Uma crônica Protocolo de estresse leve Imprevisível para sintomas depressivos Instigando, mudanças de comportamento e resultados negativos de saúde em Roedores

O objetivo geral do experimento a seguir é expor uma cepa de roedor a uma série de estressores crônicos e imprevisíveis que são determinados aleatoriamente, de modo que o animal não possa compensar efetivamente a crescente gravidade dos sintomas depressivos que se desenvolvem. Isso é conseguido pela exposição diária a um de uma lista de possíveis estímulos que são projetados para serem estressantes, mas não prejudiciais ou prejudiciais ao animal. Os animais são expostos aos estressores cinco a seis dias por semana durante oito semanas em intervalos regulares, os animais são monitorados quanto ao desenvolvimento de sintomas depressivos, avaliando o status do código e as respostas dos animais à imposição de estímulos, como um teste de pulverização de sacarose.

Os resultados mostram que a imposição de estressores crônicos randomizados insolúveis ao ambiente do animal impede a capacidade do animal de se adaptar e causa o desenvolvimento de sintomas depressivos ao longo de várias semanas. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo das doenças crônicas, como como os sintomas depressivos crônicos podem levar a resultados negativos para a saúde em outros sistemas de tecidos ou órgãos. Tivemos a ideia de utilizar esse método pela primeira vez quando aprendemos sobre as profundas comorbidades entre doenças cardiovasculares avançadas e risco de doença em nossas populações clínicas, e também a apresentação concomitante de doenças depressivas profundas.

Demonstrando este procedimento estarão os alunos de doutorado do Sr. Steven Brooks e da Sra. Kayla Brannon de nossos laboratórios. Para produzir camundongos domésticos com estresse leve em gaiolas separadas e expor os camundongos a um ou dois estressores por dia por um mínimo de três a quatro horas para cada estressor, a seguinte lista de estressores deve ser realizada em um cronograma aleatório para o estressor de cama úmida. Molhe a roupa de cama despejando 10 a 20 onças de água limpa em uma gaiola padrão.

Mantenha o mouse na gaiola úmida por três a quatro horas. Remova a roupa de cama da gaiola por três a quatro horas e, em seguida, faça a transição do mouse para outro estressor que exija uma gaiola vazia ou coloque-o em uma gaiola limpa com roupa de cama nova. Incline as gaiolas livres de cama para aproximadamente 45 graus por três a quatro horas usando um objeto resistente que permanecerá no lugar enquanto o mouse se move na gaiola Para este estressor, altere os ciclos normais de luz de 12 horas e escuridão de 12 horas em sucessões de períodos de 30 minutos, com duração total de oito horas.

Transfira o mouse de sua gaiola inicial para a gaiola de um mouse vizinho que foi removido pelo período de estressor de três horas. Remova a cama da gaiola e adicione água a uma profundidade de cerca de 0,25 polegadas para ratos e deixe o mouse por aproximadamente quatro horas. Brevemente, seque o mouse com uma toalha macia na conclusão da exposição à água.

Exponha os ratos a predadores, cheiros ou sons adicionando tufos distribuídos aleatoriamente ou 10 a 20 mililitros de urina de uma espécie de predador natural na gaiola e deixe o camundongo por três a quatro horas. Alternativamente, jogue ruídos rosnados ou predatórios de espécies predadoras naturais ENC proximidade com as gaiolas por três horas no final de cada período de estresse diário. Coloque os ratos em gaiolas limpas e devolva-os ao alojamento diariamente.

Inspecione cada animal quanto ao desenvolvimento de feridas ou feridas que possam exigir tratamento veterinário uma vez por semana, tenha dois investigadores treinados para avaliar a preparação do código. Inspecione cada animal e atribua uma pontuação de código semanal em uma escala de zero a um. Adicione uma pontuação individual atribuindo pontuações individuais de zero significando limpo ou um significado sujo para cada uma das oito regiões do corpo.

A cabeça, o pescoço, a pelagem dorsal, a pelagem ventral, a cauda, os quatro membros, os membros posteriores e a região genital. Coloque o animal em uma gaiola limpa forrada com um algodão ou toalha para evitar que a roupa de cama grude na pelagem. Em seguida, borrife uma solução de sacarose a 10% na cabeça e na pelagem dorsal de cada animal e registre o comportamento total de limpeza por cinco minutos.

Meça a latência e a frequência da atividade de higiene facial durante esse período. A latência é a quantidade de tempo entre a primeira pulverização e o início da depilação facial, e a frequência deve ser medida como o número de vezes que o rosto é escovado. Após oito semanas de estresse leve crônico imprevisível, houve alterações significativas nos resultados comportamentais e fisiológicos em roedores cronicamente estressados em relação às suas cepas de controle não estressadas.

Os camundongos desenvolveram sintomas depressivos após estresse leve crônico imprevisível e mostraram um declínio progressivo nas pontuações de higiene da pelagem. Essa degradação acentuada no estado físico da pelagem sugere diminuição da atividade de higiene e pode ser paralela à falta de motivação. Evidências recentes sugeriram que há uma divergência quantitativa substancial nas respostas ao estresse leve crônico imprevisível entre camundongos machos e fêmeas.

Especificamente, os dados sugerem que camundongos fêmeas expostos ao protocolo de estresse idêntico aos machos da mesma idade desenvolvem respostas comportamentais mais severas ao protocolo do que os machos. Após este procedimento, outros métodos apropriados para a função específica do órgão podem ser prontamente executados para responder a perguntas adicionais, como como a presença de sintomas depressivos crônicos pode afetar a função normal no sistema de órgãos de interesse. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como utilizar as diferentes etapas e procedimentos do protocolo UCMS para criar progressivamente as condições de crescimento de sintomas depressivos em seu modelo de roedor.