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DOI: 10.3791/53250-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Este protocolo descreve o uso de preparações de tecido intestinal excisadas ou "sacos intestinais" como um modelo ex vivo da função da barreira intestinal. Este modelo pode ser usado para avaliar a integridade da barreira epitelial e da camada de gel mucoso em locais intestinais específicos em modelos animais de doenças digestivas.
O objetivo geral deste procedimento é avaliar a integridade intestinal localizada em modelos animais de doença gastrointestinal. Este método pode ajudar a responder às principais questões sobre doenças gastrointestinais, como se a integridade muscular é perdida ou se há um aumento na absorção de uma molécula ou bactéria específica durante a doença. A principal vantagem dessa técnica é que ela pode ser usada para avaliar áreas específicas do trato gastrointestinal. Para preparar o trato gastrointestinal, comece borrifando o abdômen e o tórax do camundongo com 70% de etanol e use uma tesoura para fazer uma incisão horizontal no meio do abdômen, para expor o peritônio. Em seguida, corte o intestino delgado superior do estômago no esfíncter pilórico e o intestino grosso na borda anal. Em seguida, use uma pinça para remover suavemente o mesentério e coloque o trato intestinal em meio oxiginado pré-aquecido. Identificar a área a avaliar quanto à permeabilidade, medindo as secções do duodeno e do jejuno em relação ao estômago nas secções do cólon e do ílio em relação ao ceco, a fim de manter a coerência entre os animais experimentais. Observe a presença de tecidos linfóides associados à mucosa, como as placas de Peyer, que podem ser identificadas como pequenos nódulos no lado sarosal do lúmen. Em seguida, corte a seção selecionada e use uma seringa de 1 ml para lavar suavemente o conteúdo luminal do segmento em uma placa de Petri contendo 37
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