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Ex Vivo Intestinal Sacs para Avaliar mucosa Permeabilidade de modelos de doença gastroin...
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JoVE Journal Medicine
Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

Ex Vivo Intestinal Sacs para Avaliar mucosa Permeabilidade de modelos de doença gastrointestinal

Full Text
22,025 Views
06:04 min
February 9, 2016

DOI: 10.3791/53250-v

Sean W. Mateer1, Jocelle Cardona1, Ellen Marks1, Bridie J. Goggin1, Susan Hua1, Simon Keely1

1School of Biomedical Science and Pharmacy,University of Newcastle

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Este protocolo descreve o uso de preparações de tecido intestinal excisadas ou "sacos intestinais" como um modelo ex vivo da função da barreira intestinal. Este modelo pode ser usado para avaliar a integridade da barreira epitelial e da camada de gel mucoso em locais intestinais específicos em modelos animais de doenças digestivas.

O objetivo geral deste procedimento é avaliar a integridade intestinal localizada em modelos animais de doença gastrointestinal. Este método pode ajudar a responder às principais questões sobre doenças gastrointestinais, como se a integridade muscular é perdida ou se há um aumento na absorção de uma molécula ou bactéria específica durante a doença. A principal vantagem dessa técnica é que ela pode ser usada para avaliar áreas específicas do trato gastrointestinal. Para preparar o trato gastrointestinal, comece borrifando o abdômen e o tórax do camundongo com 70% de etanol e use uma tesoura para fazer uma incisão horizontal no meio do abdômen, para expor o peritônio. Em seguida, corte o intestino delgado superior do estômago no esfíncter pilórico e o intestino grosso na borda anal. Em seguida, use uma pinça para remover suavemente o mesentério e coloque o trato intestinal em meio oxiginado pré-aquecido. Identificar a área a avaliar quanto à permeabilidade, medindo as secções do duodeno e do jejuno em relação ao estômago nas secções do cólon e do ílio em relação ao ceco, a fim de manter a coerência entre os animais experimentais. Observe a presença de tecidos linfóides associados à mucosa, como as placas de Peyer, que podem ser identificadas como pequenos nódulos no lado sarosal do lúmen. Em seguida, corte a seção selecionada e use uma seringa de 1 ml para lavar suavemente o conteúdo luminal do segmento em uma placa de Petri contendo 37

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