Entrega de proteínas, peptídeos ou célula-impermeável Pequenas moléculas em células vivas por incubação com o Endosomolytic Reagente dfTAT

O objetivo geral do experimento a seguir é entregar macromoléculas em células vivas usando dímero, tat fluorescente ou df tat, um reagente que pode penetrar nas células com muita eficiência sem danificá-las. Isso é conseguido primeiro gerando e purificando o agente de entrega. Dfta como um segundo passo.

Dfta é incubado com células por uma hora a 37 graus Celsius na presença da carga de macromolécula de interesse, df tat induz a captação da carga dentro de vesículas endocíticas. As vesículas amadurecem em endossomos iniciais, finalmente atingindo o estágio final do endossomo, onde DF tat é capaz de liberar a carga no espaço citosólico das células. Em seguida, as células são visualizadas por microscopia de fluorescência para avaliar a eficiência de entrega do detta e da carga de interesse.