem pode variar entre 20 mg e 290 mg que podem ser processados ​​para ambos os estudos moleculares e histologia. A ferida precisa de ser mantida a actividade física vigorosa seco e mantidos a um mínimo de cerca de 72 horas, embora os níveis normais de actividade pode reiniciar imediatamente após o procedimento. Este procedimento é seguro e eficaz quando muita atenção é dada à seleção de temas, assepsia completa e cuidados pós-procedimento. Ambos direita e à esquerda vlateral Astus são adequados para dependentes de preferência participante biópsia.

O procedimento descrito acima é seguro e aceitável em ambos os ambientes clínicos e de pesquisa. Quando a biópsia é realizada como parte do processo de diagnóstico, o músculo deve ser escolhido de acordo com os sintomas e sinais de fraqueza muscular do paciente. O local da biópsia deve ser livre de lesões anteriores, contraturas ou instrumentação 21,1. Na pesquisa, condições padronizadas, tais como jejum ou exclusão de pacientes com diabetes podem ser necessários 19.</sup...

Este vídeo demonstra a técnica de biópsia muscular percutânea do vasto lateral humano usando o concotoma de Weil-Blakesley.

Humano<em&gt; vasto lateral</em&gt; Biópsia de músculo esquelético Usando o Weil-Blakesley Conchotome

Percutaneous muscle biopsy using the Weil-Blakesley conchotome is well established in both clinical and research practice. It is a safe, effective and ...

O objetivo geral deste método é introduzir uma técnica segura, eficaz e bem tolerada de biópsia muscular do vasto lateral, para obter tecido suficiente para histoquímica e análise molecular em estudos diagnósticos e de pesquisa. Este método pode ajudar os investigadores a obter tecido muscular suficiente com o mínimo de desconforto e trauma para o participante. A principal vantagem dessa técnica é que ela é segura e aceitável em ambientes clínicos e de pesquisa.As complicações são baixas e o desconforto é reduzido ao mínimo quando o procedimento é realizado usando uma técnica padrão. Para começar, peça ao participante que se deite confortavelmente em um sofá em decúbito dorsal. Exponha a coxa preferida da dobra da virilha e espalhe um lençol absorvente descartável sob a coxa exposta.Certifique-se de que a perna permaneça reta e relaxada durante todo o procedimento, mas a coxa é tensionada momentaneamente para delinear o vasto lateral. Marque o local do procedimento aproximadamente 2/3 abaixo de uma linha imaginária da espinha ilíaca ântero-superior até a patela. Para preparar a pele, use uma lâmina de barbear estéril para raspar aproximadamente quatro centímetros de diâmetro ao red

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O objetivo deste vídeo é apresentar a técnica de biópsia do músculo esquelético de Bergström modificada em seres humanos.

Procedimentos de biópsia de músculo esquelético humano, utilizando a técnica Bergström Modificado

Os principais tipos de células aderentes derivadas do músculo humano são células miogênicas e fibroblastos. Aqui, as populações de células são enriquecidas usando classificação de células ativadas por magnetismo com base no antígeno CD56. A imunomarcação subsequente com anticorpos específicos e o uso de técnicas de análise de imagem permitem a quantificação das características citoplasmáticas e nucleares em células individuais.

Isolamento e Quantitative Immunocytochemical caracterização de células Miogênica primários e fibroblastos de músculo-esquelético humano

Métodos para biópsia de vasto lateral, a preparação de mitocôndrias purificada e profiling respirométrico são descritos. O uso de volume muscular pequeno torna esta técnica adequada para aplicações de pesquisa clínica.

Preparação e Avaliação respirométrico de mitocôndrias isoladas de tecido muscular esquelético Obtido por meio de agulha de biópsia percutânea

Aqui apresentamos um protocolo para a dissecção de ossos longos de membros posteriores (fêmures e tíbias) do camundongo de laboratório. Descrevemos ainda uma técnica rápida para isolamento da medula óssea desses ossos que utiliza centrifugação para remoção da medula óssea do espaço da medula óssea.

Murino Hind Limb Ossos Longos Dissecção e Medula Óssea O isolamento

Ultrasom 3D de imagem (3DUS) permite rápida e econômica de morfometria dos tecidos músculo-esqueléticos. Apresentamos um protocolo para medir o comprimento de volume e Fascículo muscular usando 3DUS.

Imagens de ultra-som 3D: rápida e econômica de morfometria do tecido músculo-esquelético

Coloração imuno-histoquímica de isoformas de cadeia pesada de miosina emergiu como o discriminador de estado-da-arte do tipo de fibra muscular esquelético (ou seja, tipo I, tipo IIA, tipo IIX, tipo IIB). Aqui, apresentamos um protocolo de coloração juntamente com um algoritmo semi-automático de romance que facilita a rápida avaliação da morfologia do tipo de fibra e fibra.

Semi automatizados de análise da morfologia do músculo esquelético de rato e composição de fibra-tipo

Nós apresentamos protocolos detalhados para executar experimentos do difraction do raio X do pequeno-ângulo usando os músculos esqueletais do rato intact. Com a ampla disponibilidade de modelos de camundongo transgênicos para doenças humanas, esta plataforma experimental pode formar um leito de teste útil para elucidar a base estrutural de doenças musculares...

Difração de raios X do músculo esquelético murino intacto como uma ferramenta para estudar a base estrutural da doença muscular

Nós apresentamos técnicas para isolar-se, cultivando, caracterizando, e diferenciando pilhas preliminares humanas do progenitor do músculo (hMPCs) obtidas do tecido esqueletal da biópsia do músculo.  os hmpcs obtidos e caracterizados através destes métodos podem ser usados para abordar subseqüentemente as perguntas da pesquisa relativas à miogenesis humana e à regeneração do músculo esqueletal.

Isolamento, cultura, caracterização e diferenciação de células progenitoras do músculo humano do procedimento de biópsia do músculo esquelético

Descrito aqui é um protocolo para imunorotulagem direta de miofibras necróticas em criosecções musculares. As células necróticas são permeáveis para as proteínas séricas, incluindo a imunoglobulina G (IgG). Revelar a captação de IgG por miofibras permite a identificação e quantificação de miofibras que sofrem necrose, independentemente da condição muscular.

Imunolabellagem de degeneração da miofibra em biópsias musculares

Este relatório técnico descreve uma variação da técnica modificada de Bergström para a biópsia do musculus tibialis anterior que limita o dano da fibra.

Coleta de Biópsias Musculares Esqueléticas do Compartimento Superior do Musculus Tibialis Anterior para Avaliação Mecânica

Aqui, descrevemos um método detalhado para o isolamento das mitocôndrias do músculo esquelético do camundongo e a análise subsequente da respiração pela Taxa de Consumo de Oxigênio (OCR) usando assins respirométricos à base de microplacas. Este gasoduto pode ser aplicado para estudar os efeitos de múltiplas intervenções ambientais ou genéticas no metabolismo mitocondrial.

Isolamento das Mitocôndrias do Músculo Esquelético do Rato para Ensaios Respirométricos

Aprenda a técnica de biópsia percutânea do músculo vasto lateral usando o conchotome de Weil-Blakesley. Este método minimiza o desconforto do participante e fornece tecido suficiente para análises histoquímicas e moleculares em contextos clínicos e de pesquisa.

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