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Isolamento de mitocôndrias de quantidades mínimas de Rato Músculo Esquelético para medições High ...
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JoVE Journal Biology
Isolation of Mitochondria from Minimal Quantities of Mouse Skeletal Muscle for High Throughput Microplate Respiratory Measurements

Isolamento de mitocôndrias de quantidades mínimas de Rato Músculo Esquelético para medições High Throughput Microplate respiratórias

Full Text
13,412 Views
10:12 min
November 13, 2015

DOI: 10.3791/53217-v

Nabil E. Boutagy1,2, Emily Pyne1, George W. Rogers3, Mostafa Ali1, Matthew W. Hulver1,2, Madlyn I. Frisard1,2

1The Department of Human Nutrition, Foods, and Exercise,Virginia Tech, 2The Metabolic Phenotyping Core,Virginia Tech, 3Seahorse Bioscience

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aqui, apresentamos uma modificação de um método relatado anteriormente que permite o isolamento de mitocôndrias purificadas e de alta qualidade de quantidades menores de músculo esquelético de camundongo. Este procedimento resulta em mitocôndrias altamente acopladas que respiram com alta função durante ensaios respiratórios baseados em microplacas.

O objetivo geral deste artigo em vídeo é isolar mitocôndrias de alta qualidade de pequenas quantidades de músculo esquelético de camundongo para uso em ensaios tric baseados em microplacas. Este método pode ajudar a responder a questões-chave na pesquisa biomédica, como descrever como certos medicamentos e proteínas modulam o músculo esquelético, o consumo de oxigênio mitocondrial. A principal vantagem dessa técnica é que as mitocôndrias de alta qualidade podem ser isoladas de quantidades menores de músculo esquelético de camundongo do que foi relatado anteriormente.

Realize a eutanásia do camundongo de acordo com as diretrizes da instituição. Em seguida, posicione o mouse de lado e use uma tesoura de ponta fina para fazer uma incisão na pele. Sobrepondo o epicôndilo lateral do fêmur.

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